《功效型牙膏》規(guī)范

1QB/T2966—XXXX功效型牙膏本文件規(guī)定了功效型牙膏的原料、微生物、理化指標(biāo)、安全性、功效評(píng)價(jià)、包裝外觀、凈含量等要求，描述了相應(yīng)的試驗(yàn)方法，規(guī)定了檢測(cè)規(guī)則和標(biāo)志的內(nèi)容。本文件適用于功效型牙膏的原料的生產(chǎn)、檢驗(yàn)和銷售。執(zhí)行本文件的牙膏首先符合GB/T8372的要2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB6819—2004溶解乙炔GB/T8372牙膏GB/T15337原子吸收光譜分析法通則GB/T42763口腔清潔護(hù)理用品安全評(píng)估指南JJF1070定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則《定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法》國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第70號(hào)《牙膏監(jiān)督管理辦法》國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第71號(hào)《牙膏備案資料管理規(guī)定》國家藥品監(jiān)督管理局公告（2023年第148號(hào)）《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》國家藥品監(jiān)督管理局公告（2015年第268號(hào)）3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1功效型牙膏functionaltoothpastes添加功效成分，除具有牙膏基礎(chǔ)清潔之外，兼具有去除外源性色斑（美白牙齒）、抗牙石、抗口臭、防齲、抑制牙菌斑、抗牙本質(zhì)敏感、減輕牙齦問題，以及符合牙膏功效宣稱范圍其他功效的牙膏。注：基礎(chǔ)清潔指清潔口腔、減輕牙漬、減少軟垢、潔白牙齒、減少牙菌斑、清新口氣、清爽口感等能夠通過視覺、3.2人體功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)clinicalefficacystudy按照規(guī)定的方法和程序，通過人體試驗(yàn)結(jié)果的主觀評(píng)估、客觀測(cè)量和統(tǒng)計(jì)分析等方式，對(duì)產(chǎn)品功效宣稱作出客觀評(píng)價(jià)結(jié)論的過程。2QB/T2966—XXXX3.3消費(fèi)者使用測(cè)試consumertesting在客觀和科學(xué)方法基礎(chǔ)上，對(duì)消費(fèi)者的產(chǎn)品使用情況和功效評(píng)價(jià)信息進(jìn)行有效收集、整理和分析的過程。3.4實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)laboratorymethod在特定環(huán)境條件下，按照規(guī)定方法和程序進(jìn)行的試驗(yàn)，包括但不限于動(dòng)物試驗(yàn)、體外試驗(yàn)（包括離體器官、組織、細(xì)胞、微生物、理化試驗(yàn)）等。4要求4.1原料生產(chǎn)功效型牙膏所使用的原料應(yīng)符合國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第71號(hào)《牙膏監(jiān)督管理辦法》的規(guī)定。4.2微生物和理化指標(biāo)按GB/T8372的規(guī)定執(zhí)行。4.3安全性進(jìn)行人體功效評(píng)價(jià)和消費(fèi)者使用測(cè)試前，應(yīng)當(dāng)遵守倫理學(xué)原則要求，在質(zhì)量安全責(zé)任單位完成產(chǎn)品安全評(píng)估的基礎(chǔ)上進(jìn)行，所有受試者（或消費(fèi)者）應(yīng)當(dāng)簽署知情同意書后方可開展試驗(yàn)。4.4功效評(píng)價(jià)4.4.1基本原則功效宣稱應(yīng)當(dāng)有充分的科學(xué)依據(jù)，有功效作用評(píng)價(jià)資料做支撐。4.4.2功效成分功效成分應(yīng)進(jìn)行定性或定量測(cè)定。產(chǎn)品使用的功效成分尚未建立測(cè)定方法的，應(yīng)采用其他質(zhì)量控制措施保障產(chǎn)品的功效性。4.5包裝外觀按GB/T8372的規(guī)定執(zhí)行。4.6凈含量應(yīng)符合國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第70號(hào)《定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法》的規(guī)定。5試驗(yàn)方法5.1一般規(guī)定除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。本文件中滴定分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液、試驗(yàn)方法中所用制劑及制品，除特殊外，均按GB/T601、GB/T603的規(guī)定制備。3QB/T2966—XXXX5.2微生物和理化指標(biāo)按GB/T8372或《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定執(zhí)行。