2025年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.限制酶不能切割煙草花葉病毒的核酸B.大腸桿菌體內(nèi)不含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等復(fù)雜細(xì)胞器，故利用大腸桿菌生產(chǎn)胰島素，產(chǎn)品必須在體外進(jìn)行加工C.原核細(xì)胞和酵母菌中都存在質(zhì)粒D.運(yùn)載體的化學(xué)本質(zhì)與載體蛋白相同2、有科學(xué)家培養(yǎng)鼠胚胎干細(xì)胞分化出了心肌細(xì)胞，一段時(shí)間后發(fā)育成了直徑約1mm的心臟類器官。這一研究成果說(shuō)明胚胎干細(xì)胞（）A.分化程度高于心肌細(xì)胞B.具有無(wú)限增殖的能力C.經(jīng)誘導(dǎo)可發(fā)生定向分化D.能形成有功能的器官3、下圖是“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中幾個(gè)重要操作的示意圖；下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.圖①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)可溶于酒精B.圖①和圖③都需要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌，便于DNA的析出并保持結(jié)構(gòu)完整C.豬血不宜選作“DNA的粗提取和鑒定”的實(shí)驗(yàn)材料D.若圖④操作后DNA充分溶解，則NaCl溶液的濃度約為2mol/L4、圖表示果酒和果醋生產(chǎn)過(guò)程中的物質(zhì)變化情況，相關(guān)敘述正確的是（）

A.果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋B.過(guò)程①②在酵母菌細(xì)胞中發(fā)生的場(chǎng)所相同C.過(guò)程⑤需要氧氣而過(guò)程④不需要氧氣D.進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵的微生物均為真核生物5、人的血清白蛋白在臨床上需求量很大?？茖W(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因山羊，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到尿液中。下列敘述正確的是（）A.可從人體成熟的紅細(xì)胞中獲取血清白蛋白基因B.應(yīng)選用膀胱上皮細(xì)胞作為目的基因的受體細(xì)胞C.人的血清白蛋白基因只存在于轉(zhuǎn)基因山羊的膀胱上皮細(xì)胞中D.轉(zhuǎn)基因山羊?qū)⑷说难灏椎鞍追置诘侥蛞褐杏欣谠摰鞍椎氖占?、下圖是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖；下列相關(guān)敘述，正確的是（）

A.1過(guò)程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為抗原和T淋巴細(xì)胞B.3過(guò)程需要使用纖維素酶和聚乙二醇等物質(zhì)促進(jìn)細(xì)胞融合C.4過(guò)程是為了篩選既能產(chǎn)生單一抗體，又能無(wú)限增殖的細(xì)胞D.D物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或糖類，純度高、特異性強(qiáng)7、下列關(guān)于生物武器的敘述中，不正確的是（）A.生物武器是造價(jià)昂貴，卻具有大規(guī)模殺傷性的武器B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn)，使得利用這一技術(shù)制造各種新型致病菌成為可能C.生物武器可以直接或者通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布D.生物武器一旦使用，將對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模的殺傷后果8、下圖是山楂酒及山楂醋的制作流程圖，下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）

A.過(guò)程④、⑤利用的微生物的同化類型均為異養(yǎng)型B.在糖源不足時(shí)，醋酸菌可通過(guò)過(guò)程③獲得山楂醋C.可通過(guò)嗅味和品嘗初步鑒定過(guò)程④是否有酒精產(chǎn)生D.山楂酒和山楂醋制作過(guò)程中，發(fā)酵液pH均會(huì)降低9、GUS基因作為一種報(bào)告基因，編碼β-葡萄糖苷酸酶，該酶可催化特定底物水解，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，借此用來(lái)觀察轉(zhuǎn)基因植物中外源基因的表達(dá)情況，鑒定轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.GUS基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，由多個(gè)核糖核苷酸構(gòu)成B.GUS基因編碼β-葡萄糖苷酸酶合成的過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯C.應(yīng)將GUS基因和外源基因融合后導(dǎo)入受體細(xì)胞以觀察表達(dá)情況D.藍(lán)色的深淺可表示外源基因表達(dá)量的多少評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)10、如圖為體細(xì)胞核移植過(guò)程流程圖；下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核B.核移植的供體細(xì)胞一般都選傳代10~50代左右的細(xì)胞C.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中使用的去核方法只有顯微操作法D.上述過(guò)程能夠體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性11、運(yùn)用細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時(shí)，必要的操作是（）A.對(duì)小動(dòng)物注射特定抗原B.融合并篩選雜交瘤細(xì)胞C.原代培養(yǎng)效應(yīng)B細(xì)胞D.將胰蛋白酶注入小動(dòng)物腹腔12、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，正確的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過(guò)程中可能產(chǎn)生二次污染B.種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，對(duì)環(huán)境沒有任何負(fù)面影響C.如果轉(zhuǎn)基因花粉中有毒蛋白或過(guò)敏蛋白，可能會(huì)通過(guò)食物鏈傳遞到人體內(nèi)D.轉(zhuǎn)基因生物所帶來(lái)的安全性問(wèn)題是可以解決的13、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周這個(gè)時(shí)間段內(nèi)分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳頭中可能含有的細(xì)菌，加上擠乳過(guò)程中產(chǎn)生的少量污染，常乳中會(huì)有一定量的細(xì)菌存在。研究小組要檢測(cè)一份常乳樣品中細(xì)菌的總量（不考慮菌種），檢測(cè)流程如下圖，每個(gè)平板上接種菌液量為0.1mL。下列說(shuō)法正確的是（）

