維生素的測(cè)定

單擊此處添加正文，文字是您思想的提煉，為了演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)言簡(jiǎn)意賅地闡述您的觀點(diǎn)。您的內(nèi)容已經(jīng)簡(jiǎn)明扼要，字字珠璣，但信息卻千絲萬(wàn)縷、錯(cuò)綜復(fù)雜，需要用更多的文字來(lái)表述；但請(qǐng)您盡可能提煉思想的精髓，否則容易造成觀者的閱讀壓力，適得其反。正如我們都希望改變世界，希望給別人帶去光明，但更多時(shí)候我們只需要播下一顆種子，自然有微風(fēng)吹拂，雨露滋養(yǎng)。恰如其分地表達(dá)觀點(diǎn)，往往事半功倍。當(dāng)您的內(nèi)容到達(dá)這個(gè)限度時(shí)，或許已經(jīng)不純粹作用于演示，極大可能運(yùn)用于閱讀領(lǐng)域；無(wú)論是傳播觀點(diǎn)、知識(shí)分享還是匯報(bào)工作，內(nèi)容的詳盡固然重要，但請(qǐng)一定注意信息框架的清晰，這樣才能使內(nèi)容層次分明，頁(yè)面簡(jiǎn)潔易讀。如果您的內(nèi)容確實(shí)非常重要又難以精簡(jiǎn)，也請(qǐng)使用分段處理，對(duì)內(nèi)容進(jìn)行簡(jiǎn)單的梳理和提煉，這樣會(huì)使邏輯框架相對(duì)清晰。第十三章維生素的測(cè)定單擊此處添加正文，文字是您思想的提煉，為了演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)言簡(jiǎn)意賅地闡述您的觀點(diǎn)。您的內(nèi)容已經(jīng)簡(jiǎn)明扼要，字字珠璣，但信息卻千絲萬(wàn)縷、錯(cuò)綜復(fù)雜，需要用更多的文字來(lái)表述；但請(qǐng)您盡可能提煉思想的精髓，否則容易造成觀者的閱讀壓力，適得其反。正如我們都希望改變世界，希望給別人帶去光明，但更多時(shí)候我們只需要播下一顆種子，自然有微風(fēng)吹拂，雨露滋養(yǎng)。恰如其分地表達(dá)觀點(diǎn)，往往事半功倍。當(dāng)您的內(nèi)容到達(dá)這個(gè)限度時(shí)，或許已經(jīng)不純粹作用于演示，極大可能運(yùn)用于閱讀領(lǐng)域；無(wú)論是傳播觀點(diǎn)、知識(shí)分享還是匯報(bào)工作，內(nèi)容的詳盡固然重要，但請(qǐng)一定注意信息框架的清晰，這樣才能使內(nèi)容層次分明，頁(yè)面簡(jiǎn)潔易讀。如果您的內(nèi)容確實(shí)非常重要又難以精簡(jiǎn)，也請(qǐng)使用分段處理，對(duì)內(nèi)容進(jìn)行簡(jiǎn)單的梳理和提煉，這樣會(huì)使邏輯框架相對(duì)清晰。一、概述維生素既不是構(gòu)成機(jī)體組織的基本原料，也不是機(jī)體的供能物質(zhì)，它是一類(lèi)需求量極少、人體不能合成（或合成量很少）、主要以輔酶的形式參與代謝調(diào)節(jié)，是維持人體正常生命活動(dòng)所必需的天然有機(jī)化合物。