藥物分析10ppt課件

藥物分析,第十章: 巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析,一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì),環(huán)狀丙二酰脲類化合物,(一)基本結(jié)構(gòu),典型藥物,(Phenylbarbital),(barbital),(Secobarbital),戊巴比妥,(Pentobarbital),2.水解反應(yīng),巴比妥鈉注射液不能預(yù)先配制進(jìn)行加熱滅菌，須制成粉針劑，臨用時溶解。,3.與金屬離子反應(yīng),a.與銀鹽的反應(yīng),巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán),在碳酸鈉溶液中生成鈉鹽而溶解,因而可與硝酸銀反應(yīng),白色難溶性二銀鹽,3.與金屬離子反應(yīng),b.與銅鹽的反應(yīng),巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成烯醇式異構(gòu)體,可與吡啶試劑反應(yīng)形成穩(wěn)定的配位化合物,產(chǎn)生類似雙縮脲的呈色反應(yīng),3.與金屬離子反應(yīng),b.與銅鹽的反應(yīng),巴比妥類 銅吡啶,顯色,巴比妥類紫色或紫色沉淀,硫巴比妥類綠色,水,吡啶,部分離子化,有色配位化合物,與銅鹽的反應(yīng),c.與鈷鹽的反應(yīng),Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2,異丙胺,無水甲醇或乙醇,d.與汞鹽的反應(yīng),巴比妥類藥物+汞鹽白色（可溶于氨試液）,4.香草醛反應(yīng)(Vanillin),戊巴比妥鑒別： 取戊巴比妥10mg，加香草醛約10mg和硫酸2ml，混合后在水浴上加熱2min，顯棕紅色。放冷，小心加入乙醇5ml，即顯紫色并變成藍(lán)色。,5.紫外吸收光譜特征,240nm,255nm,A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離) B.pH9.9緩沖液(一級電離) C.pH13NaOH液(1mol/L,二級電離),1,5,5-三取代巴比妥類藥物不存在二級電離，最大吸收波長不變。,硫代巴比妥的紫外吸收光譜 A.HCl液(0.1mol/L) B.NaOH液(0.1mol/L),6.薄層色譜行為特征,7.顯微結(jié)晶,藥物本身晶形,反應(yīng)產(chǎn)物晶形,二、鑒別試驗(yàn),(一)丙二酰脲類的鑒別試驗(yàn),取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2min，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。 取供試品約50mg，加吡啶溶液(110)5 ml，溶解后，加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。,銀鹽反應(yīng),銅鹽反應(yīng),(二)測定熔點(diǎn),巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物 過濾 洗滌 干燥 測熔點(diǎn),(三)利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn),利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)(司可巴比妥鈉) 利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)(苯巴比妥鈉) 硫色素反應(yīng)(硫代巴比妥類),1.司可巴比妥鈉的鑒別,I2,褪色,Br2,KMnO4,2.苯巴比妥的鑒別,a.硝化反應(yīng),b.硫酸-亞硝酸鈉反應(yīng),苯巴比妥與NaNO2-H2SO4反應(yīng)生成橙黃色橙紅色,c.甲醛-硫酸反應(yīng),苯巴比妥與甲醛-H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán),區(qū)分苯巴比妥與不含芳環(huán)取代的巴比妥類藥物。,3.硫代巴比妥類的鑒別硫色素反應(yīng),硫代巴比妥類與巴比妥類的區(qū)別,三、特殊雜質(zhì)試驗(yàn),(一)苯巴比妥,1.酸度,中間體乙?；煌耆珪r，與尿素縮合產(chǎn)生的雜質(zhì),苯基丙二酰脲,酸性較強(qiáng),檢查方法 取本品0.20g，加水10ml，煮沸攪拌1min，放冷，濾過后，取濾液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得顯紅色,2.乙醇溶液澄清度,檢查中間體、等乙醇中不溶物。,取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液應(yīng)澄清,3.中性或堿性物質(zhì)(提取重量法,溶解度差異),副產(chǎn)物：2-苯基丁酰(胺)脲或分解產(chǎn)物 不溶于NaOH T.S.而溶于醚,(一) 銀量法 (Argentometry) 巴比妥類藥物在適當(dāng)?shù)膲A性溶液中,易與重金屬離子反應(yīng),并可定量地形成鹽,因而可用銀量法進(jìn)行滴定. 在滴定過程中,可以通過生成沉淀進(jìn)產(chǎn)生的混濁指示滴定終點(diǎn).