第11章 弧菌.ppt

1、第11章 弧菌屬,弧菌屬(Vibrio),1.概念：是一群菌體短小，彎曲成弧形的 革蘭氏陰性菌。 2.形態(tài)：菌體彎曲，屬于螺形菌，但人工培養(yǎng)后呈現(xiàn)桿狀，類似腸道桿菌。 3.與腸桿菌科細菌的區(qū)別： 氧化酶試驗 + 一端單一鞭毛，運動活潑、呈穿梭狀 嗜堿生長,氧化酶試驗陽性(深紫色),氧化酶試驗陽性(深紫色),單鞭毛電鏡圖,弧菌屬(Vibrio),4.分布：廣泛存在于自然界中，其中以水體環(huán)境最為多見。 5.致病：重要的致病性弧菌為霍亂弧菌和副溶血性弧菌。,第一節(jié) 霍亂弧菌,霍亂弧菌(V.cholerae)是引起霍亂的病原體，霍亂是一種起源于印度的烈性傳染病，自從1817年以來，發(fā)生過7次世界性的霍

2、亂大流行。前6次均由霍亂弧菌古典生物型引起，第7次大流行由霍亂弧菌El-Tor生物型引起，它們屬于O1群霍亂弧菌。但1992年在印度、孟加拉發(fā)現(xiàn)的新血清型(O139群)霍亂弧菌(非O-1群菌)所致的霍亂流行, 引起各國的高度重視。,六次霍亂大流行,亞洲 非洲 歐洲 南美洲 北美洲 大洋洲第1次1817-23+ + + - - - 第2次 1826-37+ + + + + +第3次1846-62 + + + + + -第4次1864-75+ + + + + -第5次1883-87+ + + + - -第6次1892-1925+ + + + - -,在第5次霍亂大流行中(1883年)，德國細菌學家

3、Robert Koch從霍亂病人排泄物及病死者腸道組織中首先發(fā)現(xiàn)了霍亂弧菌，霍亂傳染性強，病死率高，屬于國際檢疫的傳染病(海關(guān)檢查)，在我國霍亂排行甲類傳染病第二位，俗稱二號病。,1905年 也在埃及西奈半島的ElTor 檢疫站首次分離到 溶血性霍亂弧菌，命名為： ElTor 生物型 El Tor 生物型 溶血 古典生物型 不溶血 O-1群 古典生物型 霍亂弧菌（18171961） 前六次大流行的流行菌株 O-1群 El Tor生物型霍亂弧菌 1961 第七次大流行的流行菌株 O2O138群（非O-1群） 引起散發(fā)的胃腸炎 O139群： 1992年10月開始在印度半島引起霍亂樣病流行 流行菌株

4、不能被O-1群抗血清所凝集 也不被O2O138 群抗血清所凝集 以流行株制備的抗血清也不凝集O1O138 群霍亂弧菌 及其他弧菌 故：命名為新的血清群霍亂弧菌O139群,一、生物學性狀,形態(tài)和染色 1.大?。?.50.81.53m。 2.形態(tài)：彎曲成弧形或逗點狀。 3.結(jié)構(gòu)：有菌毛，特別是菌體一端有單鞭毛，使細菌運動活潑(病人糞便作懸滴標本,可見魚群樣穿梭 )，部分菌株(例如O139群)有莢膜 4.染色：革蘭氏陰性菌。 形態(tài)學特點為逗點狀、運動活潑的革蘭氏陰性菌。,單鞭毛電鏡圖,霍亂弧菌革蘭氏染色,培養(yǎng)特性與生化反應(yīng) 1.需氧菌,營養(yǎng)要求不高,適應(yīng)性強,對溫度、營養(yǎng)物質(zhì)、氣體環(huán)境沒有很嚴格的要

5、求。 2.耐堿不耐酸 堿性蛋白胨水運送標本/增菌 堿性瓊脂平板透明/半透明、無色扁平菌落。TCBS瓊脂平板 3.生化反應(yīng)：氧化酶試驗陽性，分解多種糖類，發(fā)酵的糖產(chǎn)酸可殺死該菌。,抗原結(jié)構(gòu)與分型 1.抗原組成：O抗原為特異性抗原，H抗原是弧菌的共同抗原。 2.分型：根據(jù)O抗原不同，把霍亂弧菌分為155個血清群，其中O1群和O139群引起霍亂，O1群霍亂弧菌又分為3個血清型和2個生物型。,O1群霍亂弧菌,血清型 O1多克隆抗體 O1單克隆抗體 流行 (抗原成分) A B C 小川型（AB） - 是 稻葉型（AC） - 是 彥島型（ABC） 未知 “”凝集，“-”不凝集,O1群霍亂弧菌,O1群霍亂弧

6、菌的每個血清型可分為古典生物型和EI-Tor生物型，兩種生物型的霍亂弧菌在許多生物學特性、臨床表現(xiàn)和流行特點等方面基本相同 ，它們的區(qū)別表現(xiàn)為： 特性 古典生物型 EI-Tor生物型 對第群噬菌體敏感性 + - 凝集雞紅細胞 - + 溶解羊紅細胞 - + 對50IU的多粘菌素敏感性 + -,O139群霍亂弧菌,1.不同點：不表達O1群霍亂弧菌的O抗原， 但編碼脂多糖抗原和莢膜多糖抗原。 2.相同點： O1群霍亂弧菌和O139群霍亂弧菌都產(chǎn)生霍亂腸毒素，感染的臨床表現(xiàn)和流行特點基本相同。,抵抗力 1.對理化因素抵抗力弱：以1份漂白粉和4份水比例處理患者排泄物或嘔吐物1小時，可殺死霍亂弧菌。 2.

