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文檔簡(jiǎn)介

1、 生物組織中生物組織中 還原糖還原糖、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 的鑒定的鑒定 基本原理基本原理:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān) 有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。 原理:還原糖和斐林試劑的反應(yīng)式:原理:還原糖和斐林試劑的反應(yīng)式: CU2+ OH- CU(OH)2 CU(OH)2 +還原糖還原糖 CU2O+2H2O (藍(lán)色)(藍(lán)色) (磚紅色(磚紅色 ) 一、還原糖的鑒一、還原糖的鑒 定定 斐林試劑只能鑒定可溶性還原糖,不能鑒斐林試劑只能鑒定可溶性還原糖,不能鑒 定可溶性非還原糖!定可溶性非還原糖! 一、還原糖的鑒定一、還原糖的鑒定 試管試

2、管A:2ml梨組織液;梨組織液; 試管試管B:2ml斐林試劑斐林試劑A 4 45 5滴滴斐林試劑斐林試劑B, 混合均勻;混合均勻; 斐林斐林A:0.1g/ml NaOH 斐林斐林B:0.05g/ml CuSO4 A B (現(xiàn)配現(xiàn)配) 水浴加熱水浴加熱2分鐘分鐘 搖勻搖勻 試管夾試管夾 水浴鍋水浴鍋 注意:斐林試劑(鮮制)注意:斐林試劑(鮮制) A、B液要先混合,液要先混合, 再水浴加熱再水浴加熱 二、蛋白質(zhì)的鑒定二、蛋白質(zhì)的鑒定 原理:原理:蛋白質(zhì)雙縮脲試劑蛋白質(zhì)雙縮脲試劑 紫色反應(yīng)紫色反應(yīng) 試管試管A:2ml稀釋的蛋清液稀釋的蛋清液 量筒:量筒: 2ml雙縮脲試劑雙縮脲試劑A(0.1g/ml

3、 NaOH) 膠頭滴管膠頭滴管 3 34 4滴雙縮脲試劑滴雙縮脲試劑B B (0.01g/ml CuSO4) 搖勻搖勻 A 量筒量筒 搖勻搖勻 注意:、液分別加入注意:、液分別加入 不用加熱不用加熱. 斐林斐林試劑試劑 (還原糖還原糖鑒定)鑒定) 雙縮脲雙縮脲試劑試劑 (蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)鑒定)鑒定) NaOH0.1g/ml0.1g/ml CuSO40.05g/ml0.01g/ml 使用方法使用方法 A、B液液后后 使用(鮮制)使用(鮮制) 水浴加熱水浴加熱 A、B液液 加入加入 不加熱不加熱 注意:注意: 還原糖還原糖 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 搖勻搖勻 觀察植物細(xì)胞的有絲分裂觀察植物細(xì)胞的有絲分裂 實(shí)驗(yàn)原理

4、:實(shí)驗(yàn)原理: 有絲分裂只發(fā)生于有絲分裂只發(fā)生于連續(xù)分裂連續(xù)分裂的細(xì)胞當(dāng)中,比如植物的細(xì)胞當(dāng)中,比如植物 的根尖、莖尖的分生區(qū)細(xì)胞;有絲分裂包括分裂間期的根尖、莖尖的分生區(qū)細(xì)胞;有絲分裂包括分裂間期 和分裂期(前、中、后、末期)。和分裂期(前、中、后、末期)。 根據(jù)各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)根據(jù)各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的變化染色體(或染色質(zhì))的變化 情況情況,識(shí)別該細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期。,識(shí)別該細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期。 觀察植物細(xì)胞的有絲分裂觀察植物細(xì)胞的有絲分裂 實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟: 一、洋蔥根尖的培養(yǎng)一、洋蔥根尖的培養(yǎng) 二、裝片的制作二、裝片的制作 三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察三、洋

5、蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察 二、裝片的制作二、裝片的制作 1、取材:、取材:取洋蔥根尖取洋蔥根尖23mm 2、解離:、解離:解離液,解離解離液,解離35分鐘分鐘 3、漂洗:、漂洗:放在清水中漂洗放在清水中漂洗10分鐘分鐘 4、染色:、染色:放在培養(yǎng)皿中用龍膽紫染色放在培養(yǎng)皿中用龍膽紫染色35分鐘分鐘 5、制片:、制片: 載玻片載玻片 蓋玻片蓋玻片 載玻片載玻片 根尖根尖 三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察 1、低倍鏡觀察:、低倍鏡觀察:找到找到分生區(qū)細(xì)胞分生區(qū)細(xì)胞 2、高倍鏡觀察:、高倍鏡觀察:觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞 洋蔥體細(xì)胞染色體數(shù)是洋蔥體細(xì)胞染色體數(shù)是

