項目九微生物的分布與控制任務(wù)消毒與滅菌講解

項目九微生物的分布與控制

任務(wù)3消毒與滅菌一、基本概念（一）消毒

消毒是殺死物體上病原微生物，并不一定能殺死含芽胞的細菌或非病原微生物的方法。用以消毒的藥品稱為消毒劑。（二）滅菌滅菌是殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。任務(wù)3消毒與滅菌（三）抑菌抑菌是抑制體內(nèi)或體外細菌生長繁殖的方法。常用的抑菌劑為各種抗生素。（四）防腐防腐是防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。細菌一般不死亡。（五）無菌

不存在活菌，多是滅菌的結(jié)果。無菌操作是防止微生物進入人體或物體的操作技術(shù)。任務(wù)3消毒與滅菌二、控制微生物的意義控制有害微生物大量繁殖的重要性體現(xiàn)在以下幾個方面。（1）防止疾病的發(fā)生和傳播。（2）培養(yǎng)過程中防止微生物的污染。（3）防止微生物引起的原材料的變質(zhì)和腐敗。任務(wù)3消毒與滅菌三、化學(xué)消毒滅菌法化學(xué)消毒滅菌法利用化學(xué)藥物滲透細菌的體內(nèi)，使菌體蛋白凝固變性，干憂細菌酶的活性，抑制細菌代謝和生長，或損害細胞膜的結(jié)構(gòu)，改變其滲透性，破壞其生理功能等，從而起到消毒滅菌作用。(一)殺菌機制（1）使菌體蛋白變性或凝固。（2）干擾微生物酶系統(tǒng)和影響其代謝。（3）損傷細胞膜，提高其通透性。任務(wù)3消毒與滅菌（二）常用消毒劑種類1.酚類酚類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-1所示。作用機制

常用消毒劑

用途使蛋白質(zhì)變性；損傷細胞膜滅活相關(guān)酶類。3%~5%石炭酸地面、器具表面消毒2%來蘇爾皮膚消毒0.01%~0.05%洗必泰術(shù)前洗手任務(wù)3消毒與滅菌2.醇類醇類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-2所示。作用機制

常用消毒劑

用途使蛋白質(zhì)變性凝固；干擾細胞代謝。70%~75%乙醇皮膚消毒50%~70%異丙醇體溫計消毒2%苯氧乙醇傷口及燒傷感染任務(wù)3消毒與滅菌3.重金屬鹽類重金屬鹽類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-3所示。表5-3重金屬鹽類消毒劑作用機制

常用消毒劑

用途使蛋白質(zhì)變性凝固；具有氧化作用；滅活相關(guān)酶類。0.05%—0.1%升汞（氯化汞）非金屬器皿的消毒2%紅汞（2,7-二溴-4-羥汞基熒光紅雙鈉鹽）皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒0.1%硫柳汞（乙汞硫水楊酸鈉）皮膚消毒、手術(shù)部位消毒1%硝酸銀新生兒滴眼預(yù)防淋球菌感染任務(wù)3消毒與滅菌4.氧化劑類氧化劑類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-4所示。表5-4氧化劑類消毒劑作用機制

常用消毒劑

用途具有氧化作用；使蛋白質(zhì)沉淀。0.1%高錳酸鉀皮膚、尿道消毒3%過氧化氫水果消毒0.2%過氧乙酸創(chuàng)口、皮膚、粘膜消毒2%碘伏器材消毒、廣譜殺菌碘酒皮膚消毒0.5ppm氯飲用水消毒10%—20%漂白粉地面、廁所、排泄物消毒任務(wù)3消毒與滅菌5.表面活性劑類表面活性劑類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-5所示。作用機制

常用消毒劑

用途損傷細胞膜；滅活相關(guān)酶類；使蛋白質(zhì)沉淀。0.1%新潔爾滅外科手術(shù)洗手，皮膚粘膜消毒，浸泡手術(shù)器械0.1%杜滅芬皮膚創(chuàng)傷沖洗，金屬器械、棉織品、塑料、橡皮類消毒表5-5表面活性劑類消毒劑任務(wù)3消毒與滅菌6.烷化劑類烷化劑類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-6所示。表5-6烷化劑類消毒劑作用機制

常用消毒劑

用途使菌體蛋白沉淀；使核酸烷基化。10%甲醛浸泡消毒，空氣消毒福爾馬林保存動植物標(biāo)本1%-5%環(huán)氧乙烷手術(shù)器械、敷料消毒2%戊二醛精密儀器、內(nèi)窺鏡消毒任務(wù)3消毒與滅菌7.染料類染料類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-7所示。表5-7染料類消毒劑作用機制

常用消毒劑

用途對核酸有親和力影響繁殖以及干擾氧化過程。2%龍膽紫淺表創(chuàng)傷消毒任務(wù)3消毒與滅菌8.酸堿類酸堿類消毒劑作用機制、種類和用途如表5-8所示。表5-8染料類消毒劑作用機制

常用消毒劑

用途破化細胞膜、細胞壁；凝固蛋白。醋酸熏蒸空氣消毒1:4生石灰地面、排泄物消毒任務(wù)3消毒與滅菌9.其他其他消毒劑作用機制、種類和用途如表5-9所示。表5-9其他消毒劑作用機制

