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文檔簡介
免疫學(xué)復(fù)習(xí)資料2012一、名詞解釋 (英文-中文-翻譯)10*2=20分1、免疫(immunit)是指機體識別自身與非自身的抗原,對自身成份形成天然免疫耐受, 對非自身抗原發(fā)生排斥作用的一種生理功能。2、 免疫學(xué)(immunology ) 是研究免疫系統(tǒng)的機構(gòu)與功能,并通過對其在免疫應(yīng)答過程中所產(chǎn)生的免疫保護與免疫損傷機制的研究,探討有效的免疫措施,實現(xiàn)以防病、治病為目的的一門現(xiàn)代醫(yī)學(xué)學(xué)科。3、 免疫細胞(immunity cell ) 凡參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細胞統(tǒng)稱為免疫細胞。4、 免疫應(yīng)答(Immune response)是指機體免疫系統(tǒng)接受抗原刺激發(fā)生一系列反應(yīng),并以排出或分解該抗原為目的的過程。5、 抗原(antigen)一類能刺激機體免疫系統(tǒng),隨之產(chǎn)生免疫應(yīng)答,包括激發(fā)機體產(chǎn)生特異性抗體,或致敏淋巴細胞,并能與它激發(fā)產(chǎn)生的抗體或致敏淋巴細胞特異性反應(yīng)的物質(zhì)。6、 抗體(antibody) 機體在抗原刺激下形成的一類具有與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的特定結(jié)構(gòu)球蛋白。7、 抗原抗體反應(yīng)(antigen-antibody)是指抗原與相應(yīng)抗體在體內(nèi)或體外發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。可發(fā)生于體內(nèi),也可發(fā)生于體外。8、 帶現(xiàn)象(zone phenomenon)抗原抗體濃度的最適比,稱為等價帶。在等價帶的前后,由于抗體和抗原過量,形成的沉淀物少,上清液中可測出游離的抗體或抗原,這種現(xiàn)象稱為帶現(xiàn)象。當(dāng)抗體過量時稱為前帶(prezone),抗原過量時稱為后帶(postzone).9、魚鉤效應(yīng)(hook effect)雙位點一步法中,當(dāng)待測抗原濃度過高時,過量的抗原可分別同固相抗體和酶標(biāo)記抗體結(jié)合而抑制夾心復(fù)合物的形成,出現(xiàn)鉤狀效應(yīng),顯色降低,嚴(yán)重時可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。10、免疫原(immunogen) 即抗原能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體,又能與抗體在體內(nèi)發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì),因而制備合格免疫原是制備高品質(zhì)抗體的前提條件。11、 免疫佐劑(immunoadjuvant) 先于抗原或與抗原同時注入體內(nèi),可增強機體對該抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)被稱為免疫佐劑,簡稱佐劑(adjuvant),佐劑本身具有免疫原性,也可無免疫原性。12、 抗血清(antiserum)又稱多克隆抗體(PcAb)亦稱免疫血清,用抗原以不同途徑免疫動物,從動物血清中獲取抗體,該類含有抗體的血清稱為抗血清。由于免疫動物的抗原往往具有多種抗原表位,可激活體內(nèi)多個B細胞克隆產(chǎn)生針對抗原多種表位的混合抗體,因而抗血清也稱為多克隆抗體(polycloal antibody,PcAb)。13、 單克隆抗體(McAb)設(shè)法將單個B細胞分離出來加以增值形成一個克隆群落,該B細胞克隆產(chǎn)生出針對單一表位、結(jié)構(gòu)相同、功能均一的抗體,成為單克隆抗體(monoclonal antibody,McAb)14、 凝集反應(yīng)(agglutination reaction)是指細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被可溶性抗原(或抗體)的顆粒性載體與相應(yīng)抗體(或抗原)特異性結(jié)合后,在適當(dāng)電解質(zhì)存在下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。15、 直接凝集反應(yīng)(direct agglutination reaction)在適當(dāng)電解質(zhì)參與下,細菌、螺旋體和紅細胞等顆??乖苯优c相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,稱為直接凝集反應(yīng)。16、 間接凝集反應(yīng)(indirect agglutination)將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體的表面,然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在適宜的電解質(zhì)存在條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象,稱間接凝集反應(yīng)(indirect agglutination)或被動凝集反應(yīng)(passive agglutination)。