目前已確認(rèn)的有30余種，其中被認(rèn)為至關(guān)重要的有20余種。定義維生素的命名多根據(jù)發(fā)現(xiàn)的時(shí)間順序以英文字母排序，如維生素A、維生素B1、B2，維生素C，維生素E等。也有根據(jù)特定生理功能，如抗干眼病因子、抗壞血酸、生育酚等，照其化學(xué)結(jié)構(gòu)如視黃醇、硫胺素、煙酸、葉酸等。維生素的分類(lèi)脂溶性維生素：能溶于脂肪或脂溶劑，在食物中與脂類(lèi)共存的一類(lèi)維生素，包括A、D、E、K各小類(lèi)，其共同特點(diǎn)是攝入后存在于脂肪組織中，不能從尿中排除，大劑量攝入時(shí)可能引起中毒。由于可儲(chǔ)藏在脂肪中，故不需每天供給。01水溶性維生素：能溶于水，包括B、C各小類(lèi)，其共同特點(diǎn)是一般只存在于植物性食品中，滿足組織需要后都能從機(jī)體排出，需要每天供給。02VA17－脫氫膽固醇麥角固醇生育三烯酚生育酚β－胡蘿卜素VA2維生素D3(膽鈣化醇)測(cè)定食品中維生素的含量的意義添加標(biāo)題在評(píng)價(jià)食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，添加標(biāo)題找富含維生素的食品資源，添加標(biāo)題人們合理調(diào)整膳食結(jié)構(gòu)，防止維生素缺乏癥或維生素中毒，添加標(biāo)題究維生素在食品加工、貯存等過(guò)程中的穩(wěn)定性，指導(dǎo)人們制定合理的工藝及貯存條件，添加標(biāo)題監(jiān)督維生素強(qiáng)化食品的強(qiáng)化劑量，防止因攝入過(guò)多而引起維生素中毒維生素的分析方法01生物鑒定法：費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、需要?jiǎng)游镲曫B(yǎng)場(chǎng)地02微生物法：僅限于水溶性維生素的測(cè)定03熒光法：用于硫胺素的測(cè)定04儀器法：快速、靈敏、有較好的選擇性05HPLC：用于大多數(shù)維生素的測(cè)定，費(fèi)用高二、脂溶性維生素的測(cè)定STEP3STEP2STEP1溶解性：脂溶性維生素不溶于水，易溶于苯、乙醚、丙酮、三氯甲烷、乙醇等有機(jī)溶劑。耐酸堿性：維生素A、D對(duì)酸（ACID）不穩(wěn)定，對(duì)堿穩(wěn)定；維生素E在無(wú)氧情況下，對(duì)熱、酸、堿穩(wěn)定。維生素K對(duì)酸、堿都不穩(wěn)定。耐熱、耐光、耐氧化性：維生素A、D、E、K耐熱性都好，維生素D性質(zhì)穩(wěn)定，不易被氧化。脂溶性維生素的理化性質(zhì)維生素A易被氧化，光和熱會(huì)促進(jìn)其氧化。維生素E容易被氧化，對(duì)可見(jiàn)光穩(wěn)定但易被紫外線破壞。維生素K對(duì)熱穩(wěn)定，但容易被光、氧化劑及醇破壞。（這樣在提取時(shí)，要求盡量避光、并加入抗氧化劑）GlobalExtractionTechforLiposolubleVitamins

