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第2課時分離特定的微生物并測定其數(shù)量 第一章無菌操作技術(shù)實踐 學(xué)習(xí)導(dǎo)航1 認識各種微生物形成的菌落特征 2 學(xué)會利用涂布平板法分離 培養(yǎng)微生物 并能測定其數(shù)量 3 掌握利用選擇培養(yǎng)基分離特定微生物的方法 重難點擊簡述分離 培養(yǎng)微生物的方法及數(shù)量測定 一 微生物分離和培養(yǎng)的基本理論 二 以尿素為唯一氮源的土壤微生物的分離 培養(yǎng)與數(shù)量測定 內(nèi)容索引 當(dāng)堂檢測 三 分離土壤中能分解纖維素的微生物 一 微生物分離和培養(yǎng)的基本理論 1 純培養(yǎng)物培養(yǎng)在實驗室中利用培養(yǎng)基可以篩選和分離某種微生物 然后在 的條件下 在培養(yǎng)基上培養(yǎng)該微生物形成單個菌落 即由一個微生物 如某種細菌 形成的單個菌落 即為純培養(yǎng)物 可用于科學(xué)研究 2 分離特定的微生物 1 平板分離法 概念 能將微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面 每個孤立的活微生物體經(jīng)過生長 繁殖均可形成 分離 培養(yǎng)微生物最常用的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基 基礎(chǔ)梳理 選擇 高度稀釋 固體 單個菌落 單個 單個菌落 瓊脂固體 類型 平板分離法有多種 如平板法 平板法等 a 涂布平板法分離細菌 將待分離的樣品進行10倍系列 取一定稀釋度的樣品0 1ml倒入預(yù)先制備好的培養(yǎng)基平板中 用無菌 將樣品均勻 恒溫培養(yǎng)一段時間 以獲得單個菌落的方法 b 混合平板法分離細菌 將待分離的樣品進行10倍系列稀釋 取一定稀釋度的樣品0 1ml與的培養(yǎng)基 將混合液倒入無菌培養(yǎng)皿中制成平板 培養(yǎng)一段時間 以獲得單個菌落的方法 涂布 混合 稀釋 玻璃涂布器 涂布 熔化冷卻至50 左右 混合均勻 2 選擇培養(yǎng)分離 概念 科學(xué)家針對某種微生物的 設(shè)計一個特定的環(huán)境 使之這種微生物的生長 而其他微生物的生長 這種通過進行微生物純培養(yǎng)分離的技術(shù)稱為選擇培養(yǎng)分離 依據(jù)原理 不同的微生物有不同的或?qū)τ胁煌拿舾行?特別適合 抑制 選擇培養(yǎng) 特性 營養(yǎng)需求 某種化學(xué)物質(zhì) 舉例a 要分離耐高溫菌 可在條件下進行培養(yǎng) b 要分離對某種抗生素具有抗性的菌種 可在加有 如鏈霉素或青霉素 的平板上進行分離 c 在培養(yǎng)基中加入質(zhì)量分數(shù)為10 的酚 可以抑制的生長 d 運用將作為唯一碳源和能源的培養(yǎng)基 可以有效地分離能分解纖維素的細菌 e 運用培養(yǎng)基 培養(yǎng)基完全不含氮元素 可選擇能固氮的細菌 f 運用只含尿素而不含其他氮元素的培養(yǎng)基 可以選擇 的微生物 能合成脲酶的微生物可以分解尿素 高溫 該抗生素 細菌和霉菌 纖維素 無氮 能分解尿素以獲取氮 3 觀察各種微生物形成的菌落 1 菌落 指微生物在適宜的表面或內(nèi)部生長 繁殖到一定程度 形成 有一定的子細胞生長群體 2 菌落特征 微生物在培養(yǎng)基上生長形成的一般都具有穩(wěn)定的特征 如菌落的大小 形狀 邊緣特征 隆起程度 顏色等 這些可以作為對微生物進行 的重要依據(jù) 單個 固體培養(yǎng)基 肉眼可見的 形態(tài)結(jié)構(gòu) 不同 特定 菌落 分類 鑒定 問題探究 1 如何從眾多微生物中分離某種微生物 所利用的原理是什么 答案 答案根據(jù)微生物所需營養(yǎng)物質(zhì) 氧氣 ph不同利用選擇培養(yǎng)基選擇 2 結(jié)合教材完善下圖中兩種分離和純化微生物的平板分離法并思考 涂布 涂布均勻 混合 表面 表面和 內(nèi)部 培養(yǎng)基 1 涂布平板法的實質(zhì)是什么 答案在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 答案 2 試比較兩種分離和純化方法 涂布 先制作平板后加入菌液 平板表面 菌液與培養(yǎng)基混合 共同倒平板 平板表面和內(nèi)部 3 選擇培養(yǎng)分離所利用的培養(yǎng)基是什么培養(yǎng)基 它利用的原理是什么 答案選擇培養(yǎng)分離所利用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基 它利用的原理是不同的微生物有不同的營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)有不同的敏感性 4 通常以菌落的哪些表觀特征來對微生物進行分類 鑒定等 答案菌落的大小 形狀 邊緣特征 隆起程度 顏色等 答案 1 菌落的特征 菌落形態(tài)包括菌落的大小 形狀 邊緣 光澤 質(zhì)地 顏色和透明程度等 每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征 這些特征對菌種識別 鑒定有一定意義 2 選擇培養(yǎng)基篩選微生物的方法 在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì) 改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分 改變微生物的培養(yǎng)條件 3 平板劃線法和涂布平板法的比較 拓展應(yīng)用 