17、 沉淀反應(yīng)(precipitation reaction)抗原可以是多糖、蛋白質(zhì)、類脂等。同相應(yīng)的抗體比較,抗原的分子小,單位體積內(nèi)含有的抗原量多。在做定量試驗時,為了不使抗原過剩,應(yīng)稀釋抗原,并以抗原的稀釋度作為沉淀反應(yīng)的效價。18、 移植(transplantation)是指將健康細胞、組織或器官從其原部位移植到自體或異體的一定部位、用以替代或補嘗機體所喪失的結(jié)構(gòu)和(或)功能的現(xiàn)代醫(yī)療手段。被移植的細胞、組織或器官稱移植物,提供移植物的個體稱為供體,接受移植物的個體稱為受體或宿主。19、 移植排斥反應(yīng)(tranlplantation refection)是針對移植抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答,從而導(dǎo)致移植物功能喪失或受者機體損害的過程。20、 標(biāo)記免疫分析(analysis of immune markers)用標(biāo)記物標(biāo)記抗體或抗原進行抗原抗體反應(yīng),借以提高免疫學(xué)診斷的敏感性。包括放射免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、免疫熒光技術(shù)。21、超敏反應(yīng)(hypersensitivity)又稱變態(tài)反應(yīng),是指機體再次接受相同抗原刺激后,發(fā)生的以組織細胞損傷或生理功能紊亂為主的特異性免疫應(yīng)答。引起超敏反應(yīng)的抗原稱之為變應(yīng)原(allergen)。22、腫瘤抗原(tumor antigen)在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達的抗原物質(zhì)。腫瘤抗原大多數(shù)存在于腫瘤細胞表面,少數(shù)在細胞質(zhì)和細胞核內(nèi)。而與腫瘤免疫有關(guān)的抗原主要在細胞表面,這類抗原與細胞膜結(jié)合不易脫落,具有一定的免疫原性,可被宿主免疫系統(tǒng)識別。23、 腫瘤特異性抗原(tumor specific antigen,TSA) 腫瘤細胞所特有的抗原,只存在于腫瘤細胞表面,而不存在于正常組織或細胞的大分子物質(zhì)。多為突變基因產(chǎn)物,如突變的ras癌基因產(chǎn)物。曾被稱為腫瘤特異性移植抗原(tumor specific transplantation,TSTA)或腫瘤排斥抗原(tumor rejection antigen,TRA)24、 腫瘤相關(guān)抗原(tumor associated antigen,TAA)非腫瘤細胞所特有的,正常組織或細胞也可表達的抗原物質(zhì),但此類抗原在癌變細胞的表達水平遠遠超過正常細胞。(22-24,三選一)25、 免疫增殖性疾?。╥mmunopro liferative disease)免疫器官、免疫細胞或免疫細胞(主要是淋巴細胞)異常增生所致的一組疾病稱為免疫增殖性疾病。26、 宿主抗移植物反應(yīng)(host versus graft reaction,HVGR)主要是受者T淋巴細胞識別移植抗原,并激活免疫系統(tǒng),產(chǎn)生細胞和體液免疫應(yīng)答,攻擊和破壞移植物。 27、 移植物抗宿主反應(yīng)(graft versus host reaction,GVHR)當(dāng)受者處于免疫無能或免疫抑制狀態(tài)時,移植物內(nèi)含有較多成熟的供者T細胞,通過識別受者抗原而產(chǎn)生攻擊受者的免疫應(yīng)答。常見于骨髓移植、小腸移植及免疫器官移植。28、 自身免疫(autoimmunity)是指機體免疫系統(tǒng)對自身成分(自身Ag)發(fā)生免疫應(yīng)答的現(xiàn)象。29、 自身免疫性疾?。╝utoimmunity disease)由于自身免疫引起自身組織器官損傷而出現(xiàn)的疾病稱為自身免疫病。30、 自身耐受(self tolerance)是指機體免疫系統(tǒng)對自身Ag不發(fā)生免疫應(yīng)答,無免疫排斥的現(xiàn)象。31、免疫應(yīng)答(immune response) 是指機體受抗原刺激后,免疫活性細胞(T、B細胞)識別抗原、自身活化、增值、分化及產(chǎn)生特異性免疫效應(yīng)的過程。32、 化學(xué)發(fā)光劑(chemiluminesent agent)在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物,稱為化學(xué)發(fā)光劑或發(fā)光底物。33、 細胞因子(cytokine)是由機體活化的免疫細胞及某些基質(zhì)細胞分泌的小分子蛋白質(zhì),通過結(jié)合細胞表面的相應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。34、 細胞黏附因子(cell-sdhesion molecules) 是由細胞產(chǎn)生、介導(dǎo)細胞與細胞間或細胞與基質(zhì)間相互接觸和結(jié)合的分子。35、 發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immune analysis)將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立起來的一種新的檢測微量抗原或抗體的新型標(biāo)記免疫分析技術(shù)。