新城疫防治技術(shù)規(guī)范.doc

九、新城疫防治技術(shù)規(guī)范新城疫（Newcastle Disease，ND），是由副粘病毒科副粘病毒亞科腮腺炎病毒屬的禽副粘病毒I型引起的高度接觸性禽類烈性傳染病。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。為預(yù)防、控制和撲滅新城疫，依據(jù)中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法、重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例、國(guó)家突發(fā)重大動(dòng)物疫情應(yīng)急預(yù)案及有關(guān)的法律法規(guī)，制定本規(guī)范。1 適用范圍本規(guī)范規(guī)定了新城疫的診斷、疫情報(bào)告、疫情處理、預(yù)防措施、控制和消滅標(biāo)準(zhǔn)。本規(guī)范適用于中華人民共和國(guó)境內(nèi)的一切從事禽類飼養(yǎng)、經(jīng)營(yíng)和禽類產(chǎn)品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)，以及從事動(dòng)物防疫活動(dòng)的單位和個(gè)人。2 診斷依據(jù)本病流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)等可做出診斷,必要時(shí)由國(guó)家指定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行毒力鑒定。2.1 流行特點(diǎn)雞、火雞、鵪鶉、鴿子、鴨、鵝等多種家禽及野禽均易感，各種日齡的禽類均可感染。非免疫易感禽群感染時(shí)，發(fā)病率、死亡率可高達(dá)90%以上；免疫效果不好的禽群感染時(shí)癥狀不典型，發(fā)病率、死亡率較低。本病傳播途徑主要是消化道和呼吸道。傳染源主要為感染禽及其糞便和口、鼻、眼的分泌物。被污染的水、飼料、器械、器具和帶毒的野生飛禽、昆蟲及有關(guān)人員等均可成為主要的傳播媒介。2.2 臨床癥狀 2.2.1 本規(guī)范規(guī)定本病的潛伏期為21天。臨床癥狀差異較大，嚴(yán)重程度主要取決于感染毒株的毒力、免疫狀態(tài)、感染途徑、品種、日齡、其它病原混合感染情況及環(huán)境因素等。根據(jù)病毒感染禽所表現(xiàn)臨床癥狀的不同，可將新城疫病毒分為5種致病型：嗜內(nèi)臟速發(fā)型(Viscerotropic velogenic)：以消化道出血性病變?yōu)橹饕卣?，死亡率高；嗜神?jīng)速發(fā)型(Neurogenic Velogenic)：以呼吸道和神經(jīng)癥狀為主要特征，死亡率高；中發(fā)型(Mesogenic)：以呼吸道和神經(jīng)癥狀為主要特征，死亡率低；緩發(fā)型(Lentogenic or respiratory)：以輕度或亞臨床性呼吸道感染為主要特征；無(wú)癥狀腸道型(Asymptomatic enteric)：以亞臨床性腸道感染為主要特征。2.2.2 典型癥狀2.2.2.1 發(fā)病急、死亡率高；2.2.2.2 體溫升高、極度精神沉郁、呼吸困難、食欲下降；2.2.2.3 糞便稀薄，呈黃綠色或黃白色；2.2.2.4 發(fā)病后期可出現(xiàn)各種神經(jīng)癥狀，多表現(xiàn)為扭頸、翅膀麻痹等。2.2.2.5 在免疫禽群表現(xiàn)為產(chǎn)蛋下降。2.3 病理學(xué)診斷2.3.1 剖檢病變2.3.1.1 全身黏膜和漿膜出血，以呼吸道和消化道最為嚴(yán)重；2.3.1.2 腺胃黏膜水腫，乳頭和乳頭間有出血點(diǎn)；2.3.1.3 盲腸扁桃體腫大、出血、壞死；2.3.1.4 十二指腸和直腸黏膜出血，有的可見(jiàn)纖維素性壞死病變；2.3.1.5 腦膜充血和出血；鼻道、喉、氣管黏膜充血，偶有出血，肺可見(jiàn)淤血和水腫。2.3.2 組織學(xué)病變2.3.2.1 多種臟器的血管充血、出血，消化道黏膜血管充血、出血，喉氣管、支氣管黏膜纖毛脫落，血管充血、出血，有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；2.3.2.2 中樞神經(jīng)系統(tǒng)可見(jiàn)非化膿性腦炎，神經(jīng)元變性，血管周圍有淋巴細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)形成的血管套。