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文檔簡介
實驗一:觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一P26)一實驗目的:初步掌握觀察DNA和RNA在細胞中分布的方法二實驗原理1 甲基綠+DNA 綠色 兩種試劑不是單獨使用,應混合使用吡羅紅+RNA 紅色幾種液體的作用2 8%鹽酸:改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色休中的DNA和蛋白質分離,有利于DNA與染色劑結合。 0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮細胞正常形態(tài) 蒸餾水:配制染色劑,沖冼載玻片三方法步驟操作步驟注意問題解釋取口腔上皮細胞制片載玻片要潔凈,滴一滴質量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液(生理鹽水)用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕刮幾下取細胞將載玻片在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果保持細胞原有形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失敗殺死并固定裝片;烘干時應來回移動,防止受熱不均破裂水解將烘干的載玻片放入質量分數(shù)為8%的鹽酸(HCl)溶液中,用300C水浴保溫5min改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞促進染色體的DNA與蛋白質分離而被染色,細胞為死細胞沖冼涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸緩水流:防止細胞被沖走染色用吸水線除去多余的水分滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5minKS*5U.C#O%吸取染色劑除去多余的染色劑并蓋上蓋玻片觀察先低倍鏡觀察:選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,調節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察:使觀察效果最佳現(xiàn)象細胞核大部分被染成綠色細胞質大部分被染成紅色細胞核也有小部分被染成紅色細胞質也有小部分被染成綠色結論DNA主要集中分布于細胞核中RNA主要集中分布于細胞質中在細胞質中也有DNA分布在細胞核中也有RNA分布實驗二: 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(必修一P18)一實驗目的:嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質水浴加熱二實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應。1還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)+ 斐林試劑 磚紅色沉淀。使用時:甲乙液等量混勻后立即使用斐林試劑 甲液:0.1g/ml NaOH 溶液 乙液:0.05g/ml CuSO4 溶液實質:是還原糖(全部單糖、麥芽糖、果糖、乳糖)與新制的Cu ( OH ) 2反應生成磚紅色氧化亞銅(Cu 2O)。2脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)。3蛋白質與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產生紫色反應。(蛋白質分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應。)使用時:先加A液后加B液雙縮脲試劑 A液:0.1g/ml NaOH 溶液 B液:0.01g/ml CuSO4 溶液實質:在堿性條件下,肽鍵結構與銅離子反生絡合反應,生成紫色絡合物。 4. 淀粉遇碘變藍色。KS*5U.C#O%三實驗材料1做還原糖鑒定實驗:應選含糖高,顏色為白色或近白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,最好無色,防止顏色干擾且易于觀察。)2做脂肪的鑒定實驗:應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡34小時(也可用蓖麻種子)。3做蛋白質的鑒定實驗:可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清等。四、實驗試劑斐林試劑、蘇丹或蘇丹染液、雙縮脲試劑、體積分數(shù)為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水。五、方法步驟(一)可還原糖的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋1. 制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液必須臨時制備。要取組織的顏色較淺,最好無色,易于觀察。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋。2. 取1支試管,向試管內注入2mL組織樣液。3. 向試管內注入1mL新制的斐林試劑,振蕩(此時呈現(xiàn)斐林試劑的顏色:淺藍色)。應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,易分解。甲、乙液分別加入時可能無Cu ( OH )2生成。4. 