普通植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)一侵染性植物病害癥狀觀察植物病害的癥狀是植物患病后由于異常生理活動而發(fā)生在細(xì)胞和組織上的病理變化，最后表現(xiàn)為肉眼可見的形態(tài)變化。有些癥狀也可用嗅覺、味覺或觸摸進(jìn)行觀察。有的癥狀是單個細(xì) 胞表現(xiàn)的癥狀，在這類癥狀中，最常見的是受某種病毒侵染的植株中所見到的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含體。植物病害的癥狀可區(qū)別為兩類不同性質(zhì)的特征：病狀和病征。病狀是一定的寄主植物和病原在一定外界條件的影響下相互作用結(jié)果的外部表現(xiàn)，是以各自的生理機(jī)能或特性為基礎(chǔ)的， 而每種生物的生理機(jī)能， 都是在質(zhì)上有特異性，并且是相對穩(wěn)定的。病變，作為這種相互作用過程的結(jié)果，一般說其發(fā)展是定向的。病狀作為病變過程的表現(xiàn)，其特征也是較穩(wěn)定的和 具

2、有特異性的。這就是利用病狀診斷植物病害的基礎(chǔ)。病征是由病原微生物的群體或器官著生在病體表面所構(gòu)成的，它更直接地暴露了病原物在質(zhì)上的特點(diǎn)。如真菌子實(shí)體在寄主表面形成的霉層、黑點(diǎn)等。由植物病毒、植原體、許多病原 細(xì)菌、非侵染性植物病害等沒有病征的表現(xiàn)。病征的出現(xiàn)與否和出現(xiàn)的明顯程度，雖受環(huán)境條件的影響很大，但一經(jīng)表現(xiàn)出來卻是相當(dāng)穩(wěn)定的特征，所以根據(jù)病征能夠正確的判定病害。不同植物的任何病害都具有其獨(dú)特癥狀，通常在病害發(fā)生過程中按一定順序出現(xiàn)。病理學(xué)家正是根據(jù)這種順序出現(xiàn)的癥狀在田間診斷植物病害。病狀和病征，尤其是前者，作為診斷病害的依據(jù)也有其局限性。首先是許多植物病害常產(chǎn)生相似的病狀，因此要從各方

3、面的特點(diǎn)去綜合判斷；其次，植物常因作物品種的變化或受害器官的不同，而使病狀有一定幅度的變化； 第三，病害的發(fā)生發(fā)展是一個過程， 有初期和后期， 病狀也隨之而發(fā)展變化； 第四，環(huán)境條件對病狀和病征有一定的影響，尤其是濕度對病征的產(chǎn)生有顯著地作用，加之發(fā)病后期病部往往會長出一些腐生菌的繁殖器官。因此，癥狀的穩(wěn)定性和特異性只是相對的，要認(rèn)識癥狀的特異性和變化的規(guī)律，在觀察植物病害時，須認(rèn)真地從癥狀的發(fā)展變化中去研究和掌握癥狀的特殊性；觀察和采集植物病害標(biāo)本，仔細(xì)地區(qū)別病征的那種微小的、似同而異的特征，這樣才能正確地診斷病害。一、目的要求認(rèn)識各類病害對植物造成的危害，了解植物病害的種類及其多樣性，初步

4、掌握主要病害的癥狀表現(xiàn)及其特點(diǎn)，學(xué)會植物病害癥狀的描述，為今后病害的診斷奠定基礎(chǔ)。二、材料、試劑與儀器按照植物病害的病狀類型 （變色、壞死、斑點(diǎn)、腐爛、畸形）和病征類型（粉狀物、霉?fàn)钗铩?點(diǎn)狀物、菌核、溢膿等）準(zhǔn)備植物病害的盒裝標(biāo)本、瓶裝浸漬標(biāo)本及新鮮標(biāo)本（不同類型的 病狀和病征的標(biāo)本可根據(jù)當(dāng)?shù)氐那闆r準(zhǔn)備）。各類癥狀的掛圖、模型、多媒體課件等。實(shí)體顯微鏡、手持?jǐn)U大鏡、水果刀、載玻片等。三、實(shí)驗(yàn)操作（一）病狀的觀察1斑點(diǎn)觀察玉米大斑病、棉花角斑病、棉花黑斑病、大麥條紋病、小麥根腐葉斑病、大蔥 或大蒜紫斑病、 花生網(wǎng)斑病、番茄早疫病、十字花科霜霉病等標(biāo)本，注意不同類型病害所表 現(xiàn)病斑的形狀、 大小

5、、顏色等的異同以及病斑上有無輪紋、花紋伴生， 同時注意觀察各類病 斑上有無病征以及病征的特點(diǎn)。斑點(diǎn)類發(fā)生在葉、莖、果等部位，受病組織局部壞死，一般 有明顯的邊緣。 斑點(diǎn)中還可以伴生輪紋、 花紋等特點(diǎn)，根據(jù)病斑的顏色、形狀等特點(diǎn)而分為 褐斑、黑斑、紫斑、角斑、條斑、大斑、小斑、胡麻斑、輪紋斑、網(wǎng)斑等多種類型。2腐爛觀察甘薯黑斑病和干腐病病薯、馬鈴薯晚疫病和環(huán)腐病病薯、棉苗立枯病、柑桔潰 瘍病等病害標(biāo)本， 認(rèn)識該類病害對植物所造成的危害， 同時掌握這類病害的病狀特點(diǎn)。 腐爛 類病狀發(fā)生在植物的各個部位， 由于組織分解的程度不同，有軟腐、干腐之分。根據(jù)腐爛的 部位，有根腐、基腐、莖腐、果腐、花腐等名

6、稱，還伴隨有各種顏色變化的特點(diǎn)，如褐腐、 白腐、黑腐等。3萎蔫觀察棉花、黃瓜等植物枯萎病、棉花和茄子黃萎病、玉米和茄科植物青枯病、馬鈴 薯環(huán)腐病等標(biāo)本，注意區(qū)別枯萎、黃萎、 青枯等病狀類型，必要時可以剖開病株莖桿觀察微 管束是否褐變。 典型的萎蔫病狀是植物根、 莖的維官束組織受到破壞而發(fā)生的葉片或枝條萎 垂現(xiàn)象，皮層組織完好， 萎蔫病害常無外表的病征。植物受萎蔫菌侵染后， 不一定都能引起 萎蔫，發(fā)病初期有半邊葉片、半個枝條萎垂的現(xiàn)象，但更常見的是全株性萎蔫。提示對于萎蔫類病害病狀的觀察應(yīng)以新鮮標(biāo)本為主， 有條件時最好在田間進(jìn)行， 這類病害發(fā) 生具有一定的地域性，觀察時要注意其微管束組織的病變，

