第十章細(xì)胞增生和凋亡的分子機(jī)制

1、第十章 細(xì)胞增生和凋亡的分子機(jī)制多細(xì)胞生物體細(xì)胞命運(yùn) 細(xì)胞周期增生 分化成具有特定功能的細(xì)胞 死亡并從生物體中消失 體內(nèi)自發(fā)的細(xì)胞死亡是細(xì)胞凋亡第一節(jié) 生長因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)活化細(xì)胞周期進(jìn)程是細(xì)胞增生的分子機(jī)制 細(xì)胞周期 參與細(xì)胞周期的蛋白質(zhì) 調(diào)控蛋白協(xié)同作用調(diào)控細(xì)胞周期 生長因子通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控細(xì)胞周期細(xì)胞周期:大多數(shù)真核細(xì)胞經(jīng)過一系列有序事件，使細(xì)胞體積增大，染色體復(fù)制，并且分裂成兩個各含有一套完整的染色體的子代細(xì)胞細(xì)胞周期： 四個周期間期(G1期S期G2期M期):蛋白質(zhì)合成旺盛，DNA復(fù)制2nG1細(xì)胞 4n的G2期細(xì)胞細(xì)胞體積增大M期 細(xì)胞分裂4n的細(xì)胞分裂為兩個2n的G1期細(xì)胞細(xì)胞周期中的四

2、個關(guān)卡1.G1晚期的限制點(diǎn)2.G1-S轉(zhuǎn)折的DNA 損傷關(guān)卡3.G2-M轉(zhuǎn)折的DNA 損傷關(guān)卡4.M期的有絲分裂中期關(guān)卡或稱紡錘體組裝關(guān)卡關(guān)卡是調(diào)控細(xì)胞周期的位點(diǎn) 為保持細(xì)胞周期正常進(jìn)行，細(xì)胞周期中存在四個關(guān)卡：G1晚期的限制點(diǎn)；G1-S轉(zhuǎn)折和G2-M轉(zhuǎn)折的DNA 損傷關(guān)卡；M期的有絲分裂中期關(guān)卡或稱紡錘體組裝關(guān)卡二、有許多蛋白質(zhì)參與調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程周期蛋白（CYCLIN） 周期蛋白依賴性激酶（CYCLIN DEPENDENT KINASES(cdk)周期蛋白周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CKI） RB及E2FDP1轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)Cdk磷酸化和去磷酸化的蛋白激酶和磷酸酶 泛酸（ubiquitin)

3、和使蛋白質(zhì)泛酸化(ubiquitination)的酶(一)周期蛋白和周期蛋白依賴性激酶復(fù)合物驅(qū)動細(xì)胞周期進(jìn)程周期蛋白-含量隨著不同細(xì)胞周期時期升高和降低的蛋白質(zhì)，可分為A、B、C、D、E等周期蛋白的含量受以下幾方面的調(diào)控：生長因子誘導(dǎo)的基因表達(dá) 泛素介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解 在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)間的運(yùn)輸（周期蛋白B）周期蛋白的結(jié)構(gòu)有結(jié)構(gòu)保守的100多個氨基酸殘基的周期蛋白盒，是與Cdk結(jié)合的部位周期蛋白與相應(yīng)的Cdk結(jié)合成異二聚體周期蛋白依賴性激酶（Cdk）組成型表達(dá)的核內(nèi)絲蘇氨酸蛋白激酶 單獨(dú)存在的Cdk無活性與相應(yīng)的周期蛋白結(jié)合后變構(gòu)形成異二聚體，并被磷酸化和去磷酸化調(diào)控才能在有活性和無活性狀態(tài)之間轉(zhuǎn)

4、換。周期蛋白是調(diào)節(jié)亞基，Cdk是催化亞基有活性的Cdk能磷酸化底物蛋白質(zhì)如Rb蛋白，轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白等，調(diào)控它們的活性，驅(qū)動細(xì)胞周期進(jìn)程 Cdk復(fù)合物的活性受CKI抑制The main human cyclins and CdksCylinCdkFunctionD1,D2,D3Cdk4,Cdk6G1 progressionE, ACdk2G1-S transition,S-progressionB, ACdk1G2-M transition成熟促進(jìn)因子（mature-promoting factor, MPF)周期蛋白B和Cdk1(Cdc2)的復(fù)合物Cdc2 is the protein th