36、 抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒作用(ADCC)指表達IgGFc受體的NK細胞、巨噬細胞和中性粒細胞等,通過與已結(jié)合在病毒感染細胞和腫瘤細胞等靶細胞表面的IgG抗體的Fc段結(jié)合,而殺傷這些靶細胞的作用。2、 選擇題 40分1、免疫組織與器官(免疫組織又稱淋巴結(jié)在組織)中樞免疫器官:是免疫細胞產(chǎn)生、分化和成熟的場所。由骨髓、胸腺組成。(禽類法氏囊)外周免疫器官及組織:是免疫應(yīng)答的場所,由淋巴結(jié)、脾臟、扁桃體、粘膜相關(guān)淋巴組織、皮膚相關(guān)淋巴組織等組成。骨髓:B淋巴細胞發(fā)育成熟的場所。胸腺:T淋巴細胞發(fā)育成熟的場所。(粘膜伴隨的淋巴組織扁桃體、闌尾、小腸的派氏集合淋巴結(jié))2、免疫細胞:干細胞系、淋巴細胞、單核吞噬細胞、其他APC(抗原遞呈細胞)、其他吞噬細胞。按免疫細胞在體內(nèi)的作用不同分為三大類:第一類為淋巴細胞,包括能特異性識別抗原,能增殖分化并產(chǎn)生免疫效應(yīng)的T細胞、B細胞和NK細胞;第二類為單核巨噬細胞,包括血液中的單核細胞和組織中的巨噬細胞,它們組成單核巨噬系統(tǒng),在免疫反應(yīng)中起輔佐作用;第三類為參與免疫應(yīng)答的細胞,包括中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和肥大細胞等,它們參與免疫應(yīng)答中的某一環(huán)節(jié)。 3、免疫分子:主要是由一些免疫活性細胞或相關(guān)細胞分泌的蛋白質(zhì)及小分子多肽物質(zhì)組成,它們參與機體的免疫反應(yīng)或免疫調(diào)節(jié)。主要包括免疫球蛋白、補體、細胞因子、細胞粘附分子和人類白細胞分化抗原等。免疫分子 T細胞受體(TCR)、B細胞受體(BCR)、CD分子、粘附分子、MHC、其他 免疫球蛋白、補體分子、細胞因子4、 免疫系統(tǒng)功能:免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視。5、 免疫應(yīng)答分3個階段:識別階段、活化階段、效應(yīng)階段。6、 抗原抗體結(jié)合力范德華力最小,疏水結(jié)合力最大。7、 半抗原(hapten):僅有抗原性而無免疫原性的物質(zhì),如多肽、甾體激素、核苷、某些藥物等小分子物質(zhì)均屬于半抗原,這些小分子物質(zhì)無免疫原性,只有與載體結(jié)合后才具有免疫原性。半抗原+載體=完全抗原8、 凝膠過濾(分子篩):按分子大小將蛋白質(zhì)分離。凝膠是具有三維空間多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。含有各種分子的樣品液緩慢流經(jīng)凝膠柱,大分子物質(zhì)不易進入凝膠微孔中,在凝膠顆粒之間的空隙很快通過,首先被洗脫出來;小分子物質(zhì)進入凝膠的微孔中,反復(fù)洗脫后緩慢流出。9、 半抗原與載體結(jié)合的數(shù)目與免疫原性密切相關(guān),一般認(rèn)為一個載體分子上至少要連接20個以上的半抗原分子,才能有效地刺激免疫動物產(chǎn)生抗體。10、 組織抗原:高速搗碎法、研磨法 細胞抗原:反復(fù)凍融法、超聲破碎法、自溶法、酶處理法、表面活性劑處理法11、抗原純化方法:超速離心法、選擇性沉淀法、凝膠過濾法、離子交換層析法、親和層析法、電泳法等12、純化抗原的鑒定:主要包括含量測定、分子量鑒定、純度鑒定和免疫學(xué)活性鑒定等。13、抗血清的鑒定:抗體特異性、效價、純度、親和力等14、抗血清保存方法:4度保存:可保存三個月或半年 冷凍保存:可保存23年 真空干燥保存:510年,保存時間最長。15、抗體特異性:抗體對相應(yīng)的抗原及結(jié)構(gòu)相似抗原的識別能力。 方法:雙向免疫瓊脂擴散技術(shù)16、?抗血清的制備流程:選擇免疫動物-免疫動物(免疫方法和途徑)-動物采血-分離血清17、最常應(yīng)用于動物的佐劑是弗氏佐劑:分為弗氏不完全佐劑:油劑+氧化劑弗氏完全佐劑:弗氏不完全佐劑+卡介苗18、佐劑的作用機制:改變抗原的物理性狀,延緩抗原降解和排除,從而更有效地刺激免疫系統(tǒng)。刺激單核-吞噬細胞系統(tǒng),增強其處理和提呈抗原的能力;活化APC刺激淋巴細胞增殖和分化,可提高機體初次和再次免疫應(yīng)答的抗體滴度;改變抗體的產(chǎn)生類型以及誘導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。19、雜交瘤細胞選擇培養(yǎng)基(HAT培養(yǎng)基)成份: H-雌黃嘌呤; A -氨甲喋呤;T-胸腺嘧啶核苷20、凝集反應(yīng)發(fā)生分兩個階段:抗原抗體的特異性結(jié)合階段,此階段反應(yīng)快,僅需數(shù)秒至數(shù)分鐘,但不出現(xiàn)可見反應(yīng)。出現(xiàn)可見的凝集反應(yīng)階段,此階段反應(yīng)慢,一般需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。21、在免疫學(xué)技術(shù)中,凝集反應(yīng)可分為直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)兩大類。22、間接凝集反應(yīng)類型(1) 正向間接凝集反應(yīng):用可溶性抗原致敏載體以檢測標(biāo)本中的待檢抗體,以反應(yīng)數(shù)分鐘出現(xiàn)凝集為陽性。(2) 反向間接凝集反應(yīng):用特異性抗體致敏載體以檢測標(biāo)本中的待檢抗原。