2.4 實(shí)驗(yàn)室診斷實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)診斷必須在相應(yīng)級(jí)別的生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。2.4.1 病原學(xué)診斷病毒分離與鑒定（見(jiàn)GB16550、附件1)2.4.1.1 雞胚死亡時(shí)間（MDT）低于90h；2.4.1.2 采用腦內(nèi)接種致病指數(shù)測(cè)定(ICPI)，ICPI達(dá)到0.7以上者；2.4.1.3 F蛋白裂解位點(diǎn)序列測(cè)定試驗(yàn)，分離毒株F1蛋白N末端117位為苯丙酸氨酸（F），F(xiàn)2蛋白C末端有多個(gè)堿性氨基酸的；2.4.1.4 靜脈接種致病指數(shù)測(cè)定(IVPI)試驗(yàn)， IVPI值為2.0以上的。2.4.2 血清學(xué)診斷微量紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（HI）（參見(jiàn)GB16550）。2.5 結(jié)果判定2.5.1 疑似新城疫符合2.1和臨床癥狀2.2.2.1，且至少有臨床癥狀2.2.2.2、2.2.2.3、2.2.2.4、2.2.2.5或/和剖檢病變2.3.1.1、2.3.1.2、2.3.1.3、 2.3.1.4、2.3.1.5或/和組織學(xué)病變2.3.2.1、2.3.2.2之一的，且能排除高致病性禽流感和中毒性疾病的。2.5.2 確診非免疫禽符合結(jié)果判定2.5.1，且符合血清學(xué)診斷2.4.2的；或符合病原學(xué)診斷2.4.1.1、2.4.1.2、2.4.1.3、2.4.1.4之一的；免疫禽符合結(jié)果2.5.1，且符合病原學(xué)診斷2.4.1.1、2.4.1.2、2.4.1.3、2.4.1.4之一的。3 疫情報(bào)告3.1 任何單位和個(gè)人發(fā)現(xiàn)患有本病或疑似本病的禽類，都應(yīng)當(dāng)立即向當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)報(bào)告。3.2 當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)接到疫情報(bào)告后，按國(guó)家動(dòng)物疫情報(bào)告管理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。4 疫情處理根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀、剖檢病變，結(jié)合血清學(xué)檢測(cè)做出的臨床診斷結(jié)果可作為疫情處理的依據(jù)。4.1 發(fā)現(xiàn)可疑新城疫疫情時(shí)，畜主應(yīng)立即將病禽（場(chǎng)）隔離，并限制其移動(dòng)。動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)要及時(shí)派員到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查核實(shí)，診斷為疑似新城疫時(shí)，立即采取隔離、消毒、限制移動(dòng)等臨時(shí)性措施。同時(shí)要及時(shí)將病料送省級(jí)動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室確診。4.2 當(dāng)確診新城疫疫情后，當(dāng)?shù)乜h級(jí)以上人民政府獸醫(yī)主管部門應(yīng)當(dāng)立即劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)，并采取相應(yīng)措施；同時(shí)，及時(shí)報(bào)請(qǐng)同級(jí)人民政府對(duì)疫區(qū)實(shí)行封鎖，逐級(jí)上報(bào)至國(guó)務(wù)院獸醫(yī)主管部門，并通報(bào)毗鄰地區(qū)。國(guó)務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門根據(jù)確診結(jié)果，確認(rèn)新城疫疫情。