5、at encoded by genes which are required for passage through START as well as for entry into mitosis.Cyclin B is a regulatory subunit required for catalytic activity of the Cdc2 protein kinase.(二) CKI抑制Cdk及周期蛋白Cdk復(fù)合物的活性CDK抑制物（CKI）的種類(兩類）1. Cdk4和Cdk6抑制因子家族，包括P15、P16、P18和P19 蛋白 特異地識別和結(jié)合Cdk4或Cdk6，抑制周期蛋白D

6、與Cdk4或Cdk6地結(jié)合與周期蛋白DCdk4/6結(jié)合，抑制Cdk4/6利用ATP磷酸化底物2. Cip/Kip（細(xì)胞因子誘導(dǎo)地蛋白/激酶相互作用蛋白）家族，包括P21、P27和P57是細(xì)胞接受到接觸抑制、DNA損傷、低氧及某些細(xì)胞因子等信號后的產(chǎn)物和周期蛋白Cdk復(fù)合物結(jié)合，抑制它們的活性對周期蛋白DCdk4/6 有正調(diào)節(jié)作用（三）Rb蛋白與轉(zhuǎn)錄因子E2FDP1的結(jié)合對G1期進(jìn)展產(chǎn)生負(fù)調(diào)節(jié)作用RB家族的成員 RB（P105 RB，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白）及P107和P130 分子中有一個口袋狀結(jié)構(gòu)，稱口袋蛋白RB家族的分子中口袋蛋白能與多種蛋白結(jié)合，如轉(zhuǎn)錄因子E2FDP1復(fù)合物、RNA聚合酶等，

7、并調(diào)控它們的活性G1早期低磷酸化的RB與E2FDP1復(fù)合物結(jié)合，抑制它的轉(zhuǎn)錄因子功能G1中期及晚期，周期蛋白DCdk4/6和E/Cdk2先后磷酸化RB，磷酸化的RB失去活性，釋放出E2FDP1游離的E2FDP1活化靶基因轉(zhuǎn)錄核苷酸及DNA合成酶的基因，如四氫葉酸還原酶，胸苷激酶，DNA合成酶的基因周期蛋白D、E、A及Cdk2基因 某些細(xì)胞癌基因游離的E2FDP1活化靶基因轉(zhuǎn)錄E2F基因本身E2F活化自身基因及周期蛋白E，加速RB蛋白在G1晚期磷酸化及釋放E2FDP1E2F靶基因的表達(dá)使細(xì)胞完成DNA復(fù)制的準(zhǔn)備，細(xì)胞通過限制點(diǎn)（四） 使Cdk磷酸化和去磷酸化的酶也調(diào)節(jié)Cdk活性Cdk1 101位

8、蘇氨酸被Cdk活化激酶磷酸化，可將活化15位酪氨酸及14位蘇氨酸磷酸化，失去活性 G2期，三個部位都磷酸化，無活性15位酪氨酸及14位蘇氨酸去磷酸化后，才能有活性( 五) 泛素蛋白酶體介導(dǎo)蛋白質(zhì)降解也起調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的作用泛素（Ub）是由76個氨基酸殘基組成的多肽，高度保守，廣泛存在于所有真核細(xì)胞內(nèi)Ub利用其末端甘氨酸末端殘基與靶蛋白的或氨基結(jié)合，使蛋白質(zhì)泛素化標(biāo)記，以便于進(jìn)一步降解Ub與靶細(xì)胞的結(jié)合由一系列酶連續(xù)催化完成 泛素活化酶（E1）泛素偶聯(lián)酶（E2）泛素蛋白連接酶（E3）蛋白質(zhì)泛素化過程所需要的酶：泛素活化酶E1和泛素偶聯(lián)酶E2都是巰基酶，參與酶催化反應(yīng)泛素蛋白連接酶E3是多亞基酶，有

