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1、何首烏對(duì)衰老大鼠海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)的影響1640職業(yè)與健康2008年8月第24卷第16期occupandhealthvo1.24no.16aug2008何首烏對(duì)衰老大鼠海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)的影響【實(shí)驗(yàn)?監(jiān)測(cè)與檢驗(yàn)】influenceofpolygonummultiflommonthehippocampusbdnfexpressionofsenilerats李怡秋,譚紅,李芳芳,馬俊驥uyiqiu,tanh0ng,lif肌g扣ng,majun-ji摘要目的探討何首烏對(duì)衰老大鼠海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(bdnf)表達(dá)的影響.方法給大鼠注射大劑量d一半乳糖,制衰老模型,12d時(shí)加飲何首烏
2、水煎劑.通過(guò)westernblot方法觀測(cè)大鼠海馬bdnf含量的變化.結(jié)果與對(duì)照組比較,d一半乳糖組大鼠和加何首烏組大鼠海馬probdnf含量均降低.結(jié)論何首烏對(duì)d一半乳糖引起的記憶力下降有預(yù)防作用,但是何首烏不影響bdnf的表達(dá)量.關(guān)鍵詞學(xué)習(xí)記憶;大鼠;d半乳糖;衰老;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子;何首烏中國(guó)圖書(shū)資料分類(lèi)號(hào):r285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:b文章編號(hào):10041257(2008)16164002subjectinfluenceofpolygonummuhiflorumonthehippocampusbdnfexpressionofsenileratsauthorsl/yiqiu,tanhong
3、,lifang-fang,eta1.(shoiazhuangcenterfordiseasecontrolandprevention,hebei,050011,china)abstractobjectivetoexploretheinfluenceofpolygonummuhiflorumonthehippocampusbdnfexpressionofsenilerats.methodsratswereinjectedwithdgalactose,thengivenpolygonummultiflorumliquidafter12d;westernblotmethodwasusedtoobse
4、rvethechangesofhippocampusbdnfcontentoftherats.resultsthecontentsofhippocampusbdnfamongboththedgalactosegroupandthepolygonummuhiflorumgroupwerelowerthanthatofthecontro1.conclusionpolygonummuhiflorumcanpreventthememorydecreaseinducedbydgalactose.butdoesntinfluencethebdnfexpressionleve1.keywordslearni
5、ngmemory;rat;dgalactose;senescence;bdnf;polygonummulfiflorum衰老的重要表現(xiàn)之一是學(xué)習(xí)記憶功能減退,海馬是大腦邊緣系統(tǒng)的重要組成部分,在學(xué)習(xí)記憶中起著重要作用,它的結(jié)構(gòu)和功能改變?cè)谒ダ蠒r(shí)發(fā)生較早和較為嚴(yán)重,因而與年齡有關(guān)的海馬的研究具有特殊意義.大量實(shí)驗(yàn)證明,腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brmnderivedneurotrophicfactor,bdnf)與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān),目前已證實(shí)衰老時(shí)大腦和海馬bdnf水平降低.何首烏屬著名的傳統(tǒng)抗衰老藥物之一,本實(shí)驗(yàn)的目的是以d.半乳糖致衰老大鼠為研究對(duì)象,探討何首烏是否可預(yù)防衰老引起的學(xué)習(xí)和記憶能力下
6、降,及探討何首烏對(duì)學(xué)習(xí)記憶相關(guān)分子bdnf表達(dá)的影響.1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)分組和藥品選用體重250300g雌性sd大鼠36只,隨機(jī)分為3組:對(duì)照組(c組),d一半乳糖組(d組)和何首烏組(h組),每組l2只.d和h組每天皮下注射d一半乳糖0.125kg,連續(xù)注射60d;c組每天注射等量生理鹽水;h組在注射d一半乳糖12d時(shí),每天給予何首烏水煎劑混入飲水中喂服,62kg,連續(xù)48d.d一半乳糖購(gòu)自北京拜爾迪生物公司,bdnf抗體購(gòu)自santa公司.1.2樣品的制備訓(xùn)練結(jié)束之后,立即將大鼠麻醉,取腦及分離海馬,提取總蛋白用于westemblot方法檢測(cè)bdnf含量.1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均
7、以xs表示,并用sas8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,兩兩比較用檢驗(yàn).2結(jié)果作者簡(jiǎn)介:李怡秋,女,主治醫(yī)師,主要從事疾病預(yù)防控制工作.作者單位:河北省石家莊市疾病預(yù)防控制中心,050011與c組比較,d組probdnf的含量明顯降低(p<0.05),h組與d組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05).bdnf的含量各組之問(wèn)變化不明顯.說(shuō)明d一半乳糖引起了海馬probdnf含量的下降.而何首鳥(niǎo)對(duì)這一變化無(wú)影響.結(jié)果見(jiàn)圖1.66kd45kd35kd30kd20kd44kd65kd60504o生蠱30220媾1a圖為westernblot方法測(cè)得海馬bdnf和probdnf;b圖為weste