4.2.1 劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)由所在地縣級(jí)以上（含縣級(jí)）獸醫(yī)主管部門劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)。疫點(diǎn)：指患病禽類所在的地點(diǎn)。一般是指患病禽類所在的禽場(chǎng)（戶）或其它有關(guān)屠宰、經(jīng)營(yíng)單位；如為農(nóng)村散養(yǎng)，應(yīng)將自然村劃為疫點(diǎn)。疫區(qū)：指以疫點(diǎn)邊緣外延3公里范圍內(nèi)區(qū)域。疫區(qū)劃分時(shí)，應(yīng)注意考慮當(dāng)?shù)氐娘曫B(yǎng)環(huán)境和天然屏障（如河流、山脈等）。受威脅區(qū)：指疫區(qū)邊緣外延5公里范圍內(nèi)的區(qū)域。4.2.2 封鎖由縣級(jí)以上獸醫(yī)主管部門報(bào)請(qǐng)同級(jí)人民政府決定對(duì)疫區(qū)實(shí)行封鎖；人民政府在接到封鎖報(bào)告后，應(yīng)立即做出決定，發(fā)布封鎖令。4.2.3 疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)采取的措施疫點(diǎn)：撲殺所有的病禽和同群禽只，并對(duì)所有病死禽、被撲殺禽及其禽類產(chǎn)品按照GB16548規(guī)定進(jìn)行無(wú)害化處理；對(duì)禽類排泄物、被污染或可能污染飼料和墊料、污水等均需進(jìn)行無(wú)害化處理；對(duì)被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、場(chǎng)地進(jìn)行嚴(yán)格徹底消毒；限制人員出入，嚴(yán)禁禽、車輛進(jìn)出，嚴(yán)禁禽類產(chǎn)品及可能污染的物品運(yùn)出。疫區(qū)：對(duì)疫區(qū)進(jìn)行封鎖，在疫區(qū)周圍設(shè)置警示標(biāo)志，在出入疫區(qū)的交通路口設(shè)置動(dòng)物檢疫消毒站(臨時(shí)動(dòng)物防疫監(jiān)督檢查站)，對(duì)出入的人員和車輛進(jìn)行消毒；對(duì)易感禽只實(shí)施緊急強(qiáng)制免疫，確保達(dá)到免疫保護(hù)水平；關(guān)閉活禽及禽類產(chǎn)品交易市場(chǎng)，禁止易感活禽進(jìn)出和易感禽類產(chǎn)品運(yùn)出；對(duì)禽類排泄物、被污染飼料、墊料、污水等按國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行無(wú)害化處理；對(duì)被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、場(chǎng)地進(jìn)行嚴(yán)格徹底消毒。受威脅區(qū)：對(duì)易感禽只(未免禽只或免疫未達(dá)到免疫保護(hù)水平的禽只)實(shí)施緊急強(qiáng)制免疫，確保達(dá)到免疫保護(hù)水平；對(duì)禽類實(shí)行疫情監(jiān)測(cè)和免疫效果監(jiān)測(cè)。4.2.4 緊急監(jiān)測(cè)對(duì)疫區(qū)、受威脅區(qū)內(nèi)的禽群必須進(jìn)行臨床檢查和血清學(xué)監(jiān)測(cè)。4.2.5 疫源分析與追蹤調(diào)查根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，分析疫源及其可能擴(kuò)散、流行的情況。對(duì)可能存在的傳染源，以及在疫情潛伏期和發(fā)病期間售(運(yùn))出的禽類及其產(chǎn)品、可疑污染物（包括糞便、墊料、飼料等）等應(yīng)當(dāng)立即開展追蹤調(diào)查，一經(jīng)查明立即按照GB16548規(guī)定進(jìn)行無(wú)害化處理。4.2.6 封鎖令的解除疫區(qū)內(nèi)沒(méi)有新的病例發(fā)生，疫點(diǎn)內(nèi)所有病死禽、被撲殺的同群禽及其禽類產(chǎn)品按規(guī)定處理21 天后，對(duì)有關(guān)場(chǎng)所和物品進(jìn)行徹底消毒，經(jīng)動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)審驗(yàn)合格后，由當(dāng)?shù)孬F醫(yī)主管部門提出申請(qǐng)，由原發(fā)布封鎖令的人民政府發(fā)布解除封鎖令。