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1、果蔬維生素C含量測定及其分析摘要本次實驗我們測定了橘子中的維生素c含量,試驗中,通過2,6-二氯酚靛酚對維生素C的滴定從而測定了橘子所含的維生素C含量,我們測得橘子的維C的含量是20.46mg/100g,相對較低。經(jīng)查閱資料,討論后發(fā)現(xiàn)維生素C在空氣中易氧化,而且不同成熟程度、品種、新鮮程度、生長地、測定溫度等客觀因素也會對其有很大的影響。一、前言實驗目的:測定橘子中的維生素c含量,從而進行分析。實驗原理: 維生素C是人類營養(yǎng)中最重要的維生素之一,缺少它時會產(chǎn)生壞血病,因此又稱為抗壞血酸(ascorbic acid)。它對物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用。近年來,發(fā)現(xiàn)它還有增強機體對腫瘤的抵抗力,
2、并具有化學致癌物的阻斷作用。維生素C主要存在于新鮮水果及蔬菜中。水果中以獼猴桃含量最多,在檸檬、桔子和橙子中含量也非常豐富;蔬菜以辣椒中的含量最豐富,在番茄、甘藍、蘿卜、青菜中含量也十分豐富,野生植物以刺梨中的含量最豐富,每100克中含2800毫克,有“維生素C王”之稱。維生素C為無色晶體,味酸,溶于水及乙醇,不耐熱,在堿性溶液中極不穩(wěn)定,日光照射后易被氧化破壞,有微量銅、鐵等重金屬離子存在時更易氧化分解,干燥條件下較為穩(wěn)定。故維生素C制劑應放在干燥、低溫和避光處保存;在烹調(diào)蔬菜時,不宜燒煮過度并應避免接觸堿和銅器。維生素C具有很強的還原性。它可分為還原性和脫氫型。還原型抗壞血酸能還原染料2,
3、6-二氯酚靛酚(DCPIP),本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈紅色,還原后變?yōu)闊o色。因此,當用此染料滴定含有維生素C的酸性溶液時,維生素C尚未全部被氧化前,則滴下的染料立即被還原成無色。一旦溶液中的維生素C已全部被氧化時,則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以,當溶液從無色變成微紅色時即表示溶液中的維生素C剛剛全部被氧化,此時即為滴定終點。如無其它雜質(zhì)干擾,樣品提取液所還原的標準染料量與樣品中所含還原型抗壞血酸量成正比。試劑和器材試劑2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸餾水中。1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸餾水中。標準抗壞血酸溶液(1mg/mL): 準確稱取
4、100mg純抗壞血酸(應為潔白色,如變?yōu)辄S色則不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀釋至100mL,貯于棕色瓶中,冷藏。最好臨用前配制。0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO3的熱水中,冷卻后加水稀釋至250mL,貯于棕色瓶中冷藏(4)約可保存一周。每次臨用時,以標準抗壞血酸溶液標定。材料橘子1只器材錐形瓶100mL(2);移液管10mL(2);容量瓶100mL(1);250mL(1);50mL(5);微量滴定管5mL(1);研缽;漏斗;紗布。操作方法提取水洗干凈整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果,用紗布或吸水紙吸干表面水分。然后稱取20g,
5、加入20mL 2%草酸,根據(jù)實驗設計需要處理樣品,然后用研缽研磨,四層紗布過濾,濾液備用。紗布可用少量2%草酸洗幾次,合并濾液,濾液總體積定容至50mL。標準液滴定準確吸取標準抗壞血酸溶液1mL置100mL錐形瓶中,加9mL 1%草酸,用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色,并保持15s不褪色,即達終點。由所用染料的體積計算出1mL染料相當于多少毫克抗壞血酸(取10mL 1%草酸作空白對照,按以上方法滴定)。樣品滴定準確吸取濾液兩份,每份10mL, 分別放入2個錐形瓶內(nèi),滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白對照滴定。數(shù)據(jù)記錄與處理1、 標準滴定結果 用0.1%的2,6
