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文檔簡介

1、第二章 細胞生物學(xué)實驗技術(shù)一、名詞解釋1顯微分辨率(microscopic resolution)-在一定條件下利用顯微鏡所能看到的精細程度。2放射自顯影技術(shù)(autoradiography)-用于整個細胞時,可以確定放射性標記物在細胞內(nèi)的定位。用于凝膠或瓊脂平板時,能鑒定出放射性的條帶或菌落。3雙向凝膠電泳(two-dimensional electrophoresis)-根據(jù)分子質(zhì)量及等電點的不同將復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物分開。這種高分辨率的技術(shù)能夠分離同一混合物中的上千種蛋白質(zhì)。4倒置顯微鏡(inverted microscope)-一種主要用于觀察培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中的活細胞生長及分裂狀態(tài)的特殊

2、顯微鏡。與普通光鏡相比,其光源、聚光鏡和物鏡的位置是倒置的,即光源在上,物鏡在載物臺的下方。另外,其聚光鏡和物鏡有較長的工作距離,以方便放置有一定厚度的培養(yǎng)瓶。二、簡答題1電子顯微鏡為何不能觀察活標本?因為電鏡樣品的觀察室要求高度的真空條件。2簡述冷凍蝕刻術(shù)的原理和方法。冷凍蝕刻(freezeetching)技術(shù)是在冷凍斷裂技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的更復(fù)雜的復(fù)型技術(shù)。如果將冷凍斷裂的樣品的溫度稍微升高,讓樣品中的冰在真空中升華,而在表面上浮雕出細胞膜的超微結(jié)構(gòu)。當大量的冰升華之后,對浮雕表面進行鉑一碳復(fù)型,并在腐蝕性溶液中除去生物材料,復(fù)型經(jīng)重蒸水多次清洗后,撈在載網(wǎng)上作電鏡觀察。3比較投射電子顯

3、微鏡和掃描電子顯微鏡。答:都是用于放大與分辨微小結(jié)構(gòu),都是通過標本電子束的影響來探測標本結(jié)構(gòu)。TEM:電子束穿過標本,聚焦成像于屏幕或者顯像屏上。用于研究超薄切片標本,有極高的分辨率,可給出細微的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)。SEM:電子束在標本表面進行掃描,反射的電子聚焦成像于顯像屏上??梢苑从澄辞衅瑯吮镜牡谋砻嫣卣?。4掃描隧道顯微鏡的工作原理及其優(yōu)越性是什么?掃描隧道顯微鏡(scanning tunneling microscope,STM) 由Binnig等1981年發(fā)明,是根據(jù)量子力學(xué)原理中的隧道效應(yīng)而設(shè)計制造的。當原子尺度的針尖在不到一個納米的高度上掃描樣品時,此處電子云重疊,外加一電壓(2mV2V),

4、針尖與樣品之間產(chǎn)生隧道效應(yīng)而有電子逸出,形成隧道電流。電流強度和針尖與樣品間的距離有一指數(shù)關(guān)系,當探針沿物質(zhì)表面按給定高度掃描時,因樣品表面原子凹凸不平,使探針與物質(zhì)表面間的距離不斷發(fā)生改變,從而引起電流不斷發(fā)生改變。將電流的這種改變圖像化即可顯示出原子水平的凹凸形態(tài)。掃描隧道顯微鏡的分辨率很高,橫向為0.10.2nm,縱向可達0.001nm。它的優(yōu)點是三態(tài)(固態(tài)、液態(tài)和氣態(tài))物質(zhì)均可進行觀察,而普通電鏡只能觀察制作好的固體標本。優(yōu)越性:1)高分辨率 原子級分辨率,橫向為1埃,縱向為0.1埃。2)可直接繪出三維立體結(jié)構(gòu)圖像;3)可在常壓、空氣甚至溶液中探測樣品,且可避免高能電子束的破壞作用;4

5、)成像快;5)不需要任何透鏡,體積小。5比較差速離心和密度梯度離心。都是利用離心力對細胞勻漿懸浮物中的顆粒進行分離的技術(shù)。差速離心通常用于分離細胞器和較大的細胞碎片,分離的對象都比介質(zhì)密度大。密度梯度離心也可分離較大顆粒和細胞器,但更多用于分離小顆粒和大分子物質(zhì)。介質(zhì)形成一個密度梯度,所分離的物質(zhì)密度小于介質(zhì)底物的密度。6在進行細胞組分的分離時,實驗方案設(shè)計的一般原則是什么?根據(jù)所分離的物質(zhì)具有一定的體積和密度,通過離心力場的作用加以分離,根據(jù)這兩個因素可設(shè)計速度離心、等密度離心(蔗糖 CsCl)。7用細菌質(zhì)粒和噬菌體基因組克隆真核生物的DNA有什么不同?都是儲存和擴增真核生物DNA片段的技術(shù)

6、,當克隆DNA數(shù)目為幾十到幾百個堿基時細菌質(zhì)粒是合適的載體。對于較長的DNA分子,病毒載體更合適。在長滿菌苔的平板上可聚集成百上千的噬菌斑,每個都可以用于篩選目的基因。第三章 細胞的結(jié)構(gòu)與起源一、名詞解釋1模板組裝(template assembly)-指由模板指導(dǎo),在一系列酶的作用下,合成新的、與模板完全相同的分子。這是細胞內(nèi)一種極其重要的組裝方式,DNA和RNA的分子組裝就屬于此類。2酶效應(yīng)組裝(enzumatic assembly)-相同的單體分子在不同的酶系作用下,生成不同的產(chǎn)物。3自體組裝(self assembly)-生物大分子借助本身的力量自行裝配成高級結(jié)構(gòu),現(xiàn)代的概念應(yīng)理解為不

7、需要模板和酶系的催化,以別于模板組裝和酶效應(yīng)組裝。4細胞社會學(xué)(cell sociology)-細胞社會學(xué)是從系統(tǒng)論的觀點出發(fā),研究細胞整體個細胞群體中細胞間的社會行為(包括細胞間識別、通訊、集合和相互作用等),以及整體和細胞群對細胞的生長、分化和死亡等活動的調(diào)節(jié)控制。二、簡答題1舉例說明內(nèi)膜系統(tǒng)的形成對真核生物細胞是有利的。如吞入一些物質(zhì)象食物顆粒,把它們隔離起來而獨自享用。而原核細菌無法捕食大塊食物,而是通過輸入物質(zhì)在環(huán)境中分解食物,一起分享。2真核生物和原核生物細胞的共同點有哪些?重點是四點:1)有DNA;2)有核糖體;3)分裂法增殖;4)都有質(zhì)膜。3真核生物和原核生物細胞的區(qū)別有哪些?

