DB45T 2553-2022 富硒蛹蟲草生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.99CCSB3945Technicalcodeofpracticeforproductionofselenium-enrichedcordycepsmilitarisIDB45/T2553—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學院提出并宣貫。本文件由廣西農(nóng)業(yè)種植業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學院微生物研究所、宜州市農(nóng)業(yè)科學研究所。本文件主要起草人：吳小建、祁亮亮、吳圣進、陳雪鳳、李俐穎、郎寧、韋仕巖、王燦琴、潘慶流。1DB45/T2553—2022富硒蛹蟲草生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件界定了富硒蛹蟲草（selenium-enrichedcordycepsmilitaris（L.exFr）Link）的術(shù)語和定義，描述了富硒蛹蟲草的培養(yǎng)方法，規(guī)定了富硒蛹蟲草生產(chǎn)的技術(shù)要求。本文件適用于富硒蛹蟲草的生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4789.28食品安全國家標準食品微生物學檢驗培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準NY/T5010無公害農(nóng)產(chǎn)品種植業(yè)產(chǎn)地環(huán)境條件3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1富硒蛹蟲草selenium-enrichedcordycepsmilitaris（L.exFr）Link在培養(yǎng)基中加入富硒營養(yǎng)液,通過蛹蟲草體內(nèi)轉(zhuǎn)化使子實體中硒含量在0.15mg/kg～2.0mg/kg的蟲草子實體干品。3.2富硒營養(yǎng)液selenium-enrichednutrientsolution稱取葡萄糖100.0g、磷酸二氫鉀3.0g、硫酸鎂1.5g、VB11.0mg，溶于1000ml自來水中，加入4.5mg～35.0mg亞硒酸鈉，充分溶解并調(diào)節(jié)pH值至7.0～7.2。4品種選擇選擇來源明確，并經(jīng)權(quán)威部門鑒定的蛹蟲草品種。5生產(chǎn)條件5.1場地選擇場地環(huán)境應(yīng)符合NY/T5010的規(guī)定。2DB45/T2553—20225.2培養(yǎng)基質(zhì)要求培養(yǎng)基原料應(yīng)符合GB4789.28的規(guī)定；生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749的規(guī)定。5.3培養(yǎng)方法按附錄A的規(guī)定執(zhí)行。6硒元素富集技術(shù)6.1人工添加硒化合物在栽培料中添加富硒營養(yǎng)液，按照栽培料與富硒營養(yǎng)液的質(zhì)量比為1:1混合，攪拌均勻，使培養(yǎng)基中硒元素含量為1mg/kg～8mg/kg。6.2利用天然富硒基質(zhì)采用天然富硒的主料和輔料，如富硒大米、富硒麥麩等替代培養(yǎng)料中常規(guī)原料進行蛹蟲草栽培，使培養(yǎng)基質(zhì)硒含量≥0.5mg/kg。3DB45/T2553—2022富硒蛹蟲草的培養(yǎng)方法A.1適用范圍本方法適用于富硒蛹蟲草的培養(yǎng)。A.2方法與步驟A.2.1培養(yǎng)基配方A.2.1.1母種培養(yǎng)基可采用：PDA培養(yǎng)基、高氏1號培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基，宜選用PDA培養(yǎng)基。A.2.1.2液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基：宜采用PDA優(yōu)化培養(yǎng)基（g/L土豆200g，葡萄糖20g，蛋白胨20g，硫胺素5×10-5g，KH2PO41.5g，MgSO41.5g，F(xiàn)eSO4·7H2O0.3g。A.2.2富硒蛹蟲草培養(yǎng)基配制取干凈的容器，加入大米、麥粒、黃豆等常用栽培料，添加一定量的富硒營養(yǎng)液，使培養(yǎng)料中硒含量為1mg/kg～8mg/kg。或用富硒大米、富硒麥麩、富硒黃豆等替代培養(yǎng)料中常規(guī)原料進行蛹蟲草栽培，使培養(yǎng)基質(zhì)硒含量≥0.5mg/kg；用塑料膜將容器密封好，放入高壓滅菌鍋中，在0.1MPa下滅菌30min，自然冷卻后取出。A.2.3接種切取PDA斜面菌種兩小塊（6～8mm2）置于裝液量100mL/250mL三角瓶中，26℃、150r/min搖床培養(yǎng)48h至菌液清亮（出現(xiàn)稠密且大小均勻的菌絲球）。將發(fā)酵好的液體菌種接種至裝量生產(chǎn)培養(yǎng)基質(zhì)100mL/250mL的三角瓶或透明的食品級塑料瓶中，接種量526℃培養(yǎng)。A.2.4轉(zhuǎn)色管理保濕培養(yǎng)3d～5d后，待菌絲布滿整個基質(zhì)表面并深扎到底部，輔助光照，光照強度以1000Lx～3000Lx為宜，濕度7090溫度18℃~23℃,培養(yǎng)至表面菌絲由白色轉(zhuǎn)為橘黃色。A.2.5出草轉(zhuǎn)色培養(yǎng)7d～12d后，培養(yǎng)基質(zhì)表面開始長出子實體。當子實體長至1cm～1.5cm，調(diào)低光照強度至