福建省南平市浦城縣2020_2021學(xué)年高二生物下學(xué)期第一次月考試題

1、福建省南平市浦城縣2020-2021學(xué)年高二生物下學(xué)期第一次月考試題 （考試時間：90分鐘；滿分：100分） 第I卷（選擇題）一、單選題（共35小題，1-20題1分，21-35題2分）1基因工程操作過程中，基因的“針線”是指A解旋酶B限制性核酸內(nèi)切酶CDNA聚合酶DDNA連接酶2分子生物學(xué)、生物化學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)理論和相關(guān)技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程。下列行為使基因工程的實(shí)施成為可能的是細(xì)菌質(zhì)粒的發(fā)現(xiàn) 精子獲能才具備受精能力 限制酶和逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn) 蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的改造 DNA序列分析方法的發(fā)明 PCR技術(shù)的發(fā)明ABCD3聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。下列有關(guān)PCR過程

2、的敘述中不正確的是A變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵BPCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需酶的最適溫度較高C延伸過程需要的是耐高溫的DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸D復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成4作為基因工程的運(yùn)輸工具運(yùn)載體，必須具備的條件及理由是A具有多個限制酶切點(diǎn)，以便于目的基因的表達(dá)B具有某些標(biāo)記基因，以使目的基因能夠與其結(jié)合C能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制，以便目的基因能夠穩(wěn)定的存在和數(shù)量的擴(kuò)大D對宿主細(xì)胞無傷害，以便于重組DNA的鑒定和選擇5下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述，不正確的是A收集大量的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的信息，以便分析結(jié)構(gòu)與功能

3、之間的關(guān)系B可以預(yù)測具有一定氨基酸序列的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和生物功能C根據(jù)特定的生物功能，設(shè)計蛋白質(zhì)的氨基酸序列和空間結(jié)構(gòu)D根據(jù)人們的需要，直接對氨基酸的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行重新設(shè)計6在基因工程中，科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞。下列哪項(xiàng)不是以細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞的原因A結(jié)構(gòu)簡單，操作方便B遺傳物質(zhì)含量少C繁殖速度快D性狀穩(wěn)定，變異少7基因治療給無數(shù)的遺傳病患者帶來希望，下列關(guān)于基因治療的論述正確的是A基因治療可以治愈所有的遺傳病B基因治療就是對有遺傳缺陷細(xì)胞進(jìn)行基因修復(fù)C基因治療分為體內(nèi)基因治療和體外基因治療，體外基因治療操作簡單，效果可靠D基因治療時可用經(jīng)過修飾的病毒或農(nóng)桿菌

4、的質(zhì)粒作載體8下列對基因工程的四大操作步驟的理解，錯誤的一項(xiàng)是A一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列BDNA連接酶可恢復(fù)被切開的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵C目前常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒等D目的基因的檢測與鑒定應(yīng)在導(dǎo)入受體細(xì)胞之前進(jìn)行9下列有關(guān)基因工程的成果及應(yīng)用的說法中，正確的是A用基因工程的方法培育出的抗蟲植物也能抗病毒B用轉(zhuǎn)基因動物作為器官移植的供體時，導(dǎo)入的是調(diào)節(jié)因子，不是目的基因C基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用主要是培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗逆性的農(nóng)作物D目前，在發(fā)達(dá)國家，基因治療已用于臨床實(shí)踐10將富含賴氨酸的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胗衩准?xì)胞，可以提高玉米中的賴

5、氨酸含量；更換賴氨酸形成過程中的天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的個別氨基酸，使兩種酶的活性提高，也可以提高玉米中的賴氨酸含量。以上兩種技術(shù)分別屬于A基因工程、基因工程B蛋白質(zhì)工程、蛋白質(zhì)工程C基因工程、蛋白質(zhì)工程D蛋白質(zhì)工程、基因工程11下列四條DNA片段，可能是由同一種限制酶切割而成的是 ABCD12某線性DNA分子含有5000個堿基對(bp)，先用限制性核酸內(nèi)切酶a完全切割，再把得到的產(chǎn)物用限制性核酸內(nèi)切酶b完全切割，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸內(nèi)切酶a和b的識別序列和切割位點(diǎn)如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是a酶切制產(chǎn)物(bp)b酶再次切割產(chǎn)物(bp)2100；1400；10