1 下列有關(guān)涂布平板法 敘述錯誤的是a 首先將菌液進行一系列的梯度稀釋b 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面c 在適宜條件下培養(yǎng)d 結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 答案 解析 解析涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 進行培養(yǎng) 用不同稀釋度的菌液接種 只有在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物被分散成單個細胞 才能夠在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 而不是所有培養(yǎng)基上均可出現(xiàn)單個菌落 1 移液時需要注意哪些問題 答案移液管也需經(jīng)過滅菌 操作時 試管口和移液管應(yīng)在離火焰1 2cm處 吸管頭不要接觸任何其他物體 2 如何處理涂布器 答案將涂布器浸在盛有70 酒精的燒杯中 取出時 讓多余的酒精在燒杯中滴盡 然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃 答案 2 從自然菌樣中篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是 采集菌樣 富集培養(yǎng) 純種分離 性能測定 1 不同微生物的生存環(huán)境不同 獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣 然后再按一定的方法分離 純化 培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從 填 高鹽 或 低鹽 環(huán)境采集 培養(yǎng)厭氧菌的菌樣應(yīng)從 填 有氧 或 無氧 環(huán)境采集 解析在長期自然選擇的作用下 生物與其生活環(huán)境相適應(yīng) 培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集 培養(yǎng)厭氧菌應(yīng)從無氧環(huán)境中采集 答案 解析 高鹽 無氧 2 富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長的特定的環(huán)境條件 使待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加 從而達到從自然界中分離到所需的特定微生物目的的微生物培養(yǎng)方法 對嗜鹽菌富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)是培養(yǎng)基 對含耐高溫淀粉酶的微生物富集培養(yǎng)應(yīng)選擇 的培養(yǎng)基 并在條件下培養(yǎng) 解析對嗜鹽菌富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)是加鹽培養(yǎng)基 對含耐高溫淀粉酶的微生物富集培養(yǎng)應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基且在高溫條件下培養(yǎng) 答案 解析 加鹽 以淀粉 為唯一碳源 高溫 3 實驗室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達到殺菌的效果 高溫滅菌的原理是高溫使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)發(fā)生 滅菌法是微生物研究和教學(xué)中應(yīng)用最廣 效果最好的濕熱滅菌法 解析高溫能使蛋白質(zhì)和核酸發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變性 高壓蒸汽滅菌法是應(yīng)用最廣 效果最好的濕熱滅菌法 答案 解析 變性 高壓蒸汽 4 如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解 請分析接種的具體方法 獲得圖a效果的接種方法是 獲得圖b效果的接種方法是 解析從培養(yǎng)基中菌落分布看 獲得圖a用的是涂布平板法 獲得圖b用的是平板劃線法 答案 解析 涂布平板法 平板劃線法 二 以尿素為唯一氮源的土壤微生物的分離 培養(yǎng)與數(shù)量測定 基礎(chǔ)梳理 1 原理 采用唯一氮源為的選擇培養(yǎng)基來培養(yǎng) 分離出能在此培養(yǎng)基中生長 繁殖的微生物 2 實驗流程采集土壤 制備懸液 制備系列稀釋液 選擇培養(yǎng) 采用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 接種 涂布平板 培養(yǎng)與觀察 計數(shù)菌落 選取菌落數(shù)為的一組為樣本進行統(tǒng)計 尿素 30 300 3 顯微鏡直接計數(shù)法 1 原理 此法利用血球計數(shù)板 在顯微鏡下計算的樣品中微生物數(shù)量 但不能區(qū)分細菌的 血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片 上面有一個特定的容積為mm3的計數(shù)室 計數(shù)室的規(guī)格有兩種 分別是25 16個小方格或16 25個小方格 但兩種規(guī)格的計數(shù)室都是由個小格組成的 具體如右圖 一定容積 死活 1 1 0 1 400 2 操作 將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片 