A.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，防止雜菌污染B.上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營(yíng)養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長(zhǎng)C.也可以通過(guò)連續(xù)劃線的方法接種，通過(guò)菌落數(shù)計(jì)算樣品中的細(xì)菌總數(shù)D.若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為5.9×10714、北方白犀牛目前僅剩兩頭雌性個(gè)體，科研人員嘗試通過(guò)現(xiàn)代生物技術(shù)，利用實(shí)驗(yàn)室冷凍保藏的少量北方白犀牛精子拯救該物種。下列說(shuō)法正確的是（）A.科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術(shù)繁育北方白犀牛的試管動(dòng)物B.若利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出北方白犀牛的克隆動(dòng)物，該動(dòng)物一定是雌性C.為了繁育更多子代，可以選擇人工繁育技術(shù)得到的原腸胚期的胚胎進(jìn)行分割D.進(jìn)行胚胎移植時(shí)，經(jīng)同期發(fā)情處理過(guò)的雌性北方白犀牛不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)15、將蘇云金桿菌的Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如圖所示(KanR為卡那霉素抗性基因)。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來(lái)篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌B.過(guò)程①必須用同種限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒C.過(guò)程③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合培養(yǎng)能使T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞D.過(guò)程④和過(guò)程⑤的培養(yǎng)基中添加的激素的濃度不同16、熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針；與染色體上對(duì)應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。下列說(shuō)法正確的是（）

A.由圖1可知，DNA探針的本質(zhì)是熒光標(biāo)記的DNA片段，其基本單位是脫氧核苷酸B.由圖2可知，高溫可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈C.圖2中兩條姐妹染色單體中最多可有2條熒光標(biāo)記的DNA片段D.若C分別代表不同來(lái)源的一個(gè)染色體組，已知AA和BB中各有一對(duì)同源染色體可被熒光探針標(biāo)記。若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1有絲分裂中期的細(xì)胞中可觀察到6個(gè)熒光點(diǎn)評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)17、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________18、1.基因檢測(cè)引發(fā)的倫理問(wèn)題。

（1）基因身份證：基因身份證指把個(gè)人的_____和_____檢測(cè)出來(lái)；記錄在磁卡上，而做成的個(gè)人基因身份證。

（2）基因檢測(cè)引發(fā)的爭(zhēng)論①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。項(xiàng)目。

反對(duì)。

支持。

技術(shù)方面。

目前人類對(duì)①及基因間的相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識(shí)；通過(guò)基因檢測(cè)達(dá)到②的目的是很困難的；基因檢測(cè)結(jié)果會(huì)給受檢者帶來(lái)巨大的③。

通過(guò)基因檢測(cè)可以對(duì)遺傳性疾病及早采取④；適時(shí)進(jìn)行治療，達(dá)到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因資訊的泄露造成⑤；如個(gè)人婚姻困難；人際關(guān)系疏遠(yuǎn)，更明顯的是造成一支遺傳性失業(yè)大軍。

對(duì)于基因歧視現(xiàn)象；可以通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播；⑥教育和立法得以解決。

2.試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒的比較①_____②_____③_____④_____

。項(xiàng)目。

設(shè)計(jì)試管嬰兒。

試管嬰兒。

技術(shù)手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）進(jìn)行遺傳學(xué)診斷這一環(huán)節(jié)。

②（填“需要”或‘不需要”）進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

實(shí)踐應(yīng)用。

用于白血??；貧血病等遺傳性疾病的預(yù)測(cè)。

解決不孕不育問(wèn)題。

聯(lián)系。

二者都是③受精；體外進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，再進(jìn)行胚胎移植，從生殖方式上都為④

19、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為______________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。20、胚胎工程。

胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術(shù)和______技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。21、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共21分)22、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯(cuò)誤23、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤24、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)25、單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高，用于診療疾病具有準(zhǔn)確；高效等特點(diǎn)。下圖表示單克隆抗體制備過(guò)程。

回答下列問(wèn)題：

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則A是_________________細(xì)胞，誘導(dǎo)d過(guò)程常用的因素是_________________（答出一個(gè)即可）。

（2）用于篩選細(xì)胞D的培養(yǎng)基必需滿足兩個(gè)條件：一是_________________細(xì)胞都會(huì)死亡；二是保證_________________細(xì)胞能生長(zhǎng)。

（3）使用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測(cè)試劑，可用_________________（選填數(shù)字標(biāo)號(hào)：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細(xì)胞。26、炭疽；是一種由炭疽芽孢桿菌引起的人獸共患性傳染病，也是我國(guó)規(guī)定的乙類傳染病?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問(wèn)題：

(1)人通常是通過(guò)接觸患炭疽的動(dòng)物或動(dòng)物制品被感染，皮膚炭疽病在人類炭疽病中最為常見，這類患者的皮膚滲出物中含有炭疽芽孢桿菌。皮膚炭疽病疑似患者就醫(yī)時(shí)，醫(yī)生先要取患者的皮膚滲出物稀釋后涂布到固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)獲得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培養(yǎng)基上的菌落進(jìn)行如圖所示實(shí)驗(yàn)（注：實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽芽孢桿菌）。