6、00；5001900；200；800；600；1000；500Aa酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同B該DNA分子中a酶能識別的堿基序列有3個C僅用b酶切割該DNA分子至少可得到三種DNA片段D限制性核酸內(nèi)切酶a和b切出的DNA片段不能相互連接13下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是A表達(dá)載體中的胰島素基因可通過胰島A細(xì)胞的mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原點(diǎn)C借助標(biāo)記基因篩選出的受體細(xì)胞不一定含有目的基因D起始密碼子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用141978年，科學(xué)家將人體內(nèi)能夠產(chǎn)生胰島素的基因與大腸桿菌的 DNA分子重組，并在大腸桿菌內(nèi)獲得成功表達(dá)。

7、按照該方法生產(chǎn)的胰島素已廣泛用于市場。下列敘述正確的是A. 人的胰島素基因可與大腸桿菌 DNA 重組的基礎(chǔ)是兩者具有相似的物質(zhì)組成和分子結(jié)構(gòu)B. 人的胰島素基因只存在于胰島組織細(xì)胞中，故只能從胰島組織細(xì)胞中獲取胰島素基因C. 人的胰島素基因在大腸桿菌中表達(dá)出的肽鏈，需經(jīng)大腸桿菌的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工才能降血糖D人的胰島素基因中的遺傳信息在大腸桿菌中的傳遞過程只有 DNARNA、RNA蛋白質(zhì)15下列操作中，不需要使用酶的一項(xiàng)是A構(gòu)建基因組文庫B體外誘導(dǎo)獲得小鼠的雜交瘤細(xì)胞C制備植物原生質(zhì)體時去除細(xì)胞壁D將動物組織分散成許多單個細(xì)胞16下列有關(guān)動物基因工程的說法，錯誤的是A將外源生長激素基因?qū)雱?/p>

8、物體內(nèi)可提高動物生長速度B將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M，使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低C科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，通過顯微注射等方法，導(dǎo)入哺乳動物的體細(xì)胞中D培育轉(zhuǎn)基因克隆豬器官，采用的方法是將器官供體基因組導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)17右圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。判斷下列說法正確的是A將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌，細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素 的培養(yǎng)基上能生長B常用的方法是顯微注射法，將完成導(dǎo)入過程 后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的只是導(dǎo)入了

9、重組質(zhì)粒的細(xì)菌C目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長D將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的 培養(yǎng)基上，能生長的是只導(dǎo)入了質(zhì)粒A的細(xì)菌18生物工程是一門生物科學(xué)與工程技術(shù)有機(jī)結(jié)合而興起的一門綜合性的科學(xué)技術(shù)，近些年來發(fā)展迅猛，碩果累累，下列關(guān)于生物工程的說法，不正確的是A植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合技術(shù)的原理是一樣的，植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是不同的B從理論上講，基因工程和細(xì)胞工程都可以定向改造生物的遺傳物質(zhì)和克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C基因工程的工具酶有限制酶、DNA連接酶等，細(xì)胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等D通過基因工程和發(fā)酵工程可以生產(chǎn)出乙肝

10、疫苗、胰島素、某些種類的單克隆抗體19下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是APEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B細(xì)胞工程在細(xì)胞器水平上定向改變細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)C骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D核移植克隆的動物，其線粒體DNA來自供卵母體20下列生物技術(shù)與其原理對應(yīng)錯誤的是A轉(zhuǎn)基因技術(shù)基因重組 B動物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞全能性C原生質(zhì)體融合細(xì)胞膜的流動性 D動物體細(xì)胞核移植細(xì)胞核的全能性21下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的敘述，不正確的是A脫分化和再分化過程中生長素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不相同B植物組織培養(yǎng)整個過程必須有光才能進(jìn)行C以人工膜包裹植物胚狀體和營養(yǎng)物質(zhì)可制得人工種子D以一株

