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【創(chuàng)新設(shè)計(jì)】(浙江專用)2016高考生物二輪復(fù)習(xí) 第七單元 專題一 基因工程與細(xì)胞工程專題整合2016高考仿真練1(2015山東煙臺(tái)一模)科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高。下圖一是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖,圖二為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。魚的抗凍蛋白基因不含圖中限制酶識(shí)別序列,ampr為抗氨芐青霉素基因,其中是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟,、表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答:(1)為了在番茄中獲得抗凍蛋白必須將抗凍蛋白基因連接在質(zhì)粒中的_之后。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細(xì)胞的_過程。(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。該酶的特點(diǎn)_。(3)要利用培養(yǎng)基篩選出已導(dǎo)入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞,應(yīng)使基因表達(dá)載體中含有_作為標(biāo)記基因。(4)研究人員通常采用_法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用_技術(shù),在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。答案(1)啟動(dòng)子脫分化、再分化(2)識(shí)別特定的dna序列并在特定位點(diǎn)切割(3)抗氨芐青霉素基因(ampr)(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍法等)抗原抗體2科研人員利用胚胎干細(xì)胞(es細(xì)胞)對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖,請(qǐng)回答相關(guān)問題:(1)過程獲得重組胚胎之前需要通過_技術(shù)獲得重組細(xì)胞,接受細(xì)胞核的去核卵母細(xì)胞應(yīng)該處于_時(shí)期。(2)步驟中,重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí),可從其_分離出es細(xì)胞。步驟中,需要構(gòu)建含有干擾素基因的_,構(gòu)建之前可以利用_技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。(3)將基因?qū)雃s細(xì)胞常用的方法是_,體外誘導(dǎo)es細(xì)胞向不同方向分化是利用了es細(xì)胞的_。(4)為檢測(cè)干擾素基因的表達(dá)情況,可采用_方法,若有雜交帶出現(xiàn),表明目的基因已成功表達(dá)。答案(1)核移植m(2)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(基因)表達(dá)載體pcr(3)顯微注射法全能性(4)抗原抗體雜交3(2015山東淄博模擬)農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后,能將ti質(zhì)粒上的tdna插入到植物基因組中。圖示為利用農(nóng)桿菌培育轉(zhuǎn)基因植物的基本流程,請(qǐng)據(jù)圖作答:(1)剪除ti質(zhì)粒的某些片段、替換復(fù)制原點(diǎn)o與添加抗生素的抗性基因t的過程中,需用_處理dna以防止dna片段的自身環(huán)化,需用_“縫合”雙鏈dna片段的平末端。(2)目的基因是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因和一些_。由過程形成的運(yùn)載體中,目的基因的首端具有_識(shí)別和結(jié)合的部位。(3)過程常用_處理使農(nóng)桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞。在過程前,常采用_技術(shù)檢測(cè)農(nóng)桿菌和愈傷組織細(xì)胞中是否有目的基因及轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。(4)過程需對(duì)植物細(xì)胞做沖洗和_處理,然后用_去除細(xì)胞壁。答案(1)多種限制酶t4dna連接酶(2)具調(diào)控作用的因子rna聚合酶(3)ca2(cacl2溶液)核酸分子雜交(基因探針)(4)消毒纖維素酶(和果膠酶)4(2015江蘇宿遷聯(lián)考)由于人突變細(xì)胞中含胸苷激酶(tk)而缺乏hgprt酶,小鼠正常細(xì)胞中含hgprt酶而缺乏tk,兩種細(xì)胞均不能在hat培養(yǎng)基中生長(zhǎng),但可在普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。