7、干標(biāo)本則失去了原有的特點(diǎn)。4變色變色主要有兩種類型。一種表現(xiàn)為黃化，是整個植株或葉片部分地或全部地均勻褪 綠、變黃，或呈現(xiàn)其它的顏色。多數(shù)伴生有整株或部分的畸形。另一種為花葉，病株葉片色 澤濃淡不均，深綠與淺綠部分相間夾雜，一般遍及全株，上部葉片較為顯著，無病征表現(xiàn)。 比較觀察煙草花葉病、 蘋果花葉病、 小麥黃矮病、 瓜類、十字花科和茄科植物的病毒病病狀、 注意每一種病害的病狀特點(diǎn)。5畸形畸形類病狀由不同組織、器官的病變，如葉片的膨腫、皺縮、小葉、蕨葉；果實(shí)的 縮果及其它畸形； 整個植株的徒長、 矮縮； 局部器官如花器和種子的退化變形和促進(jìn)性的變 態(tài)等。瘤、癭、癌、叢枝和發(fā)根也是常見的畸形病狀

8、。觀察桃縮葉病、十字花科根腫病、馬 鈴薯癌腫病、果樹根癌病、桑樹根結(jié)線蟲病、油菜白銹病、番茄蕨葉病、棗瘋病、泡桐叢枝 病、玉米黑粉病、小麥粒線蟲病、水稻惡苗病等，歸納各類標(biāo)本的病狀類型。（二）病征的觀察1粉狀物借助手持?jǐn)U大鏡或?qū)嶓w解剖鏡觀察麥類銹病、十字花科白銹病、麥類白粉病、 、玉 米黑粉病和麥類黑粉病等病害標(biāo)本，注意粉狀物的顏色、質(zhì)地和著生狀況等。2霉?fàn)钗锝柚殖謹(jǐn)U大鏡或?qū)嶓w解剖鏡觀察黃瓜霜霉病、甘薯軟腐病、瓜類軟腐病、柑桔青霉病、番茄灰霉病和番茄葉霉病等病害標(biāo)本或瓶裝標(biāo)本。注意區(qū)別霜霉、黑霉、綿霉、青 霉和灰霉等不同類型的霉?fàn)钗铩?點(diǎn)狀物取小麥白粉病、瓜類炭疽病、棉花莖枯病、芹菜斑枯病、

9、蘋果樹腐爛病和麥類赤 霉病等病害標(biāo)本， 借助手持?jǐn)U大鏡或?qū)嶓w解剖鏡觀察， 注意點(diǎn)狀物是埋生、 半埋生還是表生， 以及在寄主表面的排列狀況、顏色等。4菌核觀察油菜菌核病和水稻紋枯病等病害標(biāo)本，注意菌核的大小、 形狀、顏色、 質(zhì)地等，并觀察菌核萌發(fā)狀況。5溢膿溢濃為細(xì)菌性病害特有的病征。觀察水稻白葉枯病、水稻細(xì)菌性條斑病、十字花科 細(xì)菌性軟腐病、 棉花角斑病和黃瓜角斑病等病害標(biāo)本，注意溢膿的顏色、出現(xiàn)位置等。 用剪 刀將植物病組織剪成 4mm 2 的小塊，放于載玻片上，加一滴水，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下 觀察或直接用載玻片對光觀察噴菌現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)二鞭毛菌亞門真菌形態(tài)觀察鞭毛菌是一類低等真菌， 其中不少

10、是水生的。 它們的共同特征是無性繁殖時產(chǎn)生有鞭毛的游 動孢子。根據(jù)菌體的形態(tài)和游動孢子鞭毛的特征分為根腫菌綱、 壺菌綱、絲壺菌綱和卵菌綱。 其中與植物病害關(guān)系較為密切的有根腫菌綱、壺菌綱、卵菌綱。一、目的要求了解鞭毛菌亞門中根腫菌綱、 壺菌綱和卵菌綱真菌的主要形態(tài)特征， 掌握與植物病害有關(guān)的 重要屬的形態(tài)特征、 分類依據(jù)及所致病害的癥狀特點(diǎn)， 同時學(xué)習(xí)使用檢索表來鑒定病菌， 為 分類鑒定打下初步基礎(chǔ)。二、儀器與用品顯微鏡、幻燈機(jī)、投影儀、計算機(jī)及多媒體教學(xué)設(shè)備；載玻片、蓋玻片、浮載劑（蒸餾水或 乳酚油）、吸水紙、解剖刀、挑針、鑷子、紗布、刀片、通草、酒精燈、無菌水等。三、實(shí)驗(yàn)材料1蕓苔根腫菌

11、(Plasmodiophora brassicae )3禾谷多粘霉 ( Polymyxa graminis ) 5串囊水霉( Saprolegnia. monilifera )7. 瓜果腐霉(P ythium aphanidermatum )9. 禾生指梗霉 (Sclerospora graminicola)11. 寄生霜霉( Peronopora parasitica )2. 馬鈴薯粉痂菌 ( Spongospora subterranea )4. 玉蜀黍節(jié)壺菌 ( Physoderma maydis )6. 稻綿霉( Achlya oryzae)8. 致病疫霉( Phytophthora

12、infestans )10. 葡萄霜霉病菌( Plasmopara viticola )12. 瓜類霜霉病菌( Pseudoperonosporacubensis)13. 萵苣盤梗霉( Bremia lactucae )14.十字花科白銹病菌 ( Albugo candida )以上病害標(biāo)本或新鮮材料、 掛圖、病原菌永久玻片， 多媒體教學(xué)課件 (包括幻燈片、 錄象帶、 光盤等影像資料)以及水霉和腐霉游動孢子形成與釋放的錄相帶等。四、觀察內(nèi)容和方法(一) 根腫菌綱( Plasmodiophoromycetes )1. 蕓苔根腫菌取甘藍(lán)根腫菌切片，鏡檢切片中的病原菌。有的寄主細(xì)胞內(nèi)可見到許多堆集在

13、 一起的魚籽狀顆粒，是病菌的休眠孢子。休眠孢子近球形。2. 馬鈴薯粉痂菌鏡檢馬鈴薯粉痂病菌切片， 在寄主根的皮層組織的受害細(xì)胞中可看到病原菌 的休眠孢子，球形至多角形，多個休眠孢子聚集呈海綿狀或空心球。3. 禾谷多粘霉選取有褐點(diǎn)的根，用解剖刀或鑷子撕取小麥根基皮層，制成臨時玻片，鏡檢。 病菌的休眠孢子常有規(guī)律地呈條狀排列。提示被寄生的表皮細(xì)胞呈褐色小點(diǎn)，必須仔細(xì)觀察才能見到。(二) 壺菌綱( Chytridiomycetes )玉蜀黍節(jié)壺菌(Physoderma maydis)觀察由玉蜀黍節(jié)壺菌引起的玉米褐斑病標(biāo)本。用針挑 取受害病組織內(nèi)呈黃色粉末狀物制成臨時玻片， 或?qū)Σ〗M織作徒手切片， 鏡

14、檢可見到許多金 黃色扁球狀的休眠孢子，休眠孢子橢圓形，一面扁平有蓋。(三) 卵菌綱 (Oomycetes)水霉目 (Saprolegniales)1. 串囊水霉引起水稻爛秧，又稱水稻爛秧水霉菌。孢子囊圓筒形或棍棒狀，層出式，即新的 孢子囊從老的空孢子囊內(nèi)基部長出，游動孢子具明顯的兩游現(xiàn)象。2. 水稻爛秧綿霉菌孢子囊圓筒形或棍棒狀，合軸分枝，新的孢子囊從老孢子囊的基部外側(cè)長 出，呈聚傘形排列，游動孢子第一個活動時期很短，休止孢在孢子囊頂部孔口處聚集成團(tuán)。霜霉目( Peronosorales)1. 腐霉屬( Pythium )觀察瓜果的腐爛病病果上的白色菌絲體，將生長旺盛的小塊菌絲體移 至清水中培