11、植物的葉片和花藥為外植體培育的植株基因型不相同22下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是A動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物23下表為動、植物細(xì)胞工程的四項(xiàng)內(nèi)容比較，你認(rèn)為錯誤的有幾項(xiàng)植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程特殊處理機(jī)械法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理配制細(xì)胞懸液融合方法物理方法，化學(xué)方法，生物方法物理方法，化學(xué)方法典型應(yīng)用人工種子，種間雜種植物單克隆抗體的制備培養(yǎng)液的區(qū)別葡萄糖是離體組織賴以生長的成

12、分常添加動物血清提供營養(yǎng)A0項(xiàng)B1項(xiàng)C2項(xiàng)D3項(xiàng)24下列有關(guān)細(xì)胞工程技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的敘述，正確的是A以植物芽尖為材料通過組織培養(yǎng)可以獲得植物新品種B脫毒草莓和轉(zhuǎn)基因抗病毒草莓的培育都需要使用植物組織培養(yǎng)技術(shù)C細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸D轉(zhuǎn)基因羊和克隆羊“多莉”的培育克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和性障礙25下列不屬于細(xì)胞克隆的是A人胰島素基因的體外復(fù)制B雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖C宮頸癌細(xì)胞的體外培養(yǎng)D植物胚性細(xì)胞形成愈傷組織26細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用廣泛，下圖為細(xì)胞融合過程，下列敘述錯誤的是A借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置B培養(yǎng)液滲透壓略大于細(xì)胞質(zhì)，

13、有助于植物細(xì)胞酶解法去壁C“番茄一馬鈴薯”的培育說明了不同物種之間的雜交育種可以成功D基因型為AaBB與aaBb植株的花粉去壁后兩兩融合得到6種基因型細(xì)胞27下列有關(guān)核移植的敘述中，正確的是A卵母細(xì)胞最好選擇減數(shù)第一次分裂中期的卵母細(xì)胞B胚胎核移植難度明顯高于體細(xì)胞核移植C供體細(xì)胞應(yīng)選擇傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞D通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物是對體細(xì)胞動物進(jìn)行了100%的復(fù)制28下列關(guān)于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)的敘述，錯誤的是A細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)是植物細(xì)胞工程的重要用途之一B培養(yǎng)過程中需要脫分化形成愈傷組織，然后懸浮培養(yǎng)愈傷組織細(xì)胞C培養(yǎng)的愈傷組織需要經(jīng)過再分化產(chǎn)生特定的組織細(xì)胞后才能產(chǎn)生特定的

14、細(xì)胞產(chǎn)物D培養(yǎng)的細(xì)胞收集后一般要破碎提取有效成分29在下列過程中, 需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的有幾種用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株利用花藥離體培養(yǎng)得到的單倍體植株利用基因工程培養(yǎng)抗病轉(zhuǎn)基因植株利用細(xì)胞工程培養(yǎng)“番茄馬鈴薯”雜種植株無子西瓜的大量繁殖A一種 B二種 C三種 D四種30如圖所示，質(zhì)粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（XR）和Y抗生素抗性基因（YR）。其中YR內(nèi)部含有限制酶FseI、NaeI、NgoMIV識別序列，三種酶的識別序列如圖（表示切割位點(diǎn)），目的基因內(nèi)部不存在這些識別序列。若要將目的基因直接插入到Y(jié)R內(nèi)形成重組質(zhì)粒pZHZ10，則pZHZ9需用的限制酶是 A