Weighproperamountofthefoodsubstanceandtransfertoa150mlroundflask

RedissolvetheresiduewithaknowvolumeofhexaneforHPLCanalysis

Evaporatetodryinavacuumatatemperatureof35degreeC

Removeandfiltertheorganicphasethroughanhydroussodiumphases

Waittoobtaincompleteseparationofthetwophases

Add10mlof33%KOHand40mlethanol

Boilatrefluxfor30mins

Coolveryrapidly,thenadd17mlof25%HCl,andcoolagain

Add50mlofpetroleumetherandshakevigorouslyfor3mins

脂溶性維生素提取的一般步驟及注意事項(xiàng)步驟：取樣（如魚(yú)肝）加乙醇研磨或勻漿機(jī)均質(zhì)化（常加入抗氧化劑（如焦性沒(méi)食子酸，抗壞血酸等））加堿加熱皂化（Vk除外）（使脂肪水解成脂肪酸進(jìn)而形成水溶性的脂肪酸鹽）水洗去除脂肪酸鹽從水洗后的殘?jiān)杏糜袡C(jī)溶劑提取脂溶性維生素必要時(shí)進(jìn)行減壓回旋蒸發(fā)濃縮HPLC分析注意事項(xiàng)：皂化和濃縮時(shí)，為防止維生素的氧化分解，加入抗氧化劑某些含脂肪量低、脂溶性維生素含量較高的樣品，可以先用有機(jī)溶劑抽提，然后皂化，再提取。于那些對(duì)光敏感的維生素，分析操作一般需要在避光條件下進(jìn)行。高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定食物中維生素A、E的含量原理樣品中維生素A及維生素E經(jīng)皂化提取處理后，將其從不可皂化部分提取至有機(jī)溶劑中。用高效液相色譜法C18反相柱將維生素A和維生素E分離，經(jīng)紫外檢測(cè)器，用內(nèi)標(biāo)法定量測(cè)定（二）樣品處理皂化稱取適量樣品（含維生素A約3μg，維生素E各異構(gòu)體約40μg）于三角瓶中，加30mL無(wú)水乙醇，振搖使樣品分散。加入5mL100g/L抗壞血酸溶液和2.00mL苯并[e]芘溶液（5μg/L，內(nèi)標(biāo)用），混勻，加10mL氫氧化鉀溶液（50％濃度），混勻，于沸水浴上回流30min，使皂化完全，皂化后立即放入冰水中冷卻。提取將皂化后的樣品移入分液漏斗中，用50mL水分2－3次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。用100mL無(wú)水乙醚分2次洗皂化瓶及殘?jiān)?，乙醚液并入分液漏斗中。輕輕振搖分液漏斗2min，靜置分層，棄去水層。然后每次用約100mL水將乙醚液洗至中性，約4－5次3.濃縮將乙醚提取液經(jīng)無(wú)水硫酸鈉（約5g）濾入150mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶?jī)?nèi)，用約15mL乙醚沖洗分液漏斗及無(wú)水硫酸鈉2次，并入蒸發(fā)瓶?jī)?nèi)，于55℃水浴中減壓蒸餾并回收乙醚，待瓶中乙醚剩下約2mL時(shí)，取下蒸發(fā)瓶，用氮?dú)獯蹈梢颐?，隨即加入2mL乙醇，充分混合、溶解提取物。將乙醇液移入塑料離心管中，于離心機(jī)上離心5min（3000r/min），上清液供色譜分析用。液相色譜分析01色譜推薦條件：02預(yù)柱：ODS10μm,4mm×4.5cm03分析柱：ODS5μm,4.6mm×25cm04流動(dòng)相：甲醇：水＝98：2，混勻，臨用前脫氣。05紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)：300nm,量程0.0206進(jìn)樣量：20μL07流速：1.65～1.70mL/min08計(jì)算X=ρ/m×V×100/1000式中X-某種維生素的含量，mg/100g;ρ-由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到某種維生素含量，μg/mL；V–樣品濃縮定容體積，mL；m–樣品質(zhì)量，g。