試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察到溶液顏色:淺藍色 棕色 磚紅色(沉淀)最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者。也可用酒精燈對試管直接加熱。防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷;縮短實驗時間。留適當樣液與反應后溶液做對照,結論:組織樣液中含有還原糖(二)脂肪的鑒定顯微鏡觀察法操 作 方 法注 意 問 題解 釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時,新花生的浸泡時間可縮短。因為浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。 KS*5U.C#O%取最理想的薄片,放在載玻片中央在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色防止浮色影響對橘黃色脂肪滴的觀察。酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上12滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇中?;ㄉN子勻漿 + 蘇丹III染液 橘黃色 或 花生種子勻漿 + 蘇丹IV染液 紅色三、蛋白質的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋制備組織樣液(浸泡、去皮研磨、過濾。)黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。鑒定:加樣液約2ml于試管中加入雙縮脲試劑A,搖勻再加入雙縮脲試劑B液34滴,搖勻 溶液變紫色A液和B液也要分開配制,儲存。鑒定時先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍色會遮蓋反應的真實顏色。可用蛋清代替豆?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內壁上,使反應不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。留適當樣液與反應后溶液做對照附:淀粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內滴加2滴碘液,觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察實驗三:用顯微鏡觀察多種多樣的細胞(必修一P7)一實驗目的(1)使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞,比較不同細胞的異同點(2)運用制作臨時裝片的方法二實驗原理:利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細胞結構,例如:可以看到葉綠體、線粒體等細胞器(能看到細胞器,無法看清細胞器結構),從而能夠區(qū)別不同的細胞。顯微鏡 光學顯微鏡 細胞顯微結構圖:不能顯示細胞器的內部結構 電子顯微鏡 細胞亞顯微結構圖:能顯示細胞器的內部結構三顯微鏡的使用:不能直接使用高倍顯微鏡,一定是先低倍后高倍觀察低倍顯微鏡的使用:取鏡 安放 對光 壓片 調焦 觀察高倍顯微鏡的使用:在低倍鏡下找到目標 移裝片使觀察對象位于視野中央 轉動轉換器換高倍鏡 調焦 觀察注:移中央:觀察對象在哪往哪移;由低倍換高倍鏡后一定不能轉動粗準焦螺旋(容易壓壞玻片),只需輕輕轉動細準焦螺旋微調即可四相關問題鏡頭 物鏡:有螺紋,鏡頭越長,放大倍數(shù)越大,距離裝片的距離越近 目鏡:無螺紋,鏡頭越長,放大倍數(shù)越小放大倍數(shù) 總放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù) 顯微鏡放大倍數(shù)是指物體的長度與寬度放大倍數(shù)物像大小視野范圍看到細胞數(shù)目視野亮度物鏡與裝片距離低倍鏡小大多亮遠高倍鏡大小少暗近為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察?提示:如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對象不在視野范圍內而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。 KS*5U.C#O%五:討論1.試歸納所觀察到的細胞在結構上的共同點,并描述它們之間的差異,分析產生差異的可能原因:答:共同點是:有細胞膜、細胞質和細胞核,植物細胞還有細胞壁??赡茉蚴牵哼@些細胞的位置和功能不同,其結構與功能相適應,這是個體發(fā)育過程中細胞分化產生的差異2.低倍鏡換為高倍鏡后,若看不到或看不清原來的像,可能原因?(ABC) A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反,蓋玻片在下面 D、未換目鏡3.污點判斷:(1)污點隨載玻片的移動而移動,則位于載玻片上;(2)污點不隨載玻片移動,換目鏡后消失,則位于目鏡;換物鏡后消失,則位于物鏡;(3)污點不隨載玻片移動,換鏡后也不消失,則位于反光鏡上。實驗四:用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一P47)一、實驗目的 使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)分布。二、實驗原理葉肉細胞中的葉綠體:因其本身含有色素,呈綠色故不需染色,呈扁平的橢圓球形或球形。線粒體:本身無色,需染色體才能觀察到。線粒體+健那綠染液 藍綠色健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,染色后細胞仍然是活的。