(3) 間接凝集抑制反應(yīng):用抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體作為診斷試劑,檢測標(biāo)本中是否存在于致敏抗原相同的抗原。(4) 協(xié)同凝集反應(yīng)(co-agglutination):以葡萄球菌蛋白A(SPA)蛋白作載體,SPA具有與IgG的Fc段結(jié)合的特異性,當(dāng)葡萄球菌與IgG抗體連接時,F(xiàn)ab暴露,可與相應(yīng)抗原結(jié)合,葡萄球菌就稱為抗體致敏的顆粒載體,與相應(yīng)抗原接觸,出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。用于細菌、病毒的直接檢測。23、凝集反應(yīng)的特點:定性檢測方法,即根據(jù)凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)與否判定結(jié)果陽性或陰性。也可以進行半定量檢測,即將標(biāo)本作一系列倍比稀釋后進行反應(yīng),以出現(xiàn)陽性反應(yīng)的最高稀釋度作為滴度。24、抗球蛋白試驗(antiglobulin test):是抗球蛋白參與的間接血凝試驗,又稱Coombs試驗,用于檢測抗紅細胞不完全抗體。25、不完全抗體多半是7S的IgG類抗體,能與相應(yīng)的抗原牢固結(jié)合,但因其分子量較小,體積小,不能起到橋聯(lián)作用,在一般條件下不出現(xiàn)可見反應(yīng)。26、直接Coombs試驗:常用于檢測新生兒溶血癥、自身免疫性溶血癥、特發(fā)性自身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血等疾病的患者紅細胞上不完全抗體。 間接Coombs試驗:用于檢測母體Rh(D)抗體和因紅細胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體;也可用專一特異性抗球蛋白血清分析與紅細胞結(jié)合的不完全抗體的Ig亞類。27、沉淀反應(yīng)分兩個階段,第一階段為抗原抗體特異性結(jié)合,此階段可以在幾秒到幾十秒內(nèi)瞬間完成出現(xiàn)不可見的可溶性復(fù)合物,主要受抗原抗體特異性和結(jié)合力的影響。第二階段為形成可見的免疫復(fù)合物,反應(yīng)慢,約需幾十分鐘到數(shù)小時完成,受抗原抗體比例、分子大小、親和力、絕對濃度、電解質(zhì)濃度和反應(yīng)溫度的影響。28、沉淀反應(yīng)分類(1) 液相內(nèi)沉淀試驗分類:環(huán)狀沉淀、絮狀沉淀、免疫濁度沉淀(投射、散射比濁)(2) 凝膠內(nèi)沉淀試驗分類:單向瓊脂擴散試驗、雙向瓊脂擴散試驗(3) 凝膠免疫電泳技術(shù)a對流免疫電泳:雙向免疫擴散+電泳b 免疫電泳:雙向免疫擴散+區(qū)帶電泳c 火箭免疫電泳:單向免疫擴散+電泳d 免疫固定電泳:沉淀反應(yīng)+區(qū)帶電泳29、雙向免疫擴散試驗原理:將抗原和抗體溶液分別加在同一凝膠板的對應(yīng)孔中,兩者均在凝膠中自由擴散,相遇后特異性結(jié)合,在比例合適處形成白色沉淀線。觀察沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系,可對抗原或抗體進行定性分析。應(yīng)用:(1)判斷抗原或抗體的存在以及估計相對含量:沉淀線靠近濃度低的一方(2) 分析抗原或抗體相對分子量:分子量越小擴散越快,反之越慢。(3) 分析抗原的性質(zhì):兩種待檢抗原的性質(zhì)有完全相同、部分相同或完全不同三種情況,在雙向擴散試驗中表現(xiàn)a 兩條沉淀線相互吻合相連,表明抗體與兩個抗原中的相同表位結(jié)合形成沉淀,但不能說明兩個抗原完全相同;b 兩條沉淀線交叉,說明兩個抗原完全不同;c 兩條沉淀線相切,提示有兩個抗原之間有部分相同(4) 抗體效價的滴定:(5) 鑒定抗原或抗體純度30、免疫技術(shù)分為:放射免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)31、均相酶免疫測定的類型及原理32、酶免疫技術(shù)的方法學(xué)評價33、酶免疫技術(shù)的常用酶和底物標(biāo)記酶:堿性磷酸酶 底物:4-甲基傘形酮(4MUP) -半乳糖苷酶 4MUG 辣根過氧化物酶 HPA34、HCG:免疫膠體金技術(shù)35、超敏反應(yīng)的特點:(1)是病理性免疫應(yīng)答。(2)與抗原的性狀及進入途徑有關(guān)。(3)與抗體的遺傳或機體的反應(yīng)性有關(guān)。(4)可造成機體的組織損傷和功能障礙。36、抗Sm抗體是系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的標(biāo)記抗體。37、抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體,是SLE的重要診斷標(biāo)準(zhǔn)之一,抗dsDNA抗體滴度與疾病活動度相關(guān),抗體滴度的動態(tài)測定可監(jiān)控治療。38、間接免疫熒光法的熒光模型:作為總ANA篩查試驗,目前最常用核質(zhì)豐富的培養(yǎng)細胞-HEP-2細胞作為抗原(人喉癌上皮細胞)39、常見的抗核抗體(ANA)熒光圖形:均質(zhì)型(H)、 斑點型(S):又稱顆粒型、 核仁型(N)、 核膜型(M)、核包膜型、著絲點型、胞漿型40、抗ENA抗體包括 :抗核糖核蛋白抗體(nRNP)、 抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、Jo-1抗體、Scl-70抗體41、抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(ANCA)主要有兩型:胞質(zhì)型(cANCA)和周圍型(pANCA)。