15、FseIBNaeICNgoMIVDFseI或NgoMIV312019年12月以來，新型冠狀病毒導(dǎo)致的肺炎在世界范圍爆發(fā)。經(jīng)科學(xué)工作者研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)種快速檢驗(yàn)新冠肺炎病原體的方法，以正確診斷是否感染病毒。下列與新型冠狀病毒的研究、診斷有關(guān)的說法中錯誤的是A鏡檢法：在光學(xué)顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液，以發(fā)現(xiàn)病原體BPCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)，可在幾十分鐘內(nèi)把病原體的基因擴(kuò)增到數(shù)百萬倍C抗原-抗體法：用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合，確認(rèn)病人是否感染過病原體D基因探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的核酸分子做探針，利用核酸分子雜交原理來檢測病原體32以下為形成 c

16、DNA 過程和 PCR 擴(kuò)增過程示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是A催化過程的酶是 RNA 聚合酶B過程發(fā)生的變化是引物與單鏈 DNA 結(jié)合C催化過程的酶都是 DNA 聚合酶，都能耐高溫D對同一目的基因而言，通過 cDNA 過程獲得和 PCR 過程獲得的目的基因結(jié)構(gòu)完全相同33花粉植株是體細(xì)胞遺傳研究和突變育種的理想材料。下面是培育四季柑桔(2N=18)花粉植株的過程示意圖，有關(guān)敘述錯誤的是A花粉植株培育的原理是花粉粒細(xì)胞具有全能性，其技術(shù)是植物組織培養(yǎng)B過程是細(xì)胞再分化，其根本原因是基因選擇性表達(dá)C四種培養(yǎng)基均屬于固體培養(yǎng)基，其中所含植物激素的種類和比例有差異D觀察處于分裂中期的四季柑桔花粉

17、植株根尖細(xì)胞，可觀察到18條染色體34下圖表示抗人體胃癌的單抗抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是A圖中給實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原B利用電刺激的方法可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C用特定的選擇培養(yǎng)基對乙進(jìn)行篩選，融合細(xì)胞均能生長，未融合細(xì)胞均不能生長D對丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁35大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因，其編碼的產(chǎn)物半乳糖苷酶在Xgal和IPTG同時存在時，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。如圖為利用該質(zhì)粒進(jìn)行的轉(zhuǎn)基因過程，請據(jù)圖菌落的顏色分別是A藍(lán)色 白色 白色B藍(lán)色 藍(lán)色 白色C藍(lán)色 白色 藍(lán)色D白色

18、藍(lán)色 白色第II卷（非選擇題）二、非選擇題（共5小題，每題10分,共50分）36（10分）油菜是一種常見的油料作物。維生素E有延緩衰老的作用，是一種脂溶性維生素。尿黑酸植基轉(zhuǎn)移酶（HPT）是擬南芥中天然維生素E合成途徑中的關(guān)鍵酶。為獲得高產(chǎn)維生素E的油菜種子，科研工作者將編碼HPT的基因HPT1轉(zhuǎn)入油菜細(xì)胞并獲得轉(zhuǎn)基因油菜，流程如圖。請回答相關(guān)問題：（1）為獲得目的基因，科研工作者用擬南芥基因組DNA為模板，用基因HPT1的一段核苷酸序列作 進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增的原理是 。（2）通過過程構(gòu)建的重組質(zhì)粒，必須具備啟動子、目的基因、終止子等結(jié)構(gòu)，其中啟動子的作用是 （2分）。培養(yǎng)含重組質(zhì)粒的

19、農(nóng)桿菌時，培養(yǎng)基中需加入碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和卡那霉素，加入卡那霉素的作用是 。（3）過程利用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因油菜，是因?yàn)門i質(zhì)粒上有 結(jié)構(gòu)。中培養(yǎng)基中除加入無機(jī)鹽、有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂等外，還需要加入 _來調(diào)節(jié)生長過程，以誘導(dǎo)不同器官的形成。（4）過程獲得的油菜還需要采用_方法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA。高產(chǎn)維生素E的轉(zhuǎn)基因油菜是否成功獲得還需要在個體水平進(jìn)行鑒定，如 （2分）。37（10分）植物組織培養(yǎng)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于無病毒植株培育、育種及獲得細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。結(jié)合下圖中番茄植株的培育過程，回答相關(guān)問題：（1）植物組織培養(yǎng)依據(jù)的生物學(xué)原理是_。（2）過程中通常使用