①該實(shí)驗(yàn)的目的是_____。

②對(duì)照組試管中應(yīng)加入_____，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中為避免雜菌污染進(jìn)行的操作包括_____（至少寫出兩點(diǎn)）。

③實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_____時(shí)；表明該疑似患者被炭疽芽孢桿菌感染。

④實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需將錐形瓶固定在搖床上，在35℃下振蕩培養(yǎng)24h，直至液體培養(yǎng)基變渾濁。振蕩培養(yǎng)說(shuō)明炭疽芽孢桿菌的代謝類型是_____，振蕩培養(yǎng)的目的是_____。液體培養(yǎng)基變渾濁的原因是_____。

(3)對(duì)炭疽芽孢桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，選用10-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度的菌液，各取0．2mL涂布，每個(gè)稀釋度作三次重復(fù)，經(jīng)24h恒溫培養(yǎng)后結(jié)果如表。稀釋度10-410-510-6平板編號(hào)A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落數(shù)31529830245535112911

由表可知，最適合計(jì)數(shù)的稀釋度為_____，原因是_____。27、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過(guò)程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對(duì)引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)過(guò)程①中需要的酶有____________，過(guò)程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時(shí)，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

(3)過(guò)程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過(guò)____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測(cè)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)要操作過(guò)程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長(zhǎng)情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號(hào)備用PCR驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進(jìn)行PCR驗(yàn)證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照油脂含量測(cè)定利用索氏抽提法分別測(cè)定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較PCR驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共30分)28、雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合；目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。下圖1是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。圖2是某雙特異性抗體作用圖。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是______________；與植物體細(xì)胞雜交相比，圖1中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是______________。

（2）過(guò)程②選用的骨髓瘤細(xì)胞沒有接觸抑制的現(xiàn)象，主要原因是____________，該瘤細(xì)胞______________（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除了提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需向培養(yǎng)基中添加_________，并將其置于______________的氣體環(huán)境的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（3）為選出能產(chǎn)生專一抗體的細(xì)胞，將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7-10個(gè)細(xì)胞/mL，取0．1ml細(xì)胞稀釋液滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中有____個(gè)細(xì)胞，然后篩選出專一抗體檢測(cè)為_____（選填“陽(yáng)性”或“陰性”）的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有的特點(diǎn)為____________________________。

（4）圖1過(guò)程⑤注射后，方框內(nèi)需要經(jīng)過(guò)__次篩選；才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。

（5）圖2為雙特異性抗體分子，下列敘述不正確的有___。

A．該雙特異性抗體在核糖體當(dāng)中合成。

B．雙特異性抗體可以在人體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用。

C．該特異性抗體能與人體內(nèi)各類腫瘤細(xì)胞結(jié)合。

D．雙特異性抗體能與藥物和腫瘤細(xì)胞結(jié)合；因而不具有特異性。

（6）與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是_____________________。29、下圖是將乙肝病毒表面主蛋白基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程示意圖。巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營(yíng)養(yǎng)型酵母；能將甲醇作為其唯一碳源，此時(shí)AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達(dá)，圖中pPIC9K質(zhì)粒上5'AOX1和3'AOX1（TT）分別是基因AOX1的啟動(dòng)子和終止子。該酵母菌體內(nèi)無(wú)天然質(zhì)粒，科學(xué)家改造出了圖1所示質(zhì)粒用作載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合于染色體中以實(shí)現(xiàn)表達(dá)。請(qǐng)回答:

(1)用PCR技術(shù)擴(kuò)增HBsAg基因時(shí)原料是_______________，Taq酶需要_______________激活。

(2)為實(shí)現(xiàn)HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重組，設(shè)計(jì)引物時(shí)需要在引物的_______________端添加相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列，則在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置添加的堿基序列分別是_______________、_______________，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是_______________。

(3)酶切獲取HBsAg基因后，需用_______________（填“EcoliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上，形成重組質(zhì)粒，構(gòu)建重組質(zhì)粒的目的是______________。

(4)若用限制酶SnaBI、BglII聯(lián)合酶切pPIC9K質(zhì)粒，獲得的DNA片段的長(zhǎng)度分別是38kb、27kb、67kb；用限制酶BglII、AvrII聯(lián)合酶切pPIC9K質(zhì)粒，得到的DNA片段的長(zhǎng)度分別是38kb、40kb、54kb；已知HBsAg基因長(zhǎng)度是55kb。步驟3中應(yīng)選用限制酶_______________來(lái)切割重組質(zhì)粒以獲得重組DNA，切割后的重組DNA的長(zhǎng)度是_______________。

(5)轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，需要向其中加入甲醇，其目的是_______________。30、馬鈴薯是世界上最重要的糧食作物之一；與大多數(shù)糧食作物不同，馬鈴薯主要以塊莖繁殖。

(1)野生馬鈴薯為二倍體，而商業(yè)化的馬鈴薯栽培品種為四倍體，即體細(xì)胞中有4個(gè)______。塊莖繁殖易攜帶病原體；且四倍體的染色體高度雜合，使引入新性狀的育種工作復(fù)雜化。因此，利用二倍體雜交是馬鈴普育種的發(fā)展趨勢(shì)。