8、區(qū)別原核細胞真核細胞大小110m10100m細胞核無核膜有雙層的核膜染色體形狀環(huán)狀DNA分子線性DNA分子數(shù)目一個基因連鎖群2個以上基因連鎖群組成DNA裸露或結(jié)合少量蛋白質(zhì)DNA同組蛋白和非組蛋白結(jié)合DNA序列無或很少有重復(fù)序列有重復(fù)序列基因表達RNA和蛋白質(zhì)在同一區(qū)間合成RNA在核中合成和加工;蛋白質(zhì)在細胞質(zhì)中合成細胞分裂二分或出芽有絲分裂和減數(shù)分裂,少數(shù)出芽生殖。內(nèi)膜無獨立的內(nèi)膜有,分化成各種細胞器鞭毛構(gòu)成鞭毛蛋白微管蛋白光合與呼吸酶分布質(zhì)膜線粒體和葉綠體核糖體70S(50S+30S)80S(60S+40S)營養(yǎng)方式吸收,有的行光合作用吸收,光合作用,內(nèi)吞細胞壁肽聚糖、蛋白質(zhì)、脂多糖、脂蛋

9、白纖維素(植物細胞)真核細胞與原核細胞最根本的區(qū)別可以歸納為兩條:第一是細胞膜系統(tǒng)的分化與演變。真核細胞以膜系統(tǒng)的分化為基礎(chǔ),首先分化為兩個獨立的部分核與質(zhì),細胞質(zhì)內(nèi)又以膜系統(tǒng)為基礎(chǔ)分隔為結(jié)構(gòu)更精細,功能更專一的單位各種重要的細胞器。細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)與職能的分工是真核細胞區(qū)別于原核細胞的重要標志。第二是遺傳信息量與遺傳裝置的擴增與復(fù)雜化。這與第一點相互密切聯(lián)系,由于真核細胞結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)雜化,遺傳信息量相應(yīng)隨之擴增,即編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)與功能蛋白質(zhì)的基因數(shù)首先大大增多。遺傳信息重復(fù)序列與染色體多信性的出現(xiàn)是真核細胞區(qū)別于原核細胞的另一重大標志。遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯的裝置和程序也相應(yīng)復(fù)雜化,真核細

10、胞內(nèi)遺傳信息的轉(zhuǎn)錄與翻譯有嚴格的階段性與區(qū)域性,而在原核細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯可同時進行,這也是兩者區(qū)別的重要特征。4為什么說以多細胞的形式生存比較優(yōu)越?真核細胞以失去血細胞快速生長為代價而變得精巧復(fù)雜,但可以通過分化進行功能特化。多細胞生物能利用單細胞生物所不能利用的食物來源,如吸收土壤養(yǎng)分、光合。但單細胞生物也有優(yōu)點,如快速適應(yīng)環(huán)境。第四章 細胞質(zhì)膜及其表面結(jié)構(gòu)一、名詞解釋1載體蛋白(carrier protein)-細胞膜的脂質(zhì)雙分子中分布著一類鑲嵌蛋白,其肽鏈穿越脂雙層,屬于跨膜蛋白。載體蛋白轉(zhuǎn)運物質(zhì)進出細胞是依賴該蛋白與待轉(zhuǎn)運物質(zhì)結(jié)合后引發(fā)空間構(gòu)象改變而實現(xiàn)的。2通道蛋白(channel

11、protein)-細胞膜上的脂質(zhì)雙分子層中存在著一類能形成孔道,供某些分子進出細胞的特殊蛋白質(zhì)(跨膜蛋白)。3簡單擴散(simple diffusion)-又稱自由擴散,屬被動轉(zhuǎn)運的一種。指脂溶性物質(zhì)或分子質(zhì)量小且不帶電荷的物質(zhì)在膜內(nèi)外存在濃度差的條件下沿著濃度梯度通過細胞質(zhì)膜的現(xiàn)象。分子或離子的這種自由擴散方式的跨膜轉(zhuǎn)運,不需要細胞提供能量,也不需膜蛋白的協(xié)助。4易化擴散(facilitated diffusion)-也稱協(xié)助擴散,屬被動轉(zhuǎn)運的一種。指小分子物質(zhì)在細胞質(zhì)膜的兩邊存在濃度差以及膜中存在特定蛋白質(zhì)的條件下沿著濃度梯度所進行的跨膜轉(zhuǎn)運。該過程不需消耗細胞的代謝能,但必須有載體蛋白的

12、協(xié)助。以這種方式通過膜的物質(zhì)主要是非脂溶性的或帶有電荷的小分子。易化擴散是通過載體蛋白的變構(gòu)而完成的。5通道擴散(channel diffusion)-是細胞質(zhì)膜對小分子物質(zhì)被動轉(zhuǎn)運的一種類型。是由膜上的通道蛋白完成的協(xié)助擴散。6側(cè)向擴散(lateral diffusion)-又稱側(cè)向遷移。在同一單層內(nèi)的脂分子經(jīng)?;ハ鄵Q位,其速度相當快,這種運動始終保持脂分子在質(zhì)膜中的排布方向,親水的基團朝向膜表面,疏水的尾指向膜的內(nèi)部。7翻轉(zhuǎn)擴散(transverse diffusion)-又稱翻轉(zhuǎn)(fliop-flop)。它是指脂分子從脂雙層的一個小葉翻轉(zhuǎn)到另一個小葉的運動。8離子通道(ion chann

