實驗四動物細胞線粒體的超活染色與油鏡觀察.ppt_第1頁
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文檔簡介

實驗四動物細胞線粒體的超活染色與油鏡觀察,一.實驗原理活體染色是指對生活有機體的細胞或組織能著色但又無毒害的一種染色方法。它的目的是顯示生活細胞內(nèi)的某些結(jié)構(gòu)，而不影響細胞的生命活動和產(chǎn)生任何物理、化學變化以致引起細胞的死亡。線粒體是細胞進行呼吸作用的場所，其形態(tài)和數(shù)量隨物種、組織器官和生理狀態(tài)的不同而發(fā)生變化。詹納斯綠B可專一性地對線粒體進行超活染色，這是由于線粒體內(nèi)的細胞色素氧化酶系的作用，使染料始終保持氧化狀態(tài)(即有色狀態(tài))，呈藍綠色；而線粒體周圍的細胞質(zhì)中，這些染料被還原為無色的色基(即無色狀態(tài))。二.試劑與器械1.器材:顯微鏡、恒溫水浴鍋、解剖盤、剪刀、鑷子、雙面刀片、解剖盤載玻片、凹面載玻片、蓋玻片、表面皿、吸管、牙簽、吸水紙。2.試劑：Ringer溶液、10%中性紅溶液、1%詹納斯綠B溶液,三實驗步驟（一）線粒體的超活染色取清潔載玻片放在37恒溫水浴鍋的金屬板上，滴2滴1/5000詹納斯綠B染液。實驗者用牙簽寬頭在自己口腔頰粘膜處稍用力刮取上皮細胞，將刮下的粘液狀物放大載玻片的染液滴中，染色10l5min(注意不可使染液干燥，必要時可再加滴染液)，蓋上蓋玻片，用吸水紙吸去四周溢出的染液，置顯微鏡下觀察。在低倍鏡下，選擇平展的口腔上皮細胞，換高倍鏡或油鏡進行觀察?？梢姳馄綘钌掀ぜ毎暮酥車|(zhì)中，分布著一些被染或藍綠色的顆粒狀或短棒狀的結(jié)構(gòu)，即是線粒體。（二）油鏡的觀察操作1.把鏡筒向上提升約15cm(有的是載物臺向下降15cm)，再把油鏡轉(zhuǎn)到工作位置。,2.在聚光器和蓋玻片上所要觀察的位置各滴一小滴香柏油或石蠟油，一邊從側(cè)面觀察油鏡頭，一邊細心擰動粗調(diào)焦螺旋，使油鏡頭的前端與油滴接觸，再慢慢下降油鏡，使其前端接近蓋玻片為止，最后，一邊觀察視野中的圖像，一邊擰動細調(diào)焦螺旋，使鏡筒稍為上下升降看清標本。3.觀察完畢后，提升物鏡約lcm，把油鏡轉(zhuǎn)離光軸，及時做清潔工作。油鏡先用干的擦鏡紙擦1一2次，把部分油去掉，再用清潔劑(70%乙醚+30%無水乙醇)或二甲苯滴濕的擦鏡紙擦2次，最后用于擦鏡紙擦1次。擦拭要小心，動作要輕，聚光器上的油也用同樣方法處理。,四.注意事項應稍用力刮取口腔頰粘膜處上皮細胞，否則無活細胞染色不能成功。五.實驗結(jié)果可見扁平狀上皮細胞的核周圍胞質(zhì)中，分布著一些被染或藍綠色的顆粒狀

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