4.2.7 處理記錄對(duì)處理疫情的全過(guò)程必須做好詳細(xì)的記錄（包括文字、圖片和影像等），并完整建檔。 5 預(yù)防以免疫為主，采取“撲殺與免疫相結(jié)合”的綜合性防治措施。5.1 飼養(yǎng)管理與環(huán)境控制 飼養(yǎng)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)等場(chǎng)所必須符合動(dòng)物防疫條件審核管理辦法（農(nóng)業(yè)部200215號(hào)令）規(guī)定的動(dòng)物防疫條件，并加強(qiáng)種禽調(diào)運(yùn)檢疫管理。飼養(yǎng)場(chǎng)實(shí)行全進(jìn)全出飼養(yǎng)方式，控制人員、車輛和相關(guān)物品出入，嚴(yán)格執(zhí)行清潔和消毒程序。養(yǎng)禽場(chǎng)要設(shè)有防止外來(lái)禽鳥進(jìn)入的設(shè)施，并有健全的滅鼠設(shè)施和措施。5.2 消毒各飼養(yǎng)場(chǎng)、屠宰廠（場(chǎng)）、動(dòng)物防疫監(jiān)督檢查站等要建立嚴(yán)格的衛(wèi)生（消毒）管理制度。禽舍、禽場(chǎng)環(huán)境、用具、飲水等應(yīng)進(jìn)行定期嚴(yán)格消毒；養(yǎng)禽場(chǎng)出入口處應(yīng)設(shè)置消毒池，內(nèi)置有效消毒劑。5.3 免疫 國(guó)家對(duì)新城疫實(shí)施全面免疫政策。免疫按農(nóng)業(yè)部制定的免疫方案規(guī)定的程序進(jìn)行。所用疫苗必須是經(jīng)國(guó)務(wù)院獸醫(yī)主管部門批準(zhǔn)使用的新城疫疫苗。5.4 監(jiān)測(cè) 5.4.1 由縣級(jí)以上動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)組織實(shí)施。5.4.2 監(jiān)測(cè)方法 未免疫區(qū)域：流行病學(xué)調(diào)查、血清學(xué)監(jiān)測(cè)，結(jié)合病原學(xué)監(jiān)測(cè)。已免疫區(qū)域：以病原學(xué)監(jiān)測(cè)為主，結(jié)合血清學(xué)監(jiān)測(cè)。 5.4.3 監(jiān)測(cè)對(duì)象：雞、火雞、鵝、鵪鶉、鴿、鴨等易感禽類。5.4.4 監(jiān)測(cè)范圍和比例5.4.4.1 對(duì)所有原種、曾祖代、祖代和父母代養(yǎng)禽場(chǎng)，及商品代養(yǎng)禽場(chǎng)每年要進(jìn)行兩次監(jiān)測(cè)；散養(yǎng)禽不定期抽檢。 5.4.4.2 血清學(xué)監(jiān)測(cè)：原種、曾祖代、祖代和父母代種禽場(chǎng)的監(jiān)測(cè)，每批次按照0.1%的比例采樣；有出口任務(wù)的規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，每批次按照0.5%比例進(jìn)行監(jiān)測(cè)；商品代養(yǎng)禽場(chǎng)，每批次（群）按照0.05%的比例進(jìn)行監(jiān)測(cè)。每批次（群）監(jiān)測(cè)數(shù)量不得少于20 份。飼養(yǎng)場(chǎng)（戶）可參照上述比例進(jìn)行檢測(cè)。5.4.4.3 病原學(xué)監(jiān)測(cè)：每群采10 只以上禽的氣管和泄殖腔棉拭子，放在同一容器內(nèi)，混合為一個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)。5.4.4.3 監(jiān)測(cè)預(yù)警各級(jí)動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果及相關(guān)信息進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，做好預(yù)警預(yù)報(bào)。