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文檔簡介

1、1,檢測細胞色素P450 1A酶的 高選擇性比率雙光子熒光探針,文獻出處： DOI: 10.1021/jacs.5b09854 J. Am. Chem. Soc. 2015, 137, 1448814495,2,Contents,Introduction,1,2,Experimental section,1,2,3,4,Results and Representation,3,1. Introduction,CYP1A,抗干擾差 成像效果差 毒性大,人體藥物新陳代謝酶，對致癌物質活性有重要影響,活性腔中有豐富的羥基氨基酸，氫鍵和-相互作用可能對基底的組成產(chǎn)生作用,傳統(tǒng)單顯微鏡熒光探針,NCMN

2、的設計依據(jù):CYP1Ad的底物偏好 對位有較強的脫烷基化作用,2. Experimental section,3.表征,結論：NCMN作為檢測CYP1A的探針可行,肉眼色比,112nm紅移,機理,3.表征,結論：NCMN的脫甲基化具有良好的反應性和理想的動力學行為，有潛能對復雜生物體中的CYP1A進行定量測定。,表征 人肝微粒體中CYP1A的量化,結論：(a) (b) (c)確定了NCMN的高選擇性 (d) (e) (f)表面NCMN可以作為CYP1A調節(jié)器的篩選和表征,活細胞成像應用,11,2,單光子,雙光子,未加抑制劑,加CYP1A抑制劑,結論：熒光響應是由于CYP1A調節(jié)NCMN所致。NCMN可以用單光子、雙光子激發(fā)成像來檢測活細胞中CYP1A的活性。,NCMNe在完整細胞和細胞勻漿內檢測CYP1A的量,正常,1nMTCDD,10nMTCDD,結論：NCMN可以被用于篩選有效的CYP1A誘導劑，并檢測活細胞中生 成的CYP1A的酶活性,小鼠肝組織中CYP1A的三維深度成像,放大圖,結論：NCMN組織滲透力強，組織中的CYP1A適合用雙光子深度熒光成像,15,3. Results and discussion,CYP1A2,CYP1A1,亞鐵血紅素,鐵原子,結論：三條H-bond表明-COOH在識別和對接CYP1A中的重要作用 催化效率CY

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