弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬彎曲菌屬螺桿菌屬課件

弧菌屬、氣單胞菌屬、鄰單胞菌屬、彎曲菌屬、螺桿菌屬弧菌屬氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬彎曲菌屬螺桿菌屬目錄學(xué)習(xí)目標(biāo)霍亂弧菌的主要生物學(xué)特性及檢驗(yàn)方法、鑒定依據(jù)。掌握熟悉了解REPORT彎曲菌屬的微生物學(xué)檢驗(yàn)、螺桿菌屬的生物學(xué)特性及檢查方法。副溶血性弧菌、氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬的生物學(xué)特性及檢查方法?；【苹【萍?xì)菌細(xì)菌廣泛分布于自然界，以水中居多，人體腸道中偶有此類細(xì)菌存在。包括：弧菌屬(Vibrio)氣單胞菌屬(Aeromonas)鄰單胞菌屬(Plesiomonas)發(fā)光桿菌屬(Photo-bacterium)其中發(fā)光桿菌屬主要存在于海水中,對人類不致病弧菌科3個(gè)菌屬的特性表

試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌甘露醇產(chǎn)酸+/-+-明膠液化++-鳥氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生長+--嗜鹽性+/---黏絲試驗(yàn)+-注：S，敏感；R，耐藥；+/-，90%陽性PART01弧菌屬注意事項(xiàng)廣泛分布于自然界中以淡水及海水最多。根據(jù)抗原性、生化反應(yīng)、DNA同源性、致病性及耐鹽性等不同分為：Ｏ1群霍亂弧菌不典型Ｏ1群霍亂弧菌非Ｏ1群霍亂弧菌其他弧菌其中以霍亂弧菌和副溶血弧菌最為重要，它們分別引起霍亂和食物中毒。臨床上常見弧菌及所致疾病

種所致疾病臨床意義標(biāo)本來源O1群霍亂弧菌霍亂主要致病菌糞便O139群霍亂弧菌霍亂主要致病菌糞便非O1群霍亂弧菌胃腸炎主要致病菌糞便、血副溶血弧菌胃腸炎主要致病菌糞便、傷口創(chuàng)傷弧菌敗血癥、傷口感染主要致病菌糞便、傷口少女弧菌傷口感染散發(fā)感染傷口溶藻弧菌傷口感染散發(fā)感染耳、傷霍利斯弧菌胃腸炎散發(fā)感染糞便擬態(tài)弧菌胃腸炎散發(fā)感染糞便河弧菌胃腸炎罕見感染糞便麥?zhǔn)匣【改c炎罕見感染糞便氟尼斯弧菌胃腸炎罕見感染辛辛那提弧菌菌血癥、腦炎罕見感染鯊魚弧菌傷口感染罕見感染弧菌屬（Vibrio）的共同生物學(xué)特性要點(diǎn):★革蘭陰性、弧形（短桿）菌、動(dòng)力（＋）★兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高★除麥?zhǔn)匣【?，氧化酶陽性、還原硝酸鹽★發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、罕見產(chǎn)氣★鈉離子能刺激其生長，部分菌株嗜鹽★對O/129敏感（近年出現(xiàn)抗性株）一、霍亂弧菌

Vibriocholerae是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體。該菌分為：

古典生物型埃爾托（Eltor）生物型。霍亂發(fā)病急，傳染性強(qiáng)，死亡率高。（一）生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色G-弧形、月牙形或逗點(diǎn)狀周身菌毛，有莢膜，無芽胞單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑取糞便懸滴觀察可見穿梭樣或流星狀運(yùn)動(dòng)涂片染色鏡檢可見魚群狀弧菌（一）生物學(xué)性狀2.培養(yǎng)特性兼性厭氧營養(yǎng)要求不高，37℃為適宜耐堿不耐酸(pH8.4-9.2)SS不生長；MAC生長Eltor在BAP上出現(xiàn)β-溶血環(huán)

亞銻酸鉀瓊脂呈黑色

霍亂弧菌在堿性蛋白胨水培養(yǎng)基中生長左側(cè)為陰性對照TCBS上菌落形態(tài)初次分離常選用pH8．5的堿性胨水進(jìn)行選擇性增菌培養(yǎng)，經(jīng)35℃6h～9h增菌后液體混濁并在液體表面形成菌膜發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸，菌落呈黃色