13、el)-一種跨膜的孔洞結(jié)構(gòu),為在電化學(xué)梯度作用下穿越脂雙層膜的離子提供了親水性的通道。9協(xié)同運輸(cotransport)-又稱耦聯(lián)主動運輸,它不直接消耗ATP,但要間接利用自由能,并且也是逆濃度梯度的運輸。運輸時需要先建立電化學(xué)梯度,在動物細胞主要是靠Na+泵,在植物細胞則是由H+泵建立的H+質(zhì)子梯度。二、簡答題1脂雙分子層的結(jié)構(gòu)由其脂質(zhì)分子的特殊性質(zhì)所決定,假如出現(xiàn)下列情況之一,將會怎樣?1)假定磷脂只有一條烴鏈而非兩條;是一種去垢劑。脂質(zhì)頭的直徑比烴尾的直徑大得多,因而該分子的形狀是圓錐形而不是圓柱形,分子聚集在一起是微團,而不是雙層。2)假定烴鏈比正常的短,例如只有約10個碳原子長;形

14、成了脂雙層更具流動性,脂雙層更不穩(wěn)定,因較短的烴尾疏水性弱,所以形成雙層的力量減弱。3)假定所有的烴鏈都是飽和的;則形成的雙層具有很弱的流動性。4)假定所有的烴鏈都是不飽和的;更具流動性。5)假定雙層含有混合的兩種脂質(zhì)分子,一種具有兩條飽和的烴尾,另一種具有兩條不飽和的烴尾;飽和分子趨向于互相聚集,流動性大大降低的小區(qū)域,則脂雙層表面沒有均一性。2為什么大多數(shù)跨膜蛋白的多肽鏈以-螺旋或-折疊橫跨脂雙層?在-螺旋和-折疊內(nèi),多肽主鏈的極性肽鍵卻能被疏水Aa側(cè)鏈擋住而完全避開脂雙層的疏水環(huán)境,肽鏈內(nèi)部的氫鍵穩(wěn)定。3為什么用細胞松弛素處理細胞可增加膜的流動性?一些膜內(nèi)側(cè)蛋白質(zhì)與細胞骨架成分肌動蛋白絲

15、相連,形成一個整體,松弛素可破壞肌動蛋白絲即破壞細胞骨架,從而增加膜的流動性。4動脈硬化的細胞學(xué)基礎(chǔ)是什么?由于膜脂的組成成分發(fā)生變化,使膜的流動性降低。如膽固醇比值,卵磷脂/鞘磷脂。5構(gòu)成細胞質(zhì)膜的膜蛋白有哪些生物學(xué)功能?1)保護:為細胞的生命活動提供相對穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境;2)運輸:選擇性的物質(zhì)運輸,包括代謝底物的輸入與代謝產(chǎn)物的排出;(作為運輸?shù)鞍?,轉(zhuǎn)運特定物質(zhì)進出細胞)3)通信:提供細胞識別位點,并完成細胞內(nèi)外信息的跨膜傳遞;(作為受體,起信號接收和傳遞作用)4)提供酶結(jié)合位點:為多種酶提供結(jié)合位點,使酶促反應(yīng)高效而有序地進行;(作為酶,催化相關(guān)的代謝反應(yīng))5)介導(dǎo)細胞連接:導(dǎo)細胞與細胞、細

16、胞與基質(zhì)之間的連接;(作為連接蛋白,起連接作用)6)形成細胞表面的特化結(jié)構(gòu)。參與形成具有不同功能的細胞表面特化結(jié)構(gòu)。6哺乳動物的紅細胞之所以成為研究衰老的重要模型,主要原因是什么?首先是紅細胞數(shù)量大,取材容易(體內(nèi)的血庫),極少有其它類型的細胞污染; 其次成熟的哺乳動物的紅細胞中沒有細胞核和線粒體等膜相細胞器,細胞膜是它的惟一膜結(jié)構(gòu), 所以分離后不存在其它膜污染的問題。7為什么帶3蛋白又叫陰離子傳遞蛋白?具有陽離子轉(zhuǎn)運功能。8將以下化合物按膜通透性遞增次序排列:核糖核酸、鈣離子、葡萄糖、乙醇、氮分子、水。N2(小而非極性)乙醇(小而略有極性)H2O(小而極性)G(大而極性)Ca2+(小而電荷)

17、RNA(很大且?guī)щ姾?9簡述水通道蛋白AQP1的結(jié)構(gòu)組成。AQP是由四個相同的亞基構(gòu)成,每個亞基的分子質(zhì)量為28KDa,每個亞基有6個跨膜結(jié)構(gòu)域,在跨膜結(jié)構(gòu)域2與3、5與6之間各有一個環(huán)狀結(jié)構(gòu),是水分子通過的通道。10動物細胞與植物細胞主動運輸?shù)谋容^。動物只有Na+/K+-ATPase,通過這兩種離子的轉(zhuǎn)運建立電化學(xué)梯度。植物質(zhì)膜中具有H-ATPase,并通過對質(zhì)子運輸建立電化學(xué)梯度。11Na+/葡萄糖協(xié)同運輸?shù)闹饕攸c是什么?無需直接消耗ATP,但需要依賴電化學(xué)梯度,載體蛋白有兩種結(jié)合位點,分別結(jié)合Na+和G,載體蛋白借助Na+/K+泵建立的電化學(xué)梯度將Na+和G同時轉(zhuǎn)運到胞內(nèi),胞內(nèi)釋放的N