但容易出現(xiàn)誤差. 改用甲醇及3%的無水碳酸鈉溶劑系統(tǒng),采用Ag-玻璃電極系統(tǒng)電位法指示終點(diǎn),方法改善,為chp2010所用.,四、含量測定,指示電極 (Ag),參比電極 (玻璃/甘汞),(二) 溴量法:溴過量,再用KI反應(yīng),再用硫代硫酸鈉滴定.,司可巴比妥鈉測定,取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1min，在暗處靜置15min后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.05mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相當(dāng)于13.01mg的C12H17N2NaO3。,(三) 酸堿滴定法 (Acid-base titration method),水-乙醇混合溶劑中滴定 膠束水溶液中滴定 非水滴定法,1.水-乙醇混合溶液,2.膠束水溶液,正膠束,溴化十六烷基三甲基芐銨 Cetyltrimethylbenzylammonium bromide，CTMA 氯化四癸基二甲基芐銨 Tetradecyldimethylbenzylammonium chloride，TDBA,3.非水滴定法,溶 劑：二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷、無水乙醇、苯、吡啶、甲醇-苯、乙醇-三氯甲烷 滴定劑：甲醇鈉（鉀）、氫氧化四丁基胺 指示劑：麝香草酚藍(lán) ,也可以用電位法指示終點(diǎn),(四) 紫外分光光度法,直接測定的UV法 提取分離后的UV法,注射用硫噴妥鈉含量測定,取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量(約相當(dāng)于硫噴妥鈉0.25g)，置500ml量瓶中，搖勻，量取此溶液用0.4% NaOH溶液定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液； 另取硫噴妥對照品，精密稱定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液。 用1cm吸收池，于304nm波長處分別測定吸收度，以0.4% NaOH溶液作空白。根據(jù)每支的平均裝量計(jì)算。每1mg的硫噴妥鈉相當(dāng)于1.091mg的C11H19N2NaO2S,USP24法測定苯巴比妥含量,巴比妥類藥物適量，加水使其溶解后，加酸酸化，用三氯甲烷提取巴比妥類藥物，三氯甲烷提取液加入pH7.27.5的緩沖液，振搖，分離棄去水相緩沖液層，再用氫氧化鈉自三氯甲烷中提取巴比妥類藥物，調(diào)節(jié)堿提取液的pH值，然后選用相應(yīng)的吸收波長進(jìn)行測定。,提取后的UV分光光度法,消除干擾,第二節(jié) 苯并二氮雜卓類藥物的分析,地西泮 (diazepam),七元亞胺內(nèi)酰胺環(huán),奧普唑侖,奧沙西泮 (Oxazepam),氯氮卓 (Chlordiazepoxide),理化性質(zhì),通常為白色或微黃色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；具有一定的熔點(diǎn)。 一般不溶或極微溶于水，溶于丙酮或三氯甲烷等有機(jī)溶劑。 具有弱堿性；水解性；UV吸收特性。,一、鑒別試驗(yàn),(一) 化學(xué)鑒別試驗(yàn) 1.沉淀反應(yīng) 氯氮卓 橙紅色沉淀 阿普唑侖 KBiI4 鹽酸氟西泮 也生成橙紅色沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀顏色變深， 因此可以相互區(qū)別。,阿普唑侖 + 遇硅鎢酸 白色沉淀，藥典中也用于鑒別。,2.水解后呈芳伯胺反應(yīng) 氯氮卓和奧沙西泮的鹽酸溶液(12)，緩緩加熱煮沸，放冷，加亞硝酸鈉和堿性-萘酚試液，生成橙紅色沉淀，后者放置后顏色變暗。,3.分解產(chǎn)物的反應(yīng) 有機(jī)氯化合物，氧瓶燃燒法破壞，生成HCl，以5%氫氧化鈉溶液吸收，硝酸酸化，顯氯化物反應(yīng)。,4.硫酸熒光反應(yīng)： 苯并二氮雜卓類藥物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光(365nm)下顯不同的顏色。,(二) UV,(三) TLC,硅膠G薄層板，苯丙酮(3:2)為展開劑，稀硫酸噴霧，105干燥30min，紫外燈下檢視熒光斑點(diǎn),*s, m, w分別表示熒光的強(qiáng)、中、弱,二、有關(guān)物質(zhì)檢查,TLC HPLC GC,三、 含量測定,非水溶液滴定法 非水酸量法 非水堿量法 紫外分光光度法 對照品法 吸收系數(shù)法 高效液相色譜法,一、非水溶液滴定法,當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。,游離堿類鹽,被置換出的弱酸,供試品,+,冰醋酸,10ml30ml,若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml,結(jié) 果,HClO4滴定,空白試驗(yàn)校正,指示劑,堿性溶液pKb10，冰醋酸中滴定突躍不明顯，需加入醋酐，使堿性增強(qiáng)，突躍更明顯,應(yīng)用實(shí)例 游離弱堿性藥物：地西泮、尼克剎米或氯氮卓，基于氮原子的弱堿性可以結(jié)晶紫為指示劑，非水溶液直