果蠅唾腺染色體的觀察

1、實(shí)驗(yàn)五果蠅唾腺染色體的觀察,1、學(xué)習(xí)果蠅幼蟲唾腺的剖取方法和唾腺染色體的制片方法； 2、觀察果蠅唾腺染色體的形態(tài)特征。,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?雙翅目昆蟲（果蠅等）幼蟲期唾腺細(xì)胞中具有相當(dāng)于普通染色體100150倍的巨大染色體，由于存在于唾液腺細(xì)胞中，所以稱為唾腺染色體(salivary gland chromosome) 。它是由于唾腺細(xì)胞發(fā)育到一定階段后就不再進(jìn)行有絲分裂，永久停留在間期，唾腺染色體經(jīng)過多次復(fù)制而不分開，約有10004000根染色體絲的拷貝，所以又叫多線染色體（polytene chromosomes ）。,二、實(shí)驗(yàn)原理,黑腹果蠅巨大的唾腺染色體是從染色中心向四周放射狀地伸出5長(zhǎng)1短

2、共6條臂。果蠅染色體數(shù)為2n8。其中1號(hào)染色體（X染色體）為端著絲粒染色體，其著絲粒附著地一端在染色中心上，另一端游離；2號(hào)、3號(hào)染色體為中部著絲粒染色體，每條呈“V“伸展兩臂，4號(hào)染色體很短小，呈點(diǎn)狀附在染色中心邊緣。,特征 巨大； 體細(xì)胞配對(duì)，染色體只有半數(shù)（n）； 各染色體的異染色質(zhì)多的著絲粒部分互相靠攏形成染色中心； 深淺不同、疏密個(gè)別的橫紋。,染色質(zhì)絲的不同部位螺旋化程度不同，其中螺旋化程度較高的部位形成染色粒，這些染色粒經(jīng)多線染色體的“放大”，形成染色較深的橫紋。橫紋的相對(duì)大小和空間排列是恒定的，可以作為天然的精確基因定位的“坐標(biāo)”。這些橫紋的數(shù)目和位置一般是恒定的，具有果蠅種的特

3、征，染色體的缺失、重復(fù)、倒位、易位等，都能在唾腺染色體上辨別出來。,banded chromosomes 1000 x,材料：果蠅的三齡幼蟲 試劑： 1%醋酸洋紅 器具：顯微鏡、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、濾紙、繪圖紙,三、儀器與材料,（1）取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上，由于果蠅的唾腺位于幼蟲體前1/3-1/4處，所以左手持鑷子按壓住蟲體后端三分之一的部位，固定幼蟲，右手持解剖針扎住幼蟲頭部口器部位，適當(dāng)用力向右拉唾腺腺體隨之而出。,四、實(shí)驗(yàn)程序,果蠅三齡幼蟲解剖圖,Salivary gland：唾腺 Gonad: 性腺 Ganglion: 神經(jīng)節(jié) Trachea: 氣管 Ovary：卵巢 I

4、ntestine：腸,挑取果蠅唾腺的過程,唾腺的位置及形態(tài)特征,（2）滴加一滴醋酸洋紅，在顯微鏡下（4倍鏡）去除唾腺周圍的脂肪等其他組織部分。唾腺是一對(duì)透明的棒狀腺體，外有白色的脂肪組織（不透明）。去除幼蟲其它組織部分，并把唾腺周圍的白色脂肪剝離干凈。,分離出來的果蠅唾腺,位置：在幼蟲體前約1/3處； 形狀：形如一對(duì)香蕉，上小上大。一邊常附著帶狀的不透明的脂肪。 顏色：半透明如玻璃，略帶白色，比周圍組織透明； 細(xì)胞特征：唾腺上的細(xì)胞較大，輪廓清晰，用低倍鏡即可清楚看到。,唾腺組織,不同人操作得到的唾腺組織可能不一樣,放大的唾腺組織,放大的唾腺組織,放大的唾腺組織,（3）蓋上蓋玻片，用刀片支起蓋玻片一角，按住蓋玻片另一邊，用解剖針輕輕敲打蓋玻片，去掉刀片，稍加熱后覆上濾紙垂直壓片。 （4）觀察，先在10倍鏡下觀察找到染色體后，再換高倍鏡下觀察，比較各染色體的橫向紋帶、帶寬大小、帶紋排列順序，以及由著絲點(diǎn)糾集組成的染色體中心。,10倍鏡,40倍鏡,100倍鏡,重要實(shí)驗(yàn)步驟： 取果蠅三齡幼蟲，一手持鑷子夾住蟲體中部稍后，固定幼蟲，另一手持解剖針按住幼蟲頭部，輕緩拉開頭部，去除幼蟲的其他組織部分和唾腺周圍的脂肪等其他組織，再用常規(guī)染色體制片方法制片。,實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) ： 1、取果蠅三齡幼蟲最佳，其行動(dòng)遲緩，肥大，爬上管壁（將要化蛹）。 2、要辨別清楚