18、a+又被Na+/K+泵泵出細胞外,建立Na+梯度。第五章 物質(zhì)的跨膜運輸與細胞通信一、名詞解釋1整聯(lián)蛋白(integrin)-又稱整合素,是細胞質(zhì)膜中能夠結(jié)合RGD序列的受體之一,是由兩種不同的亞基組成的異源二聚體。2細胞黏著(cell adhesion)-在細胞識別的基礎(chǔ)上,同類細胞發(fā)生聚集形成細胞團或組織的過程叫細胞黏著。3細胞黏著分子(cell adhesion molecule)-參與細胞黏著的分子稱為細胞黏著分子。4胞間連絲(plasmodesma)-植物細胞壁內(nèi)的一種狹窄的管道,通過該管道,使一種細胞的原生質(zhì)與鄰近細胞的原生質(zhì)保持聯(lián)系。任何通過細胞壁延伸的和鄰近細胞的纖維狀胞漿連接

19、物都稱之為胞間連絲。胞間連絲可進行細胞間的通信,以及小分子溶質(zhì)在相鄰植物細胞間的交換。5細胞連接(cell junction)-機體各種組織的細胞彼此按一定的方式相互接觸并形成了將相鄰細胞連接起來的特殊細胞結(jié)構(gòu),這些起連接作用的結(jié)構(gòu)或裝置就稱為細胞連接。6緊密連接(tight junction)-是相鄰細胞間的局部緊密結(jié)合,在連接處,兩細胞膜發(fā)生點狀融合,形成與外界隔離的封閉帶,由相鄰細胞的跨膜連接糖蛋白組成對合的封閉鏈。7通訊連接(communication junction)-以細胞之間建立的連接通道為基礎(chǔ)的細胞連接方式,這種通道既使細胞之間彼此結(jié)合,又介導(dǎo)細胞之間的通訊聯(lián)系,即依靠某些親

20、水分子或離子在通道間的流動溝通信息。8細胞外被(cell coat)-也稱為細胞被,是由細胞質(zhì)膜中糖蛋白、蛋白聚糖、糖脂的寡聚糖鏈向外伸展,交織而成的一種絨毛狀結(jié)構(gòu)。9受體酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase)-使酪氨酸磷酸化的膜受體類。10表面受體(surface receptor)-位于細胞質(zhì)膜上的受體稱為表面受體。11細胞內(nèi)受體(intracellular receptor)-位于胞質(zhì)溶膠、核基質(zhì)中的受體稱為細胞內(nèi)受體。12表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)-表皮生長因子是一種小肽,由53個氨基酸殘基組成,與應(yīng)答細胞表面的特異受

21、體結(jié)合,一旦結(jié)合,變促進受體二聚化并使細胞質(zhì)位點磷酸化。13GTP結(jié)合蛋白(GTP-binding protein,G-protein)- 包含兩大類G蛋白,一類是與7次跨膜結(jié)構(gòu)域超家族受體結(jié)合的異三聚體G蛋白,參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo);另一類是小的胞質(zhì)G蛋白。二、簡答題1比較黏著斑和帶連接的結(jié)構(gòu)組成和功能。粘著斑連接位于上皮細胞緊密連接的下方,依借粘著蛋白與肌動蛋白相互作用,將兩個細胞連起來。根本區(qū)別是:1)帶是細胞與細胞之間的粘著連接;斑是細胞與細胞外基質(zhì)進行連接。2)參與帶連接的膜整合蛋白是鈣粘著蛋白,而參與斑連接的是整聯(lián)蛋白,帶是兩細胞膜上的鈣粘著蛋白之間連接。斑是整聯(lián)蛋白與胞外基質(zhì)中的纖連蛋白連

22、接。因整聯(lián)蛋白是纖連蛋白的受體,所以是受體與配體的結(jié)合所介導(dǎo)的。2比較黏著斑和半橋粒。粘著斑和半橋粒這兩種細胞粘著結(jié)構(gòu)在不同的基膜上形成,粘著斑在體外將細胞結(jié)合在人工基膜上,而半橋粒在體內(nèi)將細胞結(jié)合在基膜上。結(jié)構(gòu)上的差異是粘著斑與細胞內(nèi)肌動蛋白纖維相關(guān)聯(lián),而半橋粒與細胞內(nèi)的角蛋白纖維相關(guān)聯(lián)。3說明間隙連接的結(jié)構(gòu)特點和作用。間隙連接(gap junction) 存在于大多數(shù)動物組織。在連接處相鄰細胞間有24nm的縫隙,而且連接區(qū)域比緊密連接大得多,最大直徑可達0.3m。在間隙與兩層質(zhì)膜中有大量蛋白質(zhì)顆粒,是構(gòu)成間隙連接的基本單位,稱連接子(connexon),由6個相同或相似的跨膜蛋白亞單位環(huán)繞

23、而成,直徑8nm,中心形成一個直徑約1.5nm的孔道。通過向細胞內(nèi)注射分子量不同的染料,證明間隙連接的通道可以允許分子量小于1.5KD的分子通過。這表明細胞內(nèi)的小分子,如無機鹽離子、糖、氨基酸、核苷酸和維生素等有可能通過間隙連接的孔隙。間隙連接的功能包括:1)參與細胞分化:胚胎發(fā)育的早期,細胞間通過間隙連接相互協(xié)調(diào)發(fā)育和分化。小分子物質(zhì)即可在一定細胞群范圍內(nèi),以分泌源為中心,建立起遞變的擴散濃度梯度,以不同的分子濃度為處于梯度范圍內(nèi)的細胞提供”位置信息”(positional information),從而誘導(dǎo)細胞按其在胚胎中所處的局部位置向著一定方向分化。2)協(xié)調(diào)代謝:例如,在體外培養(yǎng)條件下