二、比色法測(cè)定維生素A的含量（一）原理維生素A在三氯甲烷中與三氯化銻相互作用，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，其深淺與溶液中所含維生素A的含量成正比，在620nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度。測(cè)定方法樣品處理維生素A極易被光破壞，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在微弱光線下進(jìn)行。根據(jù)樣品性質(zhì)，可采用皂化法或研磨法。稱取0.5～5g樣品于錐形瓶中，加入10mL50％氫氧化鉀溶液及20～40mL乙醇，于電熱板上回流30min，至皂化完全。將皂化瓶?jī)?nèi)混合物移至分液漏斗中，用無(wú)水乙醚充分洗滌皂化瓶，洗液并入分液漏斗內(nèi)，將水層與乙醚層分開(kāi)，水層反復(fù)用乙醚抽提直至無(wú)維生素A為止。合并醚層后，先用水洗提后，再用0.5mol/L氫氧化鉀溶液洗滌除去醚溶性酸皂，再用水洗滌醚層，直至洗滌水不呈堿性（用酚酞指示劑）為止。將醚層放出，經(jīng)過(guò)無(wú)水硫酸鈉脫水后，蒸餾濃縮至剩下5mL乙醚時(shí)減壓抽氣至干，立即加入一定量的三氯甲烷使溶液中維生素A含量在適宜范圍內(nèi)，供比色測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備準(zhǔn)確取一定量維生素A標(biāo)準(zhǔn)溶液于4～5個(gè)容量瓶?jī)?nèi)，用三氯甲烷配置標(biāo)準(zhǔn)系列。再取相同數(shù)量比色管順次取1mL三氯甲烷和標(biāo)準(zhǔn)系列使用液1mL，各管加入乙酸酐1滴，制成標(biāo)準(zhǔn)系列，于620nm波長(zhǎng)處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，將標(biāo)準(zhǔn)比色系列按順序移入光路前，迅速加入9ml三氯化銻－三氯甲烷溶液，于6s內(nèi)測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。32145樣品測(cè)定于一比色管中加10mL三氯甲烷，1滴乙酸酐為空白液，另一比色管中加入1mL三氯甲烷，其它比色管分別加入1mL樣品溶液及1滴乙酸酐，以下步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。計(jì)算x=ρ/m×v×100/1000式中：x－樣品中維生素A含量，mg/100g（如按國(guó)際單位，1IU＝0.3ug維生素A）；ρ－由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得維生素A的含量，ug/mL；m－樣品質(zhì)量，g；v－抽取后加三氯甲烷定量的體積，mL；討論本法摘自GB12388－90，適用于食品中維生素A的測(cè)定。三氯化銻有腐蝕性，不能粘在手上，三氯化銻與水能生成白色沉淀，所以不能碰到水。三氯化銻與維生素A生成的藍(lán)色物質(zhì)很不穩(wěn)定，要在6s內(nèi)完成吸光度的測(cè)定，否則藍(lán)色反應(yīng)逐漸消失，使結(jié)果偏低。水溶性維生素的測(cè)定水溶性維生素:水溶性維生素包括維生素B族(維生素B1(硫胺素)、維生素B2（核黃素）、維生素B6（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）、維生素PP（煙酸）、葉酸、泛酸（維生素B3）、生物素（維生素B7）)維生素C(抗壞血酸)和硫辛酸，廣泛存在于動(dòng)植物組織中，常以輔酶的形式存在。都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多數(shù)有機(jī)溶劑。在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，即使加熱也不破壞；但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，如果同時(shí)加熱，更易于破壞或分解。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響(如維生素B2對(duì)光，特別是紫外線敏感，易被光線破壞；維生素C對(duì)氧、銅離子敏感，易被氧化)。