5.3安全性產(chǎn)品安全評(píng)估應(yīng)當(dāng)自行或者委托專業(yè)機(jī)構(gòu)按照《牙膏備案資料管理規(guī)定》、GB/T42763，或其他相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。5.4功效評(píng)價(jià)牙膏產(chǎn)品功效評(píng)價(jià)方法一般分為人體功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)、消費(fèi)者使用測(cè)試和實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)。a)人體功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)應(yīng)該根據(jù)相應(yīng)的國家法律、法規(guī)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在符合國家規(guī)定已備案藥物臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)（或醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)）的三級(jí)口腔醫(yī)院或三級(jí)甲等醫(yī)院口腔科進(jìn)行。b)消費(fèi)者使用測(cè)試應(yīng)包括測(cè)試依據(jù)、測(cè)試目的及原理、測(cè)試產(chǎn)品信息、測(cè)試前準(zhǔn)備、測(cè)試方法、試驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論和不良反應(yīng)等內(nèi)容。c)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)體系、樣本量、結(jié)果及結(jié)論、方法適用性及局限性等相關(guān)信息，需說明檢測(cè)項(xiàng)目判定為有效的依據(jù)，并簡(jiǎn)述檢測(cè)項(xiàng)目與功效宣稱之間的關(guān)聯(lián)性。d)對(duì)于通過添加氟化物達(dá)到防齲功效，且含氟量達(dá)到GB/T8372要求的，可免于對(duì)防齲功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。相同責(zé)任主體的牙膏產(chǎn)品，使用經(jīng)驗(yàn)證可發(fā)揮功效作用的相同功效成分，且配方濃度不低于已備案產(chǎn)品，宣稱具有防齲、抑牙菌斑、抗牙本質(zhì)敏感、減輕牙齦問題等相同功效的，可免于功效評(píng)價(jià)。e)宣稱原料的功效作用，可開展文獻(xiàn)資料調(diào)研、研究數(shù)據(jù)分析、評(píng)價(jià)試驗(yàn)等，以證實(shí)原料具有所宣稱的功效，且原料的功效宣稱應(yīng)當(dāng)與產(chǎn)品的功效宣稱具有充分的關(guān)聯(lián)性，如在產(chǎn)品功效宣稱依據(jù)的摘要中闡明該原料所發(fā)揮的具體作用。5.5功效成分企業(yè)可按照本文件附錄A、附錄B、附錄C、附錄D、附錄E、附錄F所述測(cè)定方法或經(jīng)過方法學(xué)驗(yàn)證的其他方法對(duì)功效成分進(jìn)行檢測(cè)。完整的測(cè)試方法一般包括：a)試劑與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。b)儀器。c)分析步驟。d)結(jié)果計(jì)算。e)檢出限和定量限。f)回收率和精密度。g)允許差。5.6凈含量按JJF1070的規(guī)定執(zhí)行。6檢驗(yàn)規(guī)則和標(biāo)志微生物和理化指標(biāo)、凈含量檢驗(yàn)和標(biāo)志按GB/T8372的規(guī)定執(zhí)行。4QB/T2966—XXXX游離氟或可溶氟含量的測(cè)定游離氟或可溶氟含量，按GB/T8372或《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的方法進(jìn)行測(cè)定。5QB/T2966—XXXX丹皮酚含量的測(cè)定B.1原理試樣經(jīng)甲醇超聲提取，離心過濾后，用高效液相色譜儀測(cè)定丹皮酚含量，通過峰面積外標(biāo)法定量計(jì)B.2儀器高效液相色譜分析儀。B.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制B.3.1丹皮酚(CASNO:552-41-0)標(biāo)準(zhǔn)品：有證書的標(biāo)準(zhǔn)品，純度均不小于95%。B.3.2甲醇：HPLC色譜純。B.3.3標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱取一定量的丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品，于容量瓶中，加甲醇溶解制成丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。采取逐級(jí)用甲醇稀釋方式，配制成2μg/mL～40μg/mL系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。B.3.4樣品溶液的制備稱取樣品0.2g（精確至0.0001g于具塞比色管中，準(zhǔn)確加入甲醇10mL，用玻璃棒攪散牙膏樣品，超聲波提取30min，靜置，傾取上清液于離心管中，以不小于2000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min，用0.45μm濾膜過濾，即得。