(2)大多數(shù)二倍體馬鈴薯自交不親和，其受1號(hào)染色體上復(fù)等位基因（S1，S2，S3）控制。如下圖所示；該基因在雌蕊的花柱中編碼S酶，能抑制花粉管的伸長(zhǎng)，導(dǎo)致精子不能與卵細(xì)胞結(jié)合；在雄蕊的花粉中則編碼F蛋白，能識(shí)別降解進(jìn)入花粉管的S酶，但對(duì)相同基因編碼的S酶無(wú)效。

圖中的兩個(gè)親本雜交，后代的基因型及比例是______。

(3)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一種自交親和的二倍體馬鈴薯RH，研究發(fā)現(xiàn)其自交親和由12號(hào)染色體上的A基因決定，A蛋白能識(shí)別絕大多數(shù)類型的S酶。將RH（父本，AaS1S1）與自交不親和的二倍體PI（母本，aaS2S2）雜交；流程如圖。

①F1中SC自交，F(xiàn)2中:AA：Aa=1:1，無(wú)aa類型的個(gè)體，理由是基因型為______的精子花粉管不能伸長(zhǎng)；無(wú)法完成受精。

②寫出F1中SC自交的遺傳圖解_________。

(4)S酶是雌蕊阻斷花粉管萌發(fā)的“鎖”，RH中的A蛋白則表現(xiàn)出“萬(wàn)能鑰匙”的作用，從而打破自交不親和性，對(duì)培育馬鈴薯自交系有重要作用。請(qǐng)寫出利用RH培育出自交親和的PI的流程___________。（用文字或圖示作答均可）參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

1.基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

2.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：

（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)(農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法)；其次還有基因槍法和花粉管通道技術(shù)(花粉管通道法)。

（2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)，此方法的受體細(xì)胞多為受精卵；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：Ca2+處理法。

【詳解】

A；限制酶可以識(shí)別并切割特定的脫氧核苷酸序列；而煙草花葉病毒的核酸為RNA，因此限制酶不能切割煙草花葉病毒的核酸，A正確；

B；大腸桿菌只含有核糖體一種細(xì)胞器；因此合成的多肽鏈必須在體外進(jìn)行加工，才能形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的胰島素，B正確；

C；質(zhì)粒一般存在于原核細(xì)胞中；但真核細(xì)胞中也有，比如酵母菌，C正確；

D；運(yùn)載體一般指基因工程中攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體；例如質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等；載體蛋白的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，二者有所區(qū)別，D錯(cuò)誤。

故選D。2、C【分析】【分析】

1；干細(xì)胞的概念：動(dòng)物和人體內(nèi)保留著少量具有分裂和分化能力的細(xì)胞。

2；干細(xì)胞的分類：

（1）全能干細(xì)胞：具有形成完整個(gè)體的分化潛能。

（2）多能干細(xì)胞：具有分化出多種細(xì)胞組織的潛能。

（3）專能干細(xì)胞：只能向一種或兩種密切相關(guān)的細(xì)胞類型分化。如神經(jīng)干細(xì)胞可分化為各類神經(jīng)細(xì)胞；造血干細(xì)胞可分化為紅細(xì)胞；白細(xì)胞等各類血細(xì)胞。

【詳解】

A；由題干“鼠的胚胎干細(xì)胞分化出了心肌細(xì)胞”；說(shuō)明胚胎干細(xì)胞分化程度低于心肌細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞具有一定的增殖的能力；無(wú)限增殖是癌細(xì)胞的主要特征，B錯(cuò)誤；

C；由題干信息可知；胚胎干細(xì)胞分化出的心肌細(xì)胞一段時(shí)間后發(fā)育成了直徑約1mm的心臟類器官，說(shuō)明胚胎干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)可發(fā)生定向分化，C正確；

D；由題干信息可知；胚胎干細(xì)胞分化出的心肌細(xì)胞一段時(shí)間后發(fā)育成了直徑約1mm的心臟類器官，但不能說(shuō)明形成的器官是有功能的器官，D錯(cuò)誤。

故選C。3、B【分析】【分析】

實(shí)驗(yàn)原理：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。

（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取。

凡是含有DNA的生物材料都可以考慮；但是使用DNA含量相對(duì)較高＿＿＿＿＿＿＿＿的生物組織，成功的可能性更大。

（2）破碎細(xì)胞；獲取含DNA的濾液。

破碎動(dòng)物細(xì)胞：如在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水；同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可。破碎植物細(xì)胞（如洋蔥），需在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液。

①加入蒸餾水作用：蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來(lái)說(shuō)是一種低滲液體；使血細(xì)胞吸水脹裂，再加上攪拌的機(jī)械作用，加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNA。

②加入洗滌劑的作用是：洗滌劑是一些離子去污劑；能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA的釋放；加入食鹽的作用是：溶解DNA。

③如果研磨不充分；會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物；用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精；95%的冷酒精凝集效果最佳，所以圖①的原理是DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)可溶于酒精，以便除去溶于酒精的雜質(zhì)，提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA，A正確；

B；圖①玻璃棒逆時(shí)針方向攪拌；目的是提取出含雜質(zhì)較少的DNA，圖③玻璃棒順時(shí)針方向攪拌，目的是為了加速細(xì)胞破裂，使DNA從細(xì)胞核中釋放出來(lái)，B錯(cuò)誤；