6、16 條條 目鏡目鏡 鏡筒鏡筒 轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換器 通光孔通光孔 載物臺(tái)載物臺(tái) 壓片夾壓片夾 鏡座鏡座 粗準(zhǔn)焦螺旋粗準(zhǔn)焦螺旋 細(xì)準(zhǔn)焦螺旋細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 鏡臂鏡臂 鏡柱鏡柱 物鏡物鏡 遮光器遮光器 反光鏡反光鏡 機(jī)械系統(tǒng)機(jī)械系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng) 普通光學(xué)顯微普通光學(xué)顯微 鏡鏡 顯微鏡的使用顯微鏡的使用 對(duì)光對(duì)光 三三 對(duì)對(duì) 對(duì)物對(duì)物 對(duì)焦對(duì)焦 先下后上先下后上 先粗后細(xì)先粗后細(xì) 先低后高先低后高 觀察植物細(xì)胞有絲分裂觀察植物細(xì)胞有絲分裂 中或后期、繪圖中或后期、繪圖 1.對(duì)光(白亮視野),對(duì)物,對(duì)光(白亮視野),對(duì)物, 對(duì)焦對(duì)焦 2.用低倍鏡觀察,找到分生區(qū)用低倍鏡觀察,找到分生區(qū) (分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn))(

7、分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn)) 3.換高倍鏡觀察,找到處于有換高倍鏡觀察,找到處于有 絲分裂中、后期的細(xì)胞。絲分裂中、后期的細(xì)胞。 4.繪簡(jiǎn)圖繪簡(jiǎn)圖 5.還原顯微鏡還原顯微鏡 分生區(qū)分生區(qū) 根冠根冠 低倍鏡下觀察低倍鏡下觀察 間期間期 前期前期 中期中期 后期后期 末期末期 分裂期分裂期 一個(gè)細(xì)胞周期一個(gè)細(xì)胞周期 洋蔥根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞的有絲分裂洋蔥根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞的有絲分裂 觀察植物細(xì)胞有絲分裂中或后期、繪圖觀察植物細(xì)胞有絲分裂中或后期、繪圖 繪圖注意事項(xiàng):繪圖注意事項(xiàng): 1.植物細(xì)胞應(yīng)畫(huà)成方形植物細(xì)胞應(yīng)畫(huà)成方形 2.注意染色體的形狀應(yīng)兩兩相似,數(shù)目為偶數(shù)注意染色體的形狀應(yīng)兩兩相似,數(shù)目為偶數(shù) 3.中期時(shí)染色體

8、的著絲點(diǎn)中期時(shí)染色體的著絲點(diǎn) 排在赤道面上排在赤道面上 4.注意中、后期的染色體形態(tài)不同注意中、后期的染色體形態(tài)不同 葉綠體中色素的提取與分離葉綠體中色素的提取與分離 1cm 6cm 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟 1 1、提取色素、提取色素 5g葉片,剪碎葉片,剪碎 少許少許CaCOCaCO3 3 SiO SiO2 2 5ml 5ml丙酮丙酮 研磨研磨過(guò)濾到試管過(guò)濾到試管 (塞上棉花塞塞上棉花塞) 2 2、制備濾紙條、制備濾紙條 長(zhǎng)長(zhǎng)6cm6cm,寬,寬1cm1cm,去兩角,去兩角鉛筆鉛筆畫(huà)線畫(huà)線 4 4、分離色素、分離色素 3 3、畫(huà)濾液線、畫(huà)濾液線 毛細(xì)吸管在鉛筆線處畫(huà)線,毛細(xì)吸管在鉛筆線處畫(huà)線,5

9、58 8次次 3ml層析液層析液 濾紙尖端輕輕插濾紙尖端輕輕插 入,斜靠燒杯內(nèi)壁入,斜靠燒杯內(nèi)壁 蓋上培養(yǎng)皿蓋蓋上培養(yǎng)皿蓋 5 5、觀察結(jié)果、觀察結(jié)果 幾分鐘后取出,晾干,觀察幾分鐘后取出,晾干,觀察 剪碎葉片前要去掉葉柄和 粗的葉脈,并且盡量將葉片 剪得細(xì)碎些。 裁取濾紙時(shí),盡量注意 雙手不要接觸紙面,以 免手上的油脂或其他臟 物污染濾紙。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 濾液細(xì)線不能接觸到層析液。 結(jié)果分析結(jié)果分析 橙黃色橙黃色 胡蘿卜素胡蘿卜素 黃黃 色色葉黃素葉黃素 藍(lán)綠色藍(lán)綠色 黃綠色黃綠色 葉綠素葉綠素a 葉綠素葉綠素b 從上到下: 比較比較過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化氫酶和FeFe3 3 的催化效率 的

10、催化效率 實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟: 1. 取兩只取兩只潔凈潔凈的試管的試管,編上號(hào)編上號(hào), 分別滴加分別滴加2ml的過(guò)氧化氫溶液的過(guò)氧化氫溶液. 2. 向向1管內(nèi)滴管內(nèi)滴2滴滴肝臟研磨液肝臟研磨液,2管管 內(nèi)滴內(nèi)滴2滴滴氯化鐵溶液氯化鐵溶液,作為對(duì)照作為對(duì)照. 3. 堵住堵住試管口試管口,輕輕輕輕振蕩這兩只試振蕩這兩只試 管管,使管內(nèi)物質(zhì)均勻混合使管內(nèi)物質(zhì)均勻混合,仔細(xì)觀察仔細(xì)觀察 記錄看記錄看哪支試管產(chǎn)生的氣泡多哪支試管產(chǎn)生的氣泡多. 4. 將將帶火星帶火星的衛(wèi)生香分別放入的衛(wèi)生香分別放入1,2 號(hào)試管內(nèi)號(hào)試管內(nèi)液面上方液面上方,觀察記錄觀察記錄哪哪 支衛(wèi)生香燃燒猛烈支衛(wèi)生香燃燒猛烈. 注意:注

11、意: 兩試管的液體應(yīng)同時(shí)滴加兩試管的液體應(yīng)同時(shí)滴加 衛(wèi)生香不能碰到泡沫和液面衛(wèi)生香不能碰到泡沫和液面 原理:還原糖和斐林試劑的反應(yīng)式:原理:還原糖和斐林試劑的反應(yīng)式: CU2+ OH- CU(OH)2 CU(OH)2 +還原糖還原糖 CU2O+2H2O (藍(lán)色)(藍(lán)色) (磚紅色(磚紅色 ) 一、還原糖的鑒一、還原糖的鑒 定定 斐林試劑只能鑒定可溶性還原糖,不能鑒斐林試劑只能鑒定可溶性還原糖,不能鑒 定可溶性非還原糖!定可溶性非還原糖! 斐林斐林試劑試劑 (還原糖還原糖鑒定)鑒定) 雙縮脲雙縮脲試劑試劑 (蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)鑒定)鑒定) NaOH0.1g/ml0.1g/ml CuSO40.05g/m

12、l0.01g/ml 使用方法使用方法 A、B液液后后 使用(鮮制)使用(鮮制) 水浴加熱水浴加熱 A、B液液 加入加入 不加熱不加熱 注意:注意: 三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察 1、低倍鏡觀察:、低倍鏡觀察:找到找到分生區(qū)細(xì)胞分生區(qū)細(xì)胞 2、高倍鏡觀察:、高倍鏡觀察:觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞 洋蔥體細(xì)胞染色體數(shù)是洋蔥體細(xì)胞染色體數(shù)是 16 條條 顯微鏡的使用顯微鏡的使用 對(duì)光對(duì)光 三三 對(duì)對(duì) 對(duì)物對(duì)物 對(duì)焦對(duì)焦 先下后上先下后上 先粗后細(xì)先粗后細(xì) 先低后高先低后高 觀察植物細(xì)胞有絲分裂觀察植物細(xì)胞有絲分裂 中或后期、繪圖中或后期、繪圖 1.對(duì)光(白亮視野),對(duì)物,對(duì)光(白亮視野),對(duì)物, 對(duì)焦對(duì)焦 2.用低倍鏡觀察,找到分生區(qū)用低倍鏡觀察,找到分生區(qū) (分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn))(分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn)) 3.換高倍鏡觀察,找到處于有換高倍鏡觀察,找

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