第十九章真菌

1、真 菌 真 菌 （fungus) v也稱eumycota,來源于拉丁文fungus，即蘑菇。 真菌自成一界，為真核細胞型微生物，它具 有典型的細胞核，不含葉綠素，營養(yǎng)方式為 吸收，無吞噬作用，營腐生、寄生、共生和 超寄生生活。細胞壁含幾丁質(zhì)和B-葡聚糖。 有完善的細胞器，有呼吸作用，能進行有性 生殖和（或）無性繁殖。它與原核型微生物 有許多不同點。 表19-1原核細胞型微生物與真核 細胞型微生物的比較 v人致病的真菌分為四類： v病原性真菌、條件致病性真菌、產(chǎn)毒真菌及致 癌真菌。 v真菌發(fā)病率，近年明顯上升趨勢，特別是條件 性致病真菌更為常見，這于臨床濫用抗生素、 經(jīng)常應(yīng)用激素及免疫抑制劑、抗

2、癌藥物導(dǎo)致機 體免疫功能下降有關(guān)。 真菌的形態(tài)特性 ： v真菌按形態(tài)分為單細胞和多細胞兩大類。 v單細胞真菌呈圓形或卵圓形，如酵母菌和類 酵母菌，以出芽方式繁殖，對人致病的主要 有新生隱球菌和白假絲酵母菌。 v多細胞真菌有菌絲和孢子，菌絲伸長分支， 交織成團，稱絲狀菌，又稱霉菌，對人致病 的有皮膚癬菌等。 v有些真菌因環(huán)境條件改變，可有一重形態(tài)轉(zhuǎn) 變?yōu)榱硪环N形態(tài)，此真菌稱為二相性真菌。 真菌的菌落特性： v1、酵母型菌落，是單細胞真菌的菌 落，形態(tài)與一般細菌菌落相似，但較大些， 菌落表面光滑、濕潤、柔軟、邊緣整齊，如 新生隱球菌，有部分單細胞真菌，可在培養(yǎng) 基中形成假菌絲伸入培養(yǎng)基中，此菌落稱

3、酵 母型菌落，如白假絲酵母菌。 2、霉菌菌落 v是多細胞真菌的菌落，菌落呈 棉絮狀、絨毛狀、粉末狀，并 產(chǎn)生不同的色素，如皮膚癬菌。 真菌的檢驗方法： v類同細菌檢驗，真菌的檢驗方法 包括： 1.直接鏡檢細菌形態(tài) 2.抗原檢測 3.真菌的分離培養(yǎng)與鑒定 4.真菌核酸檢測及真菌毒素檢測等 顯微鏡檢驗： v直接鏡檢對真菌的診斷較細菌更為重要。 v許多標本不需染色即可直接鏡檢. v如癬病標本多用KOH濕片檢查法，即取病變 或病損部位、皮屑、甲屑置于載玻片，加一 滴10%KOH液然后加蓋玻片微微加熱，使標 本組織溶解透明，在顯微鏡下可觀察到真菌 的孢子和菌絲。 顯微鏡檢驗： v有些真菌標本需要做染色觀

4、察，常用的染色 方法有乳酸酚棉蘭染色、瑞氏染色、革蘭染 色、美藍染色、熒光染色還有墨汁負染色。 如革蘭染色后，真菌孢子呈革蘭陽性。 v檢測病人腦脊液標本中的新生隱球菌，需要 做墨汁負染色后檢查，背景為黑色，新生隱 球菌和莢膜不著色。直接鏡檢簡便、快速。 培養(yǎng)基 v培養(yǎng)一般采用葡萄糖蛋白胨瓊脂，即沙氏瓊 脂、PH4.0-6.0一般細菌不宜生長。 v許多病原性真菌如白假絲酵母菌在血瓊脂上 生長良好，二相性真菌常使用營養(yǎng)更豐富的 腦心浸液瓊脂。 v 培養(yǎng)方法：平皿培養(yǎng)法、大試管培養(yǎng)和玻片 培養(yǎng)等。 分離培養(yǎng)： v培養(yǎng)溫度：28攝氏度，但深部真菌為37攝氏 度，對二相性真菌培養(yǎng)時，28攝氏度培養(yǎng)真 菌

5、呈菌絲相（霉菌型），37攝氏度培養(yǎng)為組 織型（酵母型）。 v 觀察菌落生長情況是鑒別真菌的主要方法之 一。 v 真菌的生化反應(yīng)：試驗方法同 細菌試驗。 分離培養(yǎng)： 病原性真菌 v深部真菌感染 深部真菌感染是指能侵襲深部組織和內(nèi)臟及全 身的真菌，主要有假絲酵母菌、隱球菌、曲菌、 毛霉、組織胞漿菌和卡氏肺孢菌等，其中以隱球 菌感染較常見。 組織胞漿菌為二相性真菌，假絲酵母菌、曲霉 菌、毛霉和卡氏肺胞菌等為條件致病菌，只有在 一定條件，才引起機體致病。 一、假絲酵母菌 v假絲酵母菌（Candida)，俗稱 念珠菌，生物學(xué)分類為半知菌 亞門，半知菌綱，隱球菌目、 假絲酵母菌為最常見的致病菌。 臨床意義

