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醫(yī)學(xué)微生物學(xué)微生物:存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不見,必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍。甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。1微生物的分類: 種類 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 核酸 特點 代表非細(xì)胞型微物 無典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)構(gòu)DNA 或 RNA,兩者不同時存在無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng),只能在活細(xì)胞內(nèi)生長增值病毒原核細(xì)胞型微生物無核膜、核仁,僅有核糖體DNA 和 RNA 古生菌、細(xì)菌(細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌)真核細(xì)胞型微生物細(xì)胞核分化程度很高,有核膜核仁,細(xì)胞器完整DNA 和 RNA 真菌3、病原微生物:少數(shù)具有致病性,能引起人類、植物病害的微生物。機(jī)會致病性微生物:在正常情況下不致病,只有在特定情況下導(dǎo)致疾病的微生物。4,郭霍法則:特殊的病原菌應(yīng)在同一種疾病中查見,在健康人中不存在;該特殊病原菌能被分離培養(yǎng)得純種;該純培養(yǎng)物接種至易感動物,能產(chǎn)生同樣病癥;自人工感染的實驗動物體內(nèi)能重新分離得到該病原菌純培養(yǎng)。郭霍法則的特殊情況5、免疫學(xué):主動免疫;被動免疫。第一篇 細(xì)菌學(xué)第一章 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)第一節(jié) 細(xì)菌的大小與形態(tài)1、觀察細(xì)菌常采用光學(xué)顯微鏡,一般以微米為單位。2、按細(xì)菌外形可分為:球菌(雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌) 桿菌(鏈桿菌、棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌、雙歧桿菌)螺形菌(弧菌、螺菌、螺桿菌)第二節(jié) 細(xì)菌的結(jié)構(gòu)1、基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)特殊結(jié)構(gòu):莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞2、革蘭陽性菌(G+):顯紫色;革蘭陰性菌(G-):顯紅色。3、細(xì)胞壁結(jié)構(gòu) 革蘭陽性菌 G+ 革蘭陰性菌 G-肽聚糖組成由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋構(gòu)成堅韌三維立體結(jié)構(gòu)由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈構(gòu)成疏松二維平面網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)肽聚糖厚度 2080nm 1015nm肽聚糖層數(shù) 可達(dá) 50 層 僅 12 層肽聚糖含量 占胞壁干重 5080% 僅占胞壁干重 520%磷壁酸 有 無外膜 無 有4、G-菌的外膜 脂蛋白、脂多糖(LPS)【脂質(zhì) A,核心多糖,特異多糖】 、脂質(zhì)雙層、 脂多糖(LPS):即 G-菌的內(nèi)毒素。LPS 是 G-菌的重要致病物質(zhì),使白細(xì)胞增多,直至休克死亡;另一方面,LPS 也可增強機(jī)體非特異性抵抗力,并有抗腫瘤等有益作用。脂質(zhì) A:內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要成分,無種屬特異性,不同細(xì)菌的脂質(zhì) A 骨架基本一致,故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。核心多糖:有屬特異性,位于脂質(zhì) A 的外層。特意多糖:即 G-菌的菌體抗原(O 抗原) ,是脂多糖的最外層。5、細(xì)胞壁的功能:維持菌體固有的形態(tài),并保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境。G-菌的外膜是一種有效的屏障結(jié)構(gòu),使細(xì)菌不易受到機(jī)體的體液殺菌物質(zhì)、腸道的膽鹽及消化酶等的作用。6、細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型(細(xì)菌 L 型):細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制,這種細(xì)菌壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。