高中生物 2.1《微生物的實驗室培養(yǎng)》課件 新人教版選修1.ppt

課題1 微生物的實驗室培養(yǎng) 霉菌 細菌 酵母菌 放線菌 上圖都是一些常見的微生物 微生物是結構簡單 形體微小的單細胞 多細胞或沒有細胞結構的低等生物 與人類關系密切 人工的培養(yǎng)和分離 使得我們更進一步認識微生物 今天我們就來學習如何培養(yǎng)和分離大腸桿菌 1 特點 結構都相當簡單 個體多數(shù)十分微小 通常要用光學顯微鏡或電子顯微鏡才能看到 有的甚至沒有細胞結構 且體內(nèi)一般不含有葉綠素 不能進行光合作用 2 微生物包括五類 病毒細菌放線菌真菌原生動物 培養(yǎng)基 培養(yǎng)液 是由人工方法配制而成的 專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液 固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基 1 培養(yǎng)基的類型 成分區(qū)別 瓊脂 2 不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方 細菌喜葷 霉菌喜素 大腸桿菌配方酵母提取物 0 25g蛋白胨 0 5gnacl 0 5g瓊脂 1g水 50ml 3 培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì) 一般營養(yǎng)物質(zhì)水 碳源 氮源 無機鹽 其他物質(zhì)ph 特殊營養(yǎng)物質(zhì) 例如 生長因子 即細菌生長必需 而自身不能合成的化合物 以及氧氣 二氧化碳 滲透壓等的要求 4 培養(yǎng)基的用途 液體培養(yǎng)基 增菌 工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基 純化 分離 鑒定 活菌計數(shù) 保藏菌種半固體培養(yǎng)基 動力檢測 1 無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止雜菌污染的方法 無菌操作是培養(yǎng)微生物成功的關鍵 1 消毒定義 2 消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別 2 滅菌的定義 是指殺滅病原微生物的方法 是指殺滅或清除環(huán)境中一切微生物 包括芽胞 孢子 的方法 a 灼燒滅菌 3 常用滅菌的方法 b 干熱滅菌 160 170 下加熱1 2h c 高壓蒸氣滅菌 100kpa 121 下維持15 30min 取2個250ml的三角瓶中分別裝入50mllb液體培養(yǎng)基和50mllb固體培養(yǎng)基 剛配好 尚未凝固 加上封口膜 牛皮紙包裝后高壓鍋滅菌15min lb液體培養(yǎng)基 細菌的擴大培養(yǎng)lb固體培養(yǎng)基 細菌的劃線分離 滅菌后的培養(yǎng)基在無菌操作臺上倒入4個培養(yǎng)皿中 倒后立即置于水平位置上 輕輕晃動 使培養(yǎng)基鋪滿平皿底部 待凝 使之形成平面 1 培養(yǎng)基滅菌后 需要冷卻到50 左右時 才能用來倒平板 你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度 答 可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶 感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時 就可以進行倒平板了 2 在倒平板的過程中 如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位 這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎 為什么 答 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生 因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物 將斜面上培養(yǎng)的大腸桿菌菌種接種到滅菌后的液體培養(yǎng)基中 使其在37 搖床培養(yǎng)12小時 注意事項 1 火焰旁從斜面上用接種環(huán)取菌 2 取菌前接種環(huán)要用酒精燈灼燒滅菌 冷卻后方能取菌 3 取菌后封口膜和棉塞復原 1 平板劃線法 1 灼燒接種環(huán) 2 接種環(huán)冷卻后 蘸取帶菌培養(yǎng)物 3 在近火焰處 讓帶菌接種環(huán)在固體培養(yǎng)基上劃線 注意事項 1 接種環(huán)只蘸一次菌液 但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次 2 劃線首尾不能相接 3 劃線后 培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)12 24h 2 3 從上次的末端開始 交叉2 3條線 4 最后的劃線不能與第一區(qū)相連 分離后 一個菌體便會形成一個菌落 這是消除污染雜菌的通用方法 也是用于篩選菌株的最簡便方法之一 2 稀釋涂布平板法 稀釋操作 注意 移液管需要經(jīng)過滅菌 操作時 試管口和移液管離火焰1 2cm處 1 臨時保藏 接種到固體斜面培養(yǎng)基 菌落長成后置于4 冰箱保存 2 長期保存 甘油冷凍管藏法 一 培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 2d后無菌落生長 說明培養(yǎng)基的制備是成功的 否則需要重新制備 實驗操作成果評價 3 二 接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色 形狀 大小基本一致 并符合大腸桿菌菌落的特點 則說明接種操作是符合要求的 如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落 則說明接種過程中 無菌操作還未達到要求 需要分析原因 再次練習 三 是否進行了及時細致的觀察與記錄培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同 及時觀察記錄的同學會發(fā)現(xiàn)這一點 并能觀察到其他一些細微的變化 這一步的要求主要是培養(yǎng)學生良好的科學態(tài)度與習慣 1 關微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中 正確的是 a 是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源b 凡碳源都提供能量c 除水以外的無機物只提供無機鹽d 無機氮源也能提供能量 d 解析 a b選項的表達是不完整的 有的碳源只能是碳源 有的碳源可同時是氮源 有的碳源同時是能源 有的碳源同時是氮源 也是能源 對于c選項 除水以外的無機物種類繁多 功能也多樣 對于d選項 無機氮源提供能量的情況還是存在的 如nh3可為硝化細菌提供能量和氮源 2 下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是 a 防止雜菌污染b 接種前菌種要進行滅菌c 培養(yǎng)基和發(fā)酵設備都必須滅菌d 滅菌必須在接種前 b 退出 解析 發(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種 整個發(fā)酵過程不能混入其他微生物 雜菌 a正確 b錯誤