用無菌的毛細滴管吸取搖勻的土壤微生物培養(yǎng)液 在滴一小滴 讓培養(yǎng)液沿著縫隙通過毛細滲透作用自動進入計數(shù)室 加樣后靜置min 然后將血球計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上 先用 找到計數(shù)室所在位置 再換成進行觀察和計數(shù) 3 計數(shù) 若規(guī)格為16 25型的血球計數(shù)板 則在計數(shù)室內(nèi)選個中方格 如圖中加黑點的左上 右上 左下 右下四個角 中的菌體進行計數(shù) 蓋玻片的邊緣 5 低倍鏡 高倍鏡 4 若使用規(guī)格為25 16型的血球計數(shù)板 則在計數(shù)室內(nèi)選個中方格 四個角和中央的方格 中的菌體進行計數(shù) 對位于格線上的菌體 一般只統(tǒng)計格線上的 求出每個所含細菌的平均數(shù) 再按下面公式求出樣品中所含的細菌數(shù) 計算公式如下 每ml原液所含細菌數(shù) 400 104 4 使用完畢后 將血球計數(shù)板用水反復(fù)沖洗干凈 切勿用硬物洗刷 洗完后自然即可 5 上方和右邊 小格 每毫升 每小格平均細菌數(shù) 稀釋倍數(shù) 晾干 問題探究 1 篩選分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基下面是篩選分解尿素的細菌使用的培養(yǎng)基的配方 請分析 1 在培養(yǎng)基的配方中 為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì) 答案碳源是葡萄糖 氮源是尿素 2 分離分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基是如何進行選擇的 答案該選擇培養(yǎng)基的配方中 尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源 因此 只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長 3 為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長 答案分解尿素的微生物能合成脲酶 而脲酶可將尿素分解成氨 從而為微生物生長提供氮源 答案 2 下面是土壤中尿素分解菌的分離與計數(shù)的實驗流程示意圖 請結(jié)合教材提供的資料分析回答下列問題 1 試寫出分離土壤中分解尿素的細菌的實驗流程 答案 答案土壤取樣 樣品稀釋 取樣涂布 微生物培養(yǎng) 觀察并記錄結(jié)果 細菌計數(shù) 2 統(tǒng)計菌落數(shù)目甲 乙兩位同學(xué)用涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù) 在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中 得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果 甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板 統(tǒng)計的菌落數(shù)為230 該同學(xué)的統(tǒng)計結(jié)果是否真實可靠 為什么 答案不真實 為增加實驗的說服力與準確性 應(yīng)設(shè)置重復(fù)實驗 在同一稀釋度下涂布3個平板 統(tǒng)計結(jié)果后計算平均值 答案 乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板 統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21 212 256 該同學(xué)將21舍去 然后取平均值 該同學(xué)對實驗結(jié)果的處理是否合理 為什么 答案不合理 微生物計數(shù)時 如果實驗中出現(xiàn)重復(fù)實驗的結(jié)果不一致的情況 應(yīng)分析實驗過程中可能的影響因素 找出差異的原因 而不能簡單地舍棄后進行計數(shù) 答案 某同學(xué)在三種稀釋度下吸取0 1ml的菌液涂布平板 統(tǒng)計菌落數(shù) 得到以下的數(shù)據(jù) 試計算1g樣品的活菌數(shù) 答案105的稀釋度下取0 1ml涂布的三個平板上的菌落數(shù)在30 300之間 計算其平均值為 212 234 287 3 244 進一步可以換算出1g樣品中活菌數(shù)為 244 0 1 105 2 44 108 答案 為什么統(tǒng)計的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目低 答案當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時 平板上觀察到的只是一個菌落 答案 分離尿素分解菌操作中的注意事項 1 在實驗操作中 每個步驟都要注意無菌操作 以防培養(yǎng)基被污染 影響實驗效果 2 樣品稀釋液的最佳濃度為獲得每個平板上有30 300個菌落 這個稀釋度細菌一般為104 105 106倍稀釋液 放線菌一般為103 104 105倍稀釋液 真菌一般為102 103 104倍稀釋液 3 為排除非測試因素 培養(yǎng)基 的干擾 實驗需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行空白對照 4 每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個平板 作為重復(fù)實驗 求其平均值 