原生質(zhì)體:G+菌細(xì)胞壁缺失后,原生質(zhì)層僅被一層細(xì)胞膜包住原生質(zhì)球:G-菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)細(xì)菌 L 型的誘發(fā)因素,如:溶菌酶,青霉素,溶葡萄球菌素,膽汁,抗體,補體等。溶菌酶:能裂解肽聚糖中 N-乙酰葡萄胺和 N-乙酰胞壁酸之間的 -1,4 糖苷鍵,破壞聚糖骨架,引起細(xì)菌裂解。青霉素:能與細(xì)菌競爭合成肽聚糖過程中所需的轉(zhuǎn)肽酶,抑制四肽側(cè)鏈上 D-丙氨酸與五肽橋間的聯(lián)結(jié),使細(xì)菌不能合成完整的肽聚糖,在一般滲透壓環(huán)境中科導(dǎo)致細(xì)菌死亡。細(xì)菌 L 型需在高滲低瓊脂含血清的培養(yǎng)基中生長。G+菌細(xì)胞壁缺損形成的原生體,在普通培養(yǎng)基中很容易脹裂死亡,必須保存在高滲環(huán)境中。7、細(xì)胞膜:細(xì)胞膜的主要功能:物質(zhì)轉(zhuǎn)運;呼吸和分泌;生物合成;參與細(xì)菌分裂:細(xì)菌部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀物,稱為中介體。8、細(xì)胞質(zhì):核糖體:鏈霉素(與細(xì)菌核糖體的 30S 亞基結(jié)合)和紅霉素(與細(xì)菌核糖體的 50S 亞基結(jié)合)均能干擾其蛋白質(zhì)合成,從而殺死細(xì)菌,但對人體核糖體無害。質(zhì)粒:染色體外的遺傳物質(zhì),為閉合環(huán)狀的雙鏈 DNA胞制顆粒:貯藏有營養(yǎng)物質(zhì)。異染顆粒(也成迂回體,嗜堿性強,用甲基藍(lán)染色時著色較深呈紫色)常見于白喉棒狀桿菌。9、核質(zhì):細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。10、 細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)莢膜:包繞在細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì),為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體,用理化方法去除后并不影響菌細(xì)胞的生命活動。厚度0.2 微米邊界明顯的稱為莢膜或大莢膜;厚度0、2 微米的為微莢膜。若粘液物質(zhì)疏松地附著于菌細(xì)胞表面,邊界不明顯且易被洗脫者成為粘液層。大多數(shù)細(xì)菌的莢膜為多糖,多糖分子組成和構(gòu)型的多樣化使其結(jié)構(gòu)極為復(fù)雜,成為血清學(xué)分型的基礎(chǔ)。莢膜對一般堿性染料親和力低,不易著色。莢膜的功能:抗吞噬作用;粘附作用;抗有害物質(zhì)的損傷作用。鞭毛:包括:單毛菌、雙毛菌、叢毛菌、周毛菌鞭毛由基礎(chǔ)小體、鉤狀體、絲狀體三部分組成。鞭毛的功能:使細(xì)菌能在液體中自由游動,速度迅速。細(xì)菌的運動有化學(xué)趨向性,常向營養(yǎng)物質(zhì)處前進(jìn),而逃離有害物質(zhì)。有些細(xì)菌的鞭毛與致病性有關(guān)。菌毛:必須用電子顯微鏡觀察普通菌毛:與細(xì)菌粘附有關(guān)。性菌毛:僅見于少數(shù) G-菌。具有傳遞遺傳物質(zhì)作用。芽胞:細(xì)菌的休眠形式,營養(yǎng)缺乏尤其是 C、N、P 元素不足時,細(xì)菌生長繁殖減速,啟動芽胞形成的基因。細(xì)菌的芽胞由內(nèi)向外依次是:核心、內(nèi)膜、芽胞壁、皮質(zhì)、外膜、芽胞殼和押寶外衣。芽胞的形成與發(fā)芽:芽胞具有完整的核質(zhì)、酶系統(tǒng)和合成菌體組分的結(jié)構(gòu),能保存細(xì)菌的全部生命必須物質(zhì),芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力。一個細(xì)菌只形成一個芽胞,一個芽胞也只能生成一個菌體。芽胞的功能:細(xì)菌的芽胞對熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強大的抵抗力。此外,當(dāng)芽胞成為繁殖體后,能迅速大量繁殖而致病。第二章 細(xì)菌的生理第一節(jié) 細(xì)菌的理化性質(zhì)1、細(xì)菌的化學(xué)組成:水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、核酸2、細(xì)菌的物理性狀:光學(xué)性質(zhì);表面積;細(xì)菌的相對表面積大,有利于同外界進(jìn)行物質(zhì)交換;帶電現(xiàn)象;半透性:細(xì)菌的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁都有半透性,有利于吸收營養(yǎng)和排除代謝產(chǎn)物;滲透壓:細(xì)菌所處一般環(huán)境相對低滲。第二節(jié) 細(xì)菌的營養(yǎng)和生長繁殖一、細(xì)菌的營養(yǎng)類型1、自養(yǎng)菌:化能自養(yǎng)菌、光能自養(yǎng)菌2、異養(yǎng)菌:腐生菌、寄生菌所有的病原菌都是異養(yǎng)菌,大部分屬寄生菌。二、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)1、水2、碳源3、氮源:作為菌體成分的原料4、無機(jī)鹽:常用元素(P、S、K、Na、Mg、Ga、Fe)微量元素(Zn、Cu、Mn、鈷)各類無機(jī)鹽的公用:構(gòu)成有機(jī)化合物,成為菌體的成分;作為酶的組成成分,維持酶的活性;參與能量的儲存和轉(zhuǎn)運;調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓;某些元素與細(xì)菌的生長繁殖和致病作用密切相關(guān)。