實(shí)驗(yàn)1 微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則 實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌課件

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

華僑大學(xué)化工學(xué)院華僑大學(xué)化工學(xué)院實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則、工作環(huán)境要求、實(shí)驗(yàn)記錄、常用器皿材料和儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌微生物實(shí)驗(yàn)的意義、研究進(jìn)展

和實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

一、研究?jī)?nèi)容研究微生物的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理生化、遺傳變異、微生物與其他生物、與自然界之間的關(guān)系1.機(jī)理研究：微生物適應(yīng)環(huán)境的機(jī)制，鞭毛運(yùn)動(dòng)的機(jī)理等（是生化和分子生物學(xué)研究的重要研究?jī)?nèi)容和研究材料。）實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌2.微生物與實(shí)際應(yīng)用微生物與發(fā)酵工程微生物與環(huán)境工程微生物與農(nóng)業(yè)微生物與醫(yī)學(xué)領(lǐng)域微生物與食品工業(yè)實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌二、微生物學(xué)研究進(jìn)展

微生物基因組學(xué)研究（MicrobialGenomics）不可培養(yǎng)微生物（UnculturedMicroorganisms）DNA芯片（DNAChip）三域?qū)W說(shuō)（Bacteria,Archae,Eucaryote）實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌三、微生物學(xué)與Nobel獎(jiǎng)

到目前為止，幾十項(xiàng)Nobel生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，化學(xué)獎(jiǎng)都與微生物學(xué)有關(guān)參考：沈萍教授《微生物學(xué)》緒論部分Nobel獲獎(jiǎng)?wù)?。?shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌四、如何進(jìn)行微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)嚴(yán)肅認(rèn)真科學(xué)態(tài)度分析問(wèn)題搞清原理實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌五、微生物實(shí)驗(yàn)安排與考核平時(shí)表現(xiàn)、基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)：10+30%，一次考試考試：60%實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌課堂紀(jì)律嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度嚴(yán)肅課堂紀(jì)律不允許無(wú)故曠課、早退遲到（3次）實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌實(shí)驗(yàn)室安全和衛(wèi)生

安全實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁吸煙。注意用水、用電和防火正確使用化學(xué)試劑和儀器正確清洗器具

禁止在實(shí)驗(yàn)室吃東西及飲水實(shí)驗(yàn)廢棄物分類(lèi)處理，勿污染環(huán)境衛(wèi)生每次實(shí)驗(yàn)需留下4位同學(xué)值日，協(xié)助保持實(shí)驗(yàn)室清潔（班長(zhǎng)及生活委員安排）實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告及實(shí)驗(yàn)結(jié)果目的原理步驟結(jié)果及分析

學(xué)習(xí)委員（報(bào)告批改后返給同學(xué)修改，再收回留檔，統(tǒng)計(jì)分?jǐn)?shù)）實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌周次教學(xué)內(nèi)容、作業(yè)及考試安排周次教學(xué)內(nèi)容、作業(yè)及考試安排3實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則、工作環(huán)境要求、實(shí)驗(yàn)記錄、常用器皿材料和儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)2微生物營(yíng)養(yǎng)成分配制和消毒滅菌技術(shù)8實(shí)驗(yàn)7放線菌的形態(tài)觀察霉菌的形態(tài)觀察4實(shí)驗(yàn)3實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及人體表面微生物的檢查分離實(shí)驗(yàn)4顯微鏡的使用及細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色法9實(shí)驗(yàn)8酵母菌的形態(tài)觀察微生物大小的測(cè)定和計(jì)數(shù)5國(guó)慶放假10實(shí)驗(yàn)9水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)10濾膜法測(cè)定水中大腸菌群6實(shí)驗(yàn)3實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及人體表面微生物的檢查分離（結(jié)果觀察及描述）實(shí)驗(yàn)5革蘭氏染色法、細(xì)菌莢膜染色法11實(shí)驗(yàn)11環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響7實(shí)驗(yàn)6細(xì)菌芽孢染色法和鞭毛染色法12-14考試實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌分組及各組器皿清單每組器皿清單酒精燈

1個(gè)/人鑷子

1把/人培養(yǎng)皿

5套/組三角瓶（250ml）2套/組燒杯（250ml）

1個(gè)/組載波片

10片/組廢液缸

1個(gè)/組接種針/環(huán)

