凝集反應課件

免疫學檢驗第五章凝集反應直接凝集反應間接凝集反應Coombs試驗自身紅細胞凝集試驗冷凝集實驗5凝集反應凝集反應

Agglutination細菌、螺旋體、紅細胞或細胞性抗原等顆粒性抗原，或可溶性抗原或抗體與載體顆粒結合為致敏顆粒后，它們與相應抗體或抗原發(fā)生特異性反應，在適當電解質存在下，形成肉眼可見的凝集現象。

5凝集反應凝集反應的特點抗原顆粒性抗原或致敏顆粒。反應的二個階段抗原抗體的特異性結合和出現肉眼可見的凝集現象。在一定pH及適量電解質存在下才能發(fā)生。在凝集反應中IgM類抗體的作用強度比IgG類要大數百倍，lgG類抗體常出現不完全反應，即不可見的抗原抗體反應。凝集試驗為定性檢測，也可進行半定量檢測。5凝集反應直接凝集反應directagglutination

顆粒性抗原在適當電解質參與下直接與相應抗體反應，當二者比例適當時，出現凝集。

反應中的抗原稱為凝集原agglutinogen參與反應的抗體稱為凝集素agglutinin玻片凝集試驗試管凝集試驗5凝集反應玻片凝集試驗

玻片凝集試驗為定性試驗方法。一般用已知抗體作為診斷血清，與受檢顆粒性抗原如菌液或紅細胞懸液各加一滴在玻片上，混勻，數分鐘后可用肉眼或低倍顯微鏡觀察凝集結果。

出現顆粒凝集者為陽性反應，也可用已知顆粒性抗原測定病人血清中特異性抗體。

§ABO血型鑒定5凝集反應CircleAshowsapositivetest(agglutinationofthelatexparticles.)TheothercirclesB-Eshownegativetests(noagglutinationofthelatexparticles).玻片凝集試驗5凝集反應玻片凝集試驗5凝集反應ABObloodtypeKarlLandsteiner(1968-1943)anAustrianimmunologist5凝集反應ABO血型鑒定5凝集反應ABO血型及Rh血型抗體檢測5凝集反應試管凝集試驗

試管凝集試驗為半定量試驗方法。

在微生物學檢驗中常用已知細菌作為一定濃度懸液抗原與一系列稀釋的受檢血清混合，經靜置保溫后觀察每管內顆粒性抗原凝集程度。

通常以產生明顯凝集現象的最高稀釋度為血清中抗體的效價。

§肥達試驗Widaltest§外斐試驗Weil-Felixtest5凝集反應肥達試驗WidaltestFernand

Widal(1862–1929）Frenchphysicianandbacteriologistwhomadeimportantcontributionstothediagnosis,treatment,andpreventionofmanydiseases.5凝集反應Atestofbloodserumthatusesanagglutinationreactiontodiagnosetyphoidfever.AntigensdetectedaretheO(somatic),H(flagellar)andVi(virulence)antigens.肥達試驗

theWidalreaction5凝集反應外斐試驗Weil-FelixtestAnagglutinationtestusedinthelaboratorytodiagnoserickettsialdiseases.5凝集反應RickettsialInfection5凝集反應外斐試驗Weil-FelixtestItdependsonanon-specificcrossreactionbetweenantibodiesproducedbytherickettsialinfectionwiththeOX-2,OX-19andOXKantigensoftheGramnegativerod,Proteussp（變形桿菌）.