B.4色譜條件色譜條件如下：a)色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）。b)流動(dòng)相：甲醇:水（73:27體積比）。c)流速：1mL/min。d)檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)274nm。e)柱溫：40℃B.5分析步驟B.5.1.1對(duì)照品溶液準(zhǔn)確吸取上述丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)溶液10μL注入色譜儀，根據(jù)每一標(biāo)準(zhǔn)溶液所測(cè)得的峰面積繪制校正曲線，以濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，曲線線性要求0.999以上。B.5.1.2樣品溶液準(zhǔn)確吸取上述樣品溶液10μL注入色譜儀，以峰面積外標(biāo)法定量計(jì)算。B.6精密度和準(zhǔn)確度測(cè)定相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)小于5%，回收率范圍應(yīng)在95%～105%。6QB/T2966—XXXX鉀含量的測(cè)定C.1原理樣品經(jīng)處理，使鉀以離子狀態(tài)存在于溶液中，樣品溶液中鉀離子被原子化后，基態(tài)原子吸收來自鉀空心陰極燈的共振線，其吸光度與樣品中鉀的含量成正比。在其他條件不變的情況下，根據(jù)測(cè)量被吸收后的譜線強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)系列溶液比較進(jìn)行定量。方法1適用于鉀含量的添加范圍應(yīng)不高于1.55%（以硝酸鉀計(jì)，不高于4%）的牙膏產(chǎn)品；方法2適用于鉀含量的添加范圍應(yīng)不低于0.50%（以硝酸鉀計(jì)，不低于1.29%）的牙膏產(chǎn)品。C.2試劑C.2.1除非另有說明，本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。C.2.2氫氟酸。C.2.3硝酸。C.2.4溶解乙炔：滿足GB6819—2004要求。C.2.5鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL。C.2.6氯化銫。C.2.7氯化銫溶液：稱取5g氯化銫（C.2.6用水溶解轉(zhuǎn)移至500mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻，備用。此溶液在室溫下有效期為1個(gè)月。C.2.8鉀標(biāo)準(zhǔn)工作液（方法1準(zhǔn)確吸取10.0mL鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（C.2.5至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成100μg/mL的鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液。分別取鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液0mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，配制成濃度為0μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL的鉀標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。C.2.9鉀標(biāo)準(zhǔn)工作液（方法2精確量取鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（C.2.5）0mL、0.5mL、1mL、2mL、3mL的鉀離子標(biāo)準(zhǔn)溶液至100mL容量瓶中，分別移入10mL氯化銫溶液和5mL硝酸于每個(gè)容量瓶中，再用水稀釋至刻度，搖勻，配制濃度為0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。C.3儀器C.3.1原子吸收分光光度計(jì)：方法1的檢測(cè)波長(zhǎng)766.5nm；方法2的檢測(cè)波長(zhǎng)404.4nm。C.3.2鉀空心陰極燈。C.3.3分析天平：感量為0.1mg。C.3.4加熱板：輸出溫度范圍0℃~500℃。C.3.5離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不小于6000r/min。C.4分析步驟C.4.1樣品溶液的制備C.4.1.1方法17QB/T2966—XXXX任取試樣牙膏1支，棄去頭部約20mm膏體，稱取試樣0.2g～0.3g（精確到0.0001g置于聚四氟乙烯溶樣杯中，同時(shí)做空白試驗(yàn)。加入硝酸（C.2.3）5mL，由低溫（80℃)至高溫（180℃)加熱消解，移去熱源。冷卻至室溫后定量轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，備用。（若試樣溶液渾濁，離心沉淀后可取上清液進(jìn)行測(cè)定）C.4.1.2方法2稱取樣品1g（先擠去大約20mm），精確到0.0001g，置于聚四氟乙烯溶樣杯中，同時(shí)做空白試驗(yàn)。在通風(fēng)櫥中小心加入5mL硝酸（C.2.3）。于沸水?。ɑ蛳喈?dāng)溫度條件下）消解20min，經(jīng)常搖動(dòng)，最后加熱至棕黃色蒸汽揮發(fā)完全。