6、 v白假絲酵母菌通常存在與人的口腔、上呼吸 道和陰道粘膜上，當機體發(fā)生菌群失調(diào)或抵 抗力降低時，可引起各種念珠菌病。 v可引起陰道炎、外陰炎、龜頭炎、包皮炎。 v白假絲酵母菌可引起體質(zhì)虛弱嬰兒的鵝口瘡。 v引起腸炎、肺炎、膀胱炎、腎盂腎炎、腦膜 炎、腦膜腦炎、腦膿腫，長期用靜脈內(nèi)導(dǎo)管 引起全身假絲酵母菌病，病死率極高。 白假絲酵母菌 引起的皮炎 白假絲酵母菌引起的粘膜白斑 微生物特性： v白假絲酵母菌呈圓形 或卵圓形，直徑3- 6UM。革蘭陽性，著 色不均勻。出芽方式 繁殖，在組織內(nèi)可見 芽生孢子，假菌絲， 在玉米粉培養(yǎng)基中可 產(chǎn)生假菌絲和厚膜孢 子。 微生物檢驗 v標本直接檢查 （1）直接顯

7、微鏡檢查：取膿汁，痰和局部 炎性分泌物直接涂片，革蘭染色后鏡檢， 顯微鏡下見到革蘭陽性、圓形或卵圓形菌 體或孢子及假菌絲，可確認假菌絲酵母菌 感染。 （2）、抗原檢測 （3）、核酸檢測 分離培養(yǎng)： v將標本接種在沙氏培 養(yǎng)基上，25攝氏度或 37攝氏度培養(yǎng)1-4天 后，培養(yǎng)基表面可出 現(xiàn)奶油色類酵母型菌 落。 鑒 定 v鏡檢可見假菌絲及芽生孢子。 v此外還可以用芽管形成試驗、厚膜孢子形成 試驗、糖同化和發(fā)酵試驗進行鑒定。 藥物敏感試驗： v對二性霉素B、5-FC等藥物敏感，但對5-FC 極易產(chǎn)生耐藥性。體外藥敏實驗一般不做。 隱球菌 v隱球菌（Cryptococcus)歸入半知菌亞門、半 知菌

8、綱，隱球菌目、隱球菌屬。該菌于1894 年首先在法國發(fā)現(xiàn)，我國于1964年在南京首 先發(fā)現(xiàn)。隱球菌屬包括17個種和7個變種，其 中僅新生隱球菌及其變種有致病性，新生隱 球菌廣泛分布于自然界，也可以存在與人體 體表、口腔和腸道中。 （一）、臨床意義 v本菌屬外源性感染。經(jīng)呼吸道侵入人體，由 肺血行播散時可侵犯所有臟器組織，主要侵 犯肺、腦及腦膜，也可侵犯皮膚、關(guān)節(jié)、骨。 新生隱球菌病好發(fā)于細胞免疫功能低下者。 近二十年來，隱球菌的發(fā)病率越來越高。在 國外為AIDS病最常見的并發(fā)癥之一，是AIDS 死亡的首要原因。在國內(nèi)已將隱球菌病與病 毒性肝炎同列為乙類傳染病。是人類面臨的 一種嚴重的真菌病。新

9、生隱球菌的致病物質(zhì) 是莢膜。 原發(fā)性新型隱球菌病 新型隱球菌病昏迷的患兒 （二）微生物特性 v新生隱球菌在組織中呈圓形或卵圓形，直 徑一般在4-6UM，外有寬厚的莢膜，莢膜 較菌體大1-3倍，折光性強，一般染色法 不宜著色而難以發(fā)現(xiàn)而得名。常采用墨汁 負染色，在黑色背景下可鏡檢到透亮菌體 和莢膜。非致病性隱球菌無莢膜。新生隱 球菌有明顯的生物學(xué)多態(tài)性，在沙氏培養(yǎng) 基上形成白色至奶油色粘稠菌落。 新型隱球菌墨汁染色鏡下形態(tài) （三）、微生物檢查 1、標本直接檢查 v （1）、直接鏡檢：用病人腦脊液做墨汁負 染色檢查是診斷新生隱球菌腦膜炎最簡便、 快速方法之一。如用PAS染色后，新生隱球 菌呈紅色。 v （2）、抗原檢測：用乳膠凝集試驗、 ELISA和單克隆抗體法檢測隱球菌莢膜多糖 特異性抗原，已成為臨床上的