RNA的轉錄及加工

1、1. 真核生物基因為什么要進行RNA轉錄后加工？（P209）原核生物沒有細胞器的分化，轉錄與翻譯同時進行。真核生物有細胞器的分化，基因表達在時間和空間上存在明顯間隔。轉錄在細胞核內(nèi)進行，翻譯在細胞質(zhì)內(nèi)完成。真核生物基因的初始轉錄產(chǎn)物被非編碼序列或間隔區(qū)段分開，轉錄產(chǎn)物不連續(xù)，需要轉錄后加工。2. 細胞內(nèi)RNA原初轉錄物一般都需要經(jīng)過哪些過程的加工修飾？（P209）真核生物細胞內(nèi)轉錄的RNA原初轉錄物要經(jīng)過一系列變化，包括： 5端形成帽子結構； 3端形成一段PolyA； 切去內(nèi)含子； 反式剪接； 部分核苷酸修飾； RNA編輯； RNA的再編輯； RNA鏈的斷裂等過程。3. 真核生物RNA前體內(nèi)含

2、子的剪接分為哪幾類？簡述其區(qū)別。（P217，P232）內(nèi)含子的剪接分為三類： 自我剪接內(nèi)含子 蛋白質(zhì)或酶參與的內(nèi)含子剪接 依賴于snRNA剪接的內(nèi)含子 。區(qū)別：內(nèi)含子類型剪接機制是否需要G參與轉酯反應是否形成套索結構是否形成剪接體存在的基因組自我剪接內(nèi)含子的型主要是轉酯反應，能自發(fā)進行剪接，以G為輔因子，屬于自我催化需要外源G，需要內(nèi)部指導序列（IGS）有兩次轉酯反應否否，不需snRNP某些原生動物rRNA，某些細菌tRNA，某些真菌線粒體基因組，某些植物的葉綠體基因組自我剪接內(nèi)含子的型由內(nèi)含子中分值點的A中的2-OH引發(fā)不需要外源G，需要分支點A兩次轉酯反應是否，不需snRNP主要見于某些真

3、核生物的線粒體和葉綠體rRNA基因組中蛋白質(zhì)或酶參與的內(nèi)含子剪接剪接過程由蛋白質(zhì)或酶參與完成需要蛋白質(zhì)或酶某些真核洗腦的核基因組編碼的tRNA基因組中依賴于snRNA剪接的內(nèi)含子剪接機制與自我剪接內(nèi)含子的型剪接相似不需要外源G，以剪接體分支點A的2-OH引發(fā)兩次轉酯反應是需要snRNP形成剪接體絕大多數(shù)存在與細胞核的蛋白質(zhì)和酶的基因中 4. 寫出下列英文縮寫的含義：PNaseP(212)、hnRNA（217）、RISC（252）、RNAi(251)、剪接體（220）、自我剪接（228）、反義RNA（251或上課PPT）、RNA干涉（251）、siRNA(252)、選擇性剪接（235）、核酶（2

4、29）PNaseP：催化切除5 端額外核苷酸的酶hnRNA：核內(nèi)不均一RNARISC：沉默復合物RNAi：RNA干涉剪接體：是mRNA前提在剪接過程中組裝形成的多組分復合物，由多種snRNA和蛋白質(zhì)因子組成，即剪接體是具有催化剪接過程的核塘核蛋白復合體。自我剪接：rRNA的內(nèi)含子能夠自我剪接，無需剪接體反義RNA：與mRNA互補的RNA分子，也包括與其它RNA互補的RNA分子RNA干涉：在雙鏈RNA引導的抑制過程中存在某種擴增效應，且有某種沒活性參與其中。siRNA：短干涉RNA，發(fā)生轉錄后基因沉默的小的雙鏈RNA選擇性剪接：一個基因的初始轉錄產(chǎn)物在不同的分化細胞、不同的發(fā)育階段乃至不同的生理