利用上述兩類細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞,在雜種細(xì)胞傳代過程中,鼠的染色體被保留下來,人的染色體隨機(jī)丟失,以至最后只剩一條或幾條人染色體(如下圖,圖中數(shù)字代表保留的人染色體編號(hào))。科研人員運(yùn)用這一方法確定了胸苷激酶基因所在的染色體。分析回答:(1)人、鼠細(xì)胞融合的原理是_。與植物原生質(zhì)體融合過程相比,過程a特有的誘導(dǎo)方法是_。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素的目的是_,培養(yǎng)箱中充入5%的co2氣體的主要作用是_。(3)過程b用hat培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),目的是_。(4)為了使人的全部染色體分別包含于各種不同的人鼠雜交細(xì)胞中,人鼠融合細(xì)胞應(yīng)在_(填“hat”或“普通”)培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。為檢查雜種細(xì)胞中含有的人染色體數(shù)目和形態(tài),最好選取_(時(shí)期)的雜種細(xì)胞進(jìn)行觀察。(5)若將某次實(shí)驗(yàn)獲得的各種人鼠雜種細(xì)胞分別在hat培養(yǎng)基中培養(yǎng),一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)在hat培養(yǎng)基中只有a、b、c三種雜種細(xì)胞能夠生長(zhǎng),檢查雜種細(xì)胞中保留的人染色體情況如下表(表中“”表示有相應(yīng)染色體,“”表示無(wú)相應(yīng)染色體):雜種細(xì)胞保留的人染色體2號(hào)3號(hào)5號(hào)9號(hào)12號(hào)17號(hào)21號(hào)abc根據(jù)表中信息,可推測(cè)人細(xì)胞中胸苷激酶基因位于_號(hào)染色體上。答案(1)細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性用滅活的病毒處理(2)防止雜菌污染維持培養(yǎng)液適宜的ph(3)篩選出人鼠融合細(xì)胞(雜種細(xì)胞)(4)普通有絲分裂中期(5)175(2015山東臨沂三模)我國(guó)科學(xué)家建立了小鼠哺乳動(dòng)物單倍體胚胎干細(xì)胞系,為基因操作找到了新的動(dòng)物模型。下列為獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的部分過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)目前常用的獲取目的基因的方法有_、利用pcr技術(shù)擴(kuò)增和用化學(xué)方法人工合成。(2)在過程中,科學(xué)家采用兩種方法來獲得小鼠的孤雄單倍體胚胎,一是將受精后獲得的合子的_去除;二是利用_技術(shù)將成熟精子的頭部植入去核卵母細(xì)胞中。(3)_技術(shù)常用的誘導(dǎo)因素有_。動(dòng)物細(xì)胞工程中常通過此技術(shù)獲得雜交瘤細(xì)胞,以制備特異性強(qiáng)的_。(4)若切取部分早期胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),需要先剪碎切塊,然后用_處理使細(xì)胞分散,制成b瓶中的細(xì)胞懸液。為保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,b、c、d瓶中的培養(yǎng)基需要添加一定量的_,還需要提供o2和co2等氣體環(huán)境,co2的作用主要是_。答案(1)從基因文庫(kù)中獲取(2)雌原核細(xì)胞核移植(3)動(dòng)物細(xì)胞融合滅活的病毒、聚乙二醇、電激單克隆抗體(4)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)抗生素維持培養(yǎng)液的ph6(2015山東青島模擬)組織型纖溶酶原激活劑(tpa)在人體纖溶和凝血的平衡調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用,如圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)組織型纖溶酶原激活劑(tpa)的圖解,據(jù)圖回答下列問題:(1)過程在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中,應(yīng)將tpa基因首端與_基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件結(jié)合,過程常用的方法是_。(2)要獲得單個(gè)成纖維細(xì)胞,過程需用_處理奶牛胎兒皮膚組織塊。在單個(gè)組織細(xì)胞的培養(yǎng)過程中,為了防止雜菌污染,通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的_。