9、兩類：SCF復(fù)合物 APC（有絲分裂后期促進(jìn)復(fù)合物）SCF復(fù)合物三個核心成分（Skp1、Cdc53/Cullin和Fbox）底物先被磷酸化，才能和Fbox蛋白結(jié)合Cdc53/Cullin和另一亞基Rbox蛋白結(jié)合泛素化的E2，并催化泛素和底物連接SCF復(fù)合物的底物有周期蛋白D、E、P21、P27、E2F和WeelAPCAPC由10種以上的亞基組成，能與E2結(jié)合的泛素轉(zhuǎn)移給周期蛋白A和B。有功能的紡錘體形成后，APC也能多泛素化連接姐妹染色體的蛋白通過多泛素化途徑降解的蛋白質(zhì)都是一些短命的蛋白質(zhì)，如周期蛋白，P21,P27,E2F,Weel等與周期蛋白泛素化有關(guān)的序列 周期蛋白A和B的N端9個氨

10、基酸殘基組成的保守序列，稱破壞蛋白盒 周期蛋白D和E的C端保守的PEST（脯谷絲蘇）序列過程1.E1利用ATP水解釋放能量活化Ub，使半胱氨酸殘基與Ub的C末端甘氨酸殘基間形成高能硫酯鍵2.E1將活化的Ub傳遞給E2，形成UbE2中間體E2是一類小分子量蛋白質(zhì)，含有一個保守的核心結(jié)構(gòu)域，其中的半胱氨酸與Ub也以高能硫酯鍵相連3.在E3的催化下， Ub的C末端與靶蛋白的賴氨酸殘基的氨基以一個酰氨異構(gòu)肽鍵連接，形成泛素化蛋白質(zhì)4.泛素化蛋白Ub分子上的48位賴氨酸殘基的氨基進(jìn)一步不斷泛素化，形成泛素化蛋白質(zhì)三、調(diào)控蛋白協(xié)同作用調(diào)控細(xì)胞周期(一) Cdk4/6和Cdk2的活化是限制點(diǎn)處調(diào)控的關(guān)鍵因素

11、 細(xì)胞周期蛋白D最早出現(xiàn)于G1中期，在晚期達(dá)到高峰 細(xì)胞周期蛋白E最早出現(xiàn)于G1晚期，在G1-S轉(zhuǎn)折處含量最高 周期蛋白D和E分別與Cdk4/6 和Cdk2 形成復(fù)合物，使Rb磷酸化釋放轉(zhuǎn)錄因子，使靶基因轉(zhuǎn)錄，作好復(fù)制準(zhǔn)備 周期蛋白D和E經(jīng)SCF泛素化而降解（二）Cdk1活化是G2M關(guān)卡處關(guān)鍵調(diào)控因素 周期蛋白B-Cdk活化 周期蛋白B磷酸化使周期蛋白B-Cdk1在核內(nèi)聚集，并磷酸化底物蛋白，使染色體致密化，核膜解體，紡催體形成（三）APC介導(dǎo)的多泛素化蛋白降解是細(xì)胞離開M期進(jìn)入G1期的關(guān)鍵調(diào)控因素 周期蛋白A/B-Cdk1是APC磷酸化而活化的因素之一 有絲分裂中期介導(dǎo)姐妹染色體穩(wěn)定地附著在

12、紡錘體的有蛋白激酶和蛋白質(zhì)因子 APC活化導(dǎo)致連接姐妹染色體地蛋白質(zhì)降解，細(xì)胞通過有絲分裂中期關(guān)卡，可進(jìn)展到G1期（四） DNA損傷關(guān)卡與G1及G2期停滯相關(guān) G2期地停滯涉及一系列的磷酸化過程（四）生長因子等細(xì)胞外因素通過信號 轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控細(xì)胞周期 細(xì)胞退出細(xì)胞周期，從G1期進(jìn)入G0期，可由以下因素引起 環(huán)境中的信號分子促進(jìn)G1期細(xì)胞退出細(xì)胞周期，并開始分化 環(huán)境中啟動細(xì)胞分裂的生長因子不足 體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞在分裂一定次數(shù)后進(jìn)入衰老狀態(tài)，不能回到G1期的終末G0期。G0期的細(xì)胞仍然進(jìn)行著新陳代謝，許多具有特定功能的G0期細(xì)胞甚至不停地合成及分泌蛋白質(zhì)，如胰腺細(xì)胞、肝細(xì)胞G0期重返G1期要經(jīng)過三