15、養(yǎng)2448h，菌絲頂端即形成大量游動孢子囊，用針挑取在清水中培養(yǎng)過的菌絲，觀察腐霉菌的游動孢子囊，絲狀、姜瓣?duì)罨蚯驙畹?，頂生或間生，無特殊分化的孢囊梗。孢 子囊不脫落， 萌發(fā)時在其頂端產(chǎn)生一管狀物， 原生質(zhì)經(jīng)管狀物排出而形成泡囊。 游動孢子產(chǎn)生在泡囊內(nèi)。2. 疫霉屬( Phytophthora )取馬鈴薯或番茄晚疫病標(biāo)本制片觀察。孢囊梗 23 支成叢自氣孔 伸出，假軸狀分枝，小?；颗虼螅啻萎a(chǎn)生孢子囊，使孢子囊梗上部呈節(jié)狀；孢子囊近球 狀、卵形或梨形等，具乳突。3. 霜疫霉屬( Peronophthora )取荔枝霜疫霉病標(biāo)本挑取霉層觀察，孢囊梗直立，雙叉銳角分 枝，孢囊梗多級有限生長。孢子

16、囊檸檬形、橢圓形，乳突明顯。4. 霜霉屬( Peronospora )取十字花科植物(油菜、白菜等)的霜霉病標(biāo)本從葉背面刮取霉 層觀察，孢囊梗二叉狀銳角分枝，末端尖銳。按照寄生霜霉的觀察方法，選取禾生指梗霉、 葡萄霜霉病菌、 瓜類霜霉病菌、萵苣盤梗霉等 材料， 對照下列檢索表， 制片觀察各種霜霉病的病原菌或觀察病菌永久玻片標(biāo)本，掌握霜霉科幾個常見屬的主要形態(tài)特征。霜霉科主要屬的檢索表1孢囊梗粗壯，上部為重復(fù)23次的不規(guī)則二叉分枝 1孢囊梗較細(xì) 2孢囊梗單軸分枝，小軸與主軸成直角，分枝末端平鈍2孢囊梗呈現(xiàn)銳角二叉分枝3分枝兩側(cè)不對稱，頂端尖銳,假霜霉屬(指梗霉屬(Sclerospora )單軸霉

17、屬( Plasmopara)3Pseudoperonospora )44分枝頂端尖細(xì)霜霉屬(Peronospora)3分枝兩側(cè)對稱,Bremia)4分枝頂部膨大，呈盤狀，具 34個指狀周生小梗, 盤梗霉屬(5. 白銹菌屬(Albugo)鏡檢見采白銹病菌組織切片，或取以上病葉徒手切片制成臨時玻片鏡 檢。孢囊梗平行排列在寄主表皮下， 短棍棒形，孢子囊串生。 白銹菌危害癥狀是在寄主表面 產(chǎn)生乳白色或粉狀的皰斑， 這是病菌在寄主表皮下形成的孢子囊堆， 白色粉狀物是成熟的孢 子囊。五、所需學(xué)時4 學(xué)時 六、作業(yè)1. 鞭毛菌亞門真菌的共同特征和分類依據(jù)是什么？2. 以營養(yǎng)體、無性繁殖、有性生殖來比較鞭毛菌

18、亞門三個綱的區(qū)別。3. 觀察十字花科蔬菜根腫病菌、馬鈴薯粉痂病菌、禾谷多粘霉菌、玉米褐斑病菌、水霉菌 或綿霉菌，繪休眠孢子囊或游動孢子囊圖。4. 繪瓜果腐霉病菌、 馬鈴薯晚疫病菌或十字花科蔬菜白銹病菌孢囊梗、 孢子囊， 卵孢子圖。5. 繪瓜類霜霉病菌、萵苣霜霉病菌、葡萄霜霉病菌孢囊梗、孢子囊圖。6. 詳繪大白菜霜霉病和粟白發(fā)病的病原形態(tài)圖（包括無性繁殖和有性生殖） 。7. 卵菌綱真菌有哪些特點(diǎn)？結(jié)合它們的生物學(xué)特性、寄生性及病害特點(diǎn)說明本綱真菌進(jìn)化 的情況。實(shí)驗(yàn)三接合菌亞門真菌形態(tài)觀察接合菌亞門真菌的共同特征是有性生殖產(chǎn)生接合孢子。 大多數(shù)是腐生的， 少數(shù)可以引起農(nóng)產(chǎn) 品的腐爛。 接合菌營養(yǎng)體

19、為發(fā)達(dá)的無隔菌絲體， 無性繁殖產(chǎn)生具細(xì)胞壁的孢囊孢子， 有性生 殖產(chǎn)生接合孢子。孢子囊的形態(tài)、孢囊孢子釋放以及寄生性等是重要的分類依據(jù)。一、目的要求通過實(shí)驗(yàn)掌握接合菌的一般形態(tài)及其所致病害的癥狀類型， 了解同宗配合和異宗配合的含義 及同型配子囊、異型配子囊的差別。二、儀器與用品顯微鏡、幻燈機(jī)、投影儀、計算機(jī)及多媒體教學(xué)設(shè)備；滅菌培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、浮載 劑（蒸餾水或乳酚油） 、吸水紙、解剖刀、挑針、鑷子等。三、實(shí)驗(yàn)材料甘薯軟腐病新鮮標(biāo)本、掛圖、病原菌永久玻片，多媒體教學(xué)課件（包括幻燈片、錄象帶、光盤等影像資料）等；根霉屬的甘薯軟腐病、犁頭霉和毛霉“ +、- ”菌株的斜面培養(yǎng)物或培 養(yǎng)皿平板

20、培養(yǎng)物；三角瓶裝 PDA 培養(yǎng)基。四、觀察內(nèi)容和方法一）甘薯軟腐病癥狀觀察 受害甘薯變軟腐爛，有時散發(fā)出酒味，病薯表面長出白色、灰色至黑色毛狀物。仔細(xì)觀察， 能見到白色菌絲體中有許多小黑點(diǎn)。小黑點(diǎn)是病菌的孢子囊。用針挑取霉層制片、鏡檢，觀察孢子囊、孢囊孢子、孢囊梗及囊軸、假根的形態(tài)。（二）匐枝根霉培養(yǎng)物的鏡檢觀察用挑針仔細(xì)地從培養(yǎng)的匐枝根霉菌中挑取少許連有培養(yǎng)基的培養(yǎng)物， 制成臨時玻片， 在低倍 鏡下檢查。 或者用實(shí)體解剖鏡直接觀察培養(yǎng)皿上的菌體。 觀察菌絲的形態(tài)和具有分枝的孢囊 梗及其基部的假根， 孢囊梗之間有匍枝狀的菌絲相連， 在孢囊?；坑猩钊爰闹骷?xì)胞或基質(zhì) 中分枝狀的假根。 在每一個孢

