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1、實(shí)驗(yàn)一母種培養(yǎng)基配制及棉塞制作,一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、 掌握食用菌固化培養(yǎng)基的配制。 2、學(xué)會(huì)棉塞 的制作方法。 二、基本原理 食用菌母種分離、移接和斜面保存菌種都必須要制作相應(yīng)的培養(yǎng)基,以備食用菌的培養(yǎng)、分離和保存之用。 培養(yǎng)基是根據(jù)各種食用菌在生長繁殖過程中對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)需求制成的,它可供給食用菌的C源、N源、水分、各種無機(jī)鹽及生長物質(zhì)等。 培養(yǎng)基的種類很多,本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)斜面培養(yǎng)基(PDA)制作。,三.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 1.器具:天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、棉花、線繩、牛皮紙、皮筋、紗布、電爐、菜刀、菜板、小鋁鍋等。
2、2材料:馬鈴薯、葡萄糖或蔗糖、瓊脂、水。 四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 過程:制馬鈴薯濾液融化瓊脂培養(yǎng)基的分裝 棉塞的制作 方法步驟:,1配方(PDA):馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂1520g,自來水1000ml,pH自然。 2制作方法 (1)制濾液:馬鈴薯刮去粗皮,去芽眼,切成碎塊,稱量后放鍋中,加水12001300ml,將其煮沸20min。用雙層紗布過濾,取1000ml濾液。,(2)化瓊脂:將濾液加熱至將沸騰時(shí)加入瓊脂,不斷攪拌,注意控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。待瓊脂完全融化后加入剩余原料,并使其溶解(用熱水補(bǔ)足水量).,(3分裝 :通過漏斗裝置,趁熱將培養(yǎng)基分裝于試管中,裝量約占試管高度的1/4(分裝三角瓶,其,裝量以不超過其容積的一半為宜)。注意管口或瓶口不要沾染培養(yǎng)基。 (4)制棉塞棉花以白色長絨脫脂棉為宜。根據(jù)試管口大小取棉,將其卷成棉塞,最好 外包一層紗布。將棉塞塞入試管口。棉塞塞入試管2/3。制做棉塞要求外表光滑,外包的紗不能折、松緊適宜等。,A.正確; B.不正確,(5)包扎:管口堵入棉塞后7或9支試管扎一捆,棉塞部分用牛皮紙包扎。在包裝紙上標(biāo)明培養(yǎng)基名稱,制備組別和姓名、日期等。 (6)、滅菌 (7)、擺斜面 (8)、存放冰箱(4-6C) 六、作業(yè) 1、簡述高壓滅菌鍋的使用。 2、何謂滅菌?簡述熱力滅菌的類型和原理。 3.何時(shí)加入瓊脂?融化時(shí)注意什么問題?分裝的技
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