1把/組（或人）玻棒

2根/組試管

6個(gè)/組試管架

1個(gè)/組繩子

2段/組蒸餾水瓶帶滴管

1套/組2人一組（最后一組3人）（按學(xué)號(hào)）用后各自清理保管。損毀或丟失，找實(shí)驗(yàn)室管理老師登記賠償并補(bǔ)領(lǐng)實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌實(shí)驗(yàn)2微生物營(yíng)養(yǎng)成分配制和消毒滅菌技術(shù)實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌一、目的要求1、了解培養(yǎng)基制備原理，掌握培養(yǎng)基制備方法。2、掌握干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌的原理和方法。3、學(xué)會(huì)培養(yǎng)皿、瓶口的包扎。實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌（二）滅菌原理1干熱滅菌原理（蛋白質(zhì)凝固變性）一般繁殖體——80－100℃，1h芽孢——160－170℃，2h＜180℃實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌2濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌

在密閉的蒸鍋內(nèi)，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃，15min－30min，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢（蛋白凝固變性）。

優(yōu)點(diǎn)？實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌三、實(shí)驗(yàn)器材1、材料瓊脂粉、酵母膏（粉）、蛋白胨、NaCl等。2、設(shè)備天平（6臺(tái)）、稱(chēng)量紙、量筒、玻璃注射器（3-5把）、燒杯、玻璃棒、pH試紙、標(biāo)簽，紗布（8層紗布，包扎瓶口用，每組1份）、報(bào)紙、三角瓶、繩子、試管及試管塞、酒精燈、火柴、藥勺（4把）、高壓蒸汽滅菌鍋（1臺(tái)）、烘箱（1臺(tái)）、電熱板（6臺(tái)）等。實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌四、操作步驟（一）培養(yǎng)基的制備LB培養(yǎng)基(Luria-Bertanimedium)為例實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌

LB酵母粉5g蛋白胨10gNaCl5g瓊脂粉或瓊脂條12-15g蒸餾水1000mlpH7.2-7.8依上述配方配制150ml，請(qǐng)換算好相應(yīng)的質(zhì)量數(shù)。（稱(chēng)量紙，藥勺，天平，燒杯，量筒，三角瓶，試管）（試管4-5ml；剩余裝入三角瓶）倒平板（5個(gè)）擱置斜面（4個(gè)）干熱或濕熱實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌制備LB平板待培養(yǎng)基冷卻至45-60℃（不燙手）時(shí)，于酒精燈火焰無(wú)菌區(qū)均勻倒入培養(yǎng)皿中（每個(gè)約20ml），冷卻后凝固成固體膠狀平板（LB平板）。擱置斜面：適當(dāng)冷卻后便可將試管口端擱在玻璃棒或其他合適高度的器具上，斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管總長(zhǎng)的1/2為宜。實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌每人攜帶2個(gè)平板，自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，分離培養(yǎng)微生物。倒扣培養(yǎng)，盡可能密封。注意觀察，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果簡(jiǎn)單描述。（采集的樣品、生長(zhǎng)的狀況[時(shí)間，快慢]、種類(lèi)和數(shù)量是否可區(qū)分，各多少），交給學(xué)習(xí)委員，下次課分享。實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌（二）滅菌

干熱滅菌操作步驟：（1）用報(bào)紙條包好干燥的培養(yǎng)皿。（2）將待滅菌物品均勻放入烘箱內(nèi)。（3）開(kāi)啟電源，設(shè)定溫度和時(shí)間（160－170℃，2小時(shí)）。（4）切斷電源，待溫度降至70℃以下時(shí)，打開(kāi)箱門(mén)，取出滅菌物品。實(shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌濕熱滅菌操作步驟：1、滅菌物準(zhǔn)備2、高壓蒸汽滅菌（1）加水（2）裝鍋（3）接通熱源，設(shè)置參數(shù)（121℃，15min－30min）（4）升壓、升溫（5）切斷電源（6）取出滅菌物（7）待培養(yǎng)基冷卻后置于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h，若無(wú)菌生長(zhǎng)則放入冰箱或陰涼處保存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)1微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)2培養(yǎng)基配制及滅菌五思考題1、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)具備哪些條件？2、為什么培養(yǎng)基配制好后必須立即滅菌？采用那種滅菌方式？3、為什么高壓蒸汽滅菌時(shí)要先將冷空氣排盡？4、還有哪種滅菌方式屬于