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專(zhuān)題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用,考點(diǎn)1、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),一、培養(yǎng)基的分類(lèi),例:加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌;伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌,選擇培養(yǎng)基的應(yīng)用,加入青霉素的培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌 加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基分離金黃色葡萄球菌 不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基分離固氮菌 不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物 加入氨基喋呤的培養(yǎng)基分離雜交瘤細(xì)胞,二、微生物的營(yíng)養(yǎng)要素,1、有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是 A. 是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源 B. 凡碳源都能提供能量 C. 除水以外的無(wú)機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽 D. 無(wú)機(jī)氮源也能提供能量,D,2、如下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方,請(qǐng)回答: (1)依物理性質(zhì),該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。依用途劃分,則屬于 培養(yǎng)基。 (2)根據(jù)培養(yǎng)基原料,所培養(yǎng)微生物的同化作用類(lèi)型是 ,培養(yǎng)的微生物可能是 。 (3)培養(yǎng)基中的碳源是 。生長(zhǎng)因子是 。 (4)如何要鑒別自來(lái)水中的大腸桿菌是否超標(biāo),至少要加入 和 ,除去 。,選擇,液體,異養(yǎng)型,酵母菌、霉菌,CH2O,無(wú),瓊脂,伊紅美藍(lán),青霉素,三、無(wú)菌技術(shù),灼燒滅菌,干熱滅菌,高壓蒸汽滅菌,160170 12h,100kPa 121 15-30min,接種環(huán)的滅菌,培養(yǎng)皿、玻璃棒的滅菌,培養(yǎng)基、無(wú)菌水的滅菌,四、培養(yǎng)基的制備過(guò)程,稱(chēng)量,溶化,滅菌,倒平板,計(jì)算,考點(diǎn)2、微生物的分離操作以純化大腸桿菌為例,一、菌落與菌苔,單個(gè)或少數(shù)同種細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí),就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見(jiàn)的,具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,叫做菌落。,二、純化大腸桿菌的方法平板劃線(xiàn)法,二、純化大腸桿菌的方法稀釋涂布平板法法,3、研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示,為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 A.培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源 B.如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量,常采用稀釋涂布平板法 C.若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn),則其中應(yīng)以苯酚作為惟一碳源 D.使用平板劃線(xiàn)法可以在上獲得單菌落,C,4、微生物平板劃線(xiàn)示意圖。劃線(xiàn)的順序?yàn)?2345。下列操作方法正確的是 A.只有操作前將接種環(huán)放在火焰旁灼燒滅菌 B.劃線(xiàn)操作需在火焰上進(jìn)行 C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落 D.在12345區(qū)域中畫(huà)線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌,D,(1)鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法:在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基加入 指示劑,指示劑若變紅色,說(shuō)明該菌種分解尿素。 (2)鑒定纖維素分解菌的方法:利用 染色法,如果培養(yǎng)基中出現(xiàn) ,則說(shuō)明含有纖維素分解菌。,考點(diǎn)3、微生物的鑒定與數(shù)目測(cè)定,尿素,酚紅,剛果紅,透明圈,附加:纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括C1、CX和葡萄糖苷酶。,1、微生物的鑒定原理,稀釋涂布平板法,5、請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題: (1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí),通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊乃畼佑猛坎计鞣謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱(chēng)為 。下面四種菌落分布圖中,不可能由用該方法得到的是 。 A B C D (2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組? 。為什么? 。,稀釋涂布平板法,D,需要,判定培養(yǎng)基是否被雜菌污染,請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題: (3)如分別取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57,則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為 。 (4)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管,應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌?,5.6108個(gè),通過(guò)無(wú)菌操作,向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣,再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿(mǎn),塞上
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