5.4.4.5 監(jiān)測(cè)結(jié)果處理 監(jiān)測(cè)結(jié)果要及時(shí)匯總，由省級(jí)動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)定期上報(bào)中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。5.5 檢疫5.5.1 按照GB16550執(zhí)行。5.5.2 國(guó)內(nèi)異地引入種禽及精液、種蛋時(shí)，應(yīng)取得原產(chǎn)地動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)的檢疫合格證明。到達(dá)引入地后，種禽必須隔離飼養(yǎng)21 天以上，并由當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)，合格后方可混群飼養(yǎng)。 從國(guó)外引入種禽及精液、種蛋時(shí)，按國(guó)家有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。6 控制和消滅標(biāo)準(zhǔn)6.1 免疫無(wú)新城疫區(qū)6.1.1 該區(qū)域首先要達(dá)到國(guó)家無(wú)規(guī)定疫病區(qū)基本條件。6.1.2 有定期和快速(詳實(shí))的動(dòng)物疫情報(bào)告記錄。6.1.3 該區(qū)域在過(guò)去3年內(nèi)未發(fā)生過(guò)新城疫。6.1.4 該區(qū)域和緩沖帶實(shí)施強(qiáng)制免疫，免疫密度100%，所用疫苗必須符合國(guó)家獸醫(yī)主管部門規(guī)定的弱毒疫苗（ICPI小于或等于0.4）或滅活疫苗。6.1.5 該區(qū)域和緩沖帶須具有運(yùn)行有效的監(jiān)測(cè)體系，過(guò)去3年內(nèi)實(shí)施疫病和免疫效果監(jiān)測(cè)，未檢出ICPI大于0.4的病原，免疫效果確實(shí)。6.1.6 若免疫無(wú)疫區(qū)內(nèi)發(fā)生新城疫時(shí)，在具備有效的疫情監(jiān)測(cè)條件下,對(duì)最后一例病禽撲殺后6個(gè)月，方可重新申請(qǐng)免疫無(wú)新城疫區(qū)。6.1.7 所有的報(bào)告、記錄等材料詳實(shí)、準(zhǔn)確和齊全。6.2 非免疫無(wú)新城疫區(qū)6.2.1 該區(qū)域首先要達(dá)到國(guó)家無(wú)規(guī)定疫病區(qū)基本條件。6.2.2 有定期和快速(詳實(shí))的動(dòng)物疫情報(bào)告記錄。6.2.3 在過(guò)去3年內(nèi)沒(méi)有發(fā)生過(guò)新城疫，并且在過(guò)去6個(gè)月內(nèi)，沒(méi)有進(jìn)行過(guò)免疫接種；另外，該地區(qū)在停止免疫接種后，沒(méi)有引進(jìn)免疫接種過(guò)的禽類。6.2.4 在該區(qū)具有有效的監(jiān)測(cè)體系和監(jiān)測(cè)帶，過(guò)去3年內(nèi)實(shí)施疫病監(jiān)測(cè)，未檢出ICPI大于0.4的病原或新城疫 HI試驗(yàn)滴度小于23。6.2.5 當(dāng)發(fā)生疫情后，重新達(dá)到無(wú)疫區(qū)須做到：采取撲殺措施及血清學(xué)監(jiān)測(cè)情況下最后一例病例被撲殺3個(gè)月后，或采取撲殺措施、血清學(xué)監(jiān)測(cè)及緊急免疫情況下最后一只免疫禽被屠宰 后6個(gè)月后重新執(zhí)行(認(rèn)定)，并達(dá)到6.2.3、6.2.4的規(guī)定。6.2.6 所有的報(bào)告、記錄等材料詳實(shí)、準(zhǔn)確和齊全。附件1新城疫病原分離與鑒定當(dāng)臨床診斷有新城疫發(fā)生時(shí)，應(yīng)從發(fā)病禽或死亡禽采集病料，進(jìn)行病原分離、鑒定和毒力測(cè)定。1 樣品的采集、保存及運(yùn)輸1.1 樣品采集1.1.1 采集原則。采集樣品時(shí)，必須嚴(yán)格按照無(wú)菌程序操作。采自于不同發(fā)病禽或死亡禽的病料應(yīng)分別保存和標(biāo)記。每群至少采集5只發(fā)病禽或死亡禽的樣品。1.1.2 樣品內(nèi)容發(fā)病禽：采集氣管拭子和泄殖腔拭子（或糞便）；死亡禽：以腦為主；也可采集脾、肺、氣囊等組織。