8、rnblot方法測(cè)得海馬probdnf;與c組比較,p<o.05,n=5;c一對(duì)照組;dd一半乳糖組;hd一半乳糖組+何首烏組.圖1大鼠海馬probdnf的變化3討論我們?cè)ㄟ^(guò)本實(shí)驗(yàn)證實(shí),d一半乳糖所致衰老大鼠空問(wèn)學(xué)習(xí)記憶能力下降j.bdnf與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān),它相當(dāng)保守,在人,豬,鼠中成熟蛋白的氨基酸順序完全相同.人的bdnf基因表達(dá),首先合成bdnf前體probdnf,其含有247個(gè)氨基酸殘基,是成熟bd職業(yè)與健康2008年8月第24卷第16期occupandhealthv01.24no.16aug20081641nf的2倍多(2835)10,經(jīng)翻譯后加工,產(chǎn)生一個(gè)由119個(gè)氨基酸殘
9、基組成的分泌型成熟多肽.天然的bdnf以同源二聚體的形式存在,由腦組織合成,分布在大腦皮質(zhì),海馬等部位,與高親和力受體trkb結(jié)合,激發(fā)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而發(fā)揮其生物學(xué)作用,是一種促進(jìn)和維持神經(jīng)元生長(zhǎng),存活和發(fā)揮功能的活性蛋白因子.大量的研究證明bdnf在學(xué)習(xí)記憶中發(fā)揮重要作用,在本實(shí)驗(yàn)中,d一半乳糖導(dǎo)致大鼠海馬probdnf表達(dá)下降,沒(méi)有檢測(cè)到bdnf表達(dá)水平的變化,與以往的一些實(shí)驗(yàn)結(jié)果不相符合,這可能源于檢測(cè)方法的不同.有實(shí)驗(yàn)證實(shí),在大腦各區(qū)域中bdnf是以bdnf和probdnf共存的形式存在的,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法和免疫組化法測(cè)得的bdnf都是代表了bdnf和probdnf混合物的形式.所以之
10、前報(bào)道的bdnf蛋白水平的下降可能歸因于probdnf的顯著下降.尚不知probdnf的降低是否影響學(xué)習(xí)和記憶,由于probdnf的降低表明bdnf儲(chǔ)存量的降低,推測(cè)可能是由于在學(xué)習(xí)記憶過(guò)程中不能動(dòng)員足夠量的bdnf而影響了學(xué)習(xí)和記憶.值得注意的是何首烏并不改變bdnf的表達(dá).近年來(lái),許多研究報(bào)道了伺首烏的抗腦衰老作用,我們從以往的研究中推測(cè):何首烏改善衰老動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力是通過(guò)多種作用途徑而實(shí)現(xiàn)的.d半乳糖引起大鼠海馬probdnf的降低,這可能是其引起大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降的機(jī)制.何首烏對(duì)d半乳糖引起的學(xué)習(xí)和記憶能力下降有預(yù)防作用,其作用并不是通過(guò)影響bdnf的表達(dá)量實(shí)現(xiàn)的.4參考文獻(xiàn)1胡雅
11、兒,孫啟祥,夏宗勤.zms對(duì)老年大鼠腦內(nèi)ngf和bdnf的影響.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2003,19(2):149151.2李怡秋,譚紅,李芳芳.何首烏對(duì)衰老大鼠學(xué)習(xí)記憶能力和海馬超微結(jié)構(gòu)的影響.職業(yè)與健康,2008,24(14):13911392.3rosenthala,goeddeldv,nguyent,eta1.primarystructureandbiologi-calactivityofhumanbrain-derivedneurotrophicfactor.endocrinology,1991,129:12891294.41michalskib,fahnestockm.pro.brain
12、.derivedneurotrophicfactorisde-creasedinparietalcortexinalzheimersdisease.molebrainres,2003,111:148154.(收稿:20080125)(本文編輯:張軍)生活飲用水中錳的磷酸一高碘酸鉀分光光度檢測(cè)法determinationofmanganeseindrinkingwaterbyphosphoricacidpotassiumperiodatespectrophotometry宋楠songnqn【實(shí)驗(yàn)?監(jiān)測(cè)與檢驗(yàn)】關(guān)鍵詞生活飲用水;錳;磷酸一高碘酸鉀;分光光度檢測(cè)法中國(guó)圖書(shū)資料分類(lèi)號(hào):rl15文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)
13、碼:b文章編號(hào):10041257(2008)16164102錳是人體mn一超氧化物歧化酶,丙酮酸脫羧酶的必需金屬元素,水中錳濃度超過(guò)0.15mg/l時(shí),會(huì)在洗滌的衣服和衛(wèi)生設(shè)備上留下不易除去的斑痕,在較高濃度時(shí)使水產(chǎn)生不良味道.錳的測(cè)定方法有原子吸收法和分光光度法等.原子吸收法比較準(zhǔn)確,但儀器設(shè)備昂貴,適合于含量高水樣的直接測(cè)定.本方法為分光光度法,與其他分光光度法相比,具有操作簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確度高等特點(diǎn).較gb/t5750,62006】中過(guò)硫酸銨法可克服:氯離子因能沉淀銀離子而抑制硝酸銀的催化作用,本方法氯離子不影響測(cè)定;過(guò)硫酸銨水溶液易分解放出過(guò)氧化氫而失效的不穩(wěn)定性;水樣中加硝酸銀硫酸汞溶液煮
14、沸后轉(zhuǎn)移過(guò)程中易造成的錳損耗.較gb/t5750.62006中甲醛肟分光光度法及高碘酸銀()鉀分光光度法有檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單,使用試劑品種少,省略水及標(biāo)準(zhǔn)液煮沸轉(zhuǎn)移過(guò)程,避免造成的錳損耗.現(xiàn)報(bào)道如下.1方法原理作者簡(jiǎn)介:宋楠,女,副主任技師,主要從事衛(wèi)生檢驗(yàn)工作.作者單位:江蘇省徐州市鼓樓區(qū)疾病預(yù)防控制中心,221006在磷酸溶液中,錳離子被高碘酸鉀氧化成紫紅色高錳酸鹽,在530mn波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度值,進(jìn)行定量.2試劑磷酸溶液(2.3mol/l):取160ml磷酸(分析純)用純水稀釋至1000ml;高碘酸鉀(分析純);標(biāo)準(zhǔn)溶液:1.0mg/ml的錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))用純水稀釋成10.0mj錳標(biāo)準(zhǔn)使用液,實(shí)驗(yàn)用水
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