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1、機(jī)能實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不同濃度乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)的影響班級(jí):臨床1302學(xué)號(hào):132203118姓名:秦佳睿課題名稱:不同濃度乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)的影響設(shè)計(jì)思路中華酒文化從杜康釀酒至今已有數(shù)千年的歷史,酒文化的形式發(fā)展也從單一 的獨(dú)自品味酌酒演變成當(dāng)下形式多樣的“酒文化”。勸酒敬酒更是在“酒文化” 的特色之一。然而,當(dāng)下有很多人在“享受”酒文化樂(lè)趣的同時(shí),過(guò)度飲酒導(dǎo) 致健康損害,引發(fā)事故悲劇的現(xiàn)狀,也令人十分擔(dān)憂。乙醇進(jìn)入人體,能產(chǎn)生多方面的破壞作用。它使神經(jīng)系統(tǒng)從興奮到高度抑制, 嚴(yán)重地破壞神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能。據(jù)臨床觀察和流行病學(xué)調(diào)查表明,乙醇攝入 過(guò)多可導(dǎo)致心肌病變、

2、胃炎、潰瘍等,還可使高血壓病的發(fā)病率升高 【1】【2】。 常飲酒的人喉癌及消化道癌發(fā)病率明顯增加?!?】【4】消化道是乙醇進(jìn)入人體最先受刺激的部位,有報(bào)道,乙醇進(jìn)入胃內(nèi)可造成胃 粘膜損傷【5】。乙醇對(duì)心肌細(xì)胞鈉離子跨膜內(nèi)流有一定抑制用,對(duì)心肌細(xì)胞內(nèi)貯存的鈣離子釋放有顯著抑制作用。因認(rèn)為乙醇對(duì)心肌細(xì)胞收縮的抑制作用可 能是通過(guò)改變肌水平或肌漿對(duì)鈣離子的轉(zhuǎn)運(yùn)而實(shí)現(xiàn)的【6】,但不影響細(xì)胞外跨膜內(nèi)流。乙醇對(duì)小腸平滑肌的抑制作用可能與乙醇抑制鈉離子、鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)有 關(guān)。本實(shí)驗(yàn)以家兔離體小腸為標(biāo)本,觀察不同濃度乙醇對(duì)離體小腸平滑肌的影 響,進(jìn)一步了解乙醇與人體健康的關(guān)系。一、材料和方法(一)實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組選

3、用體重為2-3kg健康家兔15只,雌雄不拘。(二)材料1、 器械:恒溫浴槽裝置一套(麥?zhǔn)显〔?、恒溫控制儀、氧氣)、萬(wàn)能支架、 雙凹夾、燒杯、1ml注射器、手術(shù)器械。2、儀器:生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)、張力換能器。3、藥品:臺(tái)式液、烏拉坦、不同濃度乙醇(5%、10% 、15%、17.5%)?!緩S家批號(hào)】麥?zhǔn)显〔郏罕本﹦P輝盛達(dá)科技發(fā)展有限公司 ,KMYC恒溫控制儀:博宇創(chuàng)智(北京)科技發(fā)展有限公司,XD861-A萬(wàn)能支架:北京凱輝盛達(dá)科技發(fā)展有限公司 ,KWNJ-2雙凹夾:北京凱輝盛達(dá)科技發(fā)展有限公司 ,KHDJ注射器:江蘇治宇醫(yī)療器材有限公司 ,1ml手術(shù)器械:深圳市瑞沃德生命科技有限公司,RWD生

4、物信號(hào)采集處理系統(tǒng):南京美易科技有限公司,MedLab U/8c502張力換能器:北京眾實(shí)迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責(zé)任公司,ZS臺(tái)式液:南京森貝伽生物科技有限公司 ,SBJ-0213烏拉坦:上海麥恪林生化科技有限公司,U820333無(wú)水乙醇:上海高朗化工科技有限公司 丄05002(三)實(shí)驗(yàn)步驟與方法1、家兔離體小腸平滑肌標(biāo)本的制備家兔在實(shí)驗(yàn)前24h禁止進(jìn)食,自由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)采取耳緣靜脈注射烏拉坦進(jìn) 行麻醉。立即放到解剖臺(tái)上固定四肢,剪掉腹部的毛,沿腹中線切開(kāi)腹腔找到 胃幽門與十二指腸交界處,以此為起點(diǎn),先將腸系膜沿腸緣分離,再截取小腸 近端腸管20cm,置于盛有預(yù)冷臺(tái)式液的燒杯中,用注射器抽取臺(tái)氏液洗

5、凈腸內(nèi) 容物。將其剪成23cm的腸段作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。2、實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的連接取出一段23cm家兔離體腸段,一端用細(xì)線系于張力換能器的懸梁臂上,另 一端固定在掛鉤上,兩者成對(duì)角線。并將家兔離體腸段同通氣鉤放入平滑肌浴 槽中,加入臺(tái)氏液,使家兔離體腸段全部浸入臺(tái)氏生理溶液中,注意不要使腸 段貼壁,并勻速通入空氣,保持每秒12個(gè)氣泡。浴槽外的水溫保持 37C,使平滑肌浴槽的溫度也保持37Co張力傳感器與MSP-007生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)的輸 入接口 CH- 1連接。打開(kāi)MSP-007生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng),選擇1通道,選擇“張 力”信號(hào),設(shè)置控制參數(shù)。3、離體小腸平滑肌曲線的記錄先觀察正常情況下離體腸段的運(yùn)動(dòng)情況 2

