沙門氏菌基本知識(shí)及檢測(cè)方法;

1、沙門氏菌基本知識(shí)及檢測(cè)方法沙門氏菌屬(salmonella)是腸桿菌科的一個(gè)大屬，有2000多個(gè)血清型，我國發(fā)現(xiàn)的約有100個(gè)。沙門氏菌廣泛存在于豬、牛、羊、家禽、鳥類、鼠類等多種動(dòng)物的腸道和內(nèi)臟中。1880年eberth首先發(fā)現(xiàn)傷寒桿菌，1885年salmon分離到豬霍亂桿菌，由于salmon發(fā)現(xiàn)本屬細(xì)菌的時(shí)間較早，在研究中的貢獻(xiàn)較大，遂定名為沙門氏菌屬salmonella 。本屬細(xì)菌絕大多數(shù)成員對(duì)人和動(dòng)物有致病性，能引起人和動(dòng)物的敗血癥與胃腸炎，甚至流產(chǎn)，并能引起人類食物中毒，是人類細(xì)菌性食物中毒的最主要病原菌之一。根據(jù)沙門氏菌的致病范圍，可將其分為三大類群。第一類群：專門對(duì)人致病。如傷寒

2、沙門氏菌、副傷寒沙門氏菌(甲型、 乙型、丙型)。第二類群：能引起人類食物中毒食物中毒沙門氏菌群，如鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、紐波特沙門氏菌等。第三類群：專門對(duì)動(dòng)物致病，很少感染人，如馬流產(chǎn)沙門氏菌、雞白痢沙門氏菌。致病性最強(qiáng)的是豬霍亂沙門氏菌(salmonella cholerae)，其次是鼠傷寒沙門氏菌(salmonella typhimurium)和腸炎沙門氏菌(salmonella enteritidis)。一、 沙門氏菌屬的生物學(xué)特征：1.形態(tài)染色特性：g-無芽孢桿菌。大小通常為 0.71.5m 2.05.0m，菌端鈍圓，散在，偶有短絲狀，無莢膜，除雞白痢沙門氏菌和

3、雞傷寒沙門氏菌外均有周身鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，絕大多數(shù)菌株有菌毛。需氧或兼性厭氧菌，生長(zhǎng)溫度范圍為1042，最適生長(zhǎng)溫度為37，適宜ph為6.87.8，對(duì)營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)旺盛，膽鹽可促進(jìn)其生長(zhǎng)。2.培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧菌；生長(zhǎng)溫度范圍為1042，最適生長(zhǎng)溫度為37；適宜ph為6.87.8；對(duì)營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)旺盛；膽鹽可促進(jìn)其生長(zhǎng)。普通瓊脂：圓形、光滑、無色半透明、邊緣整齊或不太整齊的中等大小(2 4mm)菌落。雞白痢、雞傷寒、豬副傷寒、甲型副傷寒沙門氏菌等只能長(zhǎng)成細(xì)小菌落。麥康凱瓊脂和伊紅美蘭瓊脂(emb)：菌落無色半透明ss瓊脂和dhl瓊脂：無色半透明、中心黑色或

4、幾乎全部黑色(多數(shù)菌株)的菌落he瓊脂：形成藍(lán)綠色或藍(lán)色菌落，產(chǎn)硫化氫菌株菌落中心帶黑色。3.生化特性：發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇和山梨醇產(chǎn)氣；不發(fā)酵乳糖、蔗糖、水楊苷和側(cè)金盞花醇；產(chǎn)生硫化氫；原硝酸鹽；不水解尿素；不液化明膠；v-p反應(yīng)陰性;不產(chǎn)吲哚(靛基質(zhì)試驗(yàn)陰性)；能利用枸櫞酸鹽(個(gè)別菌株不利用)。表 沙門氏菌屬細(xì)菌一般生化特性 硫化氫 +枸櫞酸鹽利用 d甘露醇 +尿素酶 -賴氨酸脫羧酶+棉子糖 -靛基質(zhì) -精氨酸雙水解酶 (+)鼠李糖 +m.r. +鳥氨酸脫羧酶 +蔗糖 -v-p -苯丙氨酸脫羧酶 -衛(wèi)矛醇 +kcn -分解葡萄糖產(chǎn)氣 +丙二酸鈉-動(dòng)力 +側(cè)金盞花醇 - 明膠(22)

5、-水楊苷 -氧化酶- 乳糖 - o/f試驗(yàn)發(fā)酵型 注：+ 陽性；- 陰性；d 有不同的生化型；(+) 遲緩陽性二、 沙門氏菌屬的致病性：沙門菌的致病因素有侵襲力、內(nèi)毒素和腸毒素3種。臨床上可引起胃腸炎、腸熱癥、菌血癥或敗血癥等。其中腸熱癥屬法定傳染病。 1.腸熱癥：即傷寒與副傷寒病。由傷寒與副傷寒沙門菌所引起的慢性發(fā)熱癥狀。為法定傳染病之一。 2.食物中毒：引起食物中毒的沙門菌以鼠傷寒、腸炎、湯卜遜、豬霍亂、乙型及丙型副傷寒沙門菌為常見。 3.慢性腸炎：沙門菌可引起老人和兒童的慢性腸炎。 4.敗血癥：多由豬霍亂沙門菌引起。 5.沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。 三、 沙門氏菌屬的微生物學(xué)檢查：

6、1.標(biāo)本采集：根據(jù)不同疾病采取不同的標(biāo)本進(jìn)行分離與培養(yǎng)。腸熱癥的第一、二周采血液，第二、三周采糞便與尿液。整個(gè)病程中骨髓分離細(xì)菌陽性率較高。食物中毒采集食物與糞便。 2.檢查方法及鑒定 （1）分離培養(yǎng) 1）糞便：一般將糞便或肛拭直接接種于ss和麥康凱平板上，用兩種培養(yǎng)基的目的是為提高標(biāo)本的陽性檢出率。 2）血液和骨髓：抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml，立即接種于含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管中進(jìn)行增菌，48h將培養(yǎng)物移種到血平板和腸道鑒別培養(yǎng)基上，若有細(xì)菌生長(zhǎng)取菌涂片革蘭染色并報(bào)告結(jié)果。對(duì)增菌培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)7天，仍無細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)，則報(bào)告陰性。 3）尿液：取尿液23ml經(jīng)硫磺酸鹽肉湯增

7、菌后，再接種于腸道菌選擇培養(yǎng)基或血平板上進(jìn)行分離培養(yǎng)，亦可將尿液離心沉淀物分離培養(yǎng)。 4）局部感染的膿液。 （2）鑒定：沙門菌屬的鑒定與志賀菌屬相同，須根據(jù)生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定兩方面進(jìn)行。 1）初步鑒定：如為革蘭陰性桿菌時(shí)作氧化酶試驗(yàn)，陰性時(shí)，挑取可疑菌落分別移種于kia和miu上。并作生化反應(yīng)。以沙門菌多價(jià)診斷血清作玻片凝集試驗(yàn)。 凡符合kia：ka、產(chǎn)氣+-、h2s+-、miu：動(dòng)力+、吲哚-、脲酶+，氧化酶-，觸酶+，硝酸鹽還原+，以沙門菌多價(jià)血清作玻片凝集試驗(yàn)陽性，鑒定為沙門菌屬。 2）最后鑒定：沙門菌血清學(xué)鑒定主要借助于沙門菌o抗原多價(jià)血清與o、h、vi抗原的單價(jià)因子血清。甲型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌和傷寒沙門菌分別屬