三、實驗材料觀察葉綠體時選用:蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個小葉直接制片,所以作為實驗的首選材料。(若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。)觀察線粒體時選用:人口腔上皮細胞或紫色洋蔥鱗片葉內表皮細胞(無色)四、方法步驟實驗步 驟注 意 問 題分 析觀察葉綠體1制片:用鑷子取一片黑藻的小葉,放入載玻片的水滴中,蓋上蓋玻片。制片和鏡檢時,臨時裝片中的葉片不能放干了,要隨時保持有水狀態(tài)否則細胞或葉綠體失水收縮,將影響對葉綠體形態(tài)和分布的觀察。2低倍鏡下找到葉片細胞3高倍鏡下觀察葉綠體的形態(tài)和分布觀察線粒體1制作人的口腔上皮細胞臨時裝片在潔凈載玻片中央滴一滴健那綠染液用牙簽取口腔上皮細胞蓋蓋玻片健那綠染液是活細胞染料(不影響細胞生命)2低倍找到口腔上皮細胞后,換高倍鏡觀察線粒體藍綠色的是線粒體,細胞質接近無色。專一性染線粒體的五、討論1、細胞質基質中的葉綠體,是不是靜止不動的?為什么?答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動,這種運動能隨時改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關系?答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。 KS*5U.C#O%實驗五: 通過模擬實驗探究膜的透性(必修一P60“問題探討”)一、實驗目的:1.概述擴散作用的含義。2說明生物膜的選擇透過性。3.嘗試模擬實驗的方法。二實驗原理: 半透膜(semipermeable membrane):指一類可以讓小分子物質透過而大分子物質不能通過的薄膜的總稱。小分子和大分子的界定依據(jù)膜種類的不同而劃分范圍不同。如動物的膀胱膜、腸衣等,可以讓某些物質透過,而另一些物質不能透過;或者(玻璃紙)水分子可以透過,而蔗糖分子因為比較大,不能透過。可以用半透膜將不同濃度的溶液分隔開,然后通過觀察溶液液面高低的變化,來觀察半透膜的選擇透過特性,進而類比分析得出生物膜的透性。三、實驗流程四、注意事項 1. 取兩個長頸漏斗,分別在漏斗口處封上一層 玻璃紙 。設置裝置(如圖)2. 在A漏斗中注入硫酸銅溶液,3. B漏斗中注入蔗糖溶液,并加4. 入少許紅墨水,使其略呈紅色。3.將兩個漏斗分別浸入盛有蒸餾水的燒杯中。4.觀察燒杯中蒸餾水顏色的變化及長頸漏斗的液面變化,并將觀察到的結果填入表中。在兩漏斗的 液面 處做標記觀察前須先靜置一段時間。五、實驗結果:A漏斗中液面下降,燒杯中的液體變藍,說明長頸漏斗中的 銅離子和水分子已經通過玻璃紙進入了燒杯內的蒸餾水中(圖A)。B漏斗中的液面上升,說明水可以通過玻璃紙向漏斗內擴散,而漏斗中的蔗糖和紅墨水的染料分子不能透過玻璃紙。六、實驗結論:生物膜有選擇透過性。七討論:1漏斗管內的液面為什么會升高?答:由于單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數(shù)量多于從長頸漏斗滲出的水分子數(shù)量,使得管內液面升高。2如果用一層紗布代替玻璃紙,漏斗管內的液面還會升高嗎?答:用紗布替代玻璃紙時,因紗布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不會升高。實驗六:觀察植物細胞的質壁分離和復原(必修一P61“探究”)一、實驗目的1學會觀察植物細胞質壁分離與復原的方法。 2了解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。二實驗原理1質壁分離的原理:當細胞液濃度外界溶液濃度時,細胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質層進入到細胞液中,整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),緊貼細胞壁,使植物細胞逐漸發(fā)生質壁分離復原3原生質層:包括細胞膜、液泡膜以及兩層膜之間的細胞質;相當于一層半透膜。二、實驗材料紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質壁分離劑對細胞無毒害作用。三、實驗步驟步 驟注 意 問 題分 析1制作洋蔥外表皮細胞的臨時裝片:在載玻片上滴一滴水,撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平【也可挑取幾條水綿放入水滴中】。蓋上蓋玻片。蓋蓋玻片應讓蓋玻片的一側先觸及載玻片,然后輕輕放平。防止裝片產生氣泡。2觀察洋蔥(或水綿)細胞可看到:液泡大,呈紫色,原生質層緊貼著細胞壁。【或水綿細胞中有帶狀葉綠體,原生質層呈綠色,緊貼著細胞壁】。液泡含花青素,所以液泡呈紫色。先觀察正常細胞與后面的“質壁分離”起對照作用。(前后對照分離前與分離后對照)3觀察質壁分離現(xiàn)象:從蓋玻片的一側滴入03g/ml的蔗糖溶液,在另一側用吸水紙吸引,重復幾次。鏡檢。觀察到:液泡由大變小,顏色由淺變深,原生質層與細胞壁分離。推測:原生質層與細胞壁之間充滿蔗糖溶液。重復幾次糖液濃度不能過高蔗糖溶液濃度大于細胞液濃度,細胞通過滲透作用失水,細胞壁伸縮性小原生質層的伸縮性大,液泡和原生質層不斷收縮,所以發(fā)生質壁分離為了使細胞完全浸入蔗糖溶液中。否則,細胞嚴重失水死亡,看不到質壁分離的復原。4觀察細胞質壁分離的復原現(xiàn)象:從蓋玻片的一側滴入清水,在另一側用吸水紙吸引,重復幾次。鏡檢。觀察到:液泡由小變大,顏色由深變淺,原生質層恢復原狀。發(fā)生質壁分離的裝片,不能久置,要馬上滴加清水,使其復原。重復幾次。細胞液的濃度高于外界溶液,細胞通過滲透作用吸水,所以發(fā)生質壁分離復原現(xiàn)象。因為細胞失水過久,也會死亡。為了使細胞完全浸入清水中。