5、生長因子:生長因子是指,某些細(xì)菌細(xì)菌生長所必須的但自身又不能合成,必須由外界供給的物質(zhì)。三、細(xì)菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制1、被動擴(kuò)散:2、主動轉(zhuǎn)運系統(tǒng):依賴于周漿間隙結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)運系統(tǒng);化學(xué)滲透趨勢轉(zhuǎn)運系統(tǒng);基團(tuán)轉(zhuǎn)移。四、影響細(xì)菌生長的環(huán)境因素(簡答)1、營養(yǎng)物質(zhì):水、碳源、氮源、無機(jī)鹽及生長因子為細(xì)菌的代謝及生長繁殖提供必需的原料和充足的能量2、酸堿度(pH):多數(shù)病原菌最適 pH 為 7.2-7.6,而結(jié)核桿菌最適 pH 值為 6.5-6.8,霍亂弧菌最適 pH 值為 8.4-9.2。3、溫度:病原菌最適溫度為 37 度。4、氣體:O2: 根據(jù)細(xì)菌代謝時對氧氣的需要與否分四類: 專性需氧菌 :具有完善的呼吸酶系統(tǒng),需要分子氧作為受氫體以完成需氧呼吸,僅能在有氧環(huán)境下生長。 微需氧菌 :在低氧壓(5%-6%)生長最好。 兼性厭氧菌 :兼有有氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能,在有氧、無氧環(huán)境中均能生長,但以有氧時 生長較好。大多數(shù)病原菌屬于此。 專性厭氧菌 :缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng),只能進(jìn)行無氧發(fā)酵,必須在無氧環(huán)境中生長。CO2:對細(xì)菌生長也很重要,大部分細(xì)菌在代謝中產(chǎn)生的 CO2可滿足需要,個別細(xì)菌初次分離時需人工供給5-10%CO2。5、滲透壓:五、細(xì)菌的生長繁殖1、細(xì)菌個體的生長繁殖:繁殖方式-細(xì)菌以簡單的二分裂方式進(jìn)行無性繁殖。繁殖速度-繁殖一代所需時間(代時)約 20-30min。但少數(shù)細(xì)菌代時較長,如結(jié)核分枝桿菌代時為 18 小時。2、細(xì)菌群體的生長繁殖:遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期 繁殖規(guī)律-生長曲線 遲緩期:細(xì)菌被接種培養(yǎng)基的最初一段時間,主要是適應(yīng)新環(huán)境,同時為分裂繁殖作物質(zhì)準(zhǔn)備,此時細(xì)菌體積比較大,含有豐富的酶和中間代謝產(chǎn)物。對數(shù)期:細(xì)菌分裂繁殖最快的時期,菌數(shù)以幾何級數(shù)增長,研究細(xì)菌的最佳時期。穩(wěn)定期:由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,代謝產(chǎn)物的堆積,繁殖數(shù)與死亡數(shù)幾乎相等。活菌數(shù)保持穩(wěn)定。一些細(xì)菌的芽胞、外毒素和抗生素等代謝產(chǎn)物大多在穩(wěn)定期產(chǎn)生。衰退期:繁殖變慢,死菌數(shù)超過活菌數(shù)。細(xì)菌形態(tài)發(fā)生改變,生理活動趨于停滯。第三節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換一、細(xì)菌的能量代謝細(xì)菌能量代謝活動中主要涉及 ATP 形式的化學(xué)能。細(xì)菌的有機(jī)物分解或無機(jī)物氧化過程中釋放的能量通過底物的磷酸化或氧化磷酸化合成 ATP。生物體能量代謝的基本生化反應(yīng)是生物氧化,其方式包括:加氧、脫氫和托電子反應(yīng),細(xì)菌則以脫氫或氫的傳遞更為常見。發(fā)酵:以有機(jī)物為受氫體的生物氧化。呼吸:以無機(jī)物為受氫體的生物氧化。以分子氧為受氫體的是有氧呼吸,以其他無機(jī)物為受氫體的是厭氧呼吸。病原菌合成細(xì)胞組分和獲得能量的基質(zhì)主要為糖類,通過糖的氧化或酵解釋放能量,并以高能磷酸鍵的形式(ATP/ADP)儲存能量。1、EMP 途徑,又稱糖酵解。大多數(shù)細(xì)菌共有的基本代謝途徑,有些專性厭氧菌產(chǎn)能的唯一途徑。2、磷酸戊糖途徑,又稱一磷酸己糖途徑。為生物合成提供前提和還原能。3、需氧呼吸,需氧菌和兼性厭氧菌進(jìn)行需氧反應(yīng)。4、厭氧呼吸,專性厭氧菌和兼性厭氧菌都能進(jìn)行厭氧呼吸。二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng)合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)上的意義1、熱原質(zhì)(致熱源):是細(xì)菌合成的一種注入人體或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。產(chǎn)生熱致源的細(xì)菌大都為格蘭陰性菌,熱致源即其細(xì)胞壁的脂多糖。 2、毒素及侵襲性酶:外毒素:多數(shù) G+菌和少數(shù) G-菌在生長繁殖過程中釋放菌體外的蛋白質(zhì);內(nèi)毒素:G-菌細(xì)胞壁的脂多糖;外毒素毒性強于內(nèi)毒素。