若其中有菌落數(shù)與其他平板懸殊過大的 需要對該平板重新制作 拓展應(yīng)用 3 下列有關(guān)微生物篩選的敘述中 不正確的是a 用全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基篩選大腸桿菌b 用高nacl的培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株c 含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株d 利用高溫條件篩選耐熱的taq細菌 答案 解析 解析全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于大腸桿菌的培養(yǎng) 該培養(yǎng)基對微生物無選擇作用 a項錯誤 抗鹽突變菌株具有耐高鹽的能力 因此可以利用高nacl的選擇培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng) b項正確 分解尿素的菌株會分解尿素形成氨 使培養(yǎng)基ph升高 因此可以利用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株 c項正確 利用高溫條件可以篩選耐熱的taq細菌 d項正確 解析若對大腸桿菌進行計數(shù) 則需要用涂布平板法接種樣品 4 自然界中的微生物往往是混雜生長的 人們在研究微生物時一般要將它們分離提純 然后進行數(shù)量的測定 下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗 請回答下列有關(guān)問題 1 實驗步驟 制備稀釋倍數(shù)為102 103 104 105 106的系列稀釋液 為了得到更加準確的結(jié)果 應(yīng)選用法接種樣品 適宜溫度下培養(yǎng) 答案 解析 涂布平板 2 結(jié)果分析 測定大腸桿菌數(shù)目時 在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中 得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果 與事實更加接近的是 a 一個平板 統(tǒng)計的菌落數(shù)是230b 兩個平板 統(tǒng)計的菌落數(shù)是220和260 取平均值240c 三個平板 統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是400 212和256 取平均值289d 四個平板 統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210 260 240和250 取平均值240 答案 解析 解析應(yīng)選取多個菌落數(shù)相差不大的平板進行計數(shù) 取其平均值 一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為212 那么每毫升樣品中的菌落數(shù)約是 涂布平板時所用的稀釋液體積為0 2ml 用這種方法測定菌體密度時 實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量 填 多 或 少 因為 答案 解析 解析212 0 2 106 1 06 109 個 1 06 109個 多 當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時 平板上觀察到的只是一個 菌落 解析因為一個菌落可能由兩個或多個細菌連在一起生長而成 所以實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多 1 如果某同學(xué)的稀釋倍數(shù)僅為104 則測定的數(shù)值要比題中測定的數(shù)值高還是低 為什么 答案低 因為稀釋倍數(shù)太低 則大部分菌落是由多個細菌繁殖而成 所以測定的菌落的數(shù)值要偏低 2 第 2 問第 小題c項中菌落數(shù)為400的平板不符合要求 試分析該平板中菌落數(shù)目多于其他平板的可能的原因 答案a 培養(yǎng)基被污染 一些菌落是由雜菌繁殖而成的 b 接種過程中由于操作不當(dāng)感染了雜菌 c 取菌液時沒有搖晃 導(dǎo)致所取菌液中細菌個體濃度偏大等 答案 用涂布平板法計數(shù)微生物的注意事項 1 涂布平板操作要求 按照平行重復(fù)的原則 每一稀釋度的菌液涂布3個或3個以上的平板 2 計數(shù)的時機 當(dāng)各平板上菌落數(shù)目穩(wěn)定時進行計數(shù) 3 選擇可用于計數(shù)的平板 選擇菌落數(shù)在30 300之間的平板 相同稀釋度的平板均符合該特點 進行計數(shù) 然后取平均值 三 分離土壤中能分解纖維素的微生物 基礎(chǔ)梳理 1 原理 1 土壤中能分解纖維素的微生物 都能分泌 將纖維素分解成小分子糖類物質(zhì)以滿足自身生命活動的需要 2 培養(yǎng)基 以為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基 2 纖維素分解菌的鑒定 剛果紅染色法 即通過是否產(chǎn)生來說明菌落是由能分解纖維素的細菌形成的 其原理是 纖維素分解菌 剛果紅纖維素 紅色消失 出現(xiàn) 纖維素酶 纖維素 透明圈 紅色復(fù)合物 透明圈 1 鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基 1 鑒別纖維素分解菌時需在培養(yǎng)基中添加什么物質(zhì) 答案剛果紅染色劑 2 