24、,把不能利用外源次黃嘌呤合成核酸的突變型成纖維細胞和野生型成纖維細胞共同培養(yǎng),則兩種細胞都能吸收次黃嘌呤合成核酸。如果破壞細胞間的間隙連接,則突變型細胞不能吸收次黃嘌呤合成核酸。3)、構(gòu)成電緊張突觸:平滑肌、心肌、神經(jīng)末梢間均存在的這種間隙連接,稱為電緊張突觸(electronic synapses)。電緊張突觸無須依賴神經(jīng)遞質(zhì)或信息物質(zhì)即可將一些細胞的電興奮活動傳遞到相鄰的細胞。4比較緊密連接和間隙連接。在結(jié)構(gòu)和功能上都不同。緊密連接形成“帶”環(huán)繞在細胞外圍,限制了組織中細胞溶質(zhì)的滲漏,在上皮組織中最普遍。間隙連接位于相鄰細胞之間,允許細胞間的小分子物質(zhì)流通。5下列物質(zhì):谷氨酸、mRNA、環(huán)

25、腺苷酸、shh蛋白(sonic hedgehog,shh)、Ca2+、G蛋白、質(zhì)膜磷脂,哪個(或哪些)信號會通過間隙連接或胞間連絲,從一個細胞擴散到另一個細胞?胞質(zhì)小分子如Asp、Ca2+、cAMP可迅速穿過間隙連接或胞間連絲。而胞質(zhì)大分子mRNA 和G蛋白則不能。Shh蛋白是分泌蛋白,因此根本不可能穿過間隙連接,因為連接的兩個細胞膜在這里是各自分開的。6比較纖連蛋白和整聯(lián)蛋白。均參與細胞粘著,但一種是細胞外基質(zhì)蛋白,一種是整合膜蛋白。纖連蛋白與胞外基質(zhì)中的其它成分及細胞表面蛋白都有結(jié)合位點(包括整聯(lián)蛋白)。整聯(lián)蛋白是跨膜異二聚體,與纖連蛋白、其它RGD序列(Arg-Gly-Asp)的蛋白和E

26、CM蛋白(細胞外基質(zhì)蛋白)有結(jié)合位點。在一些細胞中可相互作為配體。7說明細胞外基質(zhì)的主要組成及它們的主要功能??煞譃槿箢悾?)蛋白聚糖由糖胺聚糖以共價鍵的形式與線性多肽連接而成的復(fù)合物。能形成水溶性的膠狀物,是ECMA的基礎(chǔ)物質(zhì)。2)結(jié)構(gòu)蛋白如膠原和彈性蛋白賦予細胞外基質(zhì)一定強度和柔性。3)粘著蛋白如纖連蛋白和粘連蛋白。促使細胞基質(zhì)結(jié)合。其中膠原和蛋白聚糖為基本骨架。在細胞表面形成纖維網(wǎng)狀復(fù)合物,再經(jīng)纖連蛋白或?qū)诱尺B蛋白及其它連接蛋白直接與細胞表面受體連接或附著在受體上。由于多數(shù)受體是膜整合蛋白并與胞內(nèi)骨架相連,因此胞外基質(zhì)通過膜整合蛋白將胞外、胞內(nèi)連成一個整體。8膠原蛋白是水不溶性蛋白,它

27、的合成和裝配過程怎樣?目前發(fā)現(xiàn)20個左右的基因分別在不同的組織中編碼不同類型的膠原,是在膜結(jié)合核糖體上起始合成的,然后進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng),通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工修飾和裝配最后分泌到細胞外基質(zhì)中。9為什么青霉素對革蘭氏陽性菌具有抑制作用?能抑制參與肽聚糖裝配后形成肽側(cè)鏈的酶活性。因為G-的細胞壁中肽聚糖含量很少,所以對G-不太敏感。10蛋白聚糖的糖基富含負電荷。如果不富含負電荷,其特性將有何變化?蛋白聚糖強烈的吸脹能力以及因此而占據(jù)較大體積能力依賴于它的負電荷可吸引陽離子云(主要為Na+),而Na+又通過滲透作用引入大量的水,從而使聚糖有獨特性質(zhì)。不帶電荷的多糖如纖維、淀粉、糖原,易于緊密結(jié)合形成纖

28、維或顆粒狀結(jié)構(gòu)。11蛋白聚糖在細胞外基質(zhì)中的作用是什么?是多糖蛋白質(zhì)復(fù)合物,介導(dǎo)細胞與細胞的相互作用,為細胞提供機械保護,且對于接近質(zhì)膜的粒子構(gòu)成屏障。12何謂RGD序列?RGD序列:是許多整合蛋白的配體。此序列在許多重要的細胞外基質(zhì)蛋白中存在,包括纖連蛋白、層粘連蛋白及其它細胞外蛋白。是Arg、Gly、Asp (D)的單字符的縮寫。13植物的初生壁和次生壁是如何形成的?細胞壁的分泌合成是逐步、分層次進行的,合成越早,最后離質(zhì)膜越遠。首先形成的是中間層,主要成分是果膠,是兩細胞共有的,起到將兩細胞連接的作用。分泌合成的第二個區(qū)帶是初生壁,與動物細胞的質(zhì)膜相當,次生壁是細胞停止生長后分泌形成的,

29、增加細胞壁厚度和硬度。14如何證明革蘭氏陽性菌細胞壁中胞壁質(zhì)具有骨架作用決定細胞的形態(tài)?用溶菌酶溶解水解壁中的胞壁質(zhì),可以證明。溶解后,桿狀細菌全部變成了球形。15信號分子與受體結(jié)合的主要特點有哪些?1)特異性;2)高親和力;3)飽和性;4)可逆性;5)引起生理反應(yīng)16為什么說蛋白激酶C是脂和鈣依賴性的激酶?因為PKC激活時需要二酰甘油(DAG)和鈣離子的協(xié)同作用。17G蛋白偶聯(lián)受體與酶聯(lián)受體的主要不同點是什么?G蛋白偶聯(lián)受體都屬于7次跨膜的蛋白質(zhì),在信號傳導(dǎo)中全部與G蛋白偶聯(lián),酶聯(lián)受體都屬于單次跨膜受體。第六章 細胞內(nèi)功能區(qū)隔與蛋白質(zhì)分選一、名詞解釋1內(nèi)膜系統(tǒng)(endomembrane sy