21、囊梗的頂端產(chǎn)生一個圓球狀的孢子囊， 用高倍鏡觀察孢子囊內(nèi) 部的構(gòu)造， 在未成熟的孢子囊內(nèi)， 往往只有大量的小顆粒體， 接近成熟的或成熟的孢子囊內(nèi) 則充滿了許多褐色圓形的孢囊孢子。孢子囊壁破裂后，孢子散出，露出鑼錘形的囊軸。（三）接合孢子觀察取根霉屬和犁頭霉屬接合孢子玻片觀察， 并注意原配子囊、 配囊柄及配子囊的發(fā)育特點(diǎn)。 成 熟的接合孢子深褐色， 表面粗糙。 犁頭霉菌的接合孢子在配子囊柄的著生處有附屬絲， 注意 觀察配囊柄的形狀及大小。（四）異宗配合現(xiàn)象觀察取融化了的 PDA 培養(yǎng)基、滅菌培養(yǎng)皿置于鋪有濕紗布的桌上，在灑精燈火焰附近，按無菌操作要求，將培養(yǎng)基倒進(jìn)滅菌培養(yǎng)皿內(nèi)，每個9cm皿內(nèi)倒入

22、1015ml培養(yǎng)基，冷卻后即成平板。取具有“ +、-”性征分化并有親和性的匐枝根霉、犁頭霉或毛霉兩個菌株，分別 按下列圖示方式接種到三個培養(yǎng)皿的平板上， 在培養(yǎng)皿的底部寫上所接種的菌株編號、 接種 日期，在 25 C 溫箱中培養(yǎng)一周， 觀察異宗配合現(xiàn)象。 記錄哪個培養(yǎng)皿中形成了接合孢子。五、所需學(xué)時2 學(xué)時六. 實(shí)驗(yàn)作業(yè)和思考題1. 接合菌亞門真菌的主要特點(diǎn)是什么？與鞭毛菌亞門有何區(qū)別？2. 根據(jù)+、 -菌株平板接種培養(yǎng)結(jié)果，說明其產(chǎn)生接合孢子的原因？3. 何為同型配子囊、異型配子囊？4. 哪些接合菌與病蟲害的生物防治有關(guān)？怎樣利用它們？5. 繪匍枝根霉菌孢子囊、孢囊梗、孢囊孢子、假根、匍匐菌

23、絲和接合孢子形態(tài)圖。 實(shí)驗(yàn)四子囊菌亞門真菌形態(tài)觀察子囊菌是一類高等真菌。 菌絲體一般都很發(fā)達(dá)， 有隔膜，具分枝， 有的菌絲體可以形成菌核、 子座等機(jī)構(gòu)。 子囊菌的共同特點(diǎn)是有性生殖產(chǎn)生子囊和子囊孢子。 子囊菌所致病害的種類很 多，其中許多是重要的經(jīng)濟(jì)作物病害。 子囊菌亞門分綱的主要依據(jù)是子囊果及子實(shí)層的有無、 子囊果的類型、 子囊的特征等。 據(jù)此分 6個綱：半子囊菌綱、 不整囊菌綱、 核菌綱、 腔菌綱、 盤菌綱和蟲囊菌綱。一、目的要求通過實(shí)驗(yàn)， 了解子囊菌亞門各個綱病原菌的主要形態(tài)特征， 掌握子囊菌中與植物病害有關(guān)的 重要屬的形態(tài)特征、分類依據(jù)及所致主要病害的癥狀特點(diǎn)。二、儀器與用品顯微鏡、幻

24、燈機(jī)、投影儀、計算機(jī)及多媒體教學(xué)設(shè)備；滅菌培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、浮載 劑（蒸餾水或乳酚油） 、吸水紙、解剖刀、挑針、鑷子、紗布、刀片、通草、擦鏡紙、無菌 水等。三、實(shí)驗(yàn)材料1桃縮葉病(Taphari na deforma ns)和李袋果病(T. pruni)2散囊菌(Eurotium sp.)3. 禾白粉病菌 (Blumeria graminis) cichoracearum )5. 瓜白粉病菌 (Sphaerotheca fuliginea)6. 洋槐白粉病菌 (Microsphaera sp.)7. 葡萄白粉病菌 (Uncinula necator) fimbriata)9. 玉蜀黍赤霉

25、菌 (Gibberella zeae)11. 小麥全蝕病菌 (Gaeumannomyces graminis)13. 竹多腔菌 (Myriangium haraeanum)15. 苜蓿輪紋病菌 (Pleospora herbarum)4. 向日葵白粉病菌 (Erysiphe6. 桃白粉病菌 (Podosphaera tridactyla)7. 桑里白粉病菌 (Phyllactinia corylea)8. 甘薯黑斑病菌 (Ceratocystis10. 蘋果樹腐爛病菌 (Valsa mali)12. 黑麥麥角菌 (Claviceps purpurea)14. 蔥葉枯病菌 (Mycosphaer

26、ella sp.)16. 核盤菌( Sclerotinia sclerotiorum )17. 紫云英菌核病菌 (S. trifoliorum)以上病害標(biāo)本或新鮮材料、 掛圖、病原菌永久玻片、 多媒體教學(xué)課件 (包括幻燈片、 錄象帶、 光盤等影像資料) 。四、觀察內(nèi)容和方法(一) 半子囊菌綱 (Hemiascomycetes)外囊菌屬 (Taphrina ) 取桃縮葉病或李袋果病材料作臨時玻片，在顯微鏡下檢查。可看見子囊在寄主葉片的表皮下排列成柵欄狀，形成無包被的子囊層，子囊下有足胞，常含孢子48 個。子囊圓筒形，近球形或橢圓形。(二) 不整囊菌綱 (Plectomycetes)散囊菌屬 (E

27、urotium) 觀察示范鏡下散囊菌的閉囊殼、子囊或散在閉囊殼內(nèi)的子囊孢子。閉 囊殼壁薄，只有 23 層細(xì)胞構(gòu)成。子囊孢子單胞、近圓形。(三) 核菌綱 (Pyrenomycetes)白粉菌目 (Erysiphales)本目是專性寄生菌。 白粉菌侵染植物可引起多種植物的白粉病。 白粉菌菌絲表生， 在寄主體 表擴(kuò)展蔓延。 一般在葉部引起褪綠或黃色斑， 以后葉面出現(xiàn)白色或灰白色的粉狀物， 即白粉 菌的無性繁殖形成的分生孢子。 生長后期， 在病部形成許多黑色小顆粒。 這些小黑點(diǎn)是白粉 菌的閉囊殼。閉囊殼有附屬絲， 附屬絲呈絲狀，其形態(tài)因種而異。 閉囊殼內(nèi)子囊數(shù)目也不一 樣，一至多個。附屬絲的形狀和子囊