cANCA的靶抗原主要是蛋白酶3(PR3),,pANCA的靶抗原主要是髓過氧化物酶(MOP)42、自身免疫性病的分類:按自身抗原分布范圍分:器官特異性自身免疫性疾病,如胰島素依賴型糖尿病,重癥肌無力,多發(fā)性硬化癥等。器官非特異性自身免疫性疾病,如SLE,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類:可分為結(jié)締組織、內(nèi)分泌系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等自身免疫病。按發(fā)病原因分類:原發(fā)性和繼發(fā)性。43、自身免疫性疾病的基本特征;1:多數(shù)病因不詳,可有誘因,可無誘因。2:以女性居多,有遺傳傾向。3:血清中存在自身抗體或致敏淋巴細胞。5:疾病有重疊現(xiàn)象。6:病程較長,多遷延為慢性。病情發(fā)展緩解反復(fù)交替。7:病損部位有淋巴、漿細胞、中性粒細浸潤。8:免疫抑制劑有一定療效。44、自身免疫病的免疫損傷機制:類似于、型超敏反應(yīng)45、自身免疫病的檢驗方法:對流免疫電泳及免疫雙擴散法(CIE,ID) 免疫熒光測定法(IFA) 酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA) 免疫印跡法(IB) 免疫斑點法放射性核素法免疫沉淀法 被動凝集試驗46、自身免疫病發(fā)生的相關(guān)因素:(1)自身抗原:隱蔽抗原的釋放、自身成份的改變、共同抗原引發(fā)的交叉反應(yīng)(2)免疫調(diào)節(jié)異常(3)遺傳因素47、自身抗體的檢測及其臨床意義抗核抗體(ANA)抗dsDNA抗體:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)抗RNP抗體:混合性結(jié)締組織?。∕CTD)抗Sm抗體:SLE特異性標(biāo)志抗SS-A抗體、抗SS-B抗體:干燥綜合征(SS)、SLE抗 rRNP抗體是SLE的高度特異性抗體,與中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變發(fā)生率高度相關(guān)。抗中性粒細胞漿抗體(ANCA)cANCA(主要靶抗原是蛋白酶3(PR3),PR3為中性粒細胞嗜天青顆粒的主要成分)cANCA + 抗PR3抗體 韋格納肉芽腫(WG)pANCA(主要靶抗原是髓過氧化物酶(MPO),MPO為中性粒細胞嗜天青顆粒的另一種成分)pANCA :血管炎抗磷脂抗體(APLA)中的抗心磷脂抗體(ACLA、ACL抗體) 抗磷脂綜合征(APS)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA):類風(fēng)濕因子(RF)、抗角蛋白抗體(AKA)48、肝臟是免疫特惠器官49、各惡性腫瘤的主要標(biāo)志物 前列腺癌(PSA);乳腺癌(CA15-3);肺癌(NSE);卵巢癌(CA125);胰腺癌(CA19-9);原發(fā)性肝癌(AFP);結(jié)直腸癌(CEA);胃癌(CA72-4);淋巴瘤(2-微球蛋白);黑色素瘤(黑色素瘤抗原)50、根據(jù)被移植骨髓的來源,分為自體骨髓移植、同基因骨髓移植、同種異基因骨髓移植。51、HLA(人類白細胞抗原)分子生物學(xué)分型法:RFLP與PCR-RFLP分型法、PCR-SSO分型法、PCR/SSP分型法、PCR-SSCP分型法、SBT分型法(常用)。52、HIV抗體檢測:確認(rèn)試驗主要用免疫印跡法53、直接檢測病毒或其組分,一般不用作常規(guī)診斷。54、HIV初篩、確認(rèn)查的都是抗體HIV抗體檢測:初篩復(fù)檢確認(rèn)初篩:ELISA法:第三代、第四代(第四代含P24Ag)快速檢測試劑(RAPID):金標(biāo)、硒標(biāo)明膠顆粒凝集實驗(PA)確認(rèn):免疫印跡法(WB)免疫熒光試驗(IFA)55、免疫缺陷病的分類原發(fā)性:體液免疫(50%、為主)、細胞免疫、聯(lián)合免疫、非特異性繼發(fā)性:營養(yǎng)不良、腫瘤、感染(HIV)56、梅毒快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡試驗(RPR)隨病情變化,有改變。確認(rèn)試驗:熒光密螺旋體吸收試驗(FTA-ABS)、免疫印跡法(WB)梅毒螺旋體熒光抗體雙染色試驗(FTA-ABS-DS)、ELISA57、化學(xué)發(fā)光劑的種類及發(fā)光原理 (1)熒光色素:異硫氰酸熒光素FITC:最大吸收光波長為490495nm,最大發(fā)射光波長520530nm,可呈明亮的黃綠色熒光。是應(yīng)用最廣泛的熒光素,其主要優(yōu)點在于人眼對黃綠色較為敏感,并且由于標(biāo)本中的綠色熒光較少,熒光染色時背景干擾小。四乙基羅丹明RB200:最大吸收光波長為570nm,最大發(fā)射光波長為595600nm,呈橘紅色熒光??膳cFITC的綠色熒光形成鮮明的對比,常用于雙重標(biāo)記或?qū)Ρ热旧?,但RB200熒光效率較低。藻紅蛋白PE:最大吸收光波長為565nm,最大發(fā)射光波長為578nm。由于它在488nm處的光吸收率為565nm處的75%,因此PE與FITC可用于雙標(biāo)記免疫熒光染色。