7、水環(huán)境：存活1-3周，與疾病傳播有關(guān)。自來水加0.5ppm次氯酸, 15分鐘能殺死霍亂弧菌。 3.1000C 1-2min，550C 10min,正常胃酸中 4min,二、致病性,致病物質(zhì) 霍亂腸毒素 、鞭毛、菌毛。,霍亂腸毒素,1.性質(zhì)：外毒素，蛋白質(zhì)，是最為強烈的致瀉毒素。 2.組成：1個A亞單位和5個B亞單位。B亞單位是結(jié)合成分，與小腸粘膜上皮細胞結(jié)合； A亞單位是毒性成分。 3.機制： A亞單位的A1成分激活腺苷酸環(huán)化酶，細胞內(nèi)cAMP升高，小腸粘膜上皮細胞分泌亢進(電解質(zhì)和水)，導致腹瀉和嘔吐。,霍亂腸毒素 B 亞單位 結(jié)合部分 受體：小腸上皮細胞GM1神經(jīng)節(jié)苷脂 A2亞單位 與B亞

8、單位結(jié)合 A1亞單位 毒性部分 活化的A1 胞內(nèi) 腺苷環(huán)化酶活化 ATP cAMP 分泌：Na+、K+、H2O 導致：嚴重腹瀉、嘔吐、脫水。 由？編碼？,霍亂腸毒素機制,菌毛：粘附腸上皮細胞刷壯緣的微絨毛； 鞭毛：活潑的鞭毛運動，使細菌穿過粘膜表面 并在此生長繁殖。 毒力株粘液素酶：液化粘液層,利于細菌穿透,霍亂弧菌依靠活潑的鞭毛運動, 穿過腸粘膜表面的粘液層, 通過菌毛粘附于腸上皮細胞上, 迅速繁殖并分泌霍亂腸毒素?；魜y弧菌只有粘附定植小腸粘膜上皮細胞后方可致病。,所致疾病 1.傳染源：霍亂病人、無癥狀感染者、帶菌者(EI-Tor生物型)。 2.傳播途徑：腸道傳染病，污染的水或食物經(jīng)口攝入。

9、 3.致病過程：稀釋胃酸，霍亂弧菌鞭毛、菌毛、霍亂腸毒素。 4.癥狀：劇烈吐瀉，吐瀉物呈“米泔水”樣(膽汁分泌減少)。導致水和電解質(zhì)丟失，循環(huán)衰竭及腎功能衰竭 。,所致疾病 人類是霍亂弧菌的唯一易感者 污染水源、食品 正常胃酸：1081010 胃 引起感染 胃酸低下：103105 小腸 粘附 迅速繁殖 定居 1、霍亂弧菌不侵入上皮細 胞，更不侵入血液。 腸毒素 2、腸毒素進入腸上皮細胞 發(fā)揮作用，但不入血液。 3、局部一般無炎癥細胞 上吐下瀉、嚴重脫水、血容量減少,微循環(huán)衰竭、酸中毒 腎功能衰竭、休克 死 亡 及時治療：補充液體、電解質(zhì)，死亡率僅為1% 未經(jīng)治療： 死亡率可達50%75%,疾病

10、的嚴重程度比較 1.最重：O139群霍亂弧菌，嚴重脫水和高死亡率。 2.較重：O1群霍亂弧菌古典生物型。 3.較輕：O1群霍亂弧菌EI-Tor生物型。,三、免疫性,患病后具有較牢固的免疫力 IgG型抗腸毒素抗體： 中和抗體 阻斷B亞單位與受體的結(jié)合 IgM型抗菌體抗體： 激活補體 SIgA抗體： 是保護機體腸粘膜免受霍亂弧菌及其腸毒素侵襲和致病的主要機制。 抵抗腸腔多種蛋白酶的分解 與菌毛等粘附因子結(jié)合，阻礙細菌粘附于腸粘膜上皮細胞 凝聚細菌，使其失去動力，阻止其侵襲力和產(chǎn)生毒素,四、微生物學檢查法,快速、準確、及時報告疫情！流行病學調(diào)查 直接鏡檢： 標本？懸滴法觀察細菌運動 分離培養(yǎng)： 標本

11、？標本的保存和運輸 Cary-Blair保存液 堿性蛋白胨水運送、保存、增菌 TCBS瓊脂平板分離培養(yǎng) 黃色菌落 生化反應(yīng) 血清學試驗 鑒定與分型 快速診斷 熒光球試驗；PCR法,霍亂是一種烈性傳染病，對首例病人的確診對控制本病極為重要!,五、防治原則,1.一般預防：控制傳染源(很難消滅傳染源)，切斷傳染途徑。 2.免疫預防：應(yīng)用菌苗類毒素 減毒重組活菌苗 減毒株（CVD103） 菌苗加類毒素混合苗 純化B亞單位 +滅活細菌 3.治療措施： 及時補充水份、電解質(zhì)(對癥處理)是搶救霍亂病人的關(guān)鍵 敏感抗生素治療(注意耐藥性) 及時隔離病人。,第二節(jié) 副溶血性弧菌,副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)的生物學性狀類似霍亂弧菌，但與霍亂弧菌比較，它的一個顯著特點是嗜鹽性，在NaCl濃度較高(3%-4%左右)的環(huán)境中才能生長繁殖 ，致病性副溶血性弧菌多出現(xiàn)溶血(神奈川現(xiàn)象)，食入烹飪不