C；哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞中不含DNA；豬血中DNA含量低，不適合選作“DNA的粗提取和鑒定”的實(shí)驗(yàn)材料，C正確；

D；DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同；能溶于2mol/L的氯化鈉溶液，D正確。

故選B。4、B【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果酒需要的溫度在18-25℃，果醋制備的溫度是30-35℃。

據(jù)圖分析；過(guò)程①是細(xì)胞呼吸的第一階段，過(guò)程②是無(wú)氧呼吸的第二階段，過(guò)程③是有氧呼吸的第二；三階段。醋酸菌好氧性細(xì)菌，過(guò)程④當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將酒精氧化成醋酸；過(guò)程⑤當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。

【詳解】

A；由分析可知；果酒發(fā)酵所需的最適溫度低于果醋，A錯(cuò)誤;

B；過(guò)程①②在酵母菌細(xì)胞中發(fā)生的場(chǎng)所相同；都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，B正確;

C；過(guò)程⑤和過(guò)程④都需要氧氣；C錯(cuò)誤;

D；參與果酒制作的微生物是酵母菌；為真核生物，進(jìn)行果醋發(fā)酵的微生物是醋酸菌，為原核生物，D錯(cuò)誤。

故選B。5、D【分析】【分析】

生物反應(yīng)器是利用生物體所具有的生物功能；在體外或體內(nèi)通過(guò)生化反應(yīng)或生物自身的代謝獲得目標(biāo)產(chǎn)物的裝置系統(tǒng)；細(xì)胞、組織器官等等?？茖W(xué)家利用轉(zhuǎn)基因山羊，生產(chǎn)血清蛋白，既可以大量生產(chǎn)，又方便了蛋白的提取。

【詳解】

A；人體成熟的紅細(xì)胞細(xì)胞核退化消失；細(xì)胞中無(wú)DNA，無(wú)基因，A錯(cuò)誤；

B；由于膀胱上皮細(xì)胞沒有全能性；應(yīng)選用受精卵作為目的基因的受體細(xì)胞，以培育得到轉(zhuǎn)基因羊，B錯(cuò)誤；

C；由于體細(xì)胞都是有絲分裂而來(lái)；遺傳物質(zhì)沒有改變，因此人體所有體細(xì)胞均含有血清白蛋白基因（紅細(xì)胞在成熟前也有），C錯(cuò)誤；

D；轉(zhuǎn)基因山羊?qū)⑷说难灏椎鞍追置诘侥蛞褐?；只要收集尿液即可收集該蛋白，D正確。

故選D。6、C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；1過(guò)程注射的物質(zhì)是抗原；用于激發(fā)機(jī)體的特異性免疫過(guò)程，A細(xì)胞是經(jīng)免疫后產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；3過(guò)程是促進(jìn)細(xì)胞融合；該過(guò)程中可以使用化學(xué)誘導(dǎo)試劑聚乙二醇，但不需要纖維素酶，B錯(cuò)誤；

C；4過(guò)程是在多孔培養(yǎng)板上進(jìn)行篩選；目的是為了篩選既能產(chǎn)生單一抗體，又能無(wú)限增殖的細(xì)胞，C正確；

D；D物質(zhì)是單克隆抗體；其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，具有純度高、特異性強(qiáng)，可大量制備等優(yōu)點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選C。7、A【分析】【分析】

生物武器包括致病菌類；病毒類和生化毒劑類等；例如，天花病毒、波特淋菌、霍亂弧菌和炭疽桿菌都可以用來(lái)制造生物武器。生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或者通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能大量損害植物。

【詳解】

A；生物武器造價(jià)低；具有大規(guī)模殺傷性，A錯(cuò)誤；

B；轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn)；使得利用這一技術(shù)制造各種新型致病菌成為可能，這些人類從來(lái)沒有接觸過(guò)的致病菌，可能讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無(wú)藥可醫(yī)，這樣施放者便可以造成敵方公眾的極度恐慌，致使受害國(guó)一切活動(dòng)癱瘓，輕而易舉地達(dá)到不戰(zhàn)而勝的目的，B正確；

C；生物武器可以直接或者通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布；經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，C正確；

D；生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣；一旦使用，將對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模的殺傷后果，D正確。

故選A。8、B【分析】【分析】

果酒制備的菌種是酵母菌；果酒制作的原理是酵母菌在無(wú)氧的條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當(dāng)氧氣；糖原都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

【詳解】

A；過(guò)程④、⑤利用的微生物分別為酵母菌和醋酸菌；同化類型均為異養(yǎng)型，A正確；

B；在糖源和氧氣都充足時(shí)；醋酸菌可通過(guò)過(guò)程③獲得山楂醋，在糖源不足時(shí)，醋酸菌可通過(guò)過(guò)程⑤獲得山楂醋，B錯(cuò)誤；

C；可通過(guò)嗅味和品嘗初步鑒定過(guò)程④是否有酒精產(chǎn)生；C正確；

D；果酒制作過(guò)程會(huì)產(chǎn)生二氧化碳；形成碳酸，使發(fā)酵液的pH降低，果醋發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)生醋酸，使發(fā)酵液的pH降低，D正確。

故選B。9、A【分析】【分析】

基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程；其中轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過(guò)程，該過(guò)程主要在細(xì)胞核中進(jìn)行，需要解旋酶和RNA聚合酶參與；翻譯是以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，該過(guò)程發(fā)生在核糖體上，需要以氨基酸為原料，還需要酶；能量和tRNA等。