四、實驗討論答案1如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答:表皮細胞維持原狀,因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質壁分離?為什么?答:不會。因為紅細胞不具細胞壁。3用8%的食鹽溶液、5%的硝酸鉀、尿素、甘油、乙二醇等進行質壁分離實驗是會出現(xiàn)自動復原嗎,為什么? 答:會,因細胞可以吸收這些物質,使細胞液濃度逐漸變大。4質壁分離與復原的引用:判斷細胞死活;測定溶液濃度范圍(類似于探究生長素類似物最適濃度實驗);驗證細胞壁與原生質層伸縮性大?。槐容^不同植物細胞細胞液溶度;比較一系列溶液濃度大小(逆向思維)。 KS*5U.C#O%實驗七:探究影響酶活性的因素(必修一P78、P83)一實驗目的1探究不同溫度和PH對過氧化氫酶活性的影響。 2培養(yǎng)實驗設計能力。二方法步驟提出問題作出假設設計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)實施實驗分析與結論表達與交流。驗證高效性: 實例1:比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率一)實驗原理鮮肝提取液中含有過氧化氫酶,過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經計算,質量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液和質量分數(shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二)方法步驟步驟注意問題解釋取4支潔凈試管,編號,分別加入2mL H2O2溶液不讓H2O2接觸皮膚H2O2有一定的腐蝕性將2號試管放在900C左右的水浴中加熱,觀察氣泡冒出情況,與1號對照向3號、4號試管內分別滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝臟研磨液,觀察氣泡產生情況不可用同一支滴管肝臟研磨液必須是新鮮的肝臟要制成研磨液由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準確性因為過氧化氫酶是蛋白質,放置過久,可受細菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低研磨可破壞肝細胞結構,使細胞內的酶釋放出來,增加酶與底物的接觸面積2-3min后,將點燃的衛(wèi)生香分別放入3號和4號試管內液面的上方,觀察復燃情況放衛(wèi)生香時,動作要快;不要插到氣泡中現(xiàn)象:4號試管產生氣泡多,冒泡時間短,衛(wèi)生香猛烈復燃,3號試管產生氣泡少,冒泡時間長,衛(wèi)生香幾乎無變化避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅實例2:溫度對酶活性的影響一)實驗目的1初步學會探索溫度對酶活性的影響的方法。2探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。二)實驗原理1淀粉遇碘后,形成紫藍色的復合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖(淀粉水解過程中,不同階段的中間產物遇碘后,會呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色注:市售a-淀粉酶的最適溫度約600C三)方法步驟操作注意問題解釋取3支試管,編上號,然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液另取3支試管,編上號,然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組,分別放入熱水(約600C)、沸水和冰塊中,維持各自的溫度5min不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液防止混合時,由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化,反應溫度不是操作者所要控制的溫度,影響實驗結果。分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中,搖勻后,維持各自的溫度5min保持各自溫度時間不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定時間在3支試管中各滴入1-2滴碘液,搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄碘液不能滴加太多防止影響實驗現(xiàn)象的觀察注意:該實驗產生還原糖,最好不要用斐林試劑;(斐林試劑鑒定要水浴加熱,從而改變了酶所處的溫度)若非用斐林試劑不可時,先將酶變性處理掉。用表格的形式顯示實驗步驟序號加入試劑或處理方法試管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鮮淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保溫5min600C1000C00C600C1000C00C3將a液加入到A試管,b液加入到B試管,c液加入到C試管中,搖勻4保溫5min600C1000C00C5滴入碘液,搖勻2滴2滴2滴6觀察現(xiàn)象并記錄注意:該實驗不能用過氧化氫酶做實驗,過氧化氫受熱分解。實例3:PH值對酶活性的影響操作步驟:用表格形式顯示實驗步驟:(注意操作順序不能錯)注意:該實驗可以用過氧化氫酶做實驗。注意:以上兩個實驗要找到最適溫度或最適PH值必須先做預實驗。酶活性表示方法:出現(xiàn)同一結果所需的時間(具體表示);還可用同一時間出現(xiàn)的不同結果進行比較,但是該方法只能粗略表示酶活性。