28、數(shù)目的多少是分屬的依據(jù)。選取小麥白粉病、向日葵白粉病、瓜白粉病、桃白粉病、洋槐白粉病、桑里白粉病、葡萄白 粉病等不同材料。 在實(shí)體解剖鏡下觀察閉囊殼及附屬絲的輪廓及形態(tài)。 挑取閉囊殼作臨時玻 片，在顯微鏡下檢查。 注意閉囊殼的形狀、 有無孔口、 閉囊殼表面附屬絲的形狀和著生部位。 然后輕輕擠壓蓋玻片，使閉囊殼破裂。觀察閉囊殼內(nèi)的子囊，數(shù)數(shù)是單子囊還是多子囊。掌握白粉菌科幾個常見屬的主對照下列檢索表， 觀察各種白粉病的病原菌永久玻片或標(biāo)本， 要形態(tài)特征及所致病害癥狀。白粉菌主要屬檢索表1. 閉囊殼內(nèi)單個子囊1. 閉囊殼內(nèi)多個子囊2. 附屬絲剛直，較粗，頂端二叉狀重復(fù)分枝，分枝末端螺旋狀卷曲叉絲單

29、囊殼屬(Podosphaera)3. 附屬絲菌絲狀 ,3. 附屬絲非菌絲狀4.附屬絲發(fā)育不良，較短布氏白粉菌屬(Blumeria )4.附屬絲較長 ,粉菌屬(Erysiphe)5.附屬絲剛直，基部膨大，頂端尖銳球針殼屬(Phyllactinia)5. 附屬絲基部不膨大6. 附屬絲粗，剛直，頂端二叉狀重復(fù)分枝，分枝末端卷曲”叉絲殼屬M(fèi)icrosphae6.附屬絲不分枝，頂端卷曲鉤絲殼屬(Uncinula)球殼菌目( Sphaeriales)1. 長喙殼屬 (Ceratocystis) 觀察甘薯黑斑病菌培養(yǎng)物， 挑取病菌灰白色物中間深褐色或黑色 毛刺狀小點(diǎn)，觀察病菌的子囊殼。子囊殼深色、球形，有長

30、頸，開口處有須狀物，稱口須。 輕壓蓋玻片將子囊殼壓破，成熟的子囊孢子頭盔狀，子囊壁早期膠化消解。2. 赤霉屬(Gibberella)取培養(yǎng)在麥粒上的玉蜀黍赤霉菌子囊殼，制成臨時玻片鏡檢，在顯 微鏡下觀察。子囊殼藍(lán)色或紫色，散生或聚生。子囊孢子多個細(xì)胞，梭形。3. 黑腐皮殼屬(Valsa)取蘋果樹腐爛病菌切片鏡檢，子囊殼埋生在子座內(nèi)，有長頸伸出子 座。子囊孢子單細(xì)胞，香蕉形。4. 頂囊殼屬(Gaeumannomyces )觀察小麥全蝕病害標(biāo)本，注意病株基部根系生長不良，莖 基部葉鞘枯腐， 葉鞘內(nèi)有黑色小顆粒狀物，即病菌的子囊殼。 取含有子囊殼葉鞘做切片，置 顯微鏡下觀察子囊殼形態(tài)，子囊殼頂端有短

31、喙；子囊孢子細(xì)線狀，多細(xì)胞。5. 麥角菌屬(Claviceps)取黑麥麥角菌切片， 置顯微鏡下觀察，頭狀子座內(nèi)壁周圍有瓶狀子 囊殼，子囊殼開口向外。子囊殼內(nèi)有子囊和子囊孢子。子囊細(xì)長，子囊孢子線形。(四) 腔菌綱 (Loculoascomycetes)1. 多腔菌屬 ( Myriangium )取竹多腔菌切片置顯微鏡下觀察， 可見到很發(fā)達(dá)的子囊座組織。子囊球形，單生，子囊孢子有縱橫隔膜 , 磚格狀。2. 球腔菌屬( Mycosphaerella )取蔥葉枯病菌切片，置顯微鏡下觀察,單腔多子囊。子囊圓柱形至棍棒形，有雙層壁。子囊初期束生，后平行排列；子囊孢子橢圓形，雙胞。3. 格孢腔菌屬 ( (

32、Pleospora) 取苜蓿輪紋病病菌切片，置顯微鏡下觀察，囊孢子長圓形或卵 圓形，磚格狀(多細(xì)胞，有縱橫分隔) 。(五 )盤菌綱 (Discomycetes)核盤菌屬( Sclerotinia )取油菜菌核病菌子囊盤切片，置顯微鏡下觀察，子囊盤具長柄；子 囊孢子橢圓形或紡錘形。 觀察油菜菌核病癥狀及菌核萌發(fā)標(biāo)本， 菌核球形至豆瓣形， 鼠糞狀， 一般生子囊盤45個。菌核上形成的子囊盤具長柄。五、所需學(xué)時半子囊菌鋼、不整囊菌綱、白粉菌目真菌形態(tài)觀察： 2 學(xué)時核菌綱其它真菌形態(tài)觀察： 2 學(xué)時腔菌綱和盤菌綱真菌形態(tài)觀察： 2 學(xué)時六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1. 子囊菌亞門各綱的主要特征是什么？2. 繪外囊菌屬

33、和散囊菌屬的形態(tài)圖。3. 白粉屬和單絲殼屬、叉絲殼屬和叉絲單囊殼屬的主要區(qū)別是什么？4. 繪白粉屬、叉絲單囊殼屬、球針殼屬、鉤絲殼屬的形態(tài)圖。5. 繪赤霉屬、多腔菌屬、核盤菌屬形態(tài)圖。6. 子囊菌有性繁殖體的病征類型和特點(diǎn)是什么？ 實(shí)驗(yàn)五擔(dān)子菌亞門真菌形態(tài)觀察擔(dān)子菌亞門真菌一般稱作擔(dān)子菌，是真菌中最高等的。其共同特征是有性生殖產(chǎn)生擔(dān)孢子。 擔(dān)子菌亞門的分綱依據(jù)是擔(dān)子果的有無， 擔(dān)子果的發(fā)育類型可分為三個綱： 冬孢菌綱、 層菌 綱、腹菌綱。與植物病害關(guān)系密切的是冬孢菌綱。 根據(jù)擔(dān)子的來源及特征， 擔(dān)孢子的數(shù)目及 位置， 冬孢菌綱分為銹菌目和黑粉菌目。 銹菌的分類主要依據(jù)冬孢子的形態(tài)， 排列和萌發(fā)

34、的 方式。 而黑粉菌的分類主要依據(jù)冬孢子的萌發(fā)方式，孢子的分隔， 排列及其大小， 形狀及是否有不孕細(xì)胞等進(jìn)行分類。一、目的要求通過實(shí)驗(yàn)了解擔(dān)子菌亞門冬孢菌綱主要病原菌的形態(tài)特征， 掌握銹菌目和黑粉菌目中與植物 病害有關(guān)的重要屬的形態(tài)特征、分類依據(jù)及所致主要病害的癥狀特點(diǎn)。二、儀器與用品顯微鏡、幻燈機(jī)、投影儀、計算機(jī)及多媒體教學(xué)設(shè)備，滅菌培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、浮載 劑（蒸餾水或乳酚油） 、吸水紙、解剖刀、挑針、鑷子、紗布、蒸餾水滴瓶、通草、刀片、 擦鏡紙、酒精燈、無菌水、PDA培養(yǎng)基等。三、實(shí)驗(yàn)材料銹菌目( Uredinales )：1. 菜豆銹菌( Uromyces. appendicula