Thediagnosisofrickettsialinfectionisconfirmedbyafour-foldriseinantibodytitrebetweenacuteandconvalescentsamples.5凝集反應間接凝集反應indirectagglutination將可溶性抗原(或抗體)先吸附或偶聯(lián)與免疫無關大小適當的顆粒表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相應抗體(或抗原)作用，在適宜的電解質存在條件下，出現特異性的凝集現象。也稱被動凝集反應Passiveagglutination)。5凝集反應正向間接凝集反應用抗原致敏載體以檢測標本中的相應抗體。將可溶性抗原與載體顆粒結合，再與樣品中的抗體反應，通過抗體橋聯(lián)，形成肉眼可見的凝集顆?；蚰瘔K者，為陽性反應?！靷抽T菌多糖抗原-綿羊紅細胞+抗體5凝集反應Agglutination5凝集反應血清稀釋法1234565凝集反應反向間接凝集試驗選用已知特異性抗體致敏載體以檢測標本中的相應抗原。用特異性抗體致敏載體，與檢測樣品中待測抗原反應，通過抗原橋聯(lián)，形成肉眼可見的凝集者為陽性?！霩BsAb-綿羊紅細胞+HbsAg,§AFP,FetalAlphaGlobulin,AlphaFetoprotein5凝集反應間接凝集抑制試驗用已知抗原致敏的顆粒載體及相應的標準抗體，檢測標本中與致敏抗原相同的抗原。檢測方法將標本與抗體試劑相加反應，然后加入致敏載體。出現凝集現象，結果陰性。未出現凝集現象，凝集反應被抑制，結果陽性。5凝集反應HemagglutinationInhibition5凝集反應反向間接凝集抑制試驗用抗體致敏載體顆粒及相應的抗原作為診斷試劑，以檢測標本中的抗體。檢測方法將待檢標本與已知標準抗原相加反應，然后加入抗體致敏載體。出現凝集現象，結果陰性。未出現凝集現象，凝集反應被抑制，結果陽性。5凝集反應間接血凝試驗

indirecthemagglutinationassay,IHA

用已知抗原（或抗體）致敏紅細胞，檢測標本中相應的抗體（或抗原）。正向間接血凝試驗反向間接血凝試驗正向間接血凝抑制試驗反向間接血凝抑制試驗§抗核抗體，類風濕因子5凝集反應Coombs試驗（橋梁凝集反應）1945年由Coombs建立的一種抗球蛋白參與的間接血凝試驗，檢測抗紅細胞不完全抗體的一種非常經典的方法。不完全抗體多半是7S的IgG抗體，該抗體能與其相應抗原牢固結合，一般條件下不出現可見反應。由于不完全抗體只能與一方紅細胞抗原的決定簇結合，而不能同時與雙方紅細胞上的抗原決定'簇連接(又稱單價抗體)，Coombs試驗利用抗球蛋白抗體作為第二抗體達到橋梁的作用，連接與紅細胞表面抗原結合的特異性抗體，使紅細胞凝集。5凝集反應Coombs試驗的應用§Coombs試驗新生兒溶血特發(fā)性自身免疫性貧血自身免疫性溶血Rh-抗D抗體5凝集反應DirectCoombsTest5凝集反應IndirectCoombsTest5凝集反應新生兒溶血癥

CoombsTest5凝集反應冷凝集實驗ColdAgglutination冷球蛋白cryoglobulin，CG

是血清中一種特殊蛋白質，在4℃時不溶解并自發(fā)沉淀，30℃易于聚合，37℃時便溶解。它能固定補體產生炎癥反應，類似免疫復合物引起的疾病。冷球蛋白有兩種類型即單株型及混合型：IgG或IgM單株型冷球蛋白混合型冷球蛋白IgG、IgM或(和)IgA多株型IgG、IgM和補體C3混合型。5凝集反應冷凝集實驗ColdAgglutinationColdagglutinindiseaseisanautoimmunediseasecharacterizedbythepresenceofhighconcentrationsofcirculatingantibodiesdirectedagainstredbloodcells.Itisaformofautoimmunehemolyticanemia,specificallyoneinwhichantibodiesonlybindredbloodcellsatlowtemperatures,typically28-31°C.5凝集反應冷凝集實驗ColdAgglutinationPathophysiologyAllindividualshavecirculatingantibodiesdirectedagainstredbloodcells,buttheirconcentrationsareoftentoolowtotriggerdisease(titersunder1:64at4°C).Inindividualswithcoldagglutinindisease,theseantibodiesareinmuchhigherconcentrations(titersover1:1000at4°C).5凝集反應冷凝集實驗ColdAgglutination5凝集反應自身紅細胞凝集試驗

Autologousredcellagglutinationassay反應中的紅細胞為未經致敏的受檢者新鮮紅細胞。主要試劑材料為抗人O型紅細胞單克隆抗體，這種抗體能與各種血型的紅細胞結合，但不發(fā)生凝集反應。抗人O型紅細胞單克隆抗體與另一特異性抗體連接的雙功能抗體可用于檢測標本中的抗原；若與特異性抗原連接，則可檢測標本中的抗體?！霩IVAb,HBsAg

5凝集反應凝集反應在臨床中的應用1直接凝集反