(3)成功進(jìn)入成纖維細(xì)胞的tpa基因,最終在轉(zhuǎn)基因牛c中維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為_,涉及到的生物技術(shù)為_,得到的轉(zhuǎn)基因牛c稱之為轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物。(4)從a到b過程中所用的胚胎工程技術(shù)是_。從個(gè)體水平上看,若_,則可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功。答案(1)乳腺蛋白顯微注射法(2)胰蛋白酶或膠原蛋白酶(只答一個(gè)也可)抗生素(3)轉(zhuǎn)化細(xì)胞核移植技術(shù)(4)早期胚胎培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑7如圖是利用現(xiàn)代生物技術(shù)改良草莓品系的過程。請(qǐng)回答下列有關(guān)現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)的問題。(1)圖中涉及的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)主要是_(答出兩點(diǎn))等。(2)在進(jìn)行過程之前,必須先利用_酶去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的原生質(zhì)體。過程中常使用的誘導(dǎo)劑是_。(3)圖中a需要先經(jīng)過脫分化形成_,再經(jīng)過_過程才能形成具鳳梨風(fēng)味的綠草莓植株。(4)研究人員根據(jù)已知的胰島素基因序列,可以采用_方法獲得胰島素基因。過程中常借助_的運(yùn)輸將胰島素基因?qū)刖G色草莓細(xì)胞中。檢測(cè)胰島素基因是否在綠色草莓細(xì)胞中翻譯成胰島素時(shí)常采用的方法是_。解析(1)圖中涉及的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)主要是基因工程技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)等。(2)欲得到所需的原生質(zhì)體,常用纖維素酶和果膠酶去除正常植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)常使用的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇(peg)。(3)誘導(dǎo)融合成功后獲得的雜種細(xì)胞,經(jīng)脫分化培養(yǎng)成愈傷組織,然后經(jīng)過再分化形成完整的雜種植株。(4)若已知目的基因的序列,則可以使用化學(xué)方法人工合成目的基因?;蚬こ讨谐=柚d體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中。檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中翻譯成蛋白質(zhì)時(shí)常采用的方法是抗原抗體雜交技術(shù)。答案(1)基因工程技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)(2)纖維素酶和果膠聚乙二醇(peg)(3)愈傷組織再分化(4)化學(xué)合成(基因表達(dá))載體抗原抗體雜交技術(shù)81981年,科學(xué)家首次對(duì)哺乳動(dòng)物小鼠成功進(jìn)行了核移植實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)流程如下:(1)核移植小鼠染色體組型與_鼠相同(填“灰”或“黑”)。(2)利用_技術(shù)將重組胚胎移入白鼠子宮內(nèi)讓其繼續(xù)發(fā)育,暫不移入的胚胎可將其置于_條件下保存。(3)1997年,英國(guó)科學(xué)家培育克隆羊“多利”的實(shí)驗(yàn)方法與本題所涉及實(shí)驗(yàn)方法基本相似,所不同的是克隆羊移植的細(xì)胞核不是來自具有發(fā)育潛能多樣性的囊胚期的_細(xì)胞,而是來自成熟母羊的_細(xì)胞,克隆羊“多利”的成功證實(shí)了_。(4)利用核移植技術(shù)產(chǎn)生的動(dòng)物可以用于_、_等方面的研究。解析(1)根據(jù)細(xì)胞核來源不同,可將核移植技術(shù)分為胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)、干細(xì)胞核移植技術(shù)、體細(xì)胞核移植技術(shù)等。題中的克隆小鼠屬于胚胎細(xì)胞核移植,因?yàn)榛沂筇峁┝思?xì)胞核,所以核移植小鼠的染色體組型與灰鼠相同。(2)利用胚胎移植技術(shù)將重組胚胎移入白鼠子宮內(nèi)讓其繼續(xù)發(fā)育,暫不移入的胚胎可將其置于冷凍、低溫、液氮等條件下保存。(3)克隆羊“多利”的產(chǎn)生利用的是體細(xì)胞核移植,說明動(dòng)物細(xì)胞核仍保持有該物種遺傳特性所需要的全套遺傳物質(zhì),故高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。(4)核移植技術(shù)主要應(yīng)用在利用轉(zhuǎn)

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