疫病雞剖檢及病毒學(xué)檢查

1、新城疫病雞剖檢 及病毒學(xué)檢查,一、獸醫(yī)傳染病學(xué)實驗室注意事項 二、獸醫(yī)傳染病的一般診斷程序 三、病雞剖檢及細菌學(xué)檢查,一、獸醫(yī)傳染病學(xué)實驗室注意事項,注意個人預(yù)防、避免病原傳播 穿著工作服，實驗結(jié)束后需立即消毒清洗。 實驗操作期間，勿以手指或其他器物等接觸口唇、眼、鼻及面部。 實驗完畢，應(yīng)洗手消毒后離去,一、獸醫(yī)傳染病學(xué)實驗室注意事項,危險材料及其污染的器物處理 動物尸體、內(nèi)臟、血液等廢棄病料，以及廢棄的病原培養(yǎng)物、生物制品等須深埋或經(jīng)過嚴格消毒處理（焚燒、煮沸、高壓滅菌等）后丟棄到公共垃圾處理場，嚴禁將未經(jīng)消毒的危險性材料直接丟棄。 用過的棉球、紗布、吸水紙等污物須置于固定容器內(nèi)統(tǒng)一消毒處理

2、，不得任意拋棄。 桌面、地板或地面被污染時，應(yīng)用適當(dāng)消毒液清洗,二、獸醫(yī)傳染病的一般診斷程序,實驗室診斷 病理組織學(xué)、病原學(xué)（涂片鏡檢、病原分離、PCR、動物回歸）、血清學(xué)（HI、AGID、ELISA）等,臨床診斷 流行病學(xué)、臨床癥狀、病理解剖等,發(fā)生疫情,確 診,三、病雞剖檢及病毒學(xué)檢查,實驗?zāi)康?1. 掌握動物病毒病實驗室診斷的一般程序。 2. 掌握病雞剖檢的一般方法。 3了解雞新城疫的病理變化和臨診要點。 4掌握新城疫病毒的分離鑒定,三、病雞剖檢及病毒學(xué)檢查,疑似新城疫病,流行病學(xué)調(diào)查,尸體剖檢 （取樣、病變的觀察,病原的分離,病原的鑒定,做出診斷,尸體剖檢,尸體剖檢,病雞剖檢基本原則

3、1、外 內(nèi) 2、觀察 取樣 剖檢 3、肝 脾 胃 腸 法氏囊 腎臟 肺 心 喉頭、氣管 腦,尸體剖檢,1. 全身黏膜和漿膜出血，淋巴系統(tǒng)腫脹、出血和壞死，以消化道和呼吸道為明顯。 2. 口腔有黏液，嗉囊內(nèi)積酸臭味液體和氣體； 3. 腺胃黏膜水腫，其乳頭或乳頭間有鮮明的出血點，或有潰瘍或壞死。肌胃角質(zhì)層下也可見出血點,病毒分離,將脾臟剪碎，按照1:5的比例加入含三抗的PBS，用研磨器研磨成組織勻漿 將勻漿置于1.5ml離心管中，5000rpm離心10min。 離心后，取上清0.1ml接種雞胚 37度孵化雞胚72h（每隔12h照胚，挑出死胚和弱胚），棄掉24h之內(nèi)的死亡胚 收獲雞胚尿囊液之前，將雞

4、胚置于4度6h以上，促進血管收縮 收獲尿囊液，測定尿囊液的HA效價， 并用新城疫的陽性血清進行HI實驗，做出鑒定,雞胚培養(yǎng)法是用來培養(yǎng)某些對雞胚敏感的病原的一種培養(yǎng)方法，此方法可用以進行多種病原的分離、培養(yǎng)，毒力的滴定，中和試驗以及抗原和疫苗的制備等。 雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內(nèi)，生長后，雞胚全身皮膚出現(xiàn)出血點，以腦后最顯著,常見接種方法： 1.尿囊腔接種 2.絨毛尿囊膜接種 3.卵黃囊接種 4.羊膜腔接種,尿囊腔接種步驟 標(biāo)本處理：病料研磨（5倍至10倍稀 釋），除菌處理 照胚： 活胚檢查： 胚動、血管、絨毛尿囊 膜發(fā)育 確定接種部位：畫氣室、畫接種部 位（避開大血管及頭部） 消

5、毒：酒精碘酒酒精 接種：0.1-0.2ml，氣室下 孵育：氣室向上放置，孵育的最適溫度為37，相對濕度為4070，孵育7296h,911日齡雞胚,雞胚孵育 氣室向上放置，孵育的最適溫度為37，相對濕度為4070，孵育7296h,接種后檢查 接種后24h內(nèi)死亡的雞胚，系由于接種時雞胚受損或其他原因而死亡，應(yīng)該棄去； 24h后，每天照蛋2次，如發(fā)現(xiàn)雞胚死亡立即放入冰箱，于一定時間內(nèi)（72h）不能致死的雞胚亦放入冰箱凍死，以便收縮血管。 死亡的雞胚置冰箱中12h即可取出收取材料并檢查雞胚病變,雞胚收獲 原則上接種什么部位，收獲什么部位。 尿囊腔內(nèi)接種者用無菌手術(shù)去氣室頂殼，打開整個氣室區(qū)； 以無菌鑷子