30、stem)-是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體和液泡(包括內(nèi)體和分泌泡)等四類膜結(jié)合細胞器。廣義上的內(nèi)膜系統(tǒng)概念也包括線粒體、葉綠體、過氧化物酶體、細胞核等細胞內(nèi)所有膜結(jié)合的細胞器。2受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用(receptor-mediated endocytosis)-是胞吞作用的一種類型,主要用于攝取特殊的生物大分子。3內(nèi)體(endosome)-是來自質(zhì)膜的細胞內(nèi)小泡,是一種含有游離的受體與配體的酸性非溶酶體小泡。4信號識別顆粒(signal recognition partical,SRP)-是一種核糖核蛋白復(fù)合體,與信號肽、核糖體相結(jié)合形成SRP-信號肽-核糖體復(fù)合物,由SRP介導(dǎo)引向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的

31、SRP受體,并與之結(jié)合。5信號序列(signal sequence)-指將蛋白質(zhì)定位于細胞中特定位置的短氨基酸序列,位于新合成的分泌蛋白的N端。二、簡答題1糖原貯積病的病因是什么?II型糖原累積?。≒ompe?。喝苊阁w缺乏-1,4-葡萄糖苷酶,糖原在溶酶體中積累,導(dǎo)致心、肝、舌腫大和骨骼肌無力。屬常染色體缺陷性遺傳病,患者多為小孩,常在兩周歲以前死亡。2臨床上醫(yī)務(wù)人員在搶救休克患者時,通常要給患者注射大量的糖皮質(zhì)類固醇藥物,其目的是什么?休克患者缺氧,會造成細胞質(zhì)pH下降,溶酶體不穩(wěn)定易破裂,目的是穩(wěn)定溶酶體的膜,防止溶酶體破裂。3討論共翻譯轉(zhuǎn)運及翻譯后轉(zhuǎn)運的主要區(qū)別。翻譯后轉(zhuǎn)移Post-t

32、ranslation translocation:在細胞質(zhì)基質(zhì)中完成多肽鏈的合成(翻譯),再轉(zhuǎn)運至膜結(jié)合的細胞器(如,線粒體、葉綠體、微體、細胞核等)或細胞質(zhì)基質(zhì)的特定部位。共翻譯轉(zhuǎn)移Co-translation translocation:在細胞質(zhì)基質(zhì)中多肽鏈的合成起始后,邊合成邊轉(zhuǎn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,隨后經(jīng)高爾基體運至溶酶體、質(zhì)膜、分泌到細胞外(還包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中的蛋白質(zhì))。4比較膜結(jié)合核糖體的蛋白質(zhì)合成和游離核糖體的蛋白質(zhì)合成。在與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖體上合成的蛋白質(zhì)帶有一特定的序列,與一信號識別顆粒(SRP)結(jié)合,由內(nèi)上的SRP受體識別。這些蛋白質(zhì)屬于分泌出細胞的蛋白質(zhì)或與特定細胞器結(jié)合的

33、蛋白質(zhì)以及整合蛋白。無這些信號序列的蛋白質(zhì)在游離核糖體上合成,構(gòu)成細胞質(zhì)、細胞核、線粒體或葉綠體的蛋白質(zhì)。5信號序列(肽)假說的核心內(nèi)容是什么?是說明共翻譯轉(zhuǎn)運機制的一種學(xué)說,通過對信號序列的識別使核糖體錨定在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,并通過信號序列將新生肽轉(zhuǎn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)后進行運輸。6Hsp70家族中的分子伴侶在正常細胞和應(yīng)激細胞中可完成不同的功能,試列舉幾種功能。1)穩(wěn)定新生肽鏈;2)維持多肽折疊活性;3)維持新生肽鏈的轉(zhuǎn)運活性;4)協(xié)助蛋白質(zhì)降解;5)促進蛋白質(zhì)寡聚體的裝配與解離;6)使熱變性的蛋白質(zhì)恢復(fù)活性。第八章 細胞核與染色體一、名詞解釋1多線染色體(polytene chromosome)-在昆蟲體內(nèi)

34、,這種染色體擴增方式可產(chǎn)生合成大量蛋白質(zhì)所需的眾多基因拷貝。由于這些巨大染色體結(jié)構(gòu)上的條帶與特定的基因有關(guān),因此通過研究其交換頻率可提供可視的遺傳圖譜證據(jù)。2常染色質(zhì)(euchromatin)-是轉(zhuǎn)錄活躍的DNA部分,在間期細胞核中為解旋的細纖維絲,折疊盤曲度小,分散度大。常染色質(zhì)含有單一和重復(fù)順序的DNA,在一定條件下可進行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,是正常情況下經(jīng)常處于功能活躍狀態(tài)的染色質(zhì)。3異染色質(zhì)(heterochromatin)-是指間期或分裂前期核內(nèi)染色很深的塊狀結(jié)構(gòu)。異染色質(zhì)的DNA分子與組蛋白等緊密結(jié)合,螺旋纏繞緊密,很少轉(zhuǎn)錄,功能上處于靜止狀態(tài),是低活性的染色質(zhì)。4染色單體(chromati

35、d)-是染色質(zhì)的四級結(jié)構(gòu),又稱子染色體。在細胞分裂中期,染色質(zhì)轉(zhuǎn)變成染色體,每條染色體都是通過著絲粒連接兩條染色單體而形成的。這兩條染色單體互稱為姐妹染色單體。5著絲粒(centromere)-是在主縊痕處兩條染色單體相連處的中心部位,即主縊痕的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。著絲粒的位置是鑒別染色體類型的一個重要標志。6動粒(kinetochore)-是指在主縊痕處兩條染色單體的外側(cè)表層部位的特殊結(jié)構(gòu),是紡錘絲微管的連接處,是微管蛋白的組織中心之一。7次縊痕(secondary constriction)-是染色體上主縊痕以外的另一個凹陷,常分布于染色體臂中或在短臂近動粒處。次縊痕也是染色體的一個固定的形態(tài)特征,

