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日本食品微生物檢測方法1、細(xì)菌總數(shù)檢查方法操作步驟: 平板計(jì)數(shù)瓊脂混釋法，適用于類產(chǎn)品。調(diào)制樣液 25g樣品+225ml滅菌生理鹽水,均質(zhì)混勻 樣液接種 10、100倍稀釋液分別向兩個(gè)空培皿中注入1ml 混 釋 分別向兩平皿中注入12-15 ml平板計(jì)數(shù)瓊脂，混釋后，將培養(yǎng)基表面干燥 培 養(yǎng) 將培皿反倒過來，351培養(yǎng)48hr 計(jì) 數(shù) 判定 特別是稀釋度低的平皿，微生物的菌落和食品的碎渣很難區(qū)分，一般以食品產(chǎn)生的碎渣沒光澤，不夠光滑等來識別。 產(chǎn)生30-300個(gè)菌落，每個(gè)稀釋度的培養(yǎng)皿中的全部菌落數(shù)用以計(jì)數(shù)，取兩個(gè)的平均值來表示 以最低稀釋度，菌落發(fā)育不到30個(gè)以上的時(shí)候也同樣要將菌落數(shù)計(jì)算出來，取其平均值作為結(jié)果 以最高稀釋度，菌落數(shù)可以數(shù)到300個(gè)以上的時(shí)候?qū)⑵矫髣澐殖?/21/8（等份），數(shù)出其中1個(gè)格子里的菌落數(shù)再乘以倍數(shù)（即分?jǐn)?shù)）就可以算出來。2、大腸菌群檢驗(yàn)方法去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基混釋培養(yǎng)法，適用于類產(chǎn)品。 推定檢驗(yàn)操作順序調(diào)制樣液 25g樣品+225ml滅菌生理鹽水,均質(zhì)混勻 樣液接種 100倍稀釋液分別向兩個(gè)空培皿中注入1ml 混 釋 分別向兩平皿中注入去氧膽酸鹽瓊脂，混釋后，將培養(yǎng)基表面干燥，重層 培 養(yǎng) 將培皿反倒過來，351培養(yǎng)48hr 推定斷定 發(fā)育出直徑0.5mm以上的亮紅色菌落的時(shí)候，推定為陽性。熟練的話，到該步即可作出判斷，必要時(shí)進(jìn)行以下確認(rèn)確認(rèn)檢驗(yàn)步驟菌線涂抹 用接種針挑取可疑地菌落，在EMB培養(yǎng)基上畫線涂抹培 養(yǎng) 351培養(yǎng)24小時(shí)菌移植 EMB培養(yǎng)基上的定型菌落的一半接種于乳糖肉湯，剩余一半涂抹在平板計(jì)數(shù)瓊脂上培 養(yǎng) 351培養(yǎng)48小時(shí)革蘭氏鑒別菌行芽孢判定 在乳糖肉湯中產(chǎn)氣的菌株是用平板計(jì)數(shù)瓊脂的菌確認(rèn)判定 在EMB培養(yǎng)基上呈金屬光澤暗紫紅色的菌落作為定型菌落，在乳糖肉湯中產(chǎn)氣且革蘭氏染色呈陰性就判為陽性雙倍量BGLG培養(yǎng)基檢驗(yàn)，適用于類產(chǎn)品推定檢驗(yàn)操作順序調(diào)制樣液 25g樣品+225ml滅菌生理鹽水,均質(zhì)混勻樣液接種 取10ml的10倍稀釋液接種于盛10mlBGLB中，分別接種3只管培 養(yǎng) 351培養(yǎng)48小時(shí)斷 定 渾濁產(chǎn)氣則判為陽性確認(rèn)檢驗(yàn)步驟同中3、大腸桿菌的檢驗(yàn)，EC檢驗(yàn)，適用于類產(chǎn)品推定檢驗(yàn)操作順序調(diào)制樣液 25g樣品+225ml滅菌生理鹽水,均質(zhì)混勻 樣液接種 取1ml的10倍稀釋液接種于盛EC管中，分別接種5只管培 養(yǎng) 44.50.2培養(yǎng)24小時(shí)斷 定 渾濁產(chǎn)氣則判為陽性確認(rèn)檢驗(yàn)步驟同大腸菌群的確認(rèn)4、金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)方法甘露醇瓊脂（MS）培養(yǎng)基平板涂抹法，適用于類產(chǎn)品樣液調(diào)制 25g樣品+225ml滅菌生理鹽水,均質(zhì)混勻樣液接種 取10倍稀釋液0.1ml接種于干燥的MS培養(yǎng)基上平板涂抹 用L型玻璃棒涂抹 培 養(yǎng) 431培養(yǎng)24小時(shí)（公定方法351培養(yǎng)48小時(shí)）推定判定 定型菌落，金黃色葡萄球菌在MS板上顯示出卵黃反應(yīng)：首先將培養(yǎng)皿倒過來尋找產(chǎn)生渾濁帶的菌落，其次拿掉培養(yǎng)皿的蓋子，從培養(yǎng)皿的表面將平板向著陽光傾斜看到菌落的時(shí)候，它的周圍確認(rèn)有象月暈一樣的圓形油膜的時(shí)后就判定是陽性?；蛘邲]有圓形的油膜的時(shí)候、只要菌落的周圍有白色的渾濁帶也判定為陽性。熟練的話，到該步即可作出判斷，必要時(shí)進(jìn)行以下確認(rèn) 確定檢查步驟菌移植 將卵黃瓊脂平板上的定性菌落接種于牛心浸湯前培養(yǎng) 351培養(yǎng)18-24小時(shí)菌移植 實(shí)驗(yàn)兔血漿（干燥）按通常的方法溶解、每個(gè)小試管中分別注入0.5ml靜 置 351、4小時(shí)靜置 推定判斷 血漿的凝固或著進(jìn)行纖維蛋白的析出血漿的凝固（將試管倒置看）或著進(jìn)行纖維蛋白的析出，每隔30分鐘的觀察進(jìn)行4小時(shí)，沒有觀到凝固的時(shí)候、就要在第6