常用消毒劑

用途使蛋白變性；干擾酶系統(tǒng)。苯酚：乳酸（1:1）熏蒸無菌室乳酸空氣消毒苯扎溴銨作用于革蘭氏陽性菌任務(wù)3消毒與滅菌四、影響消毒效果的因素

許多因素會影響消毒劑的作用，而且各種消毒劑對這些因素的敏感性差異很大。（一）微生物的種類

不同類型的病原微生物對消毒劑抵抗力不同，因此，進行消毒時必須區(qū)別對待。（二）細菌繁殖體細菌繁殖體易被消毒劑消滅，一般革蘭陽性細菌對消毒劑較敏感，革蘭陰性桿菌則常有較強的抵抗力。繁殖體對熱敏感，消毒方法以熱力消毒為主。任務(wù)3消毒與滅菌（三）細菌芽胞

細菌芽胞對消毒因子耐力最強，殺滅細菌芽胞最可靠的方法是熱力滅菌、電離輻射和環(huán)氧乙烷熏蒸法。在化學(xué)消毒劑中，戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽胞，但可靠性不如熱力滅菌法。（四）病毒

病毒對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異，親水病毒的耐力較親脂病毒強。任務(wù)3消毒與滅菌（五）真菌

真菌對干燥、日光、紫外線以及多數(shù)化學(xué)藥物耐力較強，但不耐熱（60℃，1h即可殺滅）。（六）微生物的數(shù)量

污染的微生物數(shù)量越多，需要消毒的時間就越長，需要劑量就越大。任務(wù)3消毒與滅菌（七）有機物的存在（1）有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用，以至于微生物逐漸產(chǎn)生對藥物的適應(yīng)性。（2）有機物和消毒劑作用，形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。（3）一部分消毒劑與有機物發(fā)生了作用，則對微生物的作用濃度降低。（4）有機物可中和一部分消毒劑。重金屬類、表面活化劑類消毒劑等受有機物影響較大，對戊二醛影響較小。任務(wù)3消毒與滅菌（八）溫度

隨著溫度的升高，消毒劑的殺菌作用一般會增強，但溫度的變化對各種消毒劑影響不同，如甲醛、戊二醛、環(huán)氧乙烷的溫度升高1倍時，殺菌效果可增加10倍。而酚類和酒精受溫度影響小。（九）pHpH從兩方面影響殺菌作用：（1）對消毒劑的作用：改變其溶解度和分子結(jié)構(gòu)。（2）pH過高或過低對微生物的生長均有影響。在酸性條件下，細菌表面負電荷減少，陰離子型消毒劑殺菌效果好。在堿性條件下，細菌表面負電荷增多，有利于陽離子型消毒劑發(fā)揮作用。（十）處理劑量與監(jiān)測

保證消毒、滅菌處理的劑量，加強效果監(jiān)測，防止再污染。任務(wù)4干熱滅菌技術(shù)物理因素影響著微生物的化學(xué)合成和新陳代謝，因此可用改變環(huán)境中物理因素的方法進行滅菌、消毒和防腐。一、焚燒

焚燒與灼燒是直接利用火焰將微生物燒死的一種滅菌方法，又稱火焰滅菌法。焚燒是一種徹底的滅菌方法，它的作用范圍包括污染紙張、垃圾等廢棄物和動物尸體。二、灼燒直接用火焰滅菌，適用于實驗室的金屬器械（鑷、剪、接種環(huán)等）、玻璃試管口和瓶口等的滅菌。任務(wù)4干熱滅菌技術(shù)三、干烤

應(yīng)用烤箱高溫滅菌，160℃，2h?？蓺⑺酪磺形⑸铮⒖善茐膬?nèi)毒素。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。四、紅外線滅菌

紅外線（infrared）是波長為770nm~1000μm的電磁波，以1~10μm波長的熱效應(yīng)最強。紅外線的熱效應(yīng)只能在照射到的表面產(chǎn)生，不能使物體均勻加熱，常用于碗、筷等食具的滅菌。五、微波

波長為1~1000mm的電磁波統(tǒng)稱為微波，可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面，微波爐的熱效應(yīng)分布不均勻，滅菌效果不可靠，用于非金屬器械及食具消毒。任務(wù)5濕熱滅菌技術(shù)濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸氣進行滅菌的方法，濕熱法可在較低的溫度下達到與干熱法相同的滅菌效果，原因如下：濕熱滅菌法的滅菌效果比干熱滅菌法高，是藥物制劑生產(chǎn)過程中最常用的滅菌方法。（1）蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān)，含水量愈大，發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分，比在同一溫度的干熱空氣中易于凝固。（2）溫?zé)釡缇^程中蒸氣放出大量潛熱，加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所需溫度低，如在同一溫度下，則濕熱滅菌所需時間比干熱短。（3）濕熱的穿透力比干熱大，使深部也能達到滅菌溫度，故濕熱比干熱收效好。任務(wù)5濕熱滅菌技術(shù)一、流通蒸氣消毒法在一個大氣壓下利用100℃的水蒸氣進行消毒。器械是消毒器或普通蒸籠。15~30min可殺滅細菌繁殖體，但不保證殺滅芽胞。消毒物品的包裝不宜過大、過緊，以利于蒸氣穿透。通過流通蒸氣的方法只能夠殺死絕大多數(shù)病原微生物，但不能夠徹底殺滅芽胞或者抵抗力較強的非致病性微生物，因此該方法準確來說只屬于常規(guī)消毒的范疇，不能套上“滅菌”這個概念。任務(wù)5濕熱滅菌技術(shù)二、間歇蒸氣滅菌法間歇蒸氣滅菌法又稱分段滅菌法或丁達爾滅菌法，適用于不耐高溫的培養(yǎng)基、藥液、酶制劑、血清等。具體做法是將物品放在80~100℃下蒸煮15~60min，以殺滅其中所有微生物營養(yǎng)體，再擱置室溫（28~37℃）下過夜，誘導(dǎo)其中殘存的芽孢發(fā)芽，連續(xù)重復(fù)該過程3次以上。這種方法可以在較低的滅菌溫度下達到滅菌的良好效果。任務(wù)5濕熱滅菌技術(shù)三、高壓蒸氣滅菌法

高壓蒸氣滅菌法，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物，是滅菌效果最好、應(yīng)用最廣的滅菌方法。方法是將需滅菌的物品放在高壓鍋內(nèi)，加熱時蒸氣不外溢，高壓鍋內(nèi)溫度隨著蒸氣壓的增加而升高，在101kPa（1.05kg/cm2）蒸氣壓下溫度達到121℃，維持15~20min。適用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)一、巴氏消毒法

巴氏消毒法亦稱低溫消毒法或冷殺菌法，是一種在較低的溫度下既可殺死病菌，又能保持物品中營養(yǎng)物質(zhì)風(fēng)味不變的消毒法?，F(xiàn)在常常被廣義地用于需要殺死各種病原菌的熱處理方法。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)(一)主要原理

在一定溫度范圍內(nèi)，溫度越低，細菌繁殖越慢，溫度越高，繁殖越快。但溫度太高，細菌就會死亡，不同的細菌有不同的最適生長溫度和耐熱、耐冷能力。

巴氏消毒其實就是利用病原體不是很耐熱的特點，用適當(dāng)?shù)臏囟群捅貢r間處理，將其全部殺滅，但經(jīng)巴氏消毒后，仍保留了小部分無害或有益，較耐熱的細菌或細菌芽孢。因此巴氏消毒牛奶要在4℃左右的溫度下保存，且只能保存3~10天，最多16天。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)（二）現(xiàn)行方法

一種是將牛奶加熱到62~65℃，保持30min。采用這一方法，可殺死牛奶中各種生長型致病菌，滅菌效率可達97.3%~99.9%，經(jīng)消毒后殘留的只是部分嗜熱菌及耐熱性菌以及芽孢等，但這些細菌多數(shù)是乳酸菌，乳酸菌對人無害反而有益健康。

第二種方法將牛奶加熱到75~90℃，保溫15~16s，其殺菌時間更短，工作效率更高，但殺菌的基本原則是，能將病原菌殺死即可，溫度太高反而會有較多的營養(yǎng)損失。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)二、低溫抑菌法

低溫抑菌法在食品工業(yè)中采用最多，因為在低溫下（4℃左右）大多數(shù)病原菌都不能生長，在微生物學(xué)實驗和微生物工業(yè)中，這種方法不能起到滅菌的作用。一般在-20℃微生物就不會生長了，因為此時沒有液態(tài)的水供微生物活動之用，也有些微生物可以被冰殺死，因為冰會破壞微生物細胞膜。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)三、煮沸法

煮沸至100℃，保持5~10min，能殺死一般細菌的繁殖體。許多芽胞需經(jīng)煮沸60~120min及以上才死亡。水中加入2%碳酸鈉，可提高其沸點達105℃。既可促進芽胞的殺滅，又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)四、輻射法(一)紫外線殺菌

不同的微生物對紫外線的抵抗力不同。其中265nm波長的紫外線對微生物最具殺傷力。紫外線的穿透力很弱，易被固態(tài)物質(zhì)吸收，不能穿過普通玻璃和紙張。因此，只適用于表面消毒和空氣、水的消毒。紫外線滅菌廣泛應(yīng)用于微生物化驗室、醫(yī)院、公共場所的空氣消毒。

當(dāng)空氣中濕度超過55%~60%時，紫外線的殺菌效果迅速下降，必須防止紫外線對人體的直接照射，以免損傷皮膚和眼結(jié)膜。（二）鈷-60滅菌采用鈷-60滅菌的物質(zhì)一般僅升溫5℃，又稱“冷滅菌”。滅菌的主要物品有醫(yī)療器械、醫(yī)用塑料制品或抗生素等。鈷-60的使用需要專門的輻射源和相應(yīng)的安全防護設(shè)備。任務(wù)6其他滅菌技術(shù)五、滲透壓法

滲透壓法是利用高