(2)其他熒光物質(zhì):鑭系螯合物、酶作用后產(chǎn)生的熒光物質(zhì)58、臨床常用的細胞因子與細胞黏附因子的免疫學(xué)檢測方法:酶聯(lián)免疫吸附試驗方法、流式細胞分析法、酶聯(lián)免疫斑點試驗59、簡述免疫應(yīng)答的基本過程及特點。(1)特異性:抗原效應(yīng)T細胞/抗體(2)記憶性:初次應(yīng)答 再次應(yīng)答(3)放大性:少量抗原 全身性免疫應(yīng)答(4)MHC限制性60、血清免疫球蛋白的測定方法主要有哪些?各有何特點? 臨床上常用速率散射免疫比濁法檢測IgG、IgA、IgMIgD的測定方法有放射免疫分析法、乳膠顆粒免疫比濁分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗。總IgE的測定方法有化學(xué)發(fā)光免疫分析法、放射免疫分析法、乳膠顆粒免疫比濁法特異性IgE的檢測方法主要有免疫斑點法和酶聯(lián)免疫吸附試驗。IgG的測定方法有放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附試驗、單向環(huán)狀免疫擴散法、速率散射免疫比濁法M蛋白:血清蛋白區(qū)帶電泳、血清免疫球蛋白定量測定、免疫電泳、免疫固定電泳冷球蛋白測定:定性測定,即血細胞比容管法。定量測定,為分光光度法。3、 問答題56道1、 抗原、抗體反應(yīng)的特點。 抗原抗體反應(yīng)的特點包括特異性、可逆性、比例性和階段性。 特異性(specificity):抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性稱為特異性,這種特異性是由抗原表位與抗體分子超變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補性決定的??赡嫘?reversibility):抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成復(fù)合物后,在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性稱為抗原抗體結(jié)合的可逆性。比例性(proportionality):是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系。階段性:抗原抗體反應(yīng)分為兩個階段,第一階段是抗原與抗體特異性結(jié)合階段;第二階段為反應(yīng)可見階段。2、抗原、抗體反應(yīng)的影響因素。影響因素:一方面是抗原、抗體反應(yīng)物的自身因素,另一方面是反應(yīng)的環(huán)境因素。(一)反應(yīng)物自身因素:1.抗原Ag:理化特性;Ag決定簇數(shù)量; Ag決定簇種類; 2.抗體Ab:來源; 特異性與親和力;濃度; (二)環(huán)境條件:1.電解質(zhì):常用0.85%Nacl溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液 2.酸堿度: 抗原抗體反應(yīng)一般在PH 69進行 3.溫度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的溫度中進行,一般在1540為宜,最適溫度為37。3、 單克隆抗體技術(shù)的基本原理(B細胞雜交瘤技術(shù)原理)將抗原免疫的小鼠脾細胞與具有體外長期繁殖能力的小鼠骨髓瘤細胞通過融合劑(聚乙二醇,PEG)融為一體,在HAT選擇性培養(yǎng)基的作用下,只讓融合成功的雜交瘤細胞生長,經(jīng)過反復(fù)的免疫學(xué)檢測、篩選和單個細胞培養(yǎng)(克隆化),最終獲得既能產(chǎn)生所需單克隆抗體,又能體外長期繁殖的雜交瘤細胞系,將這種雜交瘤細胞擴大培養(yǎng),接種于小鼠腹腔,從小鼠腹腔積液中獲取高效價的單克隆抗體。4、 多克隆抗體和單克隆抗體的比較PcAbMcAb抗原識別特異性識別多種抗原決定簇特異性識別單一抗原決定簇特異性與親和力批與批不同特異性高反應(yīng)能力強弱,弱凝集/不呈現(xiàn)沉淀反應(yīng)成份不均一,成份混雜高度均一性環(huán)境敏感性弱強5、 間接凝集抑制實驗原理用抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體作為診斷試劑,檢測標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原相同的抗原。先將待測抗原標(biāo)本與相應(yīng)抗體作用,然后再加入致敏的載體,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,則說明標(biāo)本中不存在相同抗原,抗體試劑未被結(jié)合,仍可與載體上的抗原起作用。若存在相同抗原,抗體與之結(jié)合,凝集反應(yīng)被抑制。同理用抗體致敏的載體及相應(yīng)的抗原檢測標(biāo)本中的抗體,則稱反向間接凝集抑制反應(yīng)。6、 凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)有何異同?凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)抗原性質(zhì)顆粒性抗原可溶性抗原反應(yīng)物凝集物(振搖后不渾濁)沉淀物(振搖后渾濁)反應(yīng)時間幾分鐘至十幾分鐘數(shù)小時至數(shù)天7、 放射免疫技術(shù)分析的原理放射免疫分析原理而言屬于競爭性分析,基于標(biāo)記抗原和非標(biāo)記抗原對同一抗體有相同親和力,則兩者在同一系統(tǒng)中發(fā)生于特異性抗體的競爭性結(jié)合。