2024神經(jīng)干細(xì)胞來(lái)源外泌體分離技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)

脊髓損傷（SpinalcordinjurySCI）作為由于直接或間接原因所致的脊椎損傷后最要緊的并發(fā)使其在脊髓損傷診治方面引起了學(xué)者們的注意。其中神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstemcells,NSCs)由于其特外泌體(Exosomes，Exos40-100nm，參SDSD100mm37℃，5%二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24100g5min311BiologicalIndustriesDAPI21mL/5mL/20mL-80日本HirayamaEP31mm310min。300g5min，離心結(jié)束后棄掉上清，用含青-鏈霉素雙抗的磷酸鹽緩沖液重懸沉淀100g5min，棄上清，保留細(xì)胞沉淀進(jìn)行下一步操作。31637℃，5min33min。8Cy3IgG(H+L50min（加入熒光二抗之后的操作步驟45minDAPI1NestinMusashi1SD100mm313生工生物工程（上海）BiologicalIndustries4日本HirayamaEPPBSPBS1L121℃高壓滅菌鍋進(jìn)行滅菌處10000g30min120000g120min，得到的沉淀物質(zhì)即為神經(jīng)干細(xì)胞外泌體。隨后將得到的神經(jīng)干細(xì)胞外泌體放置于-80℃4℃條件下完成。100μL4%15min10030min5min33min，完成后于鏡下進(jìn)行觀察。280nmCD63+%,CD9+%,CD81EpCAM+%95%以上，證明了外泌體的成功提取[2]（2）。nm（3）。3透射電鏡下神經(jīng)干細(xì)胞外泌體的形態(tài)5外泌體的濃度（A280法SD671mL/5mL/20mLEP1L121℃高壓滅菌8各組實(shí)驗(yàn)大鼠重量各只重量平均重量10[3]。2天內(nèi)腹腔注射已配好的抗生素溶液預(yù)防感染（0.3mL/只）3次按壓膀胱以促排尿，至BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分是指通過(guò)實(shí)驗(yàn)大鼠爬行，進(jìn)而觀察其軀干運(yùn)動(dòng)，后肢臀，膝，踝關(guān)節(jié)活動(dòng)，以及兩9。9BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)214%多聚甲5μm85%，95%5min5minI5minII5minIII5minI5minII5min染料后，0.13大鼠蘇醒后呈明顯臥位拖拉狀行走姿勢(shì)（4d）。4(A)脊髓擊打器，(B)造模前，(C)造模后，(D)造模后大鼠活動(dòng)狀況103P>005；7P<005P>00P<005。10各組實(shí)驗(yàn)大鼠不同時(shí)間段BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分113714215各組大鼠不同時(shí)間段BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分變化趨勢(shì)6各組脊髓組織切片蘇木精伊紅染色結(jié)果各組脊髓切片經(jīng)尼氏染色后可見(jiàn)（7）。假手術(shù)組呈現(xiàn)藍(lán)紫色的神經(jīng)元數(shù)目較多，體積較大，且樣本