教師版2.2.2《動物細(xì)胞融合與單克隆抗體》導(dǎo)學(xué)案

精品文檔 1歡迎下載 專題二細(xì)胞工程專題二細(xì)胞工程 動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程 2 2 22 2 2 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體動物細(xì)胞融合與單克隆抗體 一 預(yù)習(xí)目標(biāo) 預(yù)習(xí)動物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過程 了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用 并說其應(yīng)用實例 二 預(yù)習(xí)內(nèi)容 動物細(xì)胞融合 1 概念 或 動物細(xì)胞結(jié)合形一個細(xì)胞的過程 也稱細(xì)胞雜交 2 結(jié)果 形成 3 過程 兩個或多個細(xì)胞 PEG滅活的病毒或 4 意義 克服了 的不親和性 成為研究 腫瘤和 培育的重要手段 單克隆抗體 1 抗體 產(chǎn)生細(xì)胞 成分 特點 從 中分離出的抗體產(chǎn)量低 純度低 特異性差 2 單克隆抗體的制備 1 過程 雜交瘤細(xì)胞的特點 單克隆抗體的優(yōu)點 單克隆抗體的應(yīng)用 1 作為診斷試劑 具有 的優(yōu)點 2 用于治療疾病和運載藥物 主要用于治療 可制成 三 提出疑惑 同學(xué)們 通過你的自主學(xué)習(xí) 你還有哪些疑惑 請把它填在下面的表格中 疑惑點疑惑內(nèi)容 給小鼠注射特 定的抗原蛋白 培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞 從 中分 離 B 淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 滅活病毒融合 未融合細(xì)胞 選擇培養(yǎng)基 克隆檢測 小鼠體內(nèi)培 養(yǎng) 體外培養(yǎng) 抗體 精品文檔 2歡迎下載 課內(nèi)探究學(xué)案 一 學(xué)習(xí)目標(biāo) 1 掌握動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系 2 簡述動物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過程 3 了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用 并說其應(yīng)用實例 學(xué)習(xí)重難點 單克隆抗體的制備 二 學(xué)習(xí)過程 一 動物細(xì)胞的融合 探究一 動物細(xì)胞的融合 1 植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的區(qū)別 學(xué)生填下表 植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性 融合過程先使細(xì)胞分散開 誘導(dǎo)方法電激 振動 離心 聚乙二醇 結(jié)果 應(yīng)用培育植物新品種 意義 相同點原生質(zhì)體融合原理相同 原生質(zhì)體融合的方法相似 2 植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的主要區(qū)別是什么 3 為什么可以使用滅活的病毒促進動物細(xì)胞融合 4 不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎 知識閱讀 知識閱讀 閱讀課本 P52 中的小字 了解一下動物細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史 二 單克隆抗體 探究二 單克隆抗體制備的原理 1 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么 抗體是從何來的 2 B 淋巴細(xì)胞有什么特點 3 若要想獲得大量的單一抗體 如何做呢 精品文檔 3歡迎下載 4 在體外培養(yǎng)的條件下 一個 B 淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的 那么 怎樣解決這一問題的呢 5 小結(jié)以下內(nèi)容 利用 產(chǎn)生特異性抗體的功能 利用 無限增殖的特性 利用 技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞 利用 技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞 探究三 單克隆抗體制備的過程 1 如何獲得 B 淋巴細(xì)胞 2 如果把 B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞放在一起時 會有幾種融合方式 類型 3 選擇雜交瘤細(xì)胞的兩步篩選的目的各是什么 4 如何進行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng) 教師講解為主 融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后 能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞 但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是 能分泌所需抗體的細(xì)胞 通常用 有限稀釋法 來選擇 將雜交瘤細(xì)胞稀釋 用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng) 使每孔不超過一個細(xì)胞 通過培養(yǎng)讓其增殖 然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體 那么上清液可與 特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔 陽性孔中的細(xì)胞還不能保證是來自單個細(xì)胞 挑選陽性孔的細(xì)胞繼續(xù) 進行有限稀釋 一般需進行 3 4 次 直至確信每個孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞 該過程即為雜交瘤細(xì) 胞的克隆化培養(yǎng) 精品文檔 4歡迎下載 探究四 單克隆抗體的應(yīng)用 1 單克隆抗體的應(yīng)用有哪些 2 生物導(dǎo)彈的組成及優(yōu)點 三 反思總結(jié) 四 當(dāng)堂檢測 1 基因型為 Aa 與基因型為 Bb 