【詳解】

A；GUS基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段；DNA的基本單位是脫氧核苷酸，A錯(cuò)誤；

B；β-葡萄糖苷酸酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)；GUS基因編碼β-葡萄糖苷酸酶合成的過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄（以基因的一條鏈為模板合成RNA）和翻譯（以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)），B正確；

C；GUS基因作為一種報(bào)告基因；能夠在適宜條件下產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故GUS基因和外源基因融合后導(dǎo)入受體細(xì)胞，可通過(guò)藍(lán)色的產(chǎn)生情況觀察表達(dá)情況，C正確；

D；GUS基因可編碼β-葡萄糖苷酸酶；β-葡萄糖苷酸酶可催化特定底物水解，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，將GUS基因和外源基因融合后導(dǎo)入受體細(xì)胞，理論上藍(lán)色的深淺可表示外源基因表達(dá)量的多少，D正確。

故選A。二、多選題(共7題，共14分)10、B:C【分析】【分析】

分析題圖：該圖為動(dòng)物體細(xì)胞核移植過(guò)程和胚胎移植過(guò)程。動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。

【詳解】

A；生物的性狀主要受核基因控制；去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核，A正確；

B；核移植時(shí)做供核一方的一般是傳代10代以內(nèi)細(xì)胞；原因是細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法；也可采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法，C錯(cuò)誤；

D；核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物能夠體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；D正確。

故選BC。11、A:B【分析】【分析】

在制備單克隆抗體的過(guò)程中；需要先對(duì)小鼠進(jìn)行特定抗原免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞；在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)，除了異種細(xì)胞融合外，還有同種細(xì)胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞；效應(yīng)B細(xì)胞不能分裂；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞時(shí)，可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體。

【詳解】

A；在制備單克隆抗體的過(guò)程中；需要先對(duì)小鼠進(jìn)行特定抗原免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，A正確；

B；在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)；除了異種細(xì)胞融合外，還有同種細(xì)胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；效應(yīng)B細(xì)胞不能分裂；C錯(cuò)誤；

D；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞時(shí)；可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體，而不需要將胰蛋白酶注入小動(dòng)物腹腔，D錯(cuò)誤。

故選AB。12、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因植物可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅理由：①轉(zhuǎn)基因植物擴(kuò)散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競(jìng)爭(zhēng)能力強(qiáng)，可能成為“入侵的外來(lái)物種”，③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細(xì)菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級(jí)雜草”。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過(guò)程中可能產(chǎn)生二次污染；造成環(huán)境安全問(wèn)題，A正確；

B；種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量；保護(hù)環(huán)境，但轉(zhuǎn)基因植物可能會(huì)與野生植物雜交，造成基因污染，可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅，B錯(cuò)誤；

C；轉(zhuǎn)基因花粉中若有毒蛋白或過(guò)敏蛋白；可能會(huì)通過(guò)食物鏈傳遞到人體內(nèi)，轉(zhuǎn)基因作物可通過(guò)花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫(kù)，C正確；

D；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)；應(yīng)趨利避害，可以避免轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問(wèn)題，轉(zhuǎn)基因生物所帶來(lái)的環(huán)境安全問(wèn)題在今后有可能得到解決，D正確。

故選ACD。13、A:B:D【分析】【分析】

分析題文描述和題圖：圖示為采用稀釋涂布平板法分離常乳樣品中細(xì)菌總量的流程圖。首先將常乳樣品進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)。為了防止雜菌污染；稀釋涂布平板的所有操作都應(yīng)控制無(wú)菌條件。

【詳解】

A；為了防止雜菌污染；倒平板時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，A正確；

B；為了檢測(cè)一份常乳樣品中細(xì)菌的總量；圖示對(duì)常乳樣品進(jìn)行了一系列梯度稀釋，由此可見，上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營(yíng)養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長(zhǎng)，B正確；

C；通過(guò)連續(xù)劃線的方法接種；不易分離出單個(gè)菌落，不能用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D、取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)，若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為59÷0.1×105＝5.9×107；D正確。

故選ABD。14、A:B:D【分析】【分析】

胚胎移植：（1）概念：是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的；生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱為“受體”；

（2）胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；因?yàn)橛袃深^雌性個(gè)體和少量北方白犀牛精子；所以科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術(shù)繁育北方白犀牛的試管動(dòng)物，拯救北方白犀牛物種，A正確；

B；目前只有雌性個(gè)體；即體細(xì)胞只有雌性動(dòng)物的體細(xì)胞，若利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出北方白犀牛的克隆動(dòng)物，該動(dòng)物一定是雌性，B正確；

C；為了繁育更多子代；可以選擇人工繁育技術(shù)得到的桑椹胚或囊胚時(shí)期的胚胎進(jìn)行分割，C錯(cuò)誤；

D；在進(jìn)行胚胎移植時(shí)；要用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，為胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，經(jīng)同期發(fā)情處理過(guò)的雌性北方白犀牛不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選ABD。15、A:C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析，過(guò)程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，需用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體（質(zhì)粒）連接形成重組Ti質(zhì)粒。過(guò)程②表示將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞（農(nóng)桿菌），需要用Ca2+處理；使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。農(nóng)桿菌侵染棉花后，將自身的Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細(xì)胞的DNA上，然后利用棉花細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，獲得抗蟲棉。