6、-二氯酚靛酚溶液滴定抗壞血酸溶液,得到以下數(shù)據(jù)(表一):表一 0.1%2,6-二氯酚靛酚的標準滴定1ml標準抗壞血酸溶液+9ml1%草酸10ml1%草酸0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液(ml)5.305.450.10 表二 多種蔬果的維生素C含量測定蔬果名稱蔬果質(zhì)量W(g)0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液用量(ml)維生素C含量(mg/100g樣品)組別1組別2平均值10ml0.1%草酸橘子20.0124.344.484.410.1020.46 數(shù)據(jù)處理:由結果得1ml抗壞血酸需要的染料(0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液)的體積為V*=(5.30+5.45)/2-0.10=5.275ml1ml染料
7、能氧化抗壞血酸質(zhì)量為T=1*1/5.275=0.19mg2、多種水果蔬菜的維生素C含量測定結果本組試驗我們選取了橘子作為材料,并對其進行了維生素C含量測定。同標準滴定操作相似,用0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液對樣品進行滴定,得到以下數(shù)據(jù)(表二,圖一),并由公式得樣品中維生素C的含量(100mg/100g樣品): 附公式:式中:VA為滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數(shù);(VA=4.41mL) VB為滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數(shù);(VB=0.10mL) C為樣品提取液的總毫升數(shù);(C=50mL)D為滴定時所取的樣品提取液毫升數(shù);(D=10mL)T為1mL染料能氧化抗壞血酸毫克數(shù)(由操作二計
8、算出);(T=0.19mg)W為待測樣品的重量。(W=20.012g)注意事項(1) 某些水果、蔬菜(如橘子、西紅柿等)漿狀物泡沫太多,可加數(shù)滴丁醇或辛醇。(2) 整個操作過程要迅速,防止還原型抗壞血酸被氧化。滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應小于1mL或多于4mL,如果樣品含維生素C太高或太低時,可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。(3)提取的漿狀物如不易過濾,亦可離心,留取上清液進行滴定。5、 討論與誤差分析通過查閱資料,我們了解到,我組測得的桔肉維生素C含量為20.46mg/100g,相對偏低,分析其原因為:1、 研磨時,研磨的不完全,過濾使得紗布上有殘余;2、 滴定時,滴
9、定管有微小漏液,導致結果數(shù)據(jù)有誤差;3、 可能受到橘子成熟程度、品種、新鮮程度、生長地、測定溫度等客觀因素;4、 由于操作不熟練,整個操作不夠迅速,滴定過程超過了2min,導致還原型抗壞血酸被氧化,從而測定的結果偏小。6、 思考題1 為了測得準確的維生素C含量,實驗過程中都應注意哪些操作步驟?為什么?(1) 過濾后紗布盡量用少量2草酸多洗幾次以保證維生素c基本析出;若泡沫太多,可加數(shù)滴丁醇或辛醇。(2) 為了防止還原型抗壞血酸被氧化,滴定過程一般不超過2min。(3) 滴定所用的染料不應小于1mL或多于4mL,如果樣品含維生素C太高或太低時,可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。2 試簡述維生素C的生理意義。維生素C參與體內(nèi)的眾多氧化還原反應。可促進細胞間質(zhì)的完整,保持細胞間質(zhì)的完整,增加毛細血管壁致密度,降低其通透性及脆性;具有抗炎抗過敏作用;具有還原性,有保護酶系的巰基以避免被毒物破壞的作用,可用于鉛、汞、砷、苯等的慢性中毒和放射線??;大量維生素C有中和細菌內(nèi)毒素,促進抗體合成,增強白細胞吞噬功能;促進鐵在腸內(nèi)吸收,對血紅蛋白的合成和紅細胞的成熟有影響;維生素C對增強魚的抗病力有重要作用。本品蛋白結合率低。少量貯藏于血漿和細胞,以腺體組織內(nèi)的濃度為最高。肝內(nèi)代謝。極少數(shù)以原形物或代謝物經(jīng)腎排泄,可經(jīng)血液透析清除。維生素C主要用于由維生素C缺乏引起的全身淤點,齒齦、
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