冷卻至室溫，將溶液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用水洗滌，合并洗液。移入10mL氯化銫溶液（C.2.9），加水定容至刻度，混勻。取適量溶液于6000r/min下離心15min，取上清液過濾待測(cè)。C.4.2儀器條件儀器測(cè)定條件按照GB/T15337原子吸收光譜分析法通則進(jìn)行儀器條件優(yōu)化。C.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制待儀器穩(wěn)定后，按濃度由低至高依次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不小于0.99。C.4.4樣品的測(cè)定按照優(yōu)化的儀器條件測(cè)定空白溶液和試樣溶液的吸光度。以兩者吸光度之差在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上查出對(duì)應(yīng)試樣溶液中鉀的濃度，進(jìn)而計(jì)算出牙膏試樣中鉀的含量。如果待測(cè)試樣溶液中鉀的濃度超出標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍，則根據(jù)鉀的含量適當(dāng)稀釋待測(cè)試樣溶液。C.5結(jié)果計(jì)算試樣中鉀的含量C（以硝酸鉀計(jì)）按公式（C.1）計(jì)算：w=×100%············································(C.1)式中：ω——試樣中鉀的含量（以硝酸鉀計(jì)），單位為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)（%）；ρk——測(cè)得試樣溶液中鉀的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL）；V——試樣的定容體積，單位為毫升（mLd——試樣溶液的稀釋倍數(shù)；m——試樣的質(zhì)量，單位為克（g101.1——硝酸鉀的分子量；39.1——鉀的原子量。C.6允許差在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。QB/T2966—XXXX（資料性）三七皂苷R1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Re含量的測(cè)定D.1原理試樣經(jīng)90%甲醇水提取后，過濾后經(jīng)高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定三七皂苷R1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Re的含量，以保留時(shí)間和離子對(duì)比例定性，外標(biāo)法定量。取樣量為0.5g時(shí)，人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的方法檢出限為0.04μg/g，方法定量限為0.10μg/g；三七皂苷R1和人參皂苷Re的方法檢出限為0.02μg/g，方法定量限為0.05μg/g。D.2試劑和材料D.2.1除另有規(guī)定外，本方法用水均為GB/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。D.2.2標(biāo)準(zhǔn)品：有證書的標(biāo)準(zhǔn)品，純度均不小于95%。三七皂苷R1（CASNO.：80418-24-2）、人參皂苷Rg1（CASNO.：22427-39-0）、人參皂苷Rb1（CASNO.：41753-43-9）、人參皂苷Re（CASNO.：52286-D.2.3甲醇：色譜純。D.2.4乙腈：色譜純。D.2.5甲酸：分析純。D.2.6醋酸銨：分析純。D.2.7甲醇水溶液（90%，v/v準(zhǔn)確量取900mL甲醇（D.2.3）至1000mL容量瓶，加水定容至刻度，混勻。D.2.8乙酸銨水溶液（10mmol/L，含0.1%甲酸準(zhǔn)確稱取0.7708g乙酸銨，于燒杯中用1L純水溶解，準(zhǔn)確量取1mL甲酸（D.2.5）至燒杯中，混勻。D.2.9標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L分別稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)品（D.2.2）約10mg（精確至0.01mg）于10mL容量瓶中，用甲醇（D.2.3）定容至刻度，混勻。D.2.10混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：用甲醇（D.2.3）將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（D.2.9）分別配成一系列濃度5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。D.2.11石英砂：25~150目。D.2.12微孔濾膜：孔徑0.22μm，材質(zhì)為尼龍。D.3儀器D.3.1液相色譜色譜/串聯(lián)質(zhì)譜儀（LC-MS/MS配電噴霧離子源（ESI）。D.3.2分析天平：感量為0.1mg。D.3.3渦旋振蕩器：振蕩速度不小于1500r/min。D.3.4超聲波清洗器：功率不低于250W。D.4測(cè)定步驟89QB/T2966—XXXXD.4.1試樣制備將牙膏試樣擠去20mm后，準(zhǔn)確稱取試樣0.5g（精確到0.001g）于10mL具塞比色管中，加入約0.5g石英砂（D.2.11混勻，再準(zhǔn)確加入90%甲醇水（D.2.7）10mL，渦旋混勻后超聲提取20min，放置冷卻后經(jīng)0.22μm濾膜（D.2.12）過濾，待測(cè)。