35、tus )3.禾葉銹菌( Puccinia recondita )5.梨膠銹菌( Gymnosporangium haraeanum )7. 亞麻銹菌( Melampsora lini ) xanthoxyli )；9. 松櫟銹菌( Cronartium quercum ) zizyphi-vulgaris)黑粉菌目( Ustilaginales)：I. 小麥散黑粉菌( Ustilago tritici )3.絲軸黑粉菌 ( Sphacelotheca reiliana )5.高粱散粒黑粉菌 ( Sphacelotheca cruenta )7. 小麥網(wǎng)腥黑穗菌( Tilletia carie

36、s )9. 稻尾孢黑粉菌( Neovossia horrida )II. 小麥條黑粉菌( Urocystis tritici )2. 禾柄銹菌 (Pucc inia gram inis f. sp. tritici )4. 禾條銹菌( Puccinia striiformis )6. 薔薇多胞銹菌 ( Phragmidium rosae-multiflorae )8. 花椒鞘銹菌( Coleosporium10. 棗層銹菌( Phakopsora2. 玉蜀黍黑粉菌( U. maydis)4. 高粱堅粒黑粉菌 ( Sphacelotheca sorghi )6. 高粱團(tuán)黑粉菌 ( Sorospo

37、rium ehrenbergii )8. 小麥光腥黑穗菌( Tilletia tritici )10. 稻葉黑粉菌( Entyloma oryzae)PDA培養(yǎng)物；多媒體以上病菌引起的病害標(biāo)本或新鮮材料、掛圖、病原菌永久玻片和病菌的教學(xué)課件(包括幻燈片、錄象帶、光盤等影像資料) 。四、觀察內(nèi)容和方法(一)冬孢子萌發(fā)試驗(yàn)冬孢菌綱不同類型冬孢子萌發(fā)方法是不同的，幾種常見的冬孢子的萌發(fā)方法如下：1小麥網(wǎng)腥黑穗菌和光腥黑穗菌將冬孢子撒在保濕器皿內(nèi)的用1%硝酸鈣液潤濕的濾紙上，在1722C下培養(yǎng)，每天于日光燈下照射4h , 3d后檢查萌發(fā)情況。2 小麥條銹病菌取帶冬孢子病葉在0.51%檸檬酸中浸15mi

38、n，再放于兩層潮濕的濾紙之間，于-2 -5C下冷凍5d后，挑取冬孢子置于水滴內(nèi)， 在冰箱內(nèi)(4C)保存48h即可萌發(fā)。(二) 銹菌目( Ured i nales )1. 單胞銹菌屬(Uromyces)觀察菜豆銹病或茭白銹病標(biāo)本，挑取冬孢子制成玻片觀察。冬 孢子具柄，單細(xì)胞。2. 柄銹菌屬觀察小麥桿銹病、小麥葉銹病或小麥條銹病標(biāo)本，冬孢子堆黑色。將有冬孢子 堆的寄主葉片組織切下， 制切片于顯微鏡下觀察。 冬孢子有一隔膜，分隔處稍縊縮，柄不膠 化。4. 膠銹菌屬 ( Gymnosporangium )從用水浸泡過的膠銹菌冬孢子角上用挑針挑取冬孢子制片 觀察，冬孢子雙胞，分隔處不縊縮或稍縊縮。柄絲狀

39、，很長，含膠質(zhì)。5. 多胞銹屬( Phragmidium )挑取玫瑰銹病組織上的冬孢子，制片觀察，冬孢子多細(xì)胞，通 常下部膨大易膠化。6. 柵銹菌屬( Melampsora )取亞麻銹菌病組織制作徒手切片觀察。冬孢子無柄，集成殼狀 或墊狀，冬孢子僅側(cè)面結(jié)合成一層，埋生于寄主表皮下。7. 鞘銹菌屬 ( Coleosporium )取花椒銹病組織制作切片觀察， 冬孢子堆生于葉背或排列成環(huán) 狀，圓形黃褐色。冬孢子無柄，集成殼狀或墊狀的孢子粒，集生于寄主表皮層下。8. 柱銹菌屬( Cronartium )取馬尾松銹病標(biāo)本制片觀察，冬孢子堆生于葉背，毛狀，冬孢子 梭形。9. 層銹菌屬(Phakopsor

40、a)取棗銹病組織制作切片觀察，冬孢子堆呈黑色，冬孢子排成24 層，長橢圓形或多角形。(三) 黑粉菌目( Ustilaginales)1. 黑粉菌屬(Ustilago)孢子堆外露，很少由寄主組織長期包裹，擔(dān)子分隔，擔(dān)孢子生在擔(dān)子每一細(xì)胞的側(cè)面。挑取小麥散黑粉 (穗)病組織上的冬孢子制成玻片觀察。 冬孢子球形或近球形。另取冬孢子 萌發(fā)切片觀察。 冬孢子萌發(fā)產(chǎn)生 4 個細(xì)胞的擔(dān)子， 從擔(dān)子的不同細(xì)胞分別生出絲狀分枝， 不 產(chǎn)生擔(dān)孢子。挑取玉米瘤黑粉病組織上的冬孢子制片觀察， 冬孢子球形至卵形。 另取冬孢子萌發(fā)切片觀察。 冬孢子萌發(fā)時產(chǎn)生有隔擔(dān)子，擔(dān)子頂端或分隔處側(cè)生梭形的擔(dān)孢子。2. 軸黑粉菌屬(S

41、phacelotheca)冬孢子堆周圍有膜(不孕菌絲)，中央有寄主組織，擔(dān)子分 隔，擔(dān)孢子生在擔(dān)子每一細(xì)胞的側(cè)面。挑取高粱絲黑穗病組織上的冬孢子制片觀察。 冬孢子卵圓形或球形， 暗褐色， 有時混生有不 孕細(xì)胞，不孕細(xì)胞無色透明。取高粱堅粒黑穗病標(biāo)本觀察。 孢子堆生于子房中， 冬孢子多圓形或近圓形， 不孕細(xì)胞長圓形 至近圓形。取高粱散粒黑穗病標(biāo)本觀察。冬孢子堆有由菌絲體組成的灰白色被膜，冬孢子球形，分散。3. 團(tuán)黑粉菌屬( Sorosporium )觀察高粱長粒黑穗病標(biāo)本，病粒(即菌癭)外層包有一層淺 黃色薄膜。孢子堆結(jié)合成孢子球，孢子球的結(jié)合很松。稍加壓就分散，無不孕細(xì)胞。4. 腥黑粉菌屬(

42、Tilletia )取小麥網(wǎng)腥黑穗病或小麥光腥黑穗病標(biāo)本觀察。冬孢子單生，孢子 堆成熟時呈粉未狀， 冬孢子較小。 孢子堆生于子房內(nèi)， 外包果皮， 內(nèi)部充滿黑紫色粉狀孢子， 有腥味。5. 尾孢黑粉菌屬(Neovossia)取水稻粒黑穗病標(biāo)本挑片觀察，孢子堆寄生于子房內(nèi)，產(chǎn)生 黑粉。挑取黑粉制片，顯微鏡下可見，孢子球形，常有一部分未成熟的透明孢子。6葉黑粉菌屬(Entyloma)取水稻葉黑粉病標(biāo)本，切片觀察。孢子堆生于葉的兩面，圓形 至長條形。孢子多角形，結(jié)合緊密。取萌發(fā)的擔(dān)孢子玻片觀察，擔(dān)孢子頂生于擔(dān)子上，紡錘 形。7. 條黑粉菌屬(Urocystis)取小麥稈黑粉病標(biāo)本，制片觀察。一至多個厚垣