13、個階段獲得資格 進(jìn)入 需要血小板源生長因子 表皮生長因子和胰島素進(jìn)展 需要胰島素樣生長因子1 最終活化周期蛋白Cdk復(fù)合物，從而使細(xì)胞從G0期進(jìn)入G1期G1期的細(xì)胞也需要生長因子促進(jìn)細(xì)胞周期的進(jìn)程生長因子 受體酪氨酸蛋白激酶及整合素 Ras-Raf-MAPKK-MAPK/ERK途徑 周期蛋白D的表達(dá) 進(jìn)入胞質(zhì)被降解(G1早，中期）生長因子 活化p21和p27 促進(jìn)周期蛋白D和cdk4/6結(jié)合 使少量RB磷酸化 E2FDP1 促進(jìn)周期蛋白E和Cdk2的表達(dá)第二節(jié) 細(xì)胞凋亡是一種自發(fā)的程序化細(xì)胞死亡 早在1972年Kerr等已發(fā)現(xiàn)從細(xì)胞形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)和生化變化等方面來分析，細(xì)胞有二種死亡形式,一種

14、是早被熟知的細(xì)胞壞死（Necrosis），另一種是新提出的程序性細(xì)胞死亡（Programmed cell death, PCD）學(xué)說。但該學(xué)說到九十年代初才進(jìn)入研究高潮，進(jìn)展極快，現(xiàn)在普遍稱之為細(xì)胞凋亡（Apoptosis） 細(xì)胞凋亡是機(jī)體細(xì)胞在正常生理或病理狀態(tài)下發(fā)生的一種自發(fā)的程序化死亡過程 是一個由基因調(diào)控的細(xì)胞主動結(jié)束生命的過程細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別細(xì)胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）PCD最初是1956年發(fā)育生物學(xué)中提出的概念，是個功能性概念，強(qiáng)調(diào)的是其分子生物學(xué)和生理功能，一般指生理性細(xì)胞死亡。描述在一個多細(xì)胞生物體中某些細(xì)

15、胞死亡是個體發(fā)育中的一個預(yù)定的，并受到嚴(yán)格程序控制的正常組成部分。形態(tài)學(xué)特征 凋亡的起始：細(xì)胞器、染色質(zhì)等開始變化 凋亡小體的形成：質(zhì)膜包裹染色質(zhì)和細(xì)胞器 凋亡小體的消化：被吞噬細(xì)胞消化生物化學(xué)特征 胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高。 細(xì)胞內(nèi)活性氧增多。 質(zhì)膜通透性變大。 DNA內(nèi)切酶活性被激活升高，雙鏈DNA在核小體之間切斷形成180200bp為基數(shù)的有序片段。 型谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶和需鈣蛋白酶（Calpain）活性升高。細(xì)胞凋亡的生理意義確保正常發(fā)育、生長 維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定 發(fā)揮積極的防御功能 細(xì)胞凋亡是正常的生理過程，但是凋亡可能會引起疾病發(fā)生。因此，近年來對于細(xì)胞凋亡的研究，已成為自然科學(xué)界的關(guān)注熱點(diǎn)

16、。凋亡途徑是由誘導(dǎo)產(chǎn)生的胱天蛋白酶級聯(lián)反應(yīng) 凋亡途徑最早在線蟲中闡明 凋亡途徑涉及四個ced 基因產(chǎn)物： Ced4 蛋白是一種蛋白酶，能活化Ced 3蛋白 Ced3 蛋白是一種蛋白酶，能使許多底物蛋白降解，從而出現(xiàn)凋亡形態(tài)學(xué)變化 Ced9 蛋白，能使Ced4蛋白失活 線蟲胚胎期Ced 9基因突變失活能使許多本應(yīng)存 活的細(xì)胞由于Ced4和Ced3的活化而凋亡，結(jié)果胚胎死亡。 Egl-1 的產(chǎn)物能抑制 Ced9，過量表達(dá)可誘導(dǎo)凋亡 胱天蛋白酶的名稱來自該酶的活性中心有催化作用的半胱氨酸殘基，能水解底物蛋白中特異部位的天冬氨酸殘基羧基側(cè)肽鍵 凋亡蛋白酶活化因子1（Apaf1）是一種構(gòu)架蛋白，能活化胱