實驗八:葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)一實驗目的1嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和用紙層析法分離提取到的色素。2分析實驗結果,探究葉綠體中有幾種色素,以及各自所呈現(xiàn)的顏色。二實驗原理1提?。喝~綠體中的色素是有機物易溶于有機溶劑而不溶于水,可用無水乙醇、丙酮等能提取。2分離:葉綠體色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。所以可用紙層析法來分離四種色素。3.各種試劑的作用 無水乙醇:用于提取葉綠體中的色素 層析液:用于分離綠葉中的色素 SiO2:破壞細胞結構,使研磨更充分 CaCO3:防止色素被破壞三、實驗材料:幼嫩、鮮綠的菠菜葉,以保證含較多的色素四、實驗步驟步 驟注 意 問 題分 析1提取色素:5克綠葉剪碎,放入研缽,加SiO2、CaCO3和10mL無水乙醇(或5mL丙酮)迅速、充分研磨。(若沒有無水乙醇,也可用體積分數(shù)為95%的乙醇,但要加入適量的無水碳酸鈉,除去水分)加SiO2加CaCO3加無水乙醇(迅速)研磨迅速加SiO2為了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂,可被細胞液中的有機酸產生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸,防止葉綠素被破壞。葉綠體色素易溶于無水乙醇等有機溶劑。快速研磨目的:減少研磨過程葉綠素的分解,減少無水乙醇(或有毒性的丙酮)揮發(fā)。 KS*5U.C#O%2收集濾液漏斗基部放一單層尼龍布,研磨液倒入漏斗內擠壓,將濾液收集到小試管中,用棉花塞塞住試管口。尼龍布起過濾作用。不能用濾紙( 色素不能通過濾紙 )試管口用棉花塞塞緊是為了防止無水乙醇(或丙酮)揮發(fā)。3制備濾紙條將干燥的濾紙,順著紙紋剪成長10cm,寬1cm的紙條,一端剪去二個角,并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。干燥順著紙紋剪成長條一端剪去二個角可吸收更多的濾液。層析時,色素分離效果好??墒箤游鲆和瑫r到達濾液細線(使色素帶平整)。4劃濾液細線用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線劃出細、齊、直的一條濾液細線,干后重復三次。濾液細線越細、越齊越好。重復三次。防止色素帶之間部分重疊。增加色素在濾紙上的附著量,實驗結果更明顯。5紙層析法分離色素將3mL層析液倒入燒杯中,將濾紙條(劃線一端朝下)插入層析液中,用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。層析液不能沒及濾紙條。燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。防止色素溶解在層析液中,層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。6觀察實驗結果胡蘿卜素(橙黃色)葉黃素(黃色)葉綠素b(黃綠色)葉綠素a(藍綠色)擴散最快是胡蘿卜素,擴散最慢是葉綠素b,含量最多的是葉綠素a。四種色素之所以能被分離,是因為四種色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同。五:實驗討論 1濾紙條上的濾液細線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細線如果觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。2提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關鍵是:葉片要新鮮、濃綠;研磨要迅速、充分; 濾液收集后,要及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。 KS*5U.C#O% 分離葉綠體色素的關鍵是:一是濾液細線要細且直,而且要重復劃幾次; 二是層析液不能沒及濾液線。實驗九:探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)一實驗目的1了解酵母菌的無氧呼吸和有氧呼吸情況 2學會運用對比實驗的方法設計實驗二實驗原理1酵母菌是一種兼性厭氧菌(真菌),在有氧條件下進行有氧呼吸能產生大量的CO2和水;在無氧的條件下進行無氧呼吸能產生酒精和少量的CO2,故便于用來研究細胞呼吸的不同方式2CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產生情況。3橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學反應,在酸性條件下,變成灰綠色。三方法步驟提出問題作出假設設計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)實施實驗分析與結論表達與交流1酵母菌培養(yǎng)液的配制取20g新鮮的食用酵母菌,分成兩等份,分別放入錐形瓶A(500mL)和錐形瓶B(500mL)中 ,再分別向瓶中注入240mL質量分數(shù)為5%的葡萄糖溶液2檢測CO2的產生用錐形瓶和其他材料用具組裝好實驗裝置(如圖),并連通橡皮球(或氣泵),讓空氣間斷而持續(xù)地依次通過3個錐形瓶(約50min)。然后將實驗裝置放到25-350C的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。3檢測灑精的產生各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液,分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液(體積分數(shù)為95%-97%)并輕輕振蕩,使它們混合均勻,觀察試管中溶液的顏色變化。 