【詳解】

A、KanR為卡那霉素抗性基因；成功導(dǎo)入質(zhì)粒的農(nóng)桿菌具有卡那霉素抗性而普通農(nóng)桿菌沒有，因此可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來(lái)篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，A正確；

B；為使目的基因DNA片段和質(zhì)粒DNA片段在切口處的黏性末端匹配；需要選擇能切出相同黏性末端的限制酶來(lái)進(jìn)行切割，可以是同種限制酶，也可以是不同限制酶，但是必須要能產(chǎn)生相同黏性末端，B錯(cuò)誤；

C；棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后；農(nóng)桿菌在侵染棉花細(xì)胞時(shí)，可將自身的Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細(xì)胞的DNA上，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素濃度高于細(xì)胞分裂素，可以誘導(dǎo)根的分化；若是細(xì)胞分裂素高于生長(zhǎng)素濃度，則誘導(dǎo)芽的分化，從圖上可知，④過(guò)程分化出芽，⑤過(guò)程分化形成根，繼而形成試管苗，因此④和⑤中的培養(yǎng)基用到的激素的濃度不同，D正確。

故選ACD。16、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針；原理是DNA分子雜交。

2；DNA分子是一個(gè)獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)；是由兩條平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對(duì)（A-T；C-G）通過(guò)氫鍵連接。

3；目的基因的檢測(cè)與鑒定：

分子水平上的檢測(cè)：

①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個(gè)體水平上的鑒定：

抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；由圖1可知；DNA探針是用熒光分子標(biāo)記的DNA分子，DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸，因此熒光標(biāo)記的DNA探針的基本單位是脫氧核糖核苷酸，A正確；

B；由圖2可知；高溫（煮沸）可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈，B正確；

C；圖中兩條姐妹染色單體中含有2個(gè)DNA分子共有4條鏈；所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段，C錯(cuò)誤；

D、由于AA和BB中各有一對(duì)同源染色體可被熒光探針標(biāo)記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1（AABC）含有3個(gè)熒光點(diǎn)；經(jīng)間期復(fù)制加倍，有絲分裂中期的細(xì)胞中可觀察到6個(gè)熒光點(diǎn)，D正確。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)17、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種18、略

【分析】【分析】

1.基因檢測(cè)可以把人體內(nèi)的致病基因和易感基因檢測(cè)出來(lái)；通過(guò)采取一定的預(yù)防措施預(yù)防遺傳病的發(fā)生，但同時(shí)可能會(huì)帶來(lái)基因歧視等倫理道德方面的問(wèn)題。

2.設(shè)計(jì)試管嬰兒不同于試管嬰兒；試管嬰兒是為了解決不孕不育的問(wèn)題，而設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了解決器官移植方面的醫(yī)療問(wèn)題。

【詳解】

1.（1）基因身份證是指把每個(gè)人的致病基因和易感基因都檢測(cè)出來(lái)；并記錄在磁卡上，這樣到醫(yī)院看病時(shí)，只要帶上這種身份證，醫(yī)生就可以“對(duì)證”治療。

（2）反對(duì)基因檢測(cè)的人認(rèn)為：目前人類對(duì)基因結(jié)構(gòu)及基因間相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識(shí)；要想通過(guò)基因檢測(cè)達(dá)到預(yù)防疾病的目的是困難的；況且人類的多基因病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和生活習(xí)慣有關(guān)，有某種致病基因的人不見得就會(huì)患病。但是，基因檢測(cè)結(jié)果本身就已經(jīng)足以給受檢者帶來(lái)巨大的心理壓力。個(gè)人基因資訊的泄露所造成的基因歧視，勢(shì)必造成奇特的失業(yè)大軍，即遺傳性失業(yè)大軍。個(gè)人基因資訊被暴露之后，還會(huì)造成個(gè)人婚姻困難；人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果。支持基因檢測(cè)的人認(rèn)為：通過(guò)基因檢測(cè)可以對(duì)遺傳性疾病及早采取預(yù)防措施，適時(shí)進(jìn)行治療，達(dá)到挽救患者生命的目的。對(duì)于基因歧視現(xiàn)象，可以通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法得以解決。

2.設(shè)計(jì)試管嬰兒需要因而具有特定的性別或遺傳性狀；因此胚胎移植前需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷這一環(huán)節(jié)，而試管嬰兒是為了解決不孕不育問(wèn)題，不需要考慮嬰兒的性別等問(wèn)題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。二者的共同點(diǎn)是：兩者都是體外受精，并進(jìn)行體外早期胚胎培養(yǎng)，都要經(jīng)過(guò)胚胎移植，都是有性生殖。

【點(diǎn)睛】

1.基因與疾病的關(guān)系：具有致病基因的個(gè)體不一定患遺傳?。灰?yàn)樯锏男誀钸€受到環(huán)境因素的影響；沒有致病基因也可能患病，因?yàn)榛虮磉_(dá)的蛋白質(zhì)，在加工或修飾過(guò)程中出現(xiàn)錯(cuò)誤，也會(huì)出現(xiàn)癥狀。

