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1、影響血液凝固的因素(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^本實(shí)驗(yàn)來了解血液凝固的基本過程及了解影響血液凝固的一些因素。(二)實(shí)驗(yàn)對(duì)象:家兔(三)實(shí)驗(yàn)步驟:(略)(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1、觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用:實(shí)驗(yàn)中可見到靜置杯內(nèi)血液發(fā)生凝固。攪拌杯內(nèi)血液不凝固,但在毛刷上見到紅色的血凝塊,經(jīng)水沖洗后毛刷上纏繞有白色絲狀物。2、觀察影響血凝的一些理化因素:如下表9-1所示。表9-3 影響血凝的一些理化因素實(shí)驗(yàn)條件凝血時(shí)間1.加少許棉花502. 用石蠟油均勻涂試管內(nèi)壁8153.放置37水浴2154.放置冰水水浴6455.加肝素10個(gè)單位不凝6.加草酸鉀2mg不凝(表9-3文字說明:略)3、觀察內(nèi)源性及外源性凝血
2、過程:如下表9-2所示表9-2 內(nèi)源性和外源性凝血過程的觀察試劑試管1試管2試管31、富血小板血漿0.2 ml2、少血小板血漿0.2 ml0.2 ml3、生理鹽水0.2 ml0.2 ml4、羊肺懸液0.2 ml5、0.025mol/L CaCl20.2 ml0.2 ml0.2 ml血液凝固時(shí)間21534545(表9-2文字說明:略)(五)討論:血液凝固是指血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴涣鲃?dòng)的凍膠狀態(tài)血液凝固過程大致分為三個(gè)主要階段:凝血酶原激活物形成;凝血酶原激活成凝血酶,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。在凝血酶原激活物的形成過程中分有兩種不同的途徑:內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑。內(nèi)源性凝血途徑是由凝
3、血因子啟動(dòng)的,參與血凝的全部凝血因子都在血漿內(nèi)。凝血因子可被各種帶負(fù)電荷的物質(zhì)等所激活,如血管內(nèi)膜暴露的膠原纖維、玻璃、陶器等。外源性凝血途徑是由存在于血管外組織中的凝血因子所啟動(dòng)的,其余參與的凝血因子也在血管內(nèi)。凝血因子在腦、肺、胎盤組織含量很豐富。不管是內(nèi)源性凝血途徑或外源性凝血途徑,他們最后的是使血纖維蛋白的形成而使血液發(fā)生凝固。在觀察纖維蛋白原在凝血過程中作用的實(shí)驗(yàn)中,由于參與凝血的全部凝血因子都在血漿中,因此其凝血過程是屬于內(nèi)源性凝血。由于玻璃和毛刷表面都帶有負(fù)電荷,后者可激活凝血因子,啟動(dòng)內(nèi)源性凝血過程。凝血到最后階段時(shí),在凝血酶的作用下,把纖維蛋白原水解成血纖維蛋白;形成的纖維蛋
4、白不斷地交叉成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),把血液中的所有血細(xì)胞網(wǎng)羅于其中,從而使血液發(fā)生凝固。靜置杯中的血液,由于發(fā)生了上述的血液凝固過程,所形成的纖維蛋白沒有被破壞,所以杯中血液凝固。而攪拌過的杯內(nèi)血液,雖也發(fā)生血液凝固過程,但所形成的纖維蛋白卻不斷纏繞到毛刷上,當(dāng)杯內(nèi)血液的纖維蛋白原全部水解掉后,形成的纖維蛋白也全部纏繞在毛刷上,這時(shí)血纖維只能網(wǎng)羅毛刷附近的一些血細(xì)胞,在毛刷上見有血凝塊。經(jīng)水漂洗后,血細(xì)胞被沖走,毛刷上剩下的是白色細(xì)絲狀的纖維蛋白。攪拌后的杯內(nèi)血液因纖維蛋白原全部被耗盡,無法再形成纖維蛋白,則攪拌后的杯內(nèi)血液不發(fā)生凝固。由此可見,血液凝固的過程實(shí)際上是纖維蛋白形成的過程,任何一個(gè)步驟被破壞