將放射性核素標(biāo)記在抗原分子上,當(dāng)待測物(Ag)和標(biāo)記抗原(*Ag)同時與特異性抗體作用時,發(fā)生如下反應(yīng):Ag+*Ag+Ab=AgAb+*AgAb(Ag抗原、*Ag標(biāo)記有放射性的抗原、Ab抗體) 當(dāng)特異性抗體限量且總結(jié)合位點數(shù)大于Ag或*Ag量,但小于Ag和*Ag的總和時,Ag和*Ag與特異性抗體發(fā)生競爭性結(jié)合。當(dāng)標(biāo)本中無待檢Ag時,抗體全部與*Ag結(jié)合,并有游離的*Ag存在;當(dāng)標(biāo)本中有待檢Ag時,*Ag與抗體結(jié)合將受到抑制,標(biāo)本中待測Ag的與可以測量的結(jié)合標(biāo)記物*AgAb的量形成某種反比函數(shù)關(guān)系。Ag與*AgAb之間的關(guān)系:由于上述反應(yīng)是競爭結(jié)合機制,即,Ag越多,產(chǎn)生AgAb也越多,產(chǎn)生*AgAb就越少,反之亦然,因此Ag與*AgAb之間呈一定的函數(shù)關(guān)系。8、免疫放射分析IRMA與放射免疫分析RIA的異同點RIAIRMA標(biāo)記物抗原抗體原理競爭性結(jié)合非競爭性結(jié)合反應(yīng)體系A(chǔ)g*、Ag、Ab固相Ab、Ab*Ag反應(yīng)動力學(xué)慢快靈敏度相對低高檢測范圍窄寬12數(shù)量級特異性差優(yōu)標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)合率與測值成反比結(jié)合率與測值成正比待測原理大小分子兩抗原決定簇9、 化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型和原理(1) 直接化學(xué)發(fā)光免疫分析:是用化學(xué)發(fā)光劑(如吖啶酯)直接標(biāo)記抗體(抗原),與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體-待測抗原-吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時只需加入氧化劑(H2O2)和pH糾正液(NaOH)成為堿性環(huán)境,吖啶酯即可在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光。(2) 化學(xué)酶免疫分析:用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶來標(biāo)記抗體(或抗原)。與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體-待測抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,加入底物(發(fā)光劑),酶催化和分解底物發(fā)光。(3) 電化學(xué)發(fā)光免疫分析:以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體(抗原),以三丙胺為電子供體,在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng),它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程。10、 簡述ELISA的基本原理和方法類型原理:把抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性,也就是形成固相抗原或抗體,它既保留了免疫活性,又保留了酶的活性;測定時將受檢樣品(含待測抗原或抗體)和酶標(biāo)記抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成固相化抗原抗體-酶復(fù)合物;用洗滌的方法將固相載體上形成的抗原抗體-酶復(fù)合物與其他成分分離,結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例;加入底物后,底物被固相載體上的酶催化生成有色產(chǎn)物。通過定性或定量檢測有色產(chǎn)物的量即可確定樣品中待測物質(zhì)的含量。方法類型:檢測抗原的方法:雙抗體夾心法(臨床常用于乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、HCG的檢測);雙位點一步法;競爭法檢測抗體的方法:間接法(用于丙型肝炎病毒抗體、人免疫缺陷病毒抗體和梅毒螺旋體抗體的檢測);雙抗原夾心法(乙型肝炎表面抗體的測定);競爭法(HBeAb和HBcAb檢測)11、 時間分辨熒光免疫測定的原理?哪些方法類型?是以鑭系元素標(biāo)記抗原或抗體,并與時間分辨測定技術(shù)相結(jié)合而建立起來的一種新型非放射性微量分析技術(shù)。方法類型:雙抗體夾心法、固相抗體競爭法、固相抗原競爭法12、 熒光偏振免疫測定的原理 利用抗原抗體競爭反應(yīng)原理,根據(jù)熒光素標(biāo)記抗原與熒光素抗原抗體復(fù)合物之間熒光偏振程度的差異,測定體液中小分子抗原物質(zhì)的含量。13、 熒光酶免疫測定的原理?有哪些類型?采用堿性磷酸酶標(biāo)記抗體(或抗原),以4-甲基傘形酮磷酸鹽(4-MUP)為堿性磷酸酶反應(yīng)熒光底物,堿性磷酸酶分解4-MUP,脫磷酸根基團后形成4-甲基傘型酮(4-MU)。4-MU經(jīng)360nm激發(fā)光照射,發(fā)出450nm的熒光,通過熒光檢測儀測定熒光強度,并推算待檢抗原或抗體的含量。