的動物體細(xì)胞混合 用滅活的仙臺病毒處理后 不可能獲得下列哪種基因 型的細(xì)胞 A AAaa B AaBb C Aabb D BBbb 2 動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中 正確的是 誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞 A B C D 3 關(guān)于單克隆抗體 下列敘述不正確的是 A 可以制成診斷盒 用于疾病的珍斷 B 可以與藥物結(jié)合 用于病變細(xì)胞的定向治療 C 可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D 可以在生物體內(nèi)生產(chǎn) 不能體外生產(chǎn) 4 生物導(dǎo)彈 是指 A 單克隆抗體 B 帶有特定藥物的單克隆抗體 C 雜交細(xì)胞 D B 淋巴細(xì)胞 課后練習(xí)與提高 1 動物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較 在動物細(xì)胞融合中有特殊性的是 A 融合的原理 B 融合的優(yōu)點 C 融合的誘導(dǎo)手段 D 融合的過程 2 下圖是單克隆抗體制備過程示意圖 其中 1 過程注射的物質(zhì)和 A 細(xì)胞的名稱為 A 抗體 T 淋巴細(xì)胞 B 抗原 T 淋巴細(xì)胞 C 抗體 B 淋巴細(xì)胞 D 抗原 效應(yīng) B 淋巴細(xì)胞 3 單克隆抗體和血清抗體相比 其優(yōu)越性在 于 A 單克隆抗體能夠制成 生物導(dǎo)彈 B 單克隆抗體能夠在體外制備 C 單克隆抗體比血清抗體的特異性強 免疫活性高 D 單克隆抗體制備過程簡單 4 單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用 下列關(guān)于單克隆抗體的敘述 精品文檔 5歡迎下載 錯誤的是 A 特異性強 靈敏度高 B 與抗癌藥物結(jié)合可制成 生物導(dǎo)彈 C 體外培養(yǎng) B 淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D 由效應(yīng) B 細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌 5 試管嬰兒 試管苗 克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果 下面對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述 正確的是 A 都屬于無性生殖 能保持母本性狀 B 都是細(xì)胞工程的技術(shù)范圍 C 都充分體現(xiàn)了體細(xì)胞的全能性 D 都不會發(fā)生基因重組和變異 6 右圖為細(xì)胞融合的簡略過程 請據(jù)圖回答 1 若 A B 是植物細(xì)胞 在細(xì)胞融合之前已用 處理 除去了 由 A B 到細(xì)胞 C 的過程中 常用的物理方法是 融合完成的標(biāo)志是 2 若 A B 是植物細(xì)胞 則形成的 D 細(xì)胞還要應(yīng)用 技術(shù)把 D 培養(yǎng)成植株 3 若 A B 是動物細(xì)胞 一般取自 然后用 使其分散開來 由 A B 到 C 的過程中 常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段 是 所形成的 D 稱為 A B 融合為 C 的過程說明了細(xì) 胞膜具有 4 若該過程是制備單克隆抗體 A 為小鼠效應(yīng) B 細(xì)胞 那么 在獲得此細(xì)胞之前 小鼠已經(jīng)被注射了 注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng) 生成了 圖中 B 為 5 若該過程仍是制備單克隆抗體 在 A B 到 C 的過程中 所形成的 C 有 種 用來培養(yǎng)的 D 細(xì)胞 應(yīng)該是 從中選擇出它的方法是 培養(yǎng) 獲得 D 后 常用的培養(yǎng)方 法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學(xué)案答案動物細(xì)胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學(xué)案答案 預(yù)習(xí)內(nèi)容 預(yù)習(xí)內(nèi)容 一 1 兩個 多個 2 雜交細(xì)胞 3 結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程 4 遠緣雜交 細(xì)胞遺傳 細(xì)胞 免疫 生物新品種 二 1 1 效應(yīng) B 細(xì)胞 2 蛋白質(zhì) 3 血清 2 1 脾臟細(xì)胞 自身融合的細(xì)胞 雜種細(xì)胞 雜種細(xì) 胞 單克隆 2 迅速大量繁殖 產(chǎn)生專一的抗體 3 特異性強 靈敏度高 產(chǎn)量大 三 1 準(zhǔn)確 高效 簡易 快速 2 癌癥 生物導(dǎo)彈 學(xué)習(xí)過程 學(xué)習(xí)過程 探究一 動物細(xì)胞的融合 1 植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的區(qū)別 學(xué)生填下表 植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合 精品文檔 6歡迎下載 細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性 融合過程先除去細(xì)胞壁先使細(xì)胞分散開 誘導(dǎo)方法電激 振動 離心 聚乙二醇電激 滅活的病毒 聚乙二醇 結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞 應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體 意義突破遠緣雜交不親和的障礙 打破了生殖隔離 相同點原生質(zhì)體融合原理相同 原生質(zhì)體融合的方法相似 2 兩者的主要區(qū)別是什么 1 動物細(xì)胞融合不需要去除細(xì)胞壁 2 動物細(xì)胞融合常使用滅活的病毒 而植物細(xì)胞融合不用 3 植物雜交細(xì)胞可以培養(yǎng)成雜種植株 而動物雜交細(xì)胞則不可 3 為什么可以使用滅活的病毒促進動物細(xì)胞融合 滅活的病毒可以使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)重新排布 細(xì)胞膜打開 細(xì)胞發(fā)生融合 兩個不同 的動物細(xì)胞放在一起 用滅活的病毒處理細(xì)胞后 