5、,就不會(huì)引起血液凝固。在血液凝固的兩個(gè)過程中,它們是有所不同的。兩者的主要區(qū)別如下表9-3所示:表9-3 內(nèi)源性和外源性凝血的主要區(qū)別區(qū)別點(diǎn)內(nèi)源性凝血外源性凝血啟動(dòng)的凝血因子因子的激活需要因子復(fù)合物需要因子復(fù)合物參與凝血的凝血因子數(shù)量多,且全部在血管中數(shù)量少,因子在血管外,其余在血管內(nèi)凝血過程復(fù)雜簡(jiǎn)單凝血時(shí)間慢、約數(shù)分鐘快、約幾十秒鐘由上可知,外源性凝血比內(nèi)源性凝血所需的時(shí)間短。在實(shí)驗(yàn)結(jié)果表9-2中,第1、2試管都是由血小板、生理鹽水和CaCl2溶液組成的,參與凝血的凝血因子都在血漿中,故其凝血過程為內(nèi)源性凝血。而第3試管是由血小板、羊肺懸液和CaCl2溶液組成。在第3試管中含有羊肺懸液,其內(nèi)
6、含有豐富的第凝血因子。顯然第3試管發(fā)生的血液凝固過程主要是外源性凝血途徑。因此第3試管凝血時(shí)間最快。在第1、2試管中雖然所含成分相同,但血小板含量不一樣,第1試管血小板含量高于第2試管。血小板對(duì)血液凝固具有促進(jìn)作用,表現(xiàn)為:血小板的質(zhì)膜上吸附有許多凝血因子,如纖維蛋白原、因子V、因子XI等。其顆粒中也含有許多凝血因子以及血小板因子。血小板因子為血液凝固過程提供磷脂表面,其激活后能加速血凝;同時(shí)其能對(duì)一些血凝因子具有保護(hù)作用,免受抗凝血酶和肝素的破壞??梢?,第1試管內(nèi)因含有豐富的血小板,故其凝血時(shí)間比第2試管快。血液凝固受許多因素的影響,如凝血因子的質(zhì)和量、各種理化因素等。棉花給血液凝固提供一個(gè)
7、粗糙表面,容易使血小板發(fā)生粘著、聚集,然后發(fā)生解體,釋放許多凝血因子和血小板因子;另外,棉花含許多帶負(fù)電荷植物纖維,也能激活凝血因子,啟動(dòng)內(nèi)源性凝血途徑。因此放有棉花的試管內(nèi)血液凝固加快。試管內(nèi)壁涂上一層石蠟油時(shí),由于石蠟油表面光滑,不易引起血小板粘著,即不易使血小板發(fā)揮促進(jìn)凝血的作用。另外石蠟油為絕緣體,其把試管表面所帶的負(fù)電荷覆蓋,不利于凝血因子的激活,因此血液凝固變慢。血液凝固實(shí)際上是一系列蛋白酶的水解過程。參與血液凝固的凝血因子大多數(shù)是蛋白質(zhì)酶原,其水解后變成有活性的蛋白質(zhì)酶,如因子II、因子XI、因子XII等(因子VII是有活性的)。這些蛋白質(zhì)酶具有酶隨溫度升高催化活性加強(qiáng)的特性,也
8、具有蛋白質(zhì)受熱變性的特點(diǎn)。當(dāng)溫度低時(shí),蛋白質(zhì)酶的活性下降,而當(dāng)溫度升高到4245以上時(shí),由于蛋白質(zhì)發(fā)生變性,蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞,從而使蛋白質(zhì)功能受損,蛋白質(zhì)酶的活性下降或失活。因此,把血液放入37水浴時(shí)血液凝固的時(shí)間就比放入冰凍水浴時(shí)所需時(shí)間短。體內(nèi)重要的抗凝物質(zhì)是抗凝血酶和肝素??鼓概c凝血酶等多種凝血因子的活性中心-絲氨酸殘基結(jié)合,使這些凝血因子的活性受到抑制或失活,從而達(dá)到抗凝作用。肝素則主要通過與血漿中的一些抗凝蛋白,如抗凝血酶結(jié)合,加強(qiáng)后者的抗凝作用。此外,肝素還能使血管內(nèi)壁細(xì)胞釋放凝血抑制物和纖溶酶原激活物,增強(qiáng)纖溶作用。因此在試管內(nèi)放入肝素時(shí)血液不會(huì)發(fā)生凝固。血凝過程中,Ca2+是重要的凝血因子,其參與了血液凝固的許多環(huán)節(jié),當(dāng)血液中沒有Ca2+時(shí)血液就不會(huì)發(fā)生凝固。在試管內(nèi)放有草酸鉀時(shí),由于草酸鉀與血液中的Ca2+發(fā)生化學(xué)反應(yīng),生成草酸鈣沉淀,使血液中沒有Ca2+,故血液不會(huì)發(fā)生凝固。(六)結(jié)論:通過本實(shí)驗(yàn)可知:血液凝固過程可分為三個(gè)互相聯(lián)系的主要階段,任何一個(gè)階段被破壞,凝血過程就終止,而血液凝固的過程實(shí)際上是纖維蛋白形成的過程。根據(jù)凝血酶原激活物形成的途徑不同,可把血液凝固分為內(nèi)源性和
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