霍亂弧菌在鑒別瓊脂平板的菌落形態(tài)右為非流行株（紅色）在堿性瓊脂平板上35℃18h～24h成較大、圓形、扁平無色透明似水滴狀菌落左為流行株（無色）（一）生物學(xué)性狀3.生化反應(yīng)氧化酶陽性動(dòng)力陽性賴氨酸、鳥氨酸脫羧酶陽性分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣遲緩發(fā)酵乳糖，不分解阿拉伯糖明膠酶試驗(yàn)和ONPG（β-半乳糖苷酶）試驗(yàn)陽性霍亂紅反應(yīng)陽性，不同生物型生化反應(yīng)不同（一）生物學(xué)性狀4.抗原成分有不耐熱H抗原和耐熱的Ｏ抗原。

O1群每個(gè)血清型分2個(gè)生物型古典生物型（classicalbiotype）不溶解羊紅細(xì)胞不凝集雞紅細(xì)胞對多粘菌素敏感被第IV群噬菌體裂解ElTor生物型（ElTorbiotype）與古典物型上述性狀完全相反O1群又可分為3個(gè)血清型：小川、稻葉、彥島型。（一）生物學(xué)性狀5．變異性

經(jīng)人工培養(yǎng)，長久保存可失去典別的弧形而成直桿狀，或多形性。EI-Tor生物型的溶血特性喪失。有毒株也可成為無毒株，強(qiáng)毒株成為弱毒株。

6．抵抗力

霍亂弧菌可在水中存活20天左右。對熱、干燥敏感；100℃1～2min即死亡。怕酸而耐堿，在正常胃酸中僅能生存4min。對常用消毒劑敏感，0．5ppm氯15min殺死，對鏈霉素、氯霉素和四環(huán)素敏感，對慶大霉素耐藥。(二)臨床意義1.致病物質(zhì)鞭毛菌毛霍亂腸毒素Choleragen最強(qiáng)的致瀉毒素1A+5B結(jié)構(gòu)不耐熱(二)臨床意義霍亂腸毒素的作用機(jī)制(二)臨床意義(二)臨床意義(二)臨床意義病理生理病變：脫水和電解質(zhì)丟失：主要為劇烈瀉吐所致，嚴(yán)重者可出現(xiàn)循環(huán)衰竭。急性腎功衰竭：休克未得到及時(shí)糾正，導(dǎo)致腎血流量減少，出現(xiàn)少尿甚至無尿。病理生理病變：低鉀綜合征：由于脫水導(dǎo)致鉀離子丟失和治療時(shí)補(bǔ)鉀不及時(shí)等所致。代謝性酸中毒：由于脫水導(dǎo)致大量碳酸氫根離子丟失、循環(huán)衰竭組織缺氧代謝產(chǎn)生大量酸性產(chǎn)物及腎衰時(shí)酸性產(chǎn)物不能排泄等所致。(二)臨床意義粘蛋白酶

霍亂為什么會(huì)出現(xiàn)淘米水樣便呢？(二)臨床意義2.所致疾?。夯魜y（Cholera）傳染源：患者及帶菌者人類是唯一易感者攝入108-1010個(gè)細(xì)菌可造成感染，引起霍亂傳播途徑：通過污染的水源或飲食經(jīng)消化道感染(二)臨床意義O1血清群ClassicalbiotypeElTorbiotype6次霍亂大流行第7次霍亂大流行1961西奈半島ElTor地區(qū)發(fā)現(xiàn)O139群：1992年印度分離，流行于南亞和東南亞(二)臨床意義(二)臨床意義“米泔水”樣便防治原則改善社區(qū)環(huán)境，加強(qiáng)水源和糞便管理。及時(shí)補(bǔ)充液體和電解質(zhì)?？股氐氖褂靡詼p少外毒素產(chǎn)生。免疫性感染后機(jī)體獲得牢固免疫力。再感染少見血液和腸腔中出現(xiàn)保護(hù)性抗體小腸內(nèi)出現(xiàn)sIgA(三)微生物檢驗(yàn)1.在發(fā)病早期，在使用抗生素前采集“米泔水”樣糞便標(biāo)本，就地接種堿性胨水增菌;2.直接涂片染色鏡檢：油鏡下觀察到魚群狀排列的G-弧菌，可初步報(bào)告;3.動(dòng)力及制動(dòng)試驗(yàn);4.直接熒光抗體染色;5.分離、培養(yǎng)與鑒定;6.抗體的測定;(三)微生物檢驗(yàn)7.霍亂弧菌的鑒別試驗(yàn)