36、所以也可作為鑒別染色體的標志。8核仁組織區(qū)(nucleolus region)-是存在于細胞內(nèi)特定染色體區(qū)段,常位于染色體端部的次縊痕處,含有主要rRNA基因,是產(chǎn)生核仁的部位。二、簡答題1真核生物細胞能否象原核生物一樣,可以沒有核膜,并且DNA的轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)翻譯也是偶聯(lián)的?不能,因為真核生物的基因有內(nèi)含子,初級轉(zhuǎn)錄物必須經(jīng)過加工。2為什么真核細胞需要細胞核作為獨立的區(qū)室,而原核細胞沒有核也能生存?因為真核基因的表達機制比原核更復(fù)雜。原核基因沒有內(nèi)含子,因而一條mRNA在轉(zhuǎn)錄后立即翻譯而不需要加工。實際上在核糖體中大多數(shù)mRNA在轉(zhuǎn)錄結(jié)束前就開始翻譯了。真核轉(zhuǎn)錄后在翻譯前轉(zhuǎn)錄物必須經(jīng)過剪接。核

37、膜將轉(zhuǎn)錄與翻譯的過程在空間、時間上隔離開來,初始RNA轉(zhuǎn)錄物分布于核內(nèi),經(jīng)加工形成mRNA,才被轉(zhuǎn)運離開核進入質(zhì)中翻譯。3簡述核孔魚籠模型的主要特點。核孔復(fù)合物(NPC)是一種輪形結(jié)構(gòu),呈八面對稱。只有一中央運輸?shù)鞍?,向外伸?個輻條,與核面的核質(zhì)環(huán)及細胞質(zhì)環(huán)相連,在胞質(zhì)環(huán)表面常有8個細胞顆粒位于其上,而胞質(zhì)環(huán)上分別有肌纖絲伸向核質(zhì)、胞質(zhì),形成籠形結(jié)構(gòu)。4核定位信號是一種永久性的信號,這對生命活動有什么意義?重復(fù)使用,有利于細胞的重建過程。5比較前導(dǎo)肽與核定位信號的區(qū)別。核定位信號與前導(dǎo)肽的主要區(qū)別:1)核定位信號可以重復(fù)使用,即永久性;2)核定位信號由核孔復(fù)合物識別。6染色體的繩珠模型有什么

38、特點?是染色體的一級結(jié)構(gòu)。由核小體組成,各核小體之間有連接DNA相連。核小體又稱為核體。核粒是染色體的基本結(jié)構(gòu)單位,由200bp(160240bp)的DNA與五種組蛋白結(jié)合而成。其中4種組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各兩分子組成八聚體的小圓盤,是核小體的核心結(jié)構(gòu)。146bp的DNA在圓盤外圍繞1.75圈,1分子H1與DNA結(jié)合,鎖住核小體DNA的進出口,起穩(wěn)定核小體的作用。兩個核小體間的連接DNA長度因種屬和組織而異,一般60bp。7染色體骨架與核基質(zhì)有何不同?染色體骨架是一個密集、纖維狀的染色體支架結(jié)構(gòu)。當?shù)鞍踪|(zhì)從分裂中期的染色體中抽提出來后就只剩下骨架了。大的環(huán)形DNA還連在骨架上。

39、核基質(zhì)是與核被摸的內(nèi)部相連的一個纖維狀網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。它是間期核抽提除去蛋白質(zhì)后得到的。因此核骨架出現(xiàn)于分裂期的細胞。而核基質(zhì)出現(xiàn)于分裂間期的細胞,具有一些共同的蛋白質(zhì),但也有各自獨特的蛋白質(zhì)。8比較異染色質(zhì)與常染色質(zhì)。二者都是分裂間期的染色質(zhì)形態(tài),但壓縮程度不同。異染色質(zhì)保持高度濃縮狀態(tài),轉(zhuǎn)錄不活躍,而常染色質(zhì)是松散的,可作為轉(zhuǎn)錄模板。9為什么在真核生物的細胞中不能同時見到細胞核和染色體?染色體是遺傳物質(zhì)的高級結(jié)構(gòu),這種結(jié)構(gòu)只有在細胞分裂時才會出現(xiàn),便于均等分配。為了均等分配遺傳物質(zhì),不僅遺傳物質(zhì)要凝集成染色體,同時核膜要解體,此時見不到細胞核。僅在新細胞生長時,需要基因活動,需要蛋白質(zhì)合成,因此

40、染色體必須去凝集,此時見不到染色體,但此時為了穩(wěn)定遺傳物質(zhì),保證基因轉(zhuǎn)錄的微環(huán)境,必須形成完整的核,所以在真核生物的細胞中不能同時見到細胞核和染色體。10動粒與著絲粒有何不同?都指染色體上與有絲分裂紡錘體相連的點。動粒在顯微鏡下是染色體上一個與微管相連的密集區(qū)域。著絲粒是染色體上進行正確分離所必需的區(qū)域。11何謂人工染色體?何謂YAC文庫?利用天然染色體的功能元件,構(gòu)建重組染色體,大大提高了插入外源基因的能力,并且在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定的復(fù)制和遺傳,稱為人工染色體。如果以酵母染色體的ARS、CEN、TEL序列構(gòu)建載體,即酵母人工染色體(YAC),以YAC為載體構(gòu)建的文庫就是YAC文庫。第九章 核糖體

