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文檔簡介
1、課后知能檢測 1、選擇題1下列關(guān)于生物技術(shù)手段的操作水平的敘述,錯誤的是A雜交育種個體水平B多倍體育種細胞水平C基因工程原子水平D誘變育種分子水平【解析】基因工程又稱DNA重組技術(shù),即操作水平為分子水平。答案】 C2. 下面是4種限制性核酸內(nèi)切酶所識別的DNA分子序列和剪切位點(J表示剪切位點,切出的斷面為粘性末端):限制性核酸內(nèi)切酶1:J GAT限制性核酸內(nèi)切酶2:catG 限制性核酸內(nèi)切酶3: GJ GATCC限制性核酸內(nèi)切酶4: CCGCJ GG下列表達正確的是()A.限制性核酸內(nèi)切酶1和 3 剪出的粘性末端相同B.在使用限制性核酸內(nèi)切酶的同時還需要解旋酶C.限制性核酸內(nèi)切酶1、2、4
2、識別的序列都是由 4個脫氧核苷酸組成的D.限制性核酸內(nèi)切酶1和2切出的DNA片段可通過T4DNA連接酶拼接【解析】 使用限制性核酸內(nèi)切酶時不需要解旋酶解旋, 一般用加熱解旋; 限制性核酸 內(nèi)切酶 4 識別的序列是由 6個 脫氧核苷酸組成的;限制性核酸內(nèi)切酶 1和 2 切出的 DNA 片段不互補,不能連接。【答案】 A3. 下列對基因工程的理解錯誤的是()A. 基因工程又叫轉(zhuǎn)基因技術(shù)或重組DNA技術(shù)B. 基因工程可以將一種生物的 DNA片段轉(zhuǎn)移到另一種生物細胞內(nèi)并讓其表達C. 基因工程的出現(xiàn)受到技術(shù)發(fā)展的推動D. 基因工程技術(shù)已經(jīng)比較成熟,每次轉(zhuǎn)基因都可以成功,并且達到滿意的結(jié)果【解析】 基因工
3、程技術(shù)尚不是很完善, 每次轉(zhuǎn)基因時都需要轉(zhuǎn)移大量的片段, 然后再 進行篩選,不能精確轉(zhuǎn)移,也不能讓目的基因百分之百表達?!敬鸢浮?D4基因工程中所用到的工具酶包括 ()DNA解旋酶 限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)粒A. B.C.D.【解析】 DNA軍旋酶用于DNA復(fù)制過程中,不用于基因工程;質(zhì)粒是基因工程的載體, 但不是酶。因此 C項正確?!敬鸢浮緾5.已知某種限制性核酸內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點,如圖中箭頭所指。如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷,則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?,F(xiàn)有多個上述線性 DNA分子,若每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該
4、酶切 斷,則從理論上講,經(jīng)該酶切割后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生的不同長度 DNA片段的種類數(shù)是()ah cd線性DNA分子的酶切示意圖A. 1B. 2C. 4D. 9【解析】若每個DNA分子上至少有1個酶切位點被酶切斷,則多個線性DNA可以切得的種類有:a、b、c、d、ab、be、cd、abc、bcd 九種?!敬鸢浮緿6作為基因的運輸工具一一載體,必須具備的條件之一及理由是()A. 能夠在宿主細胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制,以便提供大量的目的基因B. 具有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點,以便于目的基因的表達C. 具有某些標(biāo)記基因,以便為目的基因的表達提供條件D. 能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存,
5、以便于進行篩選【解析】 作為載體要攜帶目的基因進入受體細胞并使之表達,必須能夠在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定地保存并大量復(fù)制,以便通過復(fù)制提供大量的目的基因。同時要具有某些標(biāo)記基因,是 為了通過標(biāo)記基因是否表達來判斷目的基因是否進入了受體細胞,從而進行篩選受體細胞。載體要具有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點,則是為了便于與外源基因連接。綜上所述,正確答 案應(yīng)為Ao【答案】 A7.限制性核酸內(nèi)切酶是一種核酸切割酶,可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下圖為四種限制性核酸內(nèi)切酶BarH I、EccR I、Hi nd川以及Bgl n的辨識序列。箭頭表示每一種限制性核酸內(nèi)切酶的特定切割部位,其中哪兩種限制性核酸內(nèi)切酶
6、所切割出來的 DNA片段末端可以互補,其正確的末端互補序列是怎樣的()Aamil 1EeoH. I*4-GCATCC - -CAATTC -CCTAGG - -CTTAACHind 111 + -AAcerr - -TTC(;AA - t鬥IIACATCT -TGTAGA 一A. BarH I 和EccR I;末端互補序列為一AAT一B. BariH I 和Hi nd川;末端互補序列為一GATC. EcoR I 和Hi ndm;末端互補序列為一AATT-D. BartH I 和Bgl n;末端互補序列為一GAT【解析】分析每種限制性內(nèi)切酶切割位點可知,BarH I和Bgl n切割核苷酸序列后,
7、能產(chǎn)生互補的粘性末端。【答案】 D&下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖,其中ori為復(fù)制必需的序列,amp為氨芐青霉素抗性基因,tet為四環(huán)素抗性基因,箭頭表示某種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。下列質(zhì)粒中【解析】質(zhì)粒作為基因工程的載體,有兩個作用:一是通過標(biāo)記基因?qū)χ亟M DNA分子是否進入受體細胞進行鑒定;二是在受體細胞中通過自我復(fù)制完成目的基因的擴增。圖中 ori為復(fù)制必需序列,該序列不能被破壞,否則重組質(zhì)粒就無法在受體細胞中進行自我復(fù)制; 圖中的amp tet均為標(biāo)記基因,只需保留 1個即可?!敬鸢浮緾9. 質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,它存在于許多細菌體內(nèi)。 質(zhì)粒上有標(biāo)記基因如圖所示,通過標(biāo)記基因