20、_酶和_酶來獲取植物細(xì)胞原生質(zhì)體，此處使用的外界溶液濃度不宜過小，以防止細(xì)胞原生質(zhì)體 。（3）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)：切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得 。（4）多倍體番茄植株所結(jié)果實(shí)中維生素含量更高，若想培育多倍體番茄，有兩種方法：一是在過程中添加_(物質(zhì)）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；二是在過程中添加一定濃度的 （物質(zhì)）進(jìn)行處理。（5）植物組織培養(yǎng)技術(shù)是在_和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生 、 叢芽，最終形成完整的植株。（6）“人工種子”是以組織培養(yǎng)得到的 等材料，添加包埋胚狀體的膠質(zhì)以及人造種皮組成。38（

21、10分）現(xiàn)代人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染 性疾病的病原體為 RNA 病毒，該病毒表面的 A 蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的 流程之一如下圖：（1） 過程采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是_，在此過程中特有的誘導(dǎo)因素為_，獲得的X是_。（2） 漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，至少需經(jīng)_ 次篩選才能選出產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后要用_ 技術(shù)在體外培養(yǎng)。培養(yǎng)時配置的培養(yǎng)基成分與培養(yǎng)植物相比不同的是含有葡萄糖和_等。其中培養(yǎng)環(huán)境中的空氣必須加5%的CO2，目的是為了 。（3） 單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是 。（4）對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內(nèi)分

22、離病毒，與已知病毒的 進(jìn)行比較；或用圖中的 進(jìn)行特異性結(jié)合檢測。39（10分）徑柳匙葉草是一種泌鹽植物?？蒲泄ぷ髡邔搅兹~草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點(diǎn)；圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點(diǎn)示意圖；圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，請分析回答問題：（1）將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，再根據(jù)TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，此法為從_獲取

23、目的基因,獲取目的基因的方法還有_、_。（2）不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA，其原因是_。（3）若用BamHI切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用_切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達(dá)載體，該方案的缺陷是 （2分）。故切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用_酶。（4）用上述最佳方案構(gòu)建基因表達(dá)載體，所得重組質(zhì)粒_（選填“能”“不能”或“不一定能”）被BamHI切割。（5）為了檢測技術(shù)成果，科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，這屬于_水平的檢測。40.（10分）角蛋白酶（KerA）是降解角蛋白的酶類，在飼料工業(yè)中具有較大的應(yīng)用前景，但天然

24、菌株產(chǎn)酶量低限制了其推廣應(yīng)用。為了獲得高效表達(dá)的KerA工程菌，研究者分別構(gòu)建了大腸桿菌和畢赤酵母工程菌，并實(shí)現(xiàn)了異源表達(dá)。請回答下列相關(guān)問題：（1）為了獲取KerA基因，從天然菌株中提取相應(yīng)的mRNA，在_酶的作用下合成cDNA片段。從物種間的基因交流角度分析，與構(gòu)建基因組文庫相比，構(gòu)建cDNA文庫的優(yōu)點(diǎn)在于 。（2）構(gòu)建KerA基因表達(dá)載體須利用的工具酶有_；將KerA基因表達(dá)載體導(dǎo)入工程菌，應(yīng)用_處理工程菌從而制備成_細(xì)胞。（3）KerA基因在大腸桿菌和畢赤酵母工程菌內(nèi)均能實(shí)現(xiàn)異源表達(dá)，從分子水平上分析原因是 ，并且它們體內(nèi)轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程或機(jī)制相同。但經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，只有畢赤酵母工程菌表達(dá)合成的KerA可直接投入使用，分析其原因是 （2分）。（4）KerA在60以上時熱穩(wěn)定性差，限制了該酶的應(yīng)用范圍，研究人員在KerA的末端插入半胱氨酸，這不僅對酶活性影響小，且大大提高了其熱穩(wěn)定性。其運(yùn)用到的這種現(xiàn)代生物技術(shù)為 ，該技術(shù)操作時真