2.明確設(shè)計(jì)試管嬰兒和試管嬰兒目的的不同是解答本題的關(guān)鍵之一?！窘馕觥恐虏』蛞赘谢蚧蚪Y(jié)構(gòu)預(yù)防疾病心理壓力預(yù)防措施基因歧視倫理道德需要不需要體外有性生殖19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色220、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)性別控制21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共3題，共21分)22、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯(cuò)誤。23、A【分析】【詳解】

雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過(guò)程不是獲得能量的過(guò)程，是獲得受精能力的過(guò)程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。故該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)25、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：

（1）原理：細(xì)胞增殖。

（2）培養(yǎng)基性質(zhì)：液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無(wú)菌環(huán)境。

（3）需要使用動(dòng)物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無(wú)菌條件下進(jìn)行。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（6）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無(wú)限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖。

（4）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

【詳解】

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則此過(guò)程可以為單克隆抗體的制備過(guò)程。故A是已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段（誘導(dǎo)d過(guò)程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

（2）一般來(lái)說(shuō)；誘導(dǎo)A細(xì)胞和B細(xì)胞融合，形成C細(xì)胞后，必須利用選擇培養(yǎng)基來(lái)篩選出目的細(xì)胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞都會(huì)死亡，而雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞）能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：一是液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無(wú)菌環(huán)境。二是氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細(xì)菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經(jīng)人工培養(yǎng)，再用物理或化學(xué)方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，對(duì)某些現(xiàn)實(shí)生活中的生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論?！窘馕觥拷?jīng)過(guò)（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細(xì)胞（或漿細(xì)胞，或已免疫的B細(xì)胞，或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺(tái)）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③26、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長(zhǎng)為單菌落的方法。

【詳解】

（1）A；B、C中的菌落分布較均勻；是通過(guò)稀釋涂布平板法獲得的，而D是通過(guò)平板劃線法獲得的，劃線平板法是從上一次劃線的末端開始劃線。故選ABC。

（2）①?gòu)恼麄€(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可以看出；實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)皮膚滲出物稀釋培養(yǎng)形成的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，利用噬菌體的作用檢測(cè)其中是否含有炭疽芽孢桿菌。②對(duì)照組中加入的液體不應(yīng)含有噬菌體，因此應(yīng)加入等量的生理鹽水；在進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)為防止雜菌的混入，消毒和滅菌工作是關(guān)鍵，主要包括對(duì)操作的空間；操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行；操作過(guò)程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸等。③若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度低于對(duì)照組，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組中的炭疽芽孢桿菌被噬菌體侵染與破壞，即該疑似患者感染了炭疽芽孢桿菌。④炭疽芽孢桿菌屬于細(xì)菌，能寄生在人和動(dòng)物體內(nèi)，說(shuō)明它是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)時(shí)需要借助搖床振蕩培養(yǎng)，說(shuō)明它是需氧型生物；振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣含量，使細(xì)菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，有利于炭疽芽孢桿菌的大量繁殖；培養(yǎng)液變渾濁表明炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

（3）分析表中數(shù)據(jù)可知，只有稀釋度為10-5時(shí)菌落數(shù)在30~300之間，適合用于計(jì)數(shù)?！窘馕觥?1)ABC

(2)檢驗(yàn)皮膚炭疽病疑似患者的皮膚滲出物中是否含有炭疽芽孢桿菌與實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水對(duì)操作的空間；操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行；操作過(guò)程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低（異養(yǎng)）需氧型增加培養(yǎng)液中的氧氣含量；使細(xì)菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

(3)10-5稀釋度為10-5時(shí)菌落數(shù)在30~300之間27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細(xì)胞。

2；基因工程的基本過(guò)程：目的基因的篩選與獲?。换虮磉_(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測(cè)和鑒定。

【詳解】

（1）過(guò)程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過(guò)程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對(duì)比幾種限制酶的結(jié)合位點(diǎn)和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過(guò)程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長(zhǎng)情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴(kuò)大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照，所以利用索氏抽提法分別測(cè)定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測(cè)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)?！窘馕觥?1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素?cái)U(kuò)大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻六、綜合題(共3題，共30分)28、略

【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞（甲）；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞（乙）；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞（丙）；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

（1）圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)；進(jìn)而產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；與植物原生質(zhì)體融合（方法有物理方法和化學(xué)方法）相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是用滅活的病毒處理。

（2）因?yàn)楣撬枇黾?xì)胞內(nèi)原癌基因和抑癌基因發(fā)生了突變，導(dǎo)致細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少，從而具有在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖的能力，沒有接觸抑制現(xiàn)象；在HAT培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞能存活，故骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除了提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需向培養(yǎng)基中添加動(dòng)物血清等物質(zhì)，并將其置于95%的空氣、5%的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

（3）篩選出專一抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)；由于要使每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞不多于一個(gè)，從而達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的；此后還要經(jīng)過(guò)專一抗體檢測(cè)，選出陽(yáng)性的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有的特點(diǎn)為既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體（或既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體）。

（4）為制備單克隆抗體；需將癌胚抗原注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取B淋巴細(xì)胞。為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細(xì)胞，至少需要2次篩選才能達(dá)到目的，第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（5）A；抗體的本質(zhì)為蛋白質(zhì)；該雙特異性抗體在核糖體當(dāng)中合成，A正確；

B；雙特異性抗體有一定的時(shí)效；不能長(zhǎng)期有效發(fā)揮作用，B錯(cuò)誤；

C；該特異性抗體具有專一性；不能