1.2 樣品保存1.2.1 樣品置于樣品保存液（0.01M PBS溶液，含抗生素且pH為7.07.4）中，抗生素視樣品種類和情況而定。對(duì)組織和氣管拭子保存液應(yīng)含青霉素（1000IU/mL）、鏈霉素（1mg/mL），或卡那霉素（50g/mL）、制霉菌素（1000IU/mL）；對(duì)泄殖腔拭子(或糞便)保存液的抗菌素濃度應(yīng)提高5倍。1.2.2 采集的樣品應(yīng)盡快處理，如果沒(méi)有處理?xiàng)l件，樣品可在4 保存4天；若超過(guò)4天，需置-20保存。1.3 樣品運(yùn)輸所有樣品必須置于密閉容器，并貼有詳細(xì)標(biāo)簽，以最快捷的方式送檢（如：航空快遞等）。如果在24小時(shí)內(nèi)無(wú)法送達(dá)，則應(yīng)用干冰致冷送檢。1.4 樣品采集、保存及運(yùn)輸按照高致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范（農(nóng)業(yè)部公告第503號(hào)）執(zhí)行。2 病毒分離與鑒定2.1 病毒分離與鑒定：按照GB 16550附錄A3.3、A4.1、A4.2進(jìn)行。2.2 病原毒力測(cè)定2.2.1 最小病毒致死量引起雞胚死亡平均時(shí)間(MDT)測(cè)定試驗(yàn)按照GB 16550附錄A4.3進(jìn)行；依據(jù)MDT可將NDV分離株分為強(qiáng)毒力型（死亡時(shí)間60小時(shí)）；中等毒力型（60小時(shí)死亡時(shí)間90小時(shí)；溫和型（死亡時(shí)間90小時(shí)）。 2.2.2 腦內(nèi)致病指數(shù)(ICPI)測(cè)定試驗(yàn)收獲接種過(guò)病毒的SPF雞胚的尿囊液，測(cè)定其血凝價(jià)24，將含毒尿囊液用等滲滅菌生理鹽水作10倍稀釋(切忌使用抗生素)，將此稀釋病毒液以0.05mL/羽腦內(nèi)接種出殼2440小時(shí)的SPF雛雞10只,2只同樣雛雞0.05mL/羽接種稀釋液作對(duì)照(對(duì)照雞不應(yīng)發(fā)病，也不計(jì)入試驗(yàn)雞)。每24小時(shí)觀察一次，共觀察8天。每次觀察應(yīng)給雞打分，正常雞記作0，病雞記作1，死雞記為2（死亡雞在其死后的每日觀察結(jié)果都記為2）。ICPI值=每只雞在8天內(nèi)所有分值之和(10只雞8天)，如指數(shù)為2.0，說(shuō)明所有雞24小時(shí)內(nèi)死亡；指數(shù)為0.0，說(shuō)明8天觀察期內(nèi)沒(méi)有雞表現(xiàn)臨床癥狀。當(dāng)ICPI達(dá)到0.7或0.7以上者可判為新城疫中強(qiáng)毒感染。2.2.3 F蛋白裂解位點(diǎn)序列測(cè)定試驗(yàn)NDV糖蛋白的裂解活性是決定NDV病原性的基本條件,F基因裂解位點(diǎn)的核苷酸序列分析,發(fā)現(xiàn)在112117位點(diǎn)處, 強(qiáng)毒株為112Arg-Arg-Gln-Lys(或Arg)-Arg-PHe117;弱毒株為112Gly-Arg(或Lys)-Gln- Gly-Arg-Leu117 這是NDV致病的分子基礎(chǔ)。個(gè)別鴿源變異株（PPMV-1）112Gly-Arg-Gln-Lys-Arg-PHe117,但I(xiàn)CPI值卻較高。因此，在115、116位為一對(duì)堿性氨基酸和117位為苯丙氨酸（PHe）和113位為堿性氨基酸是強(qiáng)毒株特有結(jié)構(gòu)。根據(jù)對(duì)NDV F基因112-117位的核苷酸序列即可判定其是否為強(qiáng)毒株。 (Arg-精氨酸；Gly-甘氨酸；Gln-谷氨酰胺；Leu-亮氨酸；Lys-賴氨酸)。分離毒株F1蛋白N末端117位為苯丙氨酸（F），F(xiàn)2蛋白C末端有多個(gè)堿性氨基酸的可判為新城疫感染?！岸鄠€(gè)堿性氨基酸”是指113至116位至少有3個(gè)精氨酸或賴氨酸（氨基酸殘基是從后F0蛋白基因的N末端開始計(jì)數(shù)的，113至116對(duì)應(yīng)于裂解位點(diǎn)的-4至-1位）。2.2.4 靜脈致病指數(shù)(IVPI)測(cè)定試驗(yàn)收獲接種病毒的SPF雞胚的感染性尿囊液，測(cè)定其血凝價(jià)24，將含毒尿囊液用等滲滅菌生理鹽水作10倍稀釋(切忌使用抗生素)，將此稀釋病毒液以0.1mL/羽靜脈