鑒別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基在目的和物理性質(zhì)方面的區(qū)別是什么 答案 鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某些特定的作用底物和指示劑 觀察微生物生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物 通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別微生物 選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì) 以促進目的菌的生長繁殖 同時抑制其他雜菌的生長繁殖 選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基中沒有加入瓊脂 所以屬于液體培養(yǎng)基 而鑒別培養(yǎng)基一般為固體培養(yǎng)基 問題探究 答案 2 透明圈的形成 1 對分離的纖維素分解菌作進一步的鑒定的原因是什么 答案產(chǎn)生透明圈的菌落可能是能產(chǎn)生纖維素酶的微生物 也可能是能降解剛果紅的菌種 所以需要進一步鑒定 2 簡要概述篩選纖維素分解菌時透明圈是如何形成的 答案纖維素分解菌分解纖維素產(chǎn)生的纖維二糖和葡萄糖 不能與剛果紅形成紅色復(fù)合物 而出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 3 向含有分解尿素的細菌的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 會出現(xiàn)類似的圈嗎 答案分解尿素的細菌能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂?加入酚紅指示劑后會變紅 也會形成以尿素分解菌為中心的紅色的圈 答案 5 分析下表培養(yǎng)基的配方 請回答下面的問題 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基 將物質(zhì)溶解后 用蒸餾水定容到1000ml 1 此培養(yǎng)基配方中為微生物提供碳源的主要是 氮源是 2 此配方為培養(yǎng)基 根據(jù)物理狀態(tài) 配方 3 此培養(yǎng)基選擇出的微生物主要是 拓展應(yīng)用 答案 解析 纖維素粉 nano3 酵母膏 水解酪素 液體 纖維素 分解菌 問題導(dǎo)析 問題導(dǎo)析 1 該培養(yǎng)基中是主要的碳源 所以可以用于篩選 2 由于該培養(yǎng)基中沒有加入 所以為培養(yǎng)基 該培養(yǎng)基中微生物與營養(yǎng)成分的接觸更充分 可以提高微生物的代謝效率 纖維素 纖維素分解菌 瓊脂 液體 答案 返回上頁 解析該培養(yǎng)基的主要碳源是纖維素粉 氮源有nano3 酵母膏 水解酪素 因沒有凝固劑成分 因此 該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看屬于液體培養(yǎng)基 因該培養(yǎng)基僅以纖維素粉為主要碳源 因此 可用于選擇培養(yǎng)纖維素分解菌 返回上頁 1 從土壤中分離纖維素分解菌時 哪種情況下可以省略選擇培養(yǎng) 答案當(dāng)土壤中纖維素分解菌的濃度很高時 可以省略選擇培養(yǎng)這一步驟 2 本題中的培養(yǎng)基配方中的酵母膏可以為微生物提供什么成分 答案可以提供碳源 氮源和生長因子 3 該培養(yǎng)基中纖維素是否為唯一的碳源 答案不是 纖維素是主要的碳源 另外 酵母膏和水解酪素也可以提供少量的碳源 答案 解析剛果紅可以在細菌菌落形成前倒平板時加入 也可以在菌落形成后加入 若在細菌菌落形成前倒平板時加入剛果紅 則所加剛果紅要進行滅菌 以防雜菌的侵入 影響纖維素分解菌菌落的形成 若在菌落形成后加入剛果紅 則不需要滅菌 6 下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述 不正確的是a 剛果紅可以在細菌菌落形成前倒平板時加入b 剛果紅可以在菌落形成后加入c 剛果紅在菌落形成前倒平板時加入 加入的剛果紅不需要滅菌d 在菌落形成后加入剛果紅時 剛果紅不需要滅菌 答案 解析 關(guān)于纖維素分解菌篩選的三個易錯警示 1 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中的碳源并不只有纖維素 其中酵母膏和水解酪素也可起碳源的作用 2 在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中生長的不只有纖維素分解菌 因此 選擇培養(yǎng)后要進行鑒別培養(yǎng) 才能獲得纖維素分解菌 3 出現(xiàn)透明圈的菌落也不一定是纖維素分解菌 課堂小結(jié) 涂布平板 當(dāng)堂檢測 1 菌種鑒定的重要依據(jù)是a 細菌的大小 形狀和顏色b 菌落的大小 形狀和顏色c 有無鞭毛d 培養(yǎng)基的不同 2 3 4 1 解析不同種類的微生物所形成的菌落在大小 形狀 邊緣特征 隆起程度 顏色等方面具有一定的差異 所以 在一定條件下所形成的菌落 可以作為微生物鑒定的重要依據(jù) 單個的細菌用肉眼是看不見的 故細菌的個體特征不能作為菌種鑒定的依據(jù) 答案 解析 解析在設(shè)計實驗時 一定要涂布至少3個平板 作為重復(fù)組 才能增強實驗結(jié)果的說服力與準確性 c項雖涂布了三個平板 但是 其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太

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