17、天蛋白酶 Bcl2家族中有些成員是抗凋亡的，另一些成員是促凋亡哺乳動物中Caspase 家族成員有相似的結(jié)構(gòu)與活化過程有14 種 家族成員以酶前體的形式合成 前體的結(jié)構(gòu)分三部分：N端的原域，中間的p20和C端的p10域。 域與域之間有可以被胱天蛋白酶水解的位點(diǎn)在活化過程中，前體被水解成3個域，原域丟失，2個p20域和2個p10域組裝成含有兩個活性中心的四聚體成熟酶胱天蛋白酶分類 1.起始者胱天蛋白酶，如caspase 8,9和10u 位于上游，有較長的原域，u 和接頭蛋白或構(gòu)架蛋白相互作用的功能域u 通過蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用自我激活 Caspase 8前體位于途徑上游，在接頭蛋白FADD的介導(dǎo)

18、下從胞漿中被募集到細(xì)胞膜，提高內(nèi)在的酶活性而自我激活 Caspase 9前體也位于途徑上游，能與Apaf 1等蛋白質(zhì)結(jié)合而自我激活2.效應(yīng)者胱天蛋白酶，如caspase 3,6和7 有較短的原域，位于胱天蛋白酶級聯(lián)下游 前體能被起始者胱天蛋白酶切割而活化 活化的效應(yīng)者胱天蛋白酶能切割底物，使細(xì)胞凋亡哺乳動物的Bcl2家族是凋亡調(diào)節(jié)蛋白Bcl-2家族: (B cell lymphoma/leukemia-2）B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2)Bc1-2是一種原癌基因 是ced-9和Egl1在哺乳類中的同源物 和一般的癌基因不同，Bc1-2家族中有些成員是抗凋亡的，另一些是促凋亡的。 Bcl-2家族已發(fā)現(xiàn)

19、15個成員，所有Bcl-2家族成員均含有1個或多個BH結(jié)構(gòu)域。 蛋白含有4個Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域，依次命 名為BHl、BH2、BH3和BH4 作用機(jī)制：影響凋亡蛋白酶活化因子1（Apaf1）的功能 影響線粒體的結(jié)構(gòu)與功能 可分為3個亞族： Bcl-2 Bcl-xl Bcl-w、Mcl-1、A1 Bcl-2亞家族成員對細(xì)胞凋亡起抑制作用 分子含有BH1BH4區(qū)，大多數(shù)成員C端有能插入線粒體外膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的疏水肽段，分子面向胞漿Bax亞家族 Bax、Bak、Bok 它們的作用與Bcl-2亞家族的作用相反，促進(jìn)細(xì)胞凋亡 除缺少BH4區(qū)外，結(jié)構(gòu)和分布與第一類成員相識 促凋亡成員位于途徑的下游BH3亞家

20、族 Bik、Blk、Hrk、BNIP3、Biml、Bad、Bid 僅有BH3結(jié)構(gòu)域 它們的作用也與Bcl-2亞家族的作用相反，可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。 促凋亡的基因位于途徑的上游。死亡受體途徑及線粒體途徑是兩種主要的凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑外源性死亡受體途徑的關(guān)鍵步驟是死亡誘導(dǎo)信號復(fù)合物的形成 被胞外信號所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑稱外源性凋亡途徑 有八種死亡受體，屬于腫瘤壞死因子受體（TNFreceptor)家族成員 Fas、TNFR1、TNFR2、DR3、DR4、DR5、 DcR1、DcR2TNF receptor的結(jié)構(gòu)特征 I型跨膜糖蛋白 胞膜外富含半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域（cysteine-rich domain C

21、RD） 胞內(nèi)有死亡域（DD） 以三聚體形式存在，與三聚體的TNF結(jié)合死亡結(jié)構(gòu)域蛋白 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白（death domain protein DD）包括TRADD，F(xiàn)ADD，RIP等。這些蛋白質(zhì)C端都有一段同源的死亡結(jié)構(gòu)域，通過這些死亡結(jié)構(gòu)域與死亡受體的胞漿區(qū)相作同，傳遞死亡受體所引起的各種信號. TRADD：TNF receptor-associated death domain protein 34kd,與TNFR1胞漿區(qū)相關(guān)的蛋白質(zhì)，傳遞TNFR1的大部分信號 FADD：Fas-associated death domain protein 與Fas胞漿區(qū)相關(guān)的蛋白質(zhì)。N 端序列為死亡效