8、可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)入成功。外源基因插入的位置不同,細菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同,下表是外源基因插入位置(插入點有a、b、c),請根據(jù)表中提供的細菌生長情況,推測三種重組后細菌的外源基因插入點,正確的一組是( )抗靈節(jié)冑霉盍革閔細菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上的生長狀況細菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生長狀況能生長能生長能生長不能生長不能生長能生長A.是c;是b;是aB. 是a和b;是a;是bC. 是a和b;是b;是aD. 是c;是a;是b【解析】對細菌來說,能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長,也能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長,說明抗氨芐青霉素基因和抗四環(huán)素基因都沒有被破壞,插入點是c;對細菌來
9、說,能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長,說明其抗氨芐青霉素基因正常,不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長,說明其抗四環(huán)素基因被破壞,插入點應(yīng)為b;對細菌來說,不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長,說明其抗氨芐青霉素基因被插入而破壞,故插入點為a?!敬鸢浮?A10. 下表為幾種限制性核酸內(nèi)切酶識別的序列和切割的位點。下圖,已知某DNA在目的基因的兩端1、2、3、4四處有BanH I或EcoR I或Pst I的酶切位點?,F(xiàn)用 BanH I和 EcoR I兩種酶同時切割該 DNA片段(假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開 )。下列各種酶 切位點情況中,可以防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀的是( )限
10、制性核酸內(nèi)切酶BanHlEcoRIPst I識別序列和切割位點GGATCCCCTAGGJGAATTCCTTAAGJCTGCAGGACGTCfI的弟出t I 1 tI 23 4A. 1為BanH I,2 為EccRI,3 為BanH I, 4 為 Pst IB. 1為EcoRI,2 為BarHI,3 為BanHI, 4 為 Pst IC. 1為Pst I,2 為 EcoRI,3 為 EcoRI, 4 為 BanH ID. 1為BanHl,2 為EccRI,3 為Pst I, 4 為 EcoR I【解析】本題建議采用排除法?,F(xiàn)用BanHl和EcoRI兩種酶同時切割該 DNA片段,若“2為BanHl
11、, 3為BarHI”,則酶切后單個含目的基因的DNA片段(2宀3)自身連接成環(huán)狀,故B項錯誤;若“2為EccRI, 3為EcoRI”,則酶切后單個含目的基因的DNA片段(2 3)自身連接成環(huán)狀,故 C項錯誤;若“2為EcoRI ,4 為ECORI”,則酶切后單個含目的基 因的DNA片段(2t4)自身連接成環(huán)狀,故 D項錯誤?!敬鸢浮緼二、非選擇題11. 如圖為DNA分子的切割和連接過程,請據(jù)圖回答:雙金斷開rci attq I C T T A |T1 |舟ATTQl| 貯 T T A 為 | pG不同來源的dna片段結(jié)合I血A 丁行可EcoRI是一種 酶,其識別序列是 ,切割位點是 與之間的鍵
12、,切割產(chǎn)生的 DNA片段的末端形式為。(2)不同來源的 DNA片段結(jié)合,在這里需要的酶應(yīng)是 酶,此酶的作用是在與之間形成而起“縫合”作用的。【解析】本題考查限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用。(1)從圖中可以看出 EcoRI將DNA片段切割,應(yīng)為限制性核酸內(nèi)切酶,其識別序列是 GAATTC切點是G與A之間的磷酸二酯鍵,切割后產(chǎn)生的DNA片段的末端是粘性末端。(2)DNA連接酶可將不同來源的 DNA 片段連接,從圖中可以看出,此酶是通過在G與A之間形成磷酸二酯鍵的形式連接兩個片段, 連接粘性末端的連接酶是 E - coli DNA連接酶。還有一種T4DNA連接酶,既可連接粘性末端, 也可連接平
13、末端?!敬鸢浮?(1)限制性核酸內(nèi)切GAATTC鳥嘌呤脫氧核苷酸(G)腺嘌呤脫氧核苷酸磷酸二酯粘性末端 (2)DNA連接鳥嘌呤脫氧核苷酸(G) 腺嘌呤脫氧核苷酸(A) 磷酸 二酯鍵12. 圖(a)中的三個 DNA片段上依次表示出了 EcoR I、BanH I和Sau3A I三種限制性 核酸內(nèi)切酶的識別序列與切割位點,圖(b)為某種表達載體的示意圖(載體上的EcoRI、SaU3AI的切點是唯一的)。GAATTCCTTA GGATCCCCTAGGGATCCTAG圖第7頁共6頁圖(b)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:(1)經(jīng)BamH I酶切后得到的目的基因可以與上述表達載體被 酶切后的產(chǎn)物連接
14、,理由是(2)若某人利用圖(b)所示的表達載體獲得了甲、 乙、丙三種含有目的基因的重組子, 如 圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有,不能表達的原因是(3)DNA連接酶是將兩個 DNA片段連接起來的酶,常見的有 和,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 ?!窘馕觥坑深}圖可知,BanH I和SaU3A I兩種限制性核酸內(nèi)切酶的共同識別序GAT列是,二者切割可以形成相同的黏性末端,因此經(jīng)BanH I酶切得到的目的基因可CTAG-以與圖(b)所示表達載體被 Sau3A I酶切后的產(chǎn)物連接。(2)在基因表達載體中,啟動子應(yīng) 位于目的基因的首端,終止子應(yīng)位于目的基因的尾端,這樣基因才能順利地轉(zhuǎn)錄,再完成翻譯過程,即順利表達。圖中甲所示的目的基因插入在啟動子的上游,丙所示目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄,因
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