43、孢子集結(jié)成牢固 的孢子球，孢子球外有淡色而小的不孕細(xì)胞包圍。五、所需學(xué)時銹菌目真菌形態(tài)觀察： 2 學(xué)時黑粉菌目真菌形態(tài)觀察： 2 學(xué)時 六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1. 繪黑粉菌屬、腥黑粉菌屬和條黑粉菌屬冬孢子形態(tài)圖。2. 繪腥黑粉菌屬冬孢子萌發(fā)圖。3. 繪柄銹菌屬、單胞銹菌屬、柵銹菌屬和膠銹菌屬冬孢子形態(tài)圖。 實(shí)驗(yàn)六半知菌亞門真菌形態(tài)觀察 半知菌亞門真菌的種類很多， 其中不少是植物病害的重要病原菌。 半知菌的分類主要是根據(jù) 無性階段的形態(tài)特征，包括分生孢子的形態(tài)、載孢體的類型、產(chǎn)孢方式等。半知菌亞門分 3 個綱。芽孢綱：營養(yǎng)體為單細(xì)胞或發(fā)育程度不同的菌絲體或假菌絲，通過產(chǎn)生芽孢子繁殖； 絲孢綱：營養(yǎng)體是發(fā)達(dá)

44、的菌絲體，分生孢子不產(chǎn)生在分生孢子盤或分生孢子器內(nèi)；腔孢綱： 分生孢子產(chǎn)生在分生孢子盤或分生孢子器內(nèi)。 與植物病害關(guān)系比較密切的是絲孢綱和腔孢綱。、目的要求 通過實(shí)驗(yàn)認(rèn)識半知菌子實(shí)體的類型及重要致病菌屬的形態(tài)特征， 掌握常見植物病原半知菌屬 的鑒別特征。二、儀器與用品顯微鏡、幻燈機(jī)、投影儀、計算機(jī)及多媒體教學(xué)設(shè)備，滅菌培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、浮載 劑(蒸餾水或乳酚油) 、吸水紙、解剖刀、挑針、鑷子、紗布、刀片、通草、酒精燈、放大 鏡，恒溫箱，方木塊，剪刀等。三、實(shí)驗(yàn)材料PDA 培養(yǎng)物；多媒體半知菌引起的病害標(biāo)本或新鮮材料、掛圖、病原菌永久玻片和病菌的 教學(xué)課件(包括幻燈片、錄象帶、光盤等影像資

45、料) 。絲孢綱( Hyphomycetes )1. 立枯絲核菌( Rhizoctonia solani )3. 稻梨孢( Pyricularia oryzae )5. 玉米大斑突臍蠕孢(Exserohilum turcicum )2.齊整小核菌( Sclerotium rolfsii )4. 玉蜀黍平臍蠕孢( Bipolaris maydis )6. 大麗輪枝菌( Verticillium dahliae )7. 蕓苔鏈格孢( Alternaria brassicae )9. 梨黑星孢( Fusicladium virescens )8. 球座尾孢( Cercospora personata

46、)10. 灰葡萄孢( Botrytis cinerea )11. 粉紅聚端孢( Trichothecium roseum )12. 意大利青霉( Penicillium italicum )13.褐孢霉( Fulvia fulva )14. 尖孢鐮刀菌( Fusarium oxysporum )腔孢綱( Coelomycetes)1. 膠孢炭疽菌( Colletotrichum gloeosporioides ) 2.葡萄痂圓孢( Sphaceloma ampelinum )3. 梨殼囊孢( Cytospora carphosperma )4.芹菜生殼針孢( Septoria apiicola

47、 )5. 高粱生殼二孢( Ascochyta sorghina)6.甜菜蛇眼病菌( Phoma beta )7. 梨葉點(diǎn)霉( Phyllosticta pyrina )四、觀察內(nèi)容和方法(一)絲孢綱1. 絲核菌屬(Rhizoctonia)觀察預(yù)先培養(yǎng)的棉花立枯病菌或小麥紋枯病菌菌落。菌核褐色至黑褐色。挑取菌絲制片觀察，菌絲粗壯，菌絲分枝呈直角，分隔處?？O縮。2. 小核菌屬( Sclerotium )取花生白絹病或小麥、大豆、棉花、煙草等白絹病菌標(biāo)本或培養(yǎng) 觀察，病菌菌絲白色絹絲狀；菌核圓形至長圓形，褐色至黑色，表面暗色，中心無色，組織 致密，干時極硬，彼此無菌絲相連。3. 梨孢屬(Pyricu

48、laria)取水稻稻瘟病標(biāo)本，用挑針挑取病葉上的霉?fàn)钗镏破^察。分生孢 子梗細(xì)長，淡褐色，頂部以合軸式延伸，呈曲膝狀，分生孢子多胞，梨形。4. 平臍蠕孢屬(Bipolaris )取玉米小斑病葉，挑取病斑上的霉層觀察。分生孢子梗單生或叢 生，上部呈曲膝狀彎曲；分生孢子蠕蟲形或長橢圓形，多胞，臍點(diǎn)稍微突出，平截狀。5. 突臍蠕孢屬(Exserohilum )取玉米大斑病病葉，用挑針挑或刮取其上的黑色霉?fàn)钗镏破?置顯微鏡下觀察。 其分生孢子梗暗色， 具分隔， 一般少分枝， 上部呈曲膝狀。 分生孢子棱形， 多胞，臍點(diǎn)明顯突出于基細(xì)胞外部。提示觀察時注意與平臍蠕孢屬的區(qū)別，主要在于其臍點(diǎn)是否突出。6鐮

49、孢屬(Fusarium)取瓜類枯萎病菌培養(yǎng)觀察，氣生菌絲白色，絨毛狀，在PDA培養(yǎng)基上底部呈淡黃色或淡紫色；挑針挑取培養(yǎng)物制片觀察，小型分生孢子量大，無色，卵圓形， 單胞，偶爾雙胞；大型分生孢子無色，紡鍾形或鐮刀形，15個隔膜，基部有時有一顯著的突起，稱足胞。提示有時可觀察到厚垣孢子，頂生或間生于菌絲體上。7. 輪枝孢屬( Verticillium )取培養(yǎng)好的棉花黃萎病菌平皿，直接放于顯微鏡載物臺上觀察， 其分生孢子梗細(xì)長直立具分隔， 呈輪狀分枝。 分生孢子梗呈直角分枝， 分生孢子單胞， 生于分枝頂端。提示培養(yǎng)菌用的培養(yǎng)基不宜太厚以便透射光能穿透， 平皿放到載物臺上小心移動， 使視野覆 蓋菌