測(cè)定水溶性維生素的一般方法樣品處理：一般多在酸性溶液中進(jìn)行前處理，再經(jīng)淀粉酶、木瓜蛋白酶等酶解作用，使結(jié)合態(tài)維生素游離出來(lái)，再進(jìn)行提取。為進(jìn)一步去除雜質(zhì)，還可用活性人造沸石、硅鎂吸附劑等進(jìn)行純化處理。測(cè)定水溶性維生素的方法常有高效液相色譜法、熒光比色法、比色法和微生物法等。Techofextractingtheensembleofhydrosolublevitaminshomogenizethesampleaftercrushingitfinelyandrapidly(ifnecessary)Weigh5-10gsampleintoa250mlflaskandadd65ml0.1MHClDecantquantitativelyintoa100mlvolumetricflaskandadjustvolumewithwaterAdd50mgβ-amylaseand50mgtakadiastase,incubateat37ovenforovernightCoolandadjusttopH4.5with2.5MNaOAcHeatat100degCfor30minsinawaterbathFilterthesupernatantanddofurthertreatmenttothefiltrateifnecessary?????????HPLC固定相:C18柱,或ODS柱流動(dòng)相:甲醇-水=68:32固定相:硅膠柱流動(dòng)相:氯仿:丙酮=55:45PrincipleofNP-CandRP-C流動(dòng)相:正己烷固定相:普通硅膠極性較大的物質(zhì)弱極性物質(zhì)流動(dòng)相:乙氰/水固定相:C18改性硅膠物質(zhì)非極性極性較大的物質(zhì)NormalphasechromatographyReversephasechromatography鍵合的有機(jī)分子帶有－CN、－NH3或－(OH)2等極性基團(tuán)的稱為正相鍵合,一般用于分離非極性或極性較小物質(zhì)；鍵合的有機(jī)分子帶有十八烷基、辛烷基等非極性基團(tuán)的稱為反相鍵合維生素B1的測(cè)定(THIAMINE)維生素B1又稱抗神經(jīng)炎素，因其分子中既含有氮（N），又含有硫（S），故又稱硫胺(素)。特別是在酸性介質(zhì)中相當(dāng)穩(wěn)定。但在堿性介質(zhì)中對(duì)熱極不穩(wěn)定。硫胺素在堿性介質(zhì)中可被鐵氰化鉀氧化產(chǎn)生硫色素，在紫外光照射下產(chǎn)生藍(lán)色熒光，可借此以熒光比色法定量。硫胺素能與多種重氮鹽偶合呈現(xiàn)各種不同顏色，借此可用比色法測(cè)定。比色法靈敏度較低，準(zhǔn)確度也稍差，適用于含硫胺素高的樣品。熒光法和高效液相色譜法靈敏度很高，是目前常用的方法。水溶性維生素的測(cè)定舉例抗皮炎維生素，主要以三種天原理微生物分析法就是將某些微生物在含有維生素的樣品提取液中的生長(zhǎng)速率，與在含已知量維生素對(duì)照溶液中的生長(zhǎng)速率進(jìn)行對(duì)比，從而得出樣品中維生素的含量。生長(zhǎng)速率可通過(guò)測(cè)定濁度、產(chǎn)酸量、質(zhì)量變化或呼吸作用，其中濁度分析（或光密度）是最常用的方法。維生素B6的含量在2ng/mL以內(nèi)，其濃度對(duì)卡爾斯伯酵母菌的生長(zhǎng)速率有良好的線性關(guān)系，可用微生物定量。但高效液相色譜法是目前最先進(jìn)簡(jiǎn)便的方法。維生素C的測(cè)定維生素C又名抗壞血酸，自然界存在的有L－型、D－型兩種，D－型的生物活性僅為L(zhǎng)－型的1/10。維生素C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜中含量都很豐富。維生素C具有較強(qiáng)的還原性，對(duì)光敏感，氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性，進(jìn)一步水解則生成2，3－二酮古樂(lè)糖酸，失去生理作用。食品分析中的所謂總抗壞血酸是指抗壞血酸和脫氫抗壞血酸二者的總量，不包括二酮古樂(lè)糖酸和進(jìn)一步的氧化產(chǎn)物。