D.4.2色譜參考條件液相色譜參考條件如下：a)色譜柱：C18柱，100mm×3mm，2.6μm，或柱效相當(dāng)者。b)流動(dòng)相：A：10mmol/L乙酸銨水溶液（含0.1%甲酸）（D.2.7），B：乙腈，梯度洗脫，梯度洗脫程序見表D.1。c)柱溫：35℃。d)進(jìn)樣體積：5μL。表D.1液相色譜梯度洗脫程序%%038D.4.3質(zhì)譜條件質(zhì)譜參考條件如下：a)電離方式：電噴霧電離，負(fù)離子模式。b）噴霧壓力（IS）-4500.0V。c）干燥器壓力：50Psi。d）氣簾氣壓力:20Psi。e）碰撞氣壓力：9Psi。f）離子源溫度：450℃。g）掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式，四種化合物的質(zhì)譜參數(shù)見表D.2。表D.2四種化合物的質(zhì)譜參數(shù)號(hào)m/zm/zV壓V1三七皂苷R1977.6931.633.6637.561.772人參皂苷Rg1845.4799.436.9637.544.2QB/T2966—XXXX號(hào)m/zm/zV壓V3人參皂苷Rb11153.645.85945.473.044人參皂苷Re991.6945.533.96637.561.65D.4.4定性測(cè)定取試樣溶液與混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在相同試驗(yàn)條件下測(cè)定，試樣溶液中待測(cè)組分的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)組分的保留時(shí)間一致（偏差在±2.5%之內(nèi)且定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)組分的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較，偏差不超過表D.3規(guī)定的范圍，即可判定試樣中存在該組分。表D.3定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的允許偏差%%D.4.5定量測(cè)定取試樣溶液與混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在相同試驗(yàn)條件下測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，根據(jù)峰面積對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上的溶液濃度定量。試樣溶液中待測(cè)組分的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后測(cè)定。D.5結(jié)果計(jì)算試樣中目標(biāo)物的含量i按公式（D.1）計(jì)算：wi=………………(D.1)式中：wi——試樣中目標(biāo)物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，mg/kg；pi——試樣溶液中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度，mg/L；V——樣液定容體積，mL；D——稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）;m——稱取試樣的質(zhì)量，g。D.6譜圖QB/T2966—XXXX四種目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)溶液的LC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖見圖D.1：圖D.1四種目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)溶液LC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖QB/T2966—XXXX異嗪皮啶（草珊瑚有效成分）含量的測(cè)定E.1原理試樣經(jīng)80%甲醇水提取后，過濾后經(jīng)高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)量異嗪皮啶的含量，以保留時(shí)間和離子對(duì)比例定性，外標(biāo)法定量。取樣量為1.0g時(shí)，異嗪皮啶的方法檢出限為0.02μg/g，方法定量限為0.05μg/g。E.2試劑和材料E.2.1除另有規(guī)定外，本實(shí)驗(yàn)用水均為GB/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。E.2.2異嗪皮啶：純度均不小于95%，CASNO.：486-21-5。E.2.3甲醇：色譜純。E.2.4甲酸：分析純。E.2.5甲醇水溶液（80%，v/v準(zhǔn)確量取800mL甲醇（E.2.3）至1000mL容量瓶，加水定容至刻度，混勻。E.2.6甲酸水溶液（0.1%，v/v準(zhǔn)確量取1mL甲酸（E.2.4）至1000mL容量瓶，加水定容至刻度，混勻。E.2.7標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L分別稱取適量各對(duì)照物質(zhì)（E.2.2）約10mg（精確至0.01mg）于10mL容量瓶中，用甲醇（E.2.3）定容至刻度，混勻。