侵襲性酶:某些細(xì)菌產(chǎn)生的,能損傷機(jī)體組織,促使菌體的侵襲和擴(kuò)散,是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。3、色素:水溶性;脂溶性。4、抗生素:某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)??股卮蠖嘤煞啪€菌和真菌產(chǎn)生。5、細(xì)菌素:某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。細(xì)菌素僅對與產(chǎn)生菌有親緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用。6、維生素:第三章 消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全第一節(jié) 消毒滅菌的常用術(shù)語1、滅菌:殺滅生物體上所有微生物的方法。2、消毒:殺死物體上或環(huán)境中的病原 微生物,并不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。3、防腐:防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長繁殖的方法。4、無菌:無菌即不存在活菌,多是滅菌的結(jié)果。無菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。5、清潔:減少微生物數(shù)量的過程。第二節(jié) 消毒滅菌的方法一、物理消毒滅菌法:熱力、輻射、濾過、干燥和低溫等。熱力滅菌法:分為干熱滅菌和濕熱滅菌1、干熱滅菌法:一般細(xì)菌繁殖體在干燥狀態(tài)下,80-100經(jīng) 1 小時可被殺死,芽胞則需要更高溫度才能被殺死。 焚燒:廢棄物、尸體灼燒:接種環(huán)、試管口干烤:(160170,2h)利用干烤箱滅菌,一般加熱至 171經(jīng) 1h 或 160 2h 或 121 16h。適用于高溫下不變質(zhì)、不損害、不蒸發(fā)的器皿(如:玻璃器皿) 。紅外線(0.71000um 波長的電磁波):醫(yī)療器械2、濕熱滅菌法:最常用,在相同溫度下濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果更好,因為:濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固變性;濕熱的穿透力比干熱大;濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)存在。巴氏消毒法:用較低的溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物,以保持物品中所需的不耐熱成分不被破壞的消毒方法(61.1-62.8 30min 或 71.715-30s,主要用于牛乳消毒和酒類) 。煮沸法(100 ,5min)食具、注射器等消毒流動蒸汽消毒法(100 15-30min)間歇蒸汽滅菌法(100 5-30min,37 24h3 天)高壓蒸汽滅菌法:*壓力103.4KPa(1.05Kg/cm 2)*溫度121.3 *時間15-20min*效果殺滅包括芽孢在內(nèi)所有微生物*應(yīng)用所有耐高溫、高壓、耐濕的物品輻射殺菌法:紫外線:波長 240300nm 的紫外線具有殺菌作用,其中以 265266nm 最強。紫外線殺菌機(jī)理是干擾細(xì)菌DNA 合成,導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡。手術(shù)室空氣消毒常采用紫外線消毒電離輻射:高速電子、X 射線、 射線微波:波長為 11000mm 的電磁波,不能穿透金屬表面。微波主要靠熱效應(yīng)發(fā)揮作用,且必須在有一定含水量條件下才能顯示出來。濾過殺菌法干燥殺菌法低溫殺菌法二、化學(xué)消毒滅菌法原理(填空):破壞菌體蛋白;干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝;改變細(xì)胞膜的通透性。第四節(jié) 影響消毒滅菌效果的因素微生物的種類微生物對消毒滅菌的敏感性高低排序大致如下:真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無包膜病毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。微生物的物理狀態(tài)微生物的數(shù)量消毒劑的性質(zhì)、濃度及作用時間溫度:消毒劑的殺菌作用速度隨溫宿升高而加快。酸堿度有機(jī)物第五節(jié) 病原微生物實驗室生物安全一、病原微生物的分類第一類:能夠引起人類或動物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類:能夠引起人類或動物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或間接在人與人、動物與動物、動物與人間傳播的微生物。第三類:能夠引起人類或動物疾病,但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險有限,實驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類:通常情況下不會引起人類或動物疾病的微生物。