(高清版)DB22∕T 396.10-2017 保健用品毒理學(xué)評價程序與檢驗方法 第10部分：致畸試驗　　

備案號：58329-2018DB22DB22/T396.10—2017保健用品毒理學(xué)評價程序與檢驗方法ToxicologicalevaluationproceduresandtestmethodsforhealthcareproductsPart10:Teratogenicitytest吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1警示——使用本標準的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本標準并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)常用試驗動物為大鼠、小鼠和家兔。傳統(tǒng)致畸應(yīng)選用健康性成熟(90d～次試驗可設(shè)一陽性對照組。每組至少12只孕鼠。常用陽性對照物有敵枯雙（0.5mg/kg～1.0mg/kg體重）、五氯酚鈉阿斯匹林(30mg/kg體重)及2性成熟雌、雄大鼠按1:1(或2:1)同籠后，每日早晨觀察陰栓(或陰道涂片),查出陰栓(或精子),認為該鼠以交配，當(dāng)日作為“受孕”零天。如果5d內(nèi)未交配，應(yīng)更換雄鼠。檢出的“孕鼠”隨機分到各組，并稱重和編號，在受孕的第7d~16d,每天經(jīng)皮給予受試物。受孕的0d、7d、12d、1620d稱體重，并計算給受試物的量。動物交配期室溫在20℃~25℃為宜，環(huán)境安靜，必要時給予增加2.5.2孕鼠處死和檢查大鼠于妊娠20d,小鼠第18d,兔第29d處死。大鼠用2g/100mL硫噴妥鈉1mL/只~1.5mL/只腹2.5.3活胎鼠檢查2.5.4胎鼠骨標本的制作與檢查將每窩1/2的活胎(奇數(shù)或偶數(shù))放入95%(V/V)乙醇中固定2周～3周，取出胎仔(或可去皮、去內(nèi)臟及脂肪)流水沖洗數(shù)分鐘后放入1g/100ml～2g/100ml的氫氧化鉀溶液內(nèi)(至少5倍于胎仔體積)8h~72h,透明后放入茜素紅-S應(yīng)用液中染色6h~48h,并輕搖1次/d~2次/d,至頭骨染紅為宜。再放入透明液A中1d~2d,放入透明液B中2頭頂間骨及后頭骨缺損情況，然后檢查胸骨的數(shù)目，缺失或融合(胸骨為6個，骨化不全時首先缺第5胸骨、次為缺第2胸骨)。肋骨通常12對~13對，常見畸形有融合肋、分叉肋、波狀肋、短肋、多肋、缺肋、肋骨中斷。脊柱發(fā)育和椎體數(shù)目(頸椎7個，胸椎12個~13個，腰椎5個～6個，底椎4個，尾椎3個~5個)有無融合、縱裂等最后檢查四肢骨。2.5.5胎鼠內(nèi)臟檢查圖1正常切面圖3），各種率的檢查用X2檢驗，孕鼠增重用方差分析或非參數(shù)統(tǒng)計，胎鼠身長、體重、窩平均活胎數(shù)用T強致畸。為表示有害物質(zhì)在保健用品中存在時人體受害機率，可計算致畸危害指數(shù)，如指數(shù)大于300說ik............................