還原型抗壞血酸脫氫抗壞血酸2，3－二酮古樂(lè)糖酸氧化氧化測(cè)定維生素C的2、6-二氯靛酚滴定法原理：1，還原型Vc能定量地還原2、6-二氯靛酚（染料）2，2、6-二氯靛酚在中性或堿性溶液中顯藍(lán)色，在酸性溶液中顯粉紅色；被還原后不顯色。還原型Vc染料（顯色）氧化型Vc被還原的染料（不顯色）還原型Vc的測(cè)定步驟單擊此處添加正文，文字是您思想的提煉，為了演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)言簡(jiǎn)意賅地闡述您的觀點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)溶液的滴定(用2、6-二氯靛酚)04單擊此處添加正文，文字是您思想的提煉，為了演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)言簡(jiǎn)意賅地闡述您的觀點(diǎn)。樣品溶液的制備(用2%的草酸提取)03Vc+2KIO3Vcr+2KIO2Vc標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定：02單擊此處添加正文，文字是您思想的提煉，為了演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)言簡(jiǎn)意賅地闡述您的觀點(diǎn)。Vc標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制01單擊此處添加正文，文字是您思想的提煉，為了演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)言簡(jiǎn)意賅地闡述您的觀點(diǎn)。樣品溶液的滴定05（2）滴定吸取樣品抽提過(guò)濾液5～10mL于50mL三角瓶中，快速加入2，6－二氯靛酚溶液，直至紅色不立即消失，然后一滴一滴的加入，以呈現(xiàn)的粉紅色在15s內(nèi)不消失為終點(diǎn)。同時(shí)作空白。結(jié)果計(jì)算x=(V－V0)/m×T×100式中：x－樣品中還原型抗壞血酸含量，mg/100g；V－滴定時(shí)樣液消耗染料的體積，mL；V0－空白滴定時(shí)消耗染料的體積，mL；T－用標(biāo)準(zhǔn)還原型抗壞血酸溶液標(biāo)定染料溶液所得出1mL染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的量，mg/mL；m－滴定時(shí)所取濾液中含有樣品的質(zhì)量，g。注意:滴定法測(cè)定的是還原型抗壞血酸，該法簡(jiǎn)便，也較靈敏，但特異性差，樣品中的其它還原性物質(zhì)（如Fe2+、Sn2+、Cu1+等）會(huì)干擾測(cè)定，測(cè)定結(jié)果往往偏高。時(shí)要盡量閉光,避氧氣進(jìn)入，操作要盡量縮短時(shí)間,以減少還原型Vc氧化.補(bǔ)充：維生素與健康維生素A易患人群：學(xué)齡前兒童維生素A缺乏癥的臨床表現(xiàn)：皮膚癥狀：皮膚干燥、脫屑、粗糙，繼而發(fā)生丘疹，好發(fā)于上臂外側(cè)及下肢伸側(cè)、肩部、臀部、背部及后頸部；由于呼吸道上皮發(fā)生角化，氣管、支氣管易受感染，幼兒還可引起支氣管肺炎眼部表現(xiàn)：常表現(xiàn)為暗適應(yīng)能力下降，即當(dāng)從光亮的環(huán)境突然進(jìn)入到黑暗處時(shí)，人的眼睛看清楚暗處物體的時(shí)間延長(zhǎng)。嚴(yán)重者在暗光下無(wú)法看清物體，成為夜盲癥，俗稱"雀目眼"。維生素A缺乏癥的預(yù)防和治療：1．預(yù)防：注意平日多吃一些富含維生素A的食物，和/或含有豐富的胡蘿卜素的黃綠色蔬菜和水果，因?yàn)楹}卜素在體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為維生素A，同樣可起到預(yù)防維生素A缺乏的作用；也可選用適當(dāng)?shù)木S生素A強(qiáng)化食品2．治療：在醫(yī)生的指導(dǎo)下，口服維生素A制劑，如魚(yú)肝油等我國(guó)規(guī)定維生素A的最高可耐受攝入量為：4～18歲2000mg視黃醇當(dāng)量/天18歲以上3000mg視黃醇當(dāng)量/天孕婦2400mg視黃醇當(dāng)量/天中毒表現(xiàn)：頭疼、視力模糊、惡心、嘔吐、眩暈、失眠、食欲不振、腹痛、腹瀉、皮膚干燥、搔癢、長(zhǎng)骨末端外周部疼痛、頭發(fā)稀疏、肝腫大等，孕婦維生素A中毒，還可能導(dǎo)致胎兒畸形維生素D#2022維生素E

維生素E，廣泛存在于食物中，且在體內(nèi)貯留的時(shí)間較長(zhǎng)，一般不會(huì)造成缺乏。

易患人群：脂肪吸收不良（患口炎性腹瀉、胰腺病變）者、新生嬰兒（尤其是早產(chǎn)兒）、多不飽和脂肪酸攝入過(guò)多者，可能會(huì)引起維生素E的缺乏。維生素E缺乏已很少見(jiàn)。

臨