二、病原微生物實驗室的分級:根據(jù)生物安全防護(hù)水平(BSL)及實驗室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)一級:二級:三級:對人體、植物、動物或環(huán)境具有高度危險性,主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病,或?qū)游镏参锘颦h(huán)境具有高度危險的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級:對人體、植物、動物或環(huán)境具有高度危險性,主要通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。第四章 噬菌體噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒;具有病毒的基本特性:個體微小,可以通過細(xì)菌濾器;無細(xì)胞結(jié)構(gòu),主要由衣殼(蛋白質(zhì))和核酸組成;只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,是一種專性胞內(nèi)寄生的微生物。噬菌體分布極廣。第一節(jié) 噬菌體的生物學(xué)性狀1、形態(tài)與結(jié)構(gòu):噬菌體很小,在光鏡下看不見,需用電鏡觀察。不同的噬菌體在電鏡下有三種形態(tài):蝌蚪形、微球形和絲形。大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形,由頭部和尾部兩部分組成。2、結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成:噬菌體頭部尾部:蛋白質(zhì) 與細(xì)菌(受體)接觸的部位核心:核酸(DNA或RNA) ,多位 DNA線狀雙鏈蛋白衣殼:蛋白質(zhì)呈20面體3、抗原性:噬菌體具有抗原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。4、抵抗力:噬菌體對理化因素及多數(shù)化學(xué)消毒劑的抵抗力比一般細(xì)菌的繁殖體強,75 30min 滅活。噬菌體能耐受低溫和冰凍,但對紫外線和 X 射線敏感。第二節(jié) 毒性噬菌體1、噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果:毒性噬菌體(virulent phage):能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生許多子代噬菌體,并最終裂解細(xì)菌,建立溶菌周期。溫和噬菌體(temperate phage):噬菌體基因與宿主染色體整合,成為前噬菌體,細(xì)菌變成溶原性菌,不產(chǎn)生子代噬菌體,但噬菌體 DNA 能隨細(xì)菌 DNA 復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳代,建立溶原狀態(tài)。 2、毒性噬菌體毒性噬菌體在宿主菌內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖,增殖過程包括:吸附、穿入、生物合成、成熟和釋放。液體培養(yǎng)基噬菌現(xiàn)象可使渾濁菌液變得澄清。固體培養(yǎng)基若用適量的噬菌體和宿主菌液混合后接種培養(yǎng),培養(yǎng)基表面可有透亮的溶菌空斑出現(xiàn)。一個空斑系由一個噬菌體復(fù)制增殖并裂解細(xì)菌后形成,稱為噬斑(plaque) ,不同噬菌體噬斑的形態(tài)與大小不盡相同。若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋,通過噬斑計數(shù),可測定一定體積內(nèi)的噬斑形成單位(plaque forming units,pfu)數(shù)目,即噬菌體的數(shù)目。第三節(jié) 溫和噬菌體前噬菌體(prophage)溫和噬菌體的基因組能與宿主菌基因組整合,并隨細(xì)菌分裂傳至子代細(xì)菌的基因組中,不引起細(xì)菌裂解。整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱為前噬菌體(prophage) 。帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenic conversion):某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變。例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理 。第五章 細(xì)菌的遺傳與變異遺傳(heredity):使微生物的性狀保持相對穩(wěn)定,子代與親代生物學(xué)的性狀基本相同,且代代相傳。變異(variation) : 在一定條件下,子代與親代之間以及子代與子代之間的生物學(xué)性狀出現(xiàn)的差異,有利于物種的進(jìn)化?;蛐停╣enotype):細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。表型(phenotype):基因表現(xiàn)出的各種性狀。遺傳性變異:是細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,故又稱基因型變異。常發(fā)生于個別的細(xì)菌,不受環(huán)境因素的影響,變異發(fā)生后是不可逆的,產(chǎn)生的新性狀可穩(wěn)定地遺傳給后代。非遺傳性變異:細(xì)菌在一定的環(huán)境條件影響下產(chǎn)生的變異,其基因結(jié)構(gòu)未改變,稱為表型變異。