方法分類:雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、固相抗原競爭法14、 腫瘤細胞的免疫逃逸機制與腫瘤細胞有關(guān)的因素:(1)腫瘤細胞的抗原缺失和抗原調(diào)變(2) 腫瘤細胞的“漏逸”(3) 腫瘤細胞的MHC I類分子表達低下或缺失(4) 腫瘤細胞導(dǎo)致的免疫抑制(5) 腫瘤細胞缺乏共刺激信號(6) 腫瘤細胞抗凋亡與宿主免疫系統(tǒng)有關(guān)的因素:(1) 機體免疫系統(tǒng)功能低下或缺陷(2) 機體的免疫耐受狀態(tài)17、 B細胞與T細胞的檢測試驗B細胞缺陷病的檢測:(1)血清Ig的測定:IgG、IgM、IgA主要采用免疫濁度法(2) 同種血型凝集素的測定:(3) 特異性抗體產(chǎn)生能力測定(4) 噬菌體試驗(5) B細胞表面膜免疫球蛋白的檢測(6) CD抗原檢測T細胞缺陷病的檢測:T細胞功能檢測(皮膚試驗、T細胞功能體外試驗);T細胞數(shù)量及其亞群檢測21、比較初次免疫應(yīng)答和再次免疫應(yīng)答的不同。特性 初次應(yīng)答再次應(yīng)答APC DC、Mf B細胞抗原濃度 高低抗體潛伏期 5-10天 1-3天高峰濃度 較低較高維持時間 短長Ig類別 主要為IgM IgG、A 親和力 低高無關(guān)抗體 多少22、 新生兒溶血癥屬于哪種超敏反應(yīng)類型,簡述其發(fā)生機制。新生兒溶血屬于II型超敏反應(yīng),母子間Rh血型不符是引起新生兒溶血癥的主要原因。初次妊娠分娩時,胎兒Rh+紅細胞進入Rh的母體內(nèi);胎兒Rh+紅細胞表面抗原刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的抗Rh抗體(IgG);當(dāng)母體再次妊娠時,抗Rh抗體通過胎盤進入胎兒體內(nèi),與Rh+紅細胞結(jié)合,導(dǎo)致紅細胞破壞,發(fā)生新生兒溶血癥。26、補體系統(tǒng)激活三步途徑的比較(一) 經(jīng)典的激活途徑激活劑:主要是IgG123型,和IgM類抗體與相應(yīng)抗原形成的抗原抗體復(fù)合物始動因子從C1開始攻膜復(fù)合體:C5b6789激活過程:1、識別階段C1識別免疫復(fù)合物至C1s形成的階段。2、活化階段C1s依次裂解C4和C2,形成具有酶活性的C3轉(zhuǎn)化酶和C5轉(zhuǎn)化酶(二)替代途徑激活劑細菌細胞壁成分脂多糖、酵母多糖和凝集的IgA等激活過程1、旁路途徑激活的準(zhǔn)備階段2、激活階段(三)MBL途徑激活物:甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)和C反應(yīng)蛋白MBL(甘露聚糖結(jié)合凝集素)是一種鈣依賴性糖結(jié)合蛋白可與甘露糖殘基結(jié)合27、 血清CH50測定原理及其臨床意義原理:綿羊紅細胞與相應(yīng)抗體(溶血素)結(jié)合后,形成的免疫復(fù)合物可激活血清中的補體,導(dǎo)致綿羊紅細胞表面形成跨膜小孔,使細胞外水分滲入,引起紅細胞腫而發(fā)生溶血。在特定的反應(yīng)體系中,溶血的程度與補體的活性呈正相關(guān)。以溶血百分率為縱坐標(biāo),相應(yīng)血清含量為橫坐標(biāo),可見在輕微溶血和接近完全溶血時,對補體含量的變化敏感度下降,形成一特殊的S形曲線。S形曲線在30%70%之間斜度最陡,幾乎成一直線,補體量的細微變化也會引起溶血程度的明顯改變,故取50%溶血作為判定終點,這一方法稱為補體50%溶血實驗,即CH50。引起50%溶血所需要的最小補體量為一個CH50單位(U),通過計算可測定出血清中總的補體溶血活性,以CH50(U/ml)表示。臨床意義:自身免疫性疾病患者如SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和強直性脊柱炎等,補體含量下降;在嚴(yán)重或營養(yǎng)不良時,血清補體下降,補體的檢測可用于某些疾病的診斷、治療效果檢測、預(yù)后判斷的參考指標(biāo)。在糖尿病、大葉性肺炎、心肌梗死、甲狀腺炎、妊娠等時,血清補體含量可升高。28、 補體結(jié)合試驗原理及結(jié)果解釋利用抗原抗體免疫復(fù)合物可激活補體的特點,用一定量的補體和致敏綿羊紅細胞來檢測有無抗原抗體特異性結(jié)合的一類試驗。試驗中有5種成分參與反應(yīng),分屬3個系統(tǒng):(1) 反應(yīng)系統(tǒng):已知抗原(或抗體)與待測抗體(或抗原)。(2) 指示體系:綿羊紅細胞與相應(yīng)溶血素結(jié)合,成為致敏綿羊紅細胞.(3) 補體系統(tǒng)常用豚鼠新鮮血清.反應(yīng)體系與補體體系先發(fā)生反應(yīng),然后再加入指示系統(tǒng),根據(jù)致敏綿羊紅細胞有無溶血來判斷實驗結(jié)果.若反應(yīng)系統(tǒng)中有相應(yīng)的抗原或抗體存在,形成的抗原抗體復(fù)合物與補體結(jié)合,補體被消耗,則補體不能與后加入的致敏綿羊紅細胞結(jié)合,致敏綿羊紅細胞不發(fā)生溶血,為補體結(jié)合試驗陽性.反之,反應(yīng)系統(tǒng)中無相應(yīng)的抗原或抗體存在,則補體未被消耗,他能使致敏綿羊紅細胞發(fā)生溶血,為補體結(jié)合試驗陰性.29、超敏反的類型及其特點類型常用名特點I型速發(fā)型,過敏型,IgE型1.發(fā)生快,消失也快 2.抗體為IgE3.一般無組織器官損傷 4.遺傳性II型細胞溶解型,細胞毒型1.抗原在細胞膜上
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