41、與核酶一、名詞解釋1核酶(ribozyme)-指具有催化活性的RNA,即化學(xué)本質(zhì)是核糖核酸(RNA),卻具有酶的催化功能。二、簡答題1原核和真核生物核糖體在生物發(fā)生上有何不同?細胞內(nèi)的核糖體是自我裝配的。核糖體的生物發(fā)生包括蛋白質(zhì)與RNA的合成、核糖體亞基的組裝。首先,原核生物rRNA基因的重復(fù)次數(shù)比真核低得多,而且細菌的5s rRNA基因與另外兩種r RNA基因組成一個轉(zhuǎn)錄單位。真核生物核糖體亞基的裝配地點在細胞核的核仁部位,而原核亞基的裝配在細胞質(zhì)中。2真核和原核核糖體的主要區(qū)別是什么?真核細胞80S核糖體蛋白和rRNA的數(shù)量和體積均比原核70S的大,因此其機體約為原核的2倍。而大小亞基(

42、40S與60S)也比原核的大。但從含量上看,原核細胞的RNA含量比真核多。原核生物核糖體上有一個E位點便于脫氨酰tRNA的離開。第十章 細胞骨架一、名詞解釋1中間纖維(intermediate filament,IF)-是細胞骨架中最復(fù)雜的一種蛋白質(zhì)纖維系統(tǒng),其直徑介于微管和微絲之間,約10nm。中間纖維與細胞核的固定、物質(zhì)運輸和有絲分裂等過程有關(guān)。2基體(basal body)-基體是纖毛和鞭毛的微管組織中心,不過基體只含有一個中心粒而不是一對中心粒。基體又稱動質(zhì)體(kinetosome),負責鞭毛和纖毛的合成。3細胞松弛素B(cytochalasin B)-又稱松胞素,是第一個用于研究細胞

43、骨架的藥物,是真菌分泌的生物堿。細胞松弛素(細胞松弛素B及其衍生物)在細胞內(nèi)與微絲正端結(jié)合,并引起F-肌動蛋白解聚,阻斷亞基的進一步聚合。4鬼筆環(huán)肽(phalloidin)-從一種毒菇中分離的劇毒生物堿,與細胞松弛素的作用相反,只與聚合的微絲結(jié)合,而不與肌動蛋白單體分子結(jié)合。與聚合的微絲結(jié)合后,抑制了微絲的解體,因而破壞了微絲的聚合和解聚的動態(tài)平衡。第十一章 細胞繁殖及細胞周期一、名詞解釋1細胞周期(cell cycle)-通常將通過細胞分裂產(chǎn)生的新細胞生長到下一次細胞分裂形成子細胞結(jié)束為止所經(jīng)歷的過程成為細胞周期。2同步化(synchronization)-培養(yǎng)物中的所有細胞都處于細胞周期的

44、相同階段,稱為細胞的同步化。3周期蛋白(cyclin)-指在整個真核生物的細胞周期中,濃度隨細胞周期的變化而時升時降的幾個相關(guān)的蛋白質(zhì)。4限制點(restriction point)-是哺乳動物細胞周期控制G1期進入S期的調(diào)節(jié)點。5M期促進因子(M phase-promoting factor,MPF)-是一種蛋白質(zhì),其含量在有絲分裂前迅速上升,在有絲分裂后迅速下降,被認為是觸發(fā)有絲分裂的物質(zhì)。6關(guān)卡(checkpoint)- 指監(jiān)控細胞周期事件的發(fā)生、發(fā)展過程是否嚴格按程序進行的控制點。7有絲分裂(mitosis)-有絲分裂是細胞周期M期進行的分裂活動。在這個時期,通過紡錘絲的形成和運動以及

45、染色體的形成,將S期復(fù)制的DNA平均分配到兩個子細胞的過程,由于紡錘絲的出現(xiàn),故稱為有絲分裂。8減數(shù)分裂(meiosis)-是特殊的核分裂方式,染色體僅復(fù)制一次,而進行兩次連續(xù)的核分裂(減數(shù)分裂、)。9胞質(zhì)分裂(cytokinesis)-核分裂(有絲分裂)完成后是細胞的原生質(zhì)體分裂的過程。有絲分裂后期,將細胞膜、細胞骨架、細胞器以及可溶性蛋白質(zhì)等均等分配,并形成兩個新的子細胞的過程稱為胞質(zhì)分裂。胞質(zhì)分裂通常開始于有絲分裂后期,直到兩個新細胞核形成后才結(jié)束。10P53蛋白(P53 protein)-磷酸化蛋白,是一種常見的腫瘤抗原,在多種轉(zhuǎn)化細胞中表達。P53被認為是腫瘤抑制基因的產(chǎn)物,而不是癌

46、基因產(chǎn)物。二、簡答題1比較有絲分裂的中期與早中期。都處于有絲分裂的早期階段,早中期其特點是染色體和紡錘體結(jié)合,以及染色體向赤道板移動。在中期,染色體全部排列在赤道板上,中期是有絲分裂的“節(jié)點”,在染色體正確地排好之前,細胞會一直處于中期。2在減數(shù)分裂前期發(fā)生染色體聯(lián)會的生物學(xué)意義是什么?同源染色體的分離、自由組合的交換、一方面保證了物種遺傳的穩(wěn)定性,另一方面增加了生物遺傳的多樣性。3染色體交叉的意義是什么?交叉提供了染色體上易于發(fā)生重組的位點。4簡述P53蛋白的作用。P53蛋白是一種防止細胞癌變的轉(zhuǎn)錄因子,可調(diào)節(jié)一種周期蛋白-colr抑制蛋白的合成,這種物質(zhì)是進入S期所必需的。第十二章 細胞分

47、化和癌細胞一、名詞解釋1細胞決定(cell determination)-細胞分化具有嚴格的方向性,細胞在未出現(xiàn)分化細胞的特征前,分化的方向就已由細胞內(nèi)部的變化及受周圍環(huán)境的影響而決定,這一現(xiàn)象稱為細胞決定。2細胞分化(cell differentiation)-受精卵產(chǎn)生的細胞在形態(tài)、功能和蛋