5、狀態(tài)下，可以有不同的剪接方式，得到不同的成熟mRNA和蛋白質(zhì)產(chǎn)物核酶：RNA本身具有酶的活性稱為核酶5. 名詞解釋：套索結構（219）、轉酯反應（227）、Dicer酶（253）、順式剪接（239）、反式剪接（239）套索結構：RNA剪接過程中的中間結構，其中有形成的帶尾巴的環(huán)形結構轉酯反應：在剪接體上完成剪接反應的生化本質(zhì)是磷酸二酯鍵的轉移，又稱轉酯反應Dicer酶：能將雙鏈RNA特異性切成大小均一的片段的酶稱為Dicer酶順式剪接：存在與同一基因中的兩個或多個外顯子和內(nèi)含子的剪接，稱為順式剪接反式剪接：幾個外顯子不在同一基因甚至不在同意染色體上的剪接叫反式剪接6. 什么是RNA的自我剪接？

6、自我剪接有哪些類型？（217或232）RNA的自我剪接：能自發(fā)進行剪接，無需酶或蛋白質(zhì)參與。自我剪接有兩種類型：和型兩個亞型的自我剪接內(nèi)含子7. 什么是核酶？（229）類型內(nèi)含子剪接的重要特點是自我催化，即RNA本身具有酶的活性，稱為核酶8. 簡述poly(A)尾的生物功能（243） 提高mRNA在細胞質(zhì)中的穩(wěn)定性，保護mRNA 增強mRNA的可翻譯能力9. 什么是RNA編輯(246)? RNA編輯有什么重要的生物學意義？（249）RNA編輯：是一種較為獨特的遺傳信息的加工方式，即轉錄后的mRNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基插入、刪除或轉換的現(xiàn)象，是在RNA分子上的一種修飾。生物學意義： 改變和補充遺傳信

7、息; 增加基因產(chǎn)物的多樣性; 與生物細胞發(fā)育和分化有關，是基因表達調(diào)控的一種重要方式; 能使基因產(chǎn)物獲得新的結構和功能，有利于復雜的生物進化; 很可能與學習和記憶有關10. 寫出RNA干涉的幾個重要特征（256），RNA干涉應用在哪些方面？（258或上課PPT） RNAi是轉錄水平的基因沉默機制，具有很高的特異性，只降解與之序列相應的單個內(nèi)源基因的mRNA RNAi抑制基因表達具有很高的效率，其表型科達到缺失突變體表型的程度，且相對很少量的dsRNA分子就能完全抑制相應基因的表達，以催化放大的方式進行。 RNAi一直基因表達的效應科穿越細胞界限，在不同細胞之間常距離傳遞和維持信號甚至傳播至整個

8、生物體 dsRNA不得短于21bp，且長鏈dsRNA也在細胞內(nèi)被Dicer酶切割為21bp作右的siRNA，并由siRNA介導mRNA切割；大于30bp的dsRNA不能再哺乳細胞中誘導特意的RNA干涉，而是以細胞非特異性方式及機體全面的基因表達收到抑制或凋亡。 RNAi的過程由dsRNA濃度、作用時間的依賴性，dsRNA誘發(fā)的RNAi效應的強度隨濃度的增高而增強，高濃度的dsRNA能產(chǎn)生較多的siRNA，不僅能增強反應體系的效應，而且還能抵消RNA依賴的腺苷脫氨酶的作用。 RNA干涉依賴于ATP,在去除ATP的樣品中，RNAi現(xiàn)象降低或消失，Dicer酶和RISC的酶切反應必須由ATP提供能量 RNAi的生物安全性高。應用： 在醫(yī)學領域的應用主要是可以有選擇性地使致病基因沉默 功能基因組學的研究 用RNAi構建轉基因動物模型 RNAi用在SARS防治研究中11.舉例說明RNAi作用機理(上課PPT)例：腫瘤的基因治療：腫瘤是