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文檔簡介
1、 離子交換層析的基本原理離子交換層析的基本原理 離子交換介質分類離子交換介質分類 離子交換層析的基本操作離子交換層析的基本操作 離子交換層析的應用離子交換層析的應用 離子交換層析(IEC)是以離子交換劑為固 定相,以含特定離子的溶液為流動相,利用 離子交換劑上的可交換離子與溶液中離子發(fā) 生交換作用,由于不同的溶質離子與離子交 換劑上離子化的基團的親和力和結合條件不 同,洗脫液流過時,樣品中的離子按結合力 的弱強先后洗脫,而將混合物中不同離子進 行分離的技術。 離子交換劑亦稱離子交換介質,為離子交 換層析的的固定相。 : 一:聚苯乙烯型離子交換樹脂。樹脂骨架的 多孔彈性顆粒. 二:多糖類骨架的離
2、子交換樹脂。如:離子離子 交換纖維素(交換纖維素(DEAE-纖維素、纖維素、CM-纖維素)纖維素) 離子交換葡聚糖離子交換葡聚糖 陽離子交換劑陽離子交換劑 強酸型和弱酸型強酸型和弱酸型 磺酸基(-SO3H) 磷酸基(-PO3H2) 羧酸基(-COOH) 酚羥基(-OH) 陰離子交換劑陰離子交換劑強堿型和弱堿型強堿型和弱堿型 伯胺基(-NH2) 仲胺基(-NHCH3 ) 叔胺基(-N(CH3)2) 季胺基(-N+(CH3) 3 ) 交換樹脂的選擇交換樹脂的選擇 酸性物質用陰離子交換劑分離 堿性物質用陽離子交換劑分離 樹脂預處理樹脂預處理 去除雜質與細小顆粒:保證有較好的均勻度 3.平衡平衡: 稀
3、酸或稀堿處理,使交換劑帶上需要的平衡離稀酸或稀堿處理,使交換劑帶上需要的平衡離 子。子。使使之成為帶之成為帶H+或或OH-,至所需的,至所需的pH和離子強和離子強 度。度。 4.裝柱裝柱: 使用前要排除氣泡。使用前要排除氣泡。 加樣與洗脫加樣與洗脫 (1)樣品應與起始緩沖液有相同的樣品應與起始緩沖液有相同的PH和離子強度和離子強度 (2)可通過改變?nèi)芤旱目赏ㄟ^改變?nèi)芤旱膒H或改變離子強度的方或改變離子強度的方 法將結合物洗脫法將結合物洗脫 最好的洗脫方法是最好的洗脫方法是連續(xù)梯度洗連續(xù)梯度洗脫 6.洗脫液的收集洗脫液的收集 7.離子交換劑的再生與保存離子交換劑的再生與保存 (1)再生劑常用HCl、NaCl、NaOH、乙醇 等。 (2)保存離子交換劑時要加防腐劑,如:氯 已定(洗必泰),乙基硫柳汞(0.005), 0.02疊氮鈉 產(chǎn)品的濃縮、脫鹽產(chǎn)品的濃縮、脫鹽 離子交換層析得到的樣品
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