E.2.8混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：用甲醇（E.2.3）將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（E.2.7）分別配成一系列濃度5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。E.2.9石英砂：25目～150目。E.2.10微孔濾膜：孔徑0.22μm，材質(zhì)為尼龍。E.3儀器E.3.1液相色譜色譜/串聯(lián)質(zhì)譜儀（LC-MS/MS配電噴霧離子源（ESI）。E.3.2分析天平：感量為0.1mg。E.3.3渦旋振蕩器：振蕩速度不小于1500r/min。E.3.4超聲波清洗器：功率不低于250W。E.4分析步驟E.4.1試樣制備棄去前20mm牙膏，準(zhǔn)確稱取1.0g（精確至0.001g）樣品，置于10mL具塞比色管中，加入約1g石英砂（E.2.9），混勻，再準(zhǔn)確加入80%甲醇水溶液（E.2.5）10mL，渦旋混勻后超聲15min。放置冷卻后經(jīng)0.22μm濾膜（E.2.10）過濾，待測(cè)。E.4.2色譜參考條件液相色譜參考條件如下：a)色譜柱：C18柱，100mm×3mm，2.6μm，或柱效相當(dāng)者。QB/T2966—XXXXb)流動(dòng)相：A：0.1%甲酸水溶液（E.2.6），B：甲醇（E.2.3），梯度洗脫，梯度洗脫程序見表E.1。c)柱溫：30℃。d)進(jìn)樣體積：5μL。表E.1液相色譜梯度洗脫程序間in動(dòng)相A動(dòng)相B090740607.190909090E.4.3質(zhì)譜條件質(zhì)譜參考條件如下：a)電離方式：電噴霧電離，正離子模式。b）噴霧壓力（IS）4500.0KV。c）干燥器壓力：50Psi。d）氣簾氣壓力:20Psi。e）碰撞氣壓力：9Psi。f）離子源溫度：550℃。g）掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式，異嗪皮啶的質(zhì)譜參數(shù)見表E.2。表E.2異嗪皮啶的質(zhì)譜參數(shù)化合物名稱母離子m/z子離子m/z碰撞電壓V去簇電壓V異嗪皮啶223.0208.0243243E.4.4定性測(cè)定取試樣溶液與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在相同試驗(yàn)條件下測(cè)定，試樣溶液中待測(cè)組分的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)組分的保留時(shí)間一致（偏差在±2.5%之內(nèi)且定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)組分的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較，偏差不超過表E.3規(guī)定的范圍，即可判定試樣中存在該組分。表E.3定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的允許偏差k＞50k≤10QB/T2966—XXXXE.4.5定量測(cè)定取試樣溶液與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在相同試驗(yàn)條件下測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，根據(jù)峰面積對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上的溶液濃度定量。試樣溶液中待測(cè)組分的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后測(cè)定。E.5結(jié)果計(jì)算試樣中目標(biāo)物的含量w按公式（E.1）計(jì)算：式中：—w——P—V——D—m—E.6譜圖試樣中目標(biāo)物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，單位為毫克每千克（mg/kg）；試樣溶液中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL樣液定容體積，單位為毫升（mL）；稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）；稱取試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)溶液及陽性樣品的LC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖E.1：圖E.1標(biāo)準(zhǔn)溶液LC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖QB/T2966—XXXX其他常見功效成分的檢測(cè)方法其他常見功效成分的檢測(cè)方法見表F.1。表F.1其他常見功效成分的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)名稱標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)口腔護(hù)理產(chǎn)品中過氧化物的測(cè)定方法高效液相色譜法GB/T32112-2015口腔護(hù)理產(chǎn)品中植酸鈉的測(cè)定方法GB/T32114-2015牙膏中4-氨甲基環(huán)己甲酸（凝血酸）的測(cè)定高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T32121-2015牙膏中維生素B2、維生素B3和維生素B6的測(cè)定高效液相色譜