22、應(yīng)區(qū)域（death effector domain DED）,也是接頭結(jié)構(gòu)域，具有DED結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)之間可以相互結(jié)合起來。 RIP：receptor-interaction protein 74kd，直接與Fas 結(jié)合，還可以通過TRADD間接與TNFR1結(jié)合。RIP除了含有C端DD外，還含有N 端的蛋白激酶同源區(qū)（protein kinase homolog PKH）,具有蛋白絲/蘇氨酸激酶活性 TRAF（TNF receptor-associated factor）：一組與TNFR家族成員胞漿區(qū)關(guān)聯(lián)的接頭蛋白TRAF結(jié)構(gòu)域：分為TRAF-N和TRAF-C，TRAF-C同源性高，是TRAF蛋

23、白與TNFR超家族成員胞漿區(qū)結(jié)合的部位。鋅指結(jié)構(gòu)：經(jīng)典的鋅指結(jié)構(gòu)C2H2環(huán)指結(jié)構(gòu)：參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，截去則發(fā)揮相反作用，成為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制蛋白Fas受體途徑 配體為FasL，也是一種細(xì)胞表面的單跨膜蛋白質(zhì)，分布在細(xì)胞毒性T細(xì)胞表面 FasL在細(xì)胞表面形成三聚體 細(xì)胞毒性T細(xì)胞識別靶細(xì)胞后，T細(xì)胞表面的三聚體FasL與Fas結(jié)合，使Fas也形成三聚體 三聚體Fas的胞內(nèi)段被激活，DD通過與接頭蛋白FADD中的DD相互作用而募集FADD 構(gòu)成死亡誘導(dǎo)信號復(fù)合物（DISC） FADD中的死亡效應(yīng)域（DED），能與caspase 8 前體原域中的DED作用而募集caspase 8 前體 募集caspas

24、e 8 前體自我激活，并且活化下游的caspase 3，導(dǎo)致病毒感染細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡的膜受體通路 FASL+FAS +FADD 凋亡誘導(dǎo)復(fù)合物（DISC） 胞質(zhì)中游離的caspase8聚集到這個復(fù)合物上 細(xì)胞有足夠caspase8 細(xì)胞caspase8濃度不夠 死亡受體活化， 切割Bid tBid從胞質(zhì)到線粒體 細(xì)胞凋亡 CtyC 釋放TNFR的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) TNF-三聚體與TNFR的結(jié)合引起受體多聚化，同時受體胞漿區(qū)DD也發(fā)生多聚化，這種多聚化DD可與胞漿中TRADD分子通過DD間相互作用發(fā)生結(jié)合。 TRADD的募集可以引起兩條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路：一條是通過FADD導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，一條是通過TRAF2和

25、RIP誘導(dǎo)NF-B和AP-1的活化，參與抗凋亡 NF-B轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞存活信號，通過表達(dá)FLIP（與caspase結(jié)構(gòu)相似，無酶活力的蛋白）抑制caspase 8前體活化，細(xì)胞不凋亡 TNFR只有在蛋白合成受阻的情況下才會誘導(dǎo)凋亡。內(nèi)源性線粒體途徑的關(guān)鍵步驟是細(xì)胞色素C從線粒體膜間隙釋放到細(xì)胞漿 線粒體參與細(xì)胞凋亡或壞死的途徑 促凋亡基因活化 細(xì)胞色素C 細(xì)胞色素C+Apaf-1+ caspase9凋亡體 抗凋亡成員能與促凋亡成員相互作用而抑制促凋亡成員的功能線粒體釋放細(xì)胞色素C的模型 Bax和Bak在線粒體外膜上打孔 通過VDAC（voltage-dependent anion channel)在線粒體外膜上形成通道 使線粒體外膜上天然存在的ATPADP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白孔道保持開放狀態(tài)，使細(xì)胞色素C從線粒體膜間隙穿過外膜進(jìn)入胞漿細(xì)胞色素C的作用 進(jìn)入胞漿的細(xì)胞色素C與Apaf1、ATP/dATP結(jié)合成復(fù)合物，稱凋亡體 Apaf1通過分子中的胱天蛋白酶募集域(CARD)與caspase 9前體原域中的CARD相互作用而募集caspase 9前體，富集的caspase 9前體自我激活凋亡途徑有正、負(fù)調(diào)節(jié) 正調(diào)節(jié)有caspase 8和9 前