(好資料)3_急性中毒性腎功能不全

三、急性中毒性腎功能不全【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?復(fù)制急性中毒性腎功能不全的動(dòng)物模型。2觀察急性腎功能不全時(shí)動(dòng)物血?dú)?、酸堿、血尿素氮、血清鉀及尿的變化，分析其發(fā)生機(jī)制?！緦?shí)驗(yàn)原理】采用腎毒物重金屬HgCl2溶液造成家兔急性腎小管壞死，復(fù)制急性腎功能不全的動(dòng)物模型，通過(guò)觀察動(dòng)物的血?dú)狻⑺釅A、血尿素氮、血清鉀及尿的變化，學(xué)習(xí)急性腎衰時(shí)內(nèi)環(huán)境的變化?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】家兔，體重1.52.5kg。【實(shí)驗(yàn)藥品與器材】1%HgCl2溶液，3%戊巴比妥鈉溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液，1%普魯卡因溶液，生理鹽水，1%肝素生理鹽水溶液；兔臺(tái)，手術(shù)器械，1ml和5ml注射器，試管，滴管，漏斗，吸管，試管夾，酒精燈，試管架，頸動(dòng)脈插管，血?dú)夥治鰞x，生化分析儀，離心機(jī)，光電比色計(jì)，水浴鍋?！居^察指標(biāo)】全血：血?dú)夥治鰞x測(cè)定pH值、PaCO2、HCO3-、K+、Na+和Cl-；血清：生化分析儀測(cè)定BUN；尿：尿量、尿蛋白定性和鏡檢；腎：大體、剖面?！緦?shí)驗(yàn)方法與步驟】1取家兔兩只，一只為正常對(duì)照，一只為中毒實(shí)驗(yàn)兔。于實(shí)驗(yàn)前一天稱(chēng)重后，實(shí)驗(yàn)兔皮下或肌肉注射1%HgCl2（按1.51.7ml/kg，一次注射），造成急性中毒性腎功能不全模型，對(duì)照兔則在相同部位注射同量的生理鹽水，作為對(duì)照。將兩只兔籠均置于大漏斗上，收集尿液,測(cè)量24h尿量。2實(shí)驗(yàn)開(kāi)始，家兔稱(chēng)重后，20%氨基甲酸乙酯溶液(0.51g/kg體重)或3%戊巴比妥鈉（30mg/kg體重）耳緣靜脈注入麻醉后，仰臥固定于兔臺(tái)。下腹部剪毛，在恥骨聯(lián)合上1.5cm處作長(zhǎng)約4cm的正中切口，分離皮下組織，沿腹白線切開(kāi)腹膜，暴露膀胱，穿刺取出全部尿液，供尿蛋白定性和尿液鏡檢。3頸部正中切口，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，頸動(dòng)脈插管內(nèi)注入肝素生理鹽水溶液，進(jìn)行頸動(dòng)脈插管。4抽取0.5ml動(dòng)脈血作血?dú)夥治?，?ml動(dòng)脈血（滴入肝素?cái)?shù)滴后）離心（1500轉(zhuǎn)/分，510分鐘），取血清供尿素氮測(cè)定用。5尿常規(guī)檢查：(1)將尿液1500轉(zhuǎn)/分離心510分鐘。(2)顯微鏡檢查 取尿沉渣，涂在玻片上，觀察有無(wú)異常成分（細(xì)胞和管型）。(3)尿蛋白定性檢查 取大試管盛尿液，傾斜試管于酒精燈上，將試管中的尿加熱至沸騰，觀察有無(wú)混濁，加數(shù)滴醋酸，再加熱至沸騰，混濁不退為蛋白陽(yáng)性，按其混濁程度以-、+、+、+、+表示之?！?”表示尿液清晰無(wú)混濁“+”表示尿液出現(xiàn)輕度白色混濁（含蛋白0.010.05g%）“+”表示尿液稀薄乳樣混濁（含蛋白質(zhì)0.050.2g%）“+”表示尿液乳濁或有少量絮片存在（含蛋白0.20.5g%）“+”表示尿液出現(xiàn)絮狀混濁 (含蛋白質(zhì)0.5g%)如加醋酸后混濁消失，是因加醋酸可除去磷酸鹽或碳酸鹽所形成的白色混濁。6血清尿素氮的測(cè)定取三只試管分別標(biāo)號(hào)后按下表操作：試劑(ml)1（空白管）2（標(biāo)準(zhǔn)管）3（樣品管）尿素氮試劑505050二乙酰單肟試劑050505蒸 餾 水01尿素標(biāo)準(zhǔn)液011：5稀釋的血清01將上述各管充分搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，用自來(lái)水冷卻3分鐘，在540nm波長(zhǎng)下比色，記錄標(biāo)準(zhǔn)管的光密度讀數(shù)（D標(biāo)）及樣品管的光密度讀數(shù)（D樣）。計(jì)算每100ml血清中尿素氮的含量(mg)=0.002=10=血清尿素氮(mg%) （公式12-1）原理：血清尿素在強(qiáng)酸條件下與二乙酰單肟和氨硫脲煮沸，生成紅色復(fù)合物（二嗪衍生物）7形態(tài)學(xué)觀察：將對(duì)照及中毒家兔一并處死，取出腎臟，稱(chēng)重，計(jì)算腎重與體重之比。觀察并比較2只家兔腎臟的大體形態(tài)、顏色、光澤、條紋等。組織切片示教：于顯微鏡下觀察皮質(zhì)腎小管上皮有無(wú)明顯的變化、壞死、脫落；管腔有無(wú)蛋白、紅細(xì)胞、管型等。【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析】 全血 血清 尿 腎pH值 paCO2 HCO3- K+Na+K+ BUN 尿量 蛋白 鏡檢 大體剖面12【思考題】1根據(jù)什么判斷急性腎功能不全模型復(fù)制成功？2各指標(biāo)變化的機(jī)制是什么？附錄：血清尿素氮測(cè)定試劑的配制12%二乙酰單肟試劑 稱(chēng)取二乙酰單肟2g，蒸餾水溶解并加至100ml。2尿素氮試劑 取濃H2SO444ml，85%H3PO466ml，溶于100ml蒸餾水中，冷至室溫依次加硫氨脲50mg，溶解后再加硫酸鎘1.62g(3CdSO4.8H2O)或2.0 g(3CdSO4.6H2O)，溶解后加蒸餾水至1升，存冰箱，可保存6月。3尿素氮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(20mg%) 精確稱(chēng)取尿素4