KS*5U.C#O%4注意:甲組中NaOH溶液的作用、澄清石灰水的作用、氣泵的作用? ( 除去空氣中的CO2;檢測有無CO2生成;使空氣進入裝置內)乙組中B瓶實驗前應該如何處理?(應先放置一段時間,從而保證使酵母菌處于無氧環(huán)境中)還可以采取那些措施來隔絕空氣? (在酵母菌培養(yǎng)液上面放一層油等)如何排除液體中所含氣體(氧氣、二氧化碳)? (可煮沸)實驗十:觀察細胞的有絲分裂(必修一P115)一實驗目的1制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片 3繪制植物細胞有絲分裂簡圖。2觀察植物細胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細胞周期不同時期的時間長短。二實驗原理1在高等植物體內,有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞(分裂能力強,處于分裂狀態(tài)的細胞較多)。由于各個細胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。2染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液、醋酸洋紅溶液、改良苯酚品紅溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內染色體(或染色質)的存在狀態(tài),就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期,進而認識有絲分裂的完整過程。三實驗材料:洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因為根尖生長點屬于分生組織,細胞分裂能力強,易觀察到有絲分裂各個時期的細胞。四實驗步驟步 驟注 意 問 題分 析一、根尖的培養(yǎng)實驗前34天,讓洋蔥放在廣口瓶上,底部接觸清水。根長約5cm時可用。置于溫暖處,常換水。因為細胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。二、裝片的制作(解離漂洗染色制片)1解離:上午10時至下午2時,剪取洋蔥根尖23mm,立即放入盛有質量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室溫下解離35min。解離時間要保證(不能太短),細胞才能分散開來。解離時間也不宜過長。目的:溶解細胞間質,使組織中的細胞相互分離開來。細胞已被鹽酸殺死(I使細胞停止分裂固定在某一時期;II改變細胞膜的通透性)。否則,根尖過于酥軟,無法取出。2漂洗:待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10 min。漂洗要充分,可換水12次。目的:洗去解離液,便于染色(防止影響染色)。3染色:把洋蔥根尖放進盛有質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色35min。染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色(紫色)。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色(紅色)改良苯酚品紅溶液也能使染色體著色(紅色)4制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細胞分散開來。要用鑷子弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片,目的:使細胞分散,避免細胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標本被壓成云霧狀三、觀察1低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。2高倍鏡觀察:移走低倍鏡(移走之前,先 將觀察對象移至視野中央),換上高倍鏡, 用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰, 仔細觀察,找出處于細胞分裂期中期的細 胞,再找出前期、后期、末期的細胞。一定要找到分生區(qū)。在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞。如果是這樣,可以慢慢地移動裝片,從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。分生區(qū)細胞特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正處于分裂期。四、記錄與統(tǒng)計設計記錄表;并記錄每個樣本處于每一個分裂時期的細胞數(shù)目,至少兩個樣本統(tǒng)計每個時期的細胞數(shù)目 KS*5U發(fā)現(xiàn)處于分裂間期細胞遠遠多于分裂期的細胞,說明分裂間期較長五、討論:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵有以下幾點:(1)剪取洋蔥根尖材料時,應該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細胞殺死,細胞間質被溶解,使細胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當,要使根尖被壓平,細胞分散開。取材:材料容易獲得(比如植物細胞);分裂周期要短;分裂期要較長的。實驗十一:模擬探究細胞表面積與體積的關系(必修一P110)一實驗目的通過探究細胞大小,即細胞的表面積與體積,與物質運輸效率之間的關系,探討細胞不能無限長大的原因。