它們就先質(zhì)融合 再核融合 進而形成雜交細(xì)胞 這 個細(xì)胞有絲分裂后仍能形成兩個完整的雜交細(xì)胞 4 不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎 不能 因為不滅活的病毒會感染細(xì)胞 而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合 探究二 單克隆抗體制備的原理 1 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么 抗體是從何來的 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原 使動物產(chǎn)生抗體 然后從動物血清中分離所需要 的抗體 這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低 而且制備的抗體特異性差 2 B 淋巴細(xì)胞有什么特點 B 淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體 但每一個 B 淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 3 若要想獲得大量的單一抗體 如何做呢 我們必須用單個 B 淋巴細(xì)胞進行無性繁殖 也就是通過克隆形成細(xì)胞群 這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn) 生出化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強的抗體 即單克隆抗體 4 在體外培養(yǎng)的條件下 一個 B 淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的 那么 怎樣解決這一問題的呢 把一種 B 淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進行融合 所得到的融合細(xì)胞既能大量增殖 又能 產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體 5 填寫一下內(nèi)容 利用 B B 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的功能 利用骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特性 利用動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞 利用動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞 探究三 單克隆抗體制備的過程 精品文檔 7歡迎下載 1 如何獲得 B 淋巴細(xì)胞 要得到能產(chǎn)生所需抗體的 B 淋巴細(xì)胞 必須對小鼠進行免疫處理 即給小鼠皮下或脾內(nèi)注射特定的 抗原 為保證 B 淋巴細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量 往往需要進行初次免疫 二次免疫和加強免疫 然后取免疫小 鼠的脾獲得 B 淋巴細(xì)胞 2 如果把 B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞放在一起時 會有幾種融合方式 類型 三種 有 B 淋巴細(xì)胞間的融合 骨髓瘤細(xì)胞間的融合以及 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞間的融合 3 選擇雜交瘤細(xì)胞的兩步篩選的目的各是什么 第一步篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞 原因是 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合后用聚乙二醇處理誘導(dǎo) 融合 這樣處理后的細(xì)胞中有以下五種 未融合的 B 淋巴細(xì)胞 未融合的骨髓瘤細(xì)胞 B 淋巴細(xì)胞與 B 淋 巴細(xì)胞的融合細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞 其中只 有 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是我們需要的雜種細(xì)胞 第二步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞 因為小鼠體內(nèi)的 B 淋巴細(xì)胞有很多種 因此獲得的雜交瘤細(xì)胞可能產(chǎn)生不同的抗體 需要從中篩選出能產(chǎn)生我們所需的單一抗體的雜交瘤細(xì)胞 篩選的方法是專一抗體檢驗 4 如何進行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng) 教師講解為主 融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后 能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞 但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是 能分泌所需抗體的細(xì)胞 通常用 有限稀釋法 來選擇 將雜交瘤細(xì)胞稀釋 用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng) 使每孔不超過一個細(xì)胞 通過培養(yǎng)讓其增殖 然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體 那么上清液可與 特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔 陽性孔中的細(xì)胞還不能保證是來自單個細(xì)胞 挑選陽性孔的細(xì)胞繼續(xù) 進行有限稀釋 一般需進行 3 4 次 直至確信每個孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞 該過程即為雜交瘤細(xì) 胞的克隆化培養(yǎng) 探究四 單克隆抗體的應(yīng)用 1 單克隆抗體的應(yīng)用有哪些 1 可用于作為診斷試劑 有準(zhǔn)確 高效 快速的優(yōu)點 2 可用于疾病治療 3 可用于運載藥物 作為運載對應(yīng)疾病的藥物的 生物導(dǎo)彈 2 生物導(dǎo)彈的組成及優(yōu)點 組成 生物導(dǎo)彈 單克隆抗體 藥物 放射性同位素 優(yōu)點 療效高 毒副作用小 當(dāng)堂練習(xí) 當(dāng)堂練習(xí) 1