6、3min ,待其運(yùn)動(dòng)穩(wěn)定后,先加入濃 度5%勺乙醇溶液,采集用藥前后 2min的波形曲線圖。然后用370C的臺(tái)氏生理 溶液沖洗腸段3次,待腸段恢復(fù)正常活動(dòng)后,再按照上述方法依次加入10% 15% 17.5%的乙醇溶液,分別采集每次用藥前后2min不同波形曲線圖。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中, 注意臺(tái)氏液恒溫和不間斷均勻通氣,在每次用藥出現(xiàn)反應(yīng)后,均用37臺(tái)氏生理溶液沖洗腸段3次,待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后,再進(jìn)行下一步處理。如若實(shí)驗(yàn)過(guò) 程中腸段失去活性,就不能繼續(xù)使用,換腸段活性比較強(qiáng)的重新開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。(四)數(shù)據(jù)結(jié)果分析數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)土 S表示,用t檢驗(yàn)法、預(yù)期結(jié)果不同濃度乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)的影響溶液收縮幅度

7、(g)收縮頻率(次/分)38 C臺(tái)式液5%乙醇溶液10%乙醇溶液15%乙醇溶液17.5%乙醇溶液預(yù)測(cè)1在鈣離子流向肌漿而引起收縮過(guò)程中,膜電位逐漸升高,當(dāng)膜電位達(dá)到一定值,鈣離子通道開(kāi)始關(guān)閉,也就是說(shuō)鈣離子通道是一種電壓門控通道, 而乙醇可以和關(guān)閉的鈣離子通道可逆性結(jié)合,從而維持后者的關(guān)閉狀態(tài)。因此:(1)收縮曲線的基線上升且?guī)缀跻恢?。?)乙醇濃度的升高被乙醇維持的關(guān)閉著的鈣離子通道增多,波形越來(lái)越緩直 至變成一直線。(3)由于是可逆性結(jié)合故而經(jīng)臺(tái)氏液洗滌后仍能恢復(fù)。預(yù)測(cè)2:乙醇可能影響鈣泵的功能,因?yàn)槭鎻堖^(guò)程是由肌漿的鈣離子下降引起, 而鈣離子的下降主要為鈣泵的功勞。乙醇和鈣泵可逆性結(jié)合來(lái)

8、抑制鈣泵的作用, 從而使曲線停止于收縮狀態(tài)。三、討論據(jù)報(bào)道,乙醇能加強(qiáng)胃壁環(huán)行肌收縮,抑制胃粘膜分泌,破壞胃粘膜屏障, 從而造成胃粘膜損傷?!?】本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng) 有抑制性作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),乙醇不僅能抑制小腸平滑肌的收縮幅度,抑制收縮 頻率,同時(shí)還能抑制平滑肌張力。并且有一定的劑量效應(yīng)關(guān)系,劑量越大,對(duì) 小腸的抑制作用就越強(qiáng)。離體腸段失去外來(lái)神經(jīng)的支配,但壁內(nèi)神經(jīng)叢仍存在,在適宜條件下,仍能 保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用。【8】已知小腸平滑肌的活動(dòng)是依賴于小腸平滑肌細(xì)胞電活動(dòng)實(shí)現(xiàn)的,而小腸平滑肌動(dòng)作電位的產(chǎn)生與鈣離子和 鈉離子有關(guān)。小腸的節(jié)律性活動(dòng)受小腸的基

9、本電節(jié)律 (即漫波)所控制。通常認(rèn) 為,慢波來(lái)源于縱行平滑肌細(xì)胞,也有人認(rèn)為,慢波是縱行肌與環(huán)行肌之間的 Cajal問(wèn)質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的。關(guān)于慢波的產(chǎn)生機(jī)制,有兩種見(jiàn)解:(1)可能與細(xì)胞膜上鈉泵活動(dòng)的周期性變化有關(guān);(2)也可能與細(xì)胞膜上鈉離子電導(dǎo)和氯離子電導(dǎo) 變化有關(guān)?!?】無(wú)論何種見(jiàn)解,慢波的產(chǎn)生可能與細(xì)胞內(nèi) Na濃度變化有關(guān)。 現(xiàn)有研究報(bào)道,乙醇對(duì)心肌細(xì)胞鈉離子跨膜內(nèi)流有一定抑制作用,對(duì)心肌細(xì)胞 內(nèi)貯存的鈣離子釋放有顯著抑制作用。因而認(rèn)為乙醇對(duì)心肌細(xì)胞收縮的抑制作 用可能是通過(guò)改變肌絲水平或肌漿對(duì)鈣離子的轉(zhuǎn)運(yùn)而實(shí)現(xiàn)的【10】,但不影響細(xì)胞外鈣跨膜內(nèi)流?!?1】根據(jù)上述資料推測(cè),乙醇對(duì)小腸平滑肌

10、的抑制作用 可能與乙醇抑制鈉離子和鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。四、結(jié)論不同濃度乙醇對(duì)兔離體腸平滑肌有影響,濃度越高,收縮越強(qiáng)。五、參考文獻(xiàn)【1】ChengCP Shinabiz . LittleWC . Acute efects ofinildlyintixieatinplevels ofalcohol Onleft ventricularin conscious aogj . JCAinlnvest 1990 . 85: 5861.【2 matsAL. The relation of alcohol and CaliO vascular systemJ . Ann Rev Nutr 1982(5) :

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