二實驗原理:用瓊脂塊模擬細胞。瓊脂塊越小,其相對表面積越大,則其與外界效換物質的表面積越大,經交換進來的物質在瓊脂塊中擴散的速度快;瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(NaOH)在瓊脂塊中的擴散速度。三操作步驟操作方法注意問題解釋用塑料餐刀將含酚酞的瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的正方體將3塊瓊脂塊放在燒杯內,加入NaOH溶液,將瓊脂塊淹沒,浸泡10min。用塑料勺不時翻動瓊脂塊。不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動其表面避免干擾實驗結果戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出。用紙巾把它們吸干,用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。仔細觀察切面的顏色變化,變成紅色的部分代表NaOH擴散的深度,測量每一塊上NaOH擴散后著色的濃度。記錄測量結果應避免NaOH與皮膚和眼睛等接觸。如潑灑出來,應立即用水沖洗潑灑處。每兩次操作之間必須把刀擦干NaOH有腐蝕性避免干擾實驗結果根據(jù)測量結果進行計算,并將結果填在記錄表中結論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減?。籒aOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。四課后討論題答案1.當NaOH與含酚酞的瓊脂塊相遇時,其中的酚酞變成紫紅色,這是常用的檢測NaOH的方法,從瓊脂塊的顏色變化就知道NaOH擴散到多遠;在相同時間內,NaOH在每一瓊脂塊內擴散的深度基本相同,說明NaOH在每一瓊脂塊內擴散的速率是相同的2.根據(jù)球體的體積公式V=4/3r3,表面積公式S=4r2,計算結果如下表。細胞直徑(m)表面積(m2)體積(m3)比值(表面積/體積)201 2564 1870.30302 82614 1300.203.細胞越大,物質運輸?shù)男试降?,細胞越大,需要與外界環(huán)境交流的物質越多;但是細胞體積越大,其表面積相對越小,細胞與周圍環(huán)境之間物質交流的面積相對小了,所以物質運輸?shù)男试降?。限制細胞長大。實驗十二: 觀察細胞的減數(shù)分裂(人教版必修二P21)一實驗原理蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂示意圖蝗蟲的精母細胞進行減數(shù)分裂形成精細胞,再形成精子。此過程要經過兩次連續(xù)的細胞分裂:減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂。在此過程中,細胞中的染色體形態(tài)、位置和數(shù)目都在不斷地發(fā)生變化,因而可據(jù)此識別減數(shù)分裂的各個時期。二方法步驟(該實驗不知片,只需觀察固定裝片)一般是從減數(shù)分裂的場所取材生殖器官在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞低倍鏡觀察先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂前、中、后期和減數(shù)第二次分裂前、中、后期的細胞,再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目高倍鏡觀察推測根據(jù)觀察結果,盡可能多地繪制減數(shù)分裂不同時期的細胞簡圖,推測減數(shù)分裂過程染色體行為三討論題1、減數(shù)第一次分裂會出現(xiàn)同源染色體聯(lián)會、四分體形成、同源染色體在赤道板位置成對排列、同源染色體分離、移向細胞兩極的染色體分別由兩條染色單體組成等現(xiàn)象。減數(shù)第二次分裂的中期,非同源染色體成單排列在細胞赤道板位置,移向細胞兩極的染色體不含染色單體。2、減數(shù)第一次分裂的中期,兩條同源染色體分別排列在細胞赤道板的兩側,末期在細胞兩極的染色體由該細胞一整套非同源染色體組成,其數(shù)目是體細胞染色體數(shù)的一半,每條染色體均由兩條染色單體構成。減數(shù)第二次分裂的中期,所有染色體的著絲點排列在細胞的赤道板的位置。末期細胞兩極的染色體不含染色單體。3、同一生物的細胞,所含遺傳物質相同;增殖的過程相同;不同細胞可能處于細胞周期的不同階段。因此,可以通過觀察多個精原細胞的減數(shù)分裂,推測出一個精原細胞減數(shù)分裂過程中染色體的連續(xù)變化。 KS*5U.C#O%實驗十三 低溫誘導染色體加倍(人教版必修二P88)一實驗原理1進行正常有絲分裂的植物分生組織細胞,在有絲分裂后期,染色體的著絲點分裂,子染色體在紡綞絲的作用下分別移向兩極,最終被平均分配到兩個子細胞中去2用低溫處理植物組織細胞,使紡綞體的形成受到抑制(秋水仙素也能抑制紡綞體的形成),以致影響染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。(低溫影響酶活性和供能)二方法步驟培養(yǎng)洋蔥根。待洋蔥根長出1cm左右時,將整個裝置放入冰箱的低溫室內(40C)。誘導培養(yǎng)36h剪取誘導處理的根尖約0.5-1cm,放入卡諾氏液中浸泡0.5-1h,以固定形態(tài),然后用體積分數(shù)為95%的酒精沖冼2次解離漂洗染色制片(過程和注意事項與有絲分裂相同)先用低倍顯微鏡觀察(有染色體數(shù)目增加的細胞,也有染色體數(shù)目沒增加的細胞),并尋找發(fā)生了染色體數(shù)目變化的細胞,然后移至視野中央,換高倍鏡低溫誘導固定形態(tài)制作裝片觀察注意取材時:材料容易獲得(比如植物細胞);分裂周期要短;分裂期要較長的。