50、落邊緣，這樣才能找到理想的輪狀分枝結(jié)構(gòu)。8. 鏈格孢屬( Alternaria )取白菜黑斑病病葉，用挑針挑取病斑上的黑色霉?fàn)钗镏破@微 鏡下觀察。分生孢子長棍棒狀，具縱橫分隔，呈磚格狀，頂端有一長條形喙?fàn)罴?xì)胞。9. 尾孢屬(Cercospora)取芹菜早疫病(斑點(diǎn)病)病葉，挑取霉層制片，分生孢子梗不分枝 或少有分枝；分生孢子單生，鞭狀，具多數(shù)分隔。10. 黑星孢屬( Fusicladium )挑取梨黑星病葉上的煤煙狀霉層制片，分生孢子梗暗色，頂部稍屈曲，孢痕明顯；分生孢子淡褐色，12胞，瓜子形。提示注意分生孢子梗的孢痕，在顯微鏡透射光源照射下呈現(xiàn)亮點(diǎn)。11. 葡萄孢屬( Botrytis

51、)取黃瓜或番茄灰霉病標(biāo)本，挑取其上的灰霉?fàn)钗镏破^察。分生孢 子梗頂端分枝，末端膨大并產(chǎn)生小突起，其上著生多數(shù)分生孢子，外觀呈葡萄穗狀。12. 聚端孢屬( Trichothecium )取棉鈴紅粉病標(biāo)本，挑取霉層制片觀察，分生孢子梗直立， 少分隔或不分隔， 分生孢子無色雙胞， 洋梨形， 常以基部交錯相連的方式在孢子梗頂端聚集 成孢子鏈。13. 青霉屬( Penicillium )取柑桔青霉病標(biāo)本或病菌培養(yǎng)，挑片觀察。分生孢子梗集結(jié)成束， “掃帚狀”分枝，分枝末端為瓶狀小梗，生孢子著生在瓶狀小梗上。14褐孢霉屬(Fulvia)取番茄葉霉病標(biāo)本，挑取霉層制片顯微鏡下觀察。分生孢子梗基部細(xì)， 上部粗

52、，分生孢子串生，孢子鏈常分枝并有芽狀突起。(二)腔孢綱1. 炭疽菌屬 ( Colletotrichum )取蘋果炭疽病標(biāo)本制片觀察， 分生孢子盤埋生于寄主表皮下， 墊狀無剛毛，成熟后突破表皮，分生孢子梗平行排列成一層，分生孢子單胞。提示切片時最好用新鮮采集的標(biāo)本， 如果標(biāo)本干燥可用蒸餾水濕潤一下再進(jìn)行切片， 切出的 絲條越薄越好，若用乳酚油作浮載劑效果更好。2. 痂圓孢屬(Sphaceloma)取葡萄黑痘病標(biāo)本，切片觀察，孢子梗排列緊密，自盤狀子座 基部產(chǎn)生；分生孢子盤黑色；分生孢子梗極短，緊密排列于子座上，分生孢子無色單胞，中 部縊縮，內(nèi)含 1 2 個油球。3 殼囊孢屬(Cytospora)

53、取梨樹腐爛病病樹皮，徒手切片觀察，子座暗褐色，多腔室，似 迷宮狀，分生孢子器著生于瘤狀子座組織內(nèi)；分生孢子香蕉形。分生孢子與膠體物質(zhì)混合， 吸水膨脹后連同孢子自孔口擠出成為分生孢子角。4 殼針孢屬（Septoria）取芹菜斑枯病病葉，做徒手切片，分生孢子器球形；分生孢子無色， 針狀，多胞。提示分生孢子的橫隔須經(jīng)染色后才能觀察清楚； 切片操作的最后一步即將切片放到載物臺上 時再加水浮載樣品，這樣立即觀察可看到分生孢子自孔口向外噴射的現(xiàn)象。5. 殼二孢屬（Ascochyta）取高粱粗斑病標(biāo)本制作切片觀察，分生孢子器黑色，分生孢子器 扁球形，分生孢子圓筒形，雙胞無色。6 .莖點(diǎn)霉屬（Phoma）取甜

54、菜蛇眼病標(biāo)本，切片觀察，分生孢子器著生于寄主表皮下，呈 輪紋狀排列，分生孢子器球形，分生孢子無色單胞，卵圓形。7 .葉點(diǎn)霉屬（Phyllosticta）多寄生于葉上。取蘋果灰斑病葉，制作徒手切片觀察，分生孢 子器球形，有孔口，分生孢子極?。ㄐ∮?15卩m）,卵圓形。提示葉點(diǎn)霉屬的形態(tài)與莖點(diǎn)霉屬很難區(qū)分，應(yīng)結(jié)合發(fā)病部位一起認(rèn)識。五、所需學(xué)時絲孢綱： 4 學(xué)時腔孢綱： 4 學(xué)時六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1. 繪梨孢屬、尾孢屬和鐮孢霉屬的分生孢子梗和分生孢子形態(tài)圖。2. 繪炭疽菌屬、盤二孢屬的分生孢子盤和分生孢子形態(tài)圖。 實(shí)驗(yàn)七植物病原原核生物病害的癥狀觀察及診斷原核生物病害的癥狀表現(xiàn)復(fù)雜， 類型多樣， 同時也各

55、具特點(diǎn)。 診斷者要善于掌握病害的典型 癥狀，抓住同一寄主上各病害的區(qū)別，結(jié)合鏡檢，做出癥狀診斷。一、目的要求通過對各種病害標(biāo)本及病害照片的觀察， 熟悉植物原核生物病害的主要癥狀特點(diǎn)， 掌握常規(guī) 診斷技術(shù)。二、材料、試劑與儀器1 .植物原核生物病害標(biāo)本及消耗性病害材料1 )水稻白葉枯病( Xanthomonas oryzae pv. oryzae)2）水稻細(xì)菌性條斑?。?X. oryzae pv. oryzicola）（ 3）柑桔潰瘍?。?X.competrstris pv citri ）（ 4）甘藍(lán)黑腐病（ X. campestris pv. campestris）（5）桃細(xì)菌性穿孔?。?X.

56、 campestris pv. pruni ）（ 6）黃瓜細(xì)菌性角斑?。?Pseudomonas syringae pv. lachrymans）（7）桑疫病（ P. syringae pv. mori ）（ 8）白菜軟腐?。?Erwinia carotovora subsp. carotovora ）（ 9）番茄青枯病（ Burkholderia solanacearum ）（10 ）馬鈴薯環(huán)腐?。?Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicum ）（11 ）果樹根癌病（ Agrobacterium tumefaciens ）（12 ）蘋果發(fā)根?。?A. rhizogenes）（13 ）馬鈴薯瘡痂?。?Streptomyces scalbies）（14 ）柑桔黃龍?。?Candidatus Liberobacter asiaticum ）（15 ）棗瘋病（ Jujube witches broom disease ）（16 ）泡桐叢枝?。?Paulownia witches broom disease ）各學(xué)校可根據(jù)當(dāng)?shù)夭『Πl(fā)生的情況增減、 替換以上病害標(biāo)本。 但需注意病害的癥狀類型和各 類病原的代表性。2儀器與用品顯微鏡、 放大鏡、 載玻片、 蓋玻片、 浮載劑（蒸餾水或乳酚油） 、紗布