易受到環(huán)境因素的影響,凡在此環(huán)境因素作用下的所有細(xì)菌都出現(xiàn)變異,而且當(dāng)環(huán)境中的影響因素去除后,變異的性狀又可復(fù)原,表型變異不能遺傳。第一節(jié) 細(xì)菌的遺傳物質(zhì)DNA 的結(jié)構(gòu)與功能:結(jié)構(gòu)兩條互相平行而方向相反的多核苷酸鏈功能儲存、復(fù)制和傳遞遺傳信息復(fù)制半保留復(fù)制特點復(fù)制中易發(fā)生錯誤基因突變蛋白合成分子生物學(xué)中心法則(DNA-RNA-蛋白質(zhì))基因與基因的轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)基因編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)基因結(jié)構(gòu)非結(jié)構(gòu)基因編碼功能蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)錄遺傳信息的翻譯第二節(jié) 細(xì)菌的遺傳與變異一 、染色體(chromosome)一條環(huán)狀雙螺旋 DNA 長鏈,按一定構(gòu)型反復(fù)回旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);缺乏組蛋白,無核膜包裹;約含有 5000 個基因;二、質(zhì)粒是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì),是閉合環(huán)狀的雙鏈 DNA。1、質(zhì)粒的特征 :質(zhì)粒具有自我復(fù)制的能力。質(zhì)粒 DNA 所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征。質(zhì)??勺孕衼G失與消除。質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。質(zhì)??煞譃橄嗳菪耘c不相容性兩種。2、質(zhì)粒的分類(1)根據(jù)質(zhì)粒能否通過細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞接合性質(zhì)粒非接合性質(zhì)粒(2)根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)拷貝數(shù)多少嚴(yán)緊型質(zhì)粒松弛型質(zhì)粒(3)根據(jù)相容性相容性幾種質(zhì)粒同時共存于同一菌體內(nèi)不相容性不能同時共存*可借此對質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群。(4)根據(jù)所編碼的生物學(xué)性狀質(zhì)粒基因可編碼多種重要的生物學(xué)性狀:致育質(zhì)粒(fertility plasmid、F 質(zhì)粒)編碼性菌毛,介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞;耐藥性質(zhì)粒(resistance plasmid、R 質(zhì)粒)編碼細(xì)菌對抗菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性。分兩類,一是接合性耐藥質(zhì)粒(R 質(zhì)粒) ,另一是非接合耐藥性質(zhì)粒(r 質(zhì)粒) ;毒力質(zhì)粒(Vi 質(zhì)粒) 編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子;細(xì)菌素質(zhì)粒:編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素;代謝質(zhì)粒:編碼產(chǎn)生相關(guān)的代謝酶。 三、轉(zhuǎn)位因子轉(zhuǎn)位因子(transposable element):是一類在細(xì)菌染色體、質(zhì)?;蚴删w之間可自行移動的一段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的核苷酸序列片段,又稱移動基因。轉(zhuǎn)座子有二類:插入序列(insertion sequence,IS):最小,不超過 2kb,只攜帶與轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因。轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn):長度一般超過 2kb,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其他基因(如耐藥性、毒素基因等) 。四、整合子定位:細(xì)菌染色體、質(zhì)?;蜣D(zhuǎn)座子上?;窘Y(jié)構(gòu):兩端為保守末端( attI,59-be) ,中間為可變區(qū)(orf 1) ,含一個或多個基因盒。功能元件:重組位點( attI,59-be) ;整合酶基因( intI) ;啟動子(Pc) 。功能:通過轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒,使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播。第三
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