注:低溫和秋水仙素都是通過抑制分裂細胞內紡錘體的形成,使染色體不能移向細胞兩極,而引起細胞內染色體數(shù)目加倍。實驗十四:調查常見的人類遺傳?。ū匦薅91)一、實驗目的1初步學會調查和統(tǒng)計人類遺傳病的方法2通過對幾種人類遺傳病的調查,了解這幾種遺傳病的發(fā)病情況3通過實際調查,培養(yǎng)接觸社會,并從社會中直接獲取資料或數(shù)據(jù)的能力二、實驗原理遺傳病類型:單基因遺傳?。ǔH旧w顯性遺傳病、常染色體隱性遺傳病、伴X顯性遺傳病、伴X隱性遺傳病)各種病的特點;多基因遺傳病;染色體異常遺傳病調查某種遺傳病的遺傳方式:應選擇具有該遺傳病的典型家系中調查,且只能選擇單基因遺傳病來調查,因只有單基因遺傳病遵循孟德爾遺傳規(guī)律。調查某種遺傳病的發(fā)病率:應在社會上隨機調查,可以調查各種類型的遺傳病三、調查程序1、確定調查目的要求2、制定調查計劃確定調查遺傳病例;了解要調查的遺傳病特征;制定記錄表格;確定調查地點;討論注意事項3、分組實施調查4、匯總調查結果5、對調查結果進行統(tǒng)計和分析四、注意事項1、調查群體要足夠大使數(shù)量的真實性加大2、調查病例群體發(fā)病率較高的單基因遺傳??;多基因遺傳?。ㄋ卸嗷蜻z傳病發(fā)病率都高。)實驗十五:探究植物生長調節(jié)劑對扦插枝條生根的作用(必修三P51)一實驗目的1了解植物生長調節(jié)劑的作用 2進一步培養(yǎng)進行實驗設計的能力二實驗原理植物插條經植物生長調節(jié)劑處理后,對植物插條的生根情況有兩重性,而且用不同濃度、不同時間處理其影響程度亦不同。最適濃度,在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多,生的根最長。三方法步驟:1.選擇生長素類似物:2,4-D或-萘乙酸(NAA)等。2.配制生長素類似物母液:5 mg/mL(用蒸餾水配制,加少許無水乙醇以促進溶解)。3.設置生長素類似物的濃度梯度:用容量瓶將母液分別稀釋成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5 mg/mL的梯度濃度溶液,分別放入小磨口瓶,及時貼上相應標簽。NAA有毒,配制時最好戴手套 和口罩。5制備插條,把插條分成不同的組,每組3根,防止出現(xiàn)偶然現(xiàn)象。注意每根插條生長發(fā)育狀況要一樣或基本相似;芽數(shù)也要一樣,不能選擇幼嫩的枝條。6處理插條處理方法:(處理時間要相同)1)浸泡法:把插條的基部浸泡在配制好的溶液中,深約3cm,處理幾小時至一天。(要求的溶液濃度較低,并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進行處理)2)沾蘸法:把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。7探究活動一般程序:提出問題作出假設設計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)實施實驗分析與結論表達與交流。 注:可先設計一組梯度比較大的預實驗進行摸索,再選擇預實驗中出現(xiàn)的最適濃兩側濃度之間的范圍設計一組進行細致的實驗。(預實驗需要空白對照組,正式實驗不需要空白對照組)實驗十六、模擬尿糖的檢測1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、檢測方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙3、結果:(用斐林試劑或班氏試劑檢測)試管內發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。4、分析:因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖,與斐林試劑發(fā)生反應產生磚紅色沉淀,而正常人尿液中無還原糖,所以沒有發(fā)生反應。實驗十七:探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化(必修三P68)一、實驗目的:1通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,嘗試建構種群增長的數(shù)學模型。2用數(shù)學模型解釋種群數(shù)量的變化。 3學會使用血球計數(shù)板進行計數(shù)。二、實驗原理:1在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一個封閉容器內的酵母菌種群,通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。2營養(yǎng)成分、空間、PH值、溫度和有毒排泄物(代謝廢物)等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素。3在理想條件下,酵母菌增長曲線為“J”型,在有限環(huán)境中,酵母菌增長曲線為“S”型。三、方法步驟: I、基本程序提出問題作出假設討論探究思路制定計劃實施計劃按計劃中確定的工作流程認真操作,做好實驗記錄分析結果,得出結論將記錄的數(shù)據(jù)用曲線圖表示出來II、具體步驟:配制培養(yǎng)液(必須消毒即無菌處理)防止雜菌污染,影響實驗結果。接種(無菌操作)防止雜菌污染,影響實驗結果在恒溫(28)條件下培養(yǎng)在相同的時間間隔(一般為1天)內抽樣計數(shù)【振蕩混勻取樣稀釋用滴管取樣液滴在蓋玻片邊緣自行滲入待其沉入底部計數(shù)】將計數(shù)結果記錄下來根據(jù)記錄結果繪制曲線 III、實驗討論 為何計數(shù)前要振蕩?(使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻,減少誤
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