(1)霍亂紅試驗(yàn)：

分解培養(yǎng)基色氨酸產(chǎn)生吲哚。同時(shí)，還原硝酸鹽成為亞硝酸鹽，兩種產(chǎn)物結(jié)合成亞硝酸吲哚?；魜y紅陽性(2)粘絲試驗(yàn)（去氧膽酸鈉溶液）

lmin內(nèi)懸液由混變清，并變得粘稠?；魜y弧菌粘絲試驗(yàn)陽性(3)0／129敏感試驗(yàn)：(三)微生物檢驗(yàn)返回(三)微生物檢驗(yàn)霍亂弧菌粘絲試驗(yàn)陽性返回(三)微生物檢驗(yàn)(4)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)：１ｍin內(nèi)出現(xiàn)凝集為陽性?；魜y弧菌EITor生物型雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)陽性

(5)多粘菌素Ｂ敏感試驗(yàn)：古典生物型不生長為敏感（圖），EI-Tor生物型生長為不敏感。(6)第Ⅳ、V組噬菌體裂解試驗(yàn)：(7)耐鹽培養(yǎng)試驗(yàn)：(三)微生物檢驗(yàn)霍亂弧菌EITor生物型雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)陽性返回(三)微生物檢驗(yàn)霍亂弧菌古典生物型對多粘菌素B敏感返回(三)微生物檢驗(yàn)檢驗(yàn)程序：(三)微生物檢驗(yàn)抗生素藥敏試驗(yàn)

常規(guī)測定氨芐西林、四環(huán)素、氯霉素、SMZ+TMP、呋南唑酮；對監(jiān)控弧菌的耐藥性發(fā)展趨勢有意義。

總結(jié)案例分析

患者，男，20歲。因飲用不潔河水后一天突發(fā)劇烈腹瀉，繼而嘔吐，吐瀉物“米泔水”樣，無腹痛，查體：T36.8℃，BP95mm／70mmHg，壓痛，心臟無異常。案例：

問題：

請問最有可能的病原菌是？該病原菌的致腹瀉機(jī)制是？二、副溶血性弧菌Vibrioparahaemolyticus（一）生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色：為G-b，有鞭毛(極單毛)，無莢膜，無芽胞;2.培養(yǎng)特征：營養(yǎng)要求不高，需養(yǎng)或兼性厭氧，具有嗜鹽性，在培養(yǎng)基中必須加入3.5%氯化鈉，最適pH為7.7～8.0，最適生長溫度為35℃，TCBS瓊脂平板上形成1.0～2.0mm大小，蔗糖不發(fā)酵呈藍(lán)綠色的菌落。（與霍亂弧菌區(qū)別）（一）生物學(xué)特性3.生活反應(yīng)：95％病人分離菌株在含高鹽(7%)的人O型血或兔血及以D-甘露醇為碳源的瓊脂平板上可產(chǎn)生β溶血,稱為神奈川現(xiàn)象。該現(xiàn)象作為鑒定致病性與非致病性菌株的一項(xiàng)重要指標(biāo).4.抵抗力：弱，不耐熱，90℃1min即被殺死。:耐堿怕酸，在50％食醋中1min死亡。在淡水中生存不超過2天而在海水中能存活47天以上（一）生物學(xué)特性

TCBS平板上菌落特征(二)臨床意義胃腸炎傳播途徑存在于近海的海水、海底的沉淀物、魚蝦類和貝殼及鹽漬加工的海產(chǎn)品中。臨床癥狀主要引起食物中毒和急性腹瀉。病程2—3天，通常為自限性。(二)臨床意義胃腸炎免疫力病后免疫力不強(qiáng)，可重復(fù)感染致病機(jī)制通過菌毛的粘附，產(chǎn)生耐熱性溶血素而致病。該毒素耐受100℃10min不被破壞。(二)臨床意義血水樣便（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)1、標(biāo)本采集