試論單胺氧化酶的研究進(jìn)展

1、試論單胺氧化酶的研究進(jìn)展 【摘 要】近年來,關(guān)于單胺氧化酶在臨床上的應(yīng)用研究越來越受到人們的關(guān)注,本文將對其理化性質(zhì)、檢測方法及臨床應(yīng)用作一綜述。 【關(guān)鍵詞】單胺氧化酶;研究進(jìn)展 1 mao理化性質(zhì)單胺氧化酶(monoamine oxidase,mao)的分類名為單胺:氧氧化還原酶,是含fe2+、cu2+和磷脂的結(jié)合酶,主要作用-ch2nh2基團(tuán)催化各種單胺類脫胺生成相應(yīng)的醛,然后進(jìn)一步氧化成酸;或使醛轉(zhuǎn)化為醇再進(jìn)一步代謝。mao是一種上具多個(gè)結(jié)合部位的單一分子酶,故對底物的特異性不高,可使多種胺類氧化脫氨。mao廣布于體內(nèi)各組織器官,尤以肝、腎、胃和小腸含量最多,主要位于線粒體膜外表面,并與

2、膜緊密結(jié)合,以黃素腺嘌呤二核苷酸為輔酶;另一類存在于結(jié)締組織,不含fad,以磷酸吡哆醛為輔酶。 腦組織中的mao隨年齡增加、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增多其活性增強(qiáng)。mao能分解兒茶酚胺類激素,可間接反映心臟交感神經(jīng)結(jié)功能。現(xiàn)已證實(shí),不同來源的mao的相對分子質(zhì)量相差很大,小者約100,000,大者可達(dá)1,000,000以上,是由于同一亞基的聚合程度不同所致。 2 mao實(shí)驗(yàn)室檢測方法 最早檢測mao是用熒光測定法1和醛偶氮萘酚法,目前常用方法包括以下幾種。 2.1 醛苯腙比色法 該方法通過mao氧化芐胺,再與2,4二硝基苯肼作用生成的醛苯腙在堿性條件下產(chǎn)生棕紅色,于470nm比色測定,計(jì)算mao的濃度。

3、 2.2 mcdp比色法 該法是通過mao氧化芐胺產(chǎn)生過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶存在下與mcdp作用生成有色的甲烯藍(lán),于660nm處比色測定,計(jì)算mao的濃度。此法需要加入終止液后測定,不宜于大批量標(biāo)本的檢測,而且mcdp見光易分解。 2.3 連速監(jiān)測法 該方法是通過mao催化芐胺生成氨,氨在-酮戊二酸、nadph和gldh的存在下生成谷氨酸,同時(shí)nadph還原成nadp+,引起340nm處吸光度的下降,通過監(jiān)測其下降的速率即可得出樣本中mao的活性。此方法快捷、操作簡單、適合自動化分析,可減少人為誤差,具有良好的準(zhǔn)確度與精密度,適合大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。 3 mao測定的臨床應(yīng)用 3.1

4、 血清單胺氧化酶活性高低能反映肝纖維化的程度,是診斷肝硬化的重要指標(biāo)。肝硬化病人mao活性升高的陽性率在80%以上,最高值可達(dá)對照值的3.5倍(n=30)。酶活性與腹腔鏡所見肝表面的結(jié)節(jié)變化,以及與活組織鏡檢所見的纖維化程度相平行。纖維變僅限于匯管區(qū)或小葉中心者,其mao活性大致正常;纖維變侵入肝實(shí)質(zhì)內(nèi)時(shí),mao升高率為30%;匯管和匯管區(qū)之間有架橋性纖維化時(shí),則有83%升高;如在假小葉周圍有廣泛纖維化形成時(shí),則幾乎全部均升高,且升高幅度最大。國內(nèi)報(bào)道陽性率均在85%(天津公安醫(yī)院:17例,88%,高璣山等:32例,85.7%;薛德義等:71例,87.05%;黃澤倫:20例,85%;劉覽等:3

5、0例,86.7%),其升高幅度及陽性率均超過急性或慢性肝炎。同工酶分離證實(shí),慢性肝病smao-iii有增高趨勢;肝硬化代償組mao-iii占總活性的(23.9+3.0)%,其陽性率為72.2%(13/18);肝硬化失代償組mao-iii占總活性的(34.6+4.0)%,其陽性率為92.3%,故檢測mao同工酶有助于肝硬化的早期診斷。 雖然肝硬化時(shí),結(jié)締組織纖維釋放mao增多,但在纖維化甚為明顯的血吸蟲肝病,患者smao并不一定升高,故纖維化并非mao活性升高的唯一原因。現(xiàn)已知大動脈和肺組織內(nèi)mao的濃度比血清高100-150倍,血中mao可能部分來自血管內(nèi)皮細(xì)胞。肝硬化時(shí),病人體內(nèi)的水分增加,

6、末梢擴(kuò)張和高動力型循環(huán)等有可能促使血管壁內(nèi)mao釋放人血。由于胃腸組織也含有豐富的mao,因此門-體靜脈短路時(shí),腸內(nèi)mao可經(jīng)短路進(jìn)入體循環(huán)。 3.2 各型肝炎:各型肝炎急性期患者的mao活性多數(shù)不升高,但在暴發(fā)型重癥肝炎時(shí),因肝細(xì)胞壞死,線粒體釋放大量的mao,可致mao活性升高,陽性率可達(dá)73.3%,其升高幅度與病情輕重程度成正相關(guān);急性肝炎經(jīng)久不愈,病程超過3個(gè)月者,mao活性亦可升高;活動型慢性肝炎有半數(shù)左右病例mao活性升高。肝炎與肝硬化病人mao活性差別顯著,而各型肝炎之間的mao活性無顯著差異。 3.3 糖尿病可因合并脂肪肝,充血性心力衰竭可因肝郁而繼發(fā)肝纖維化,以至人mao活性

7、增高;甲狀腺功能亢進(jìn)可因纖維組織分解與合成旺盛,肢端肥大癥可因纖維過度合成等原因,從而引起mao活性不同程度的升高。有些無纖維增生的結(jié)締組織疾病的病人mao活性不升高。原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、畸胎瘤、膽汁性肝硬化、血吸蟲性肝硬化、慢性膽汁郁積型肝炎等患者的smao活性不變。 測定血小板mao活性發(fā)現(xiàn),正常對照組女性大于男性。 慢性精神分裂癥患者血小板mao活性明顯低于正常組,而急性精神分裂癥與對照組無明顯差別,但抗精神病藥物能引起mao活性升高。雙向情感性障礙患者,血小板mao活性顯著低于對照組,且男性低于女性;躁狂型患者顯著低于抑郁型患者患者,單相抑郁癥患者顯著公共開支對照組。但美國學(xué)者最近研究認(rèn)為,血小板mao活性與精神病學(xué)檢查結(jié)果沒有明顯關(guān)系。酒精中毒者男性血小板mao與女性有明顯差異。 此外,測定腫瘤組織勻漿mao和二胺氧化酶的活性,有助于區(qū)別前腸和中腸的類癌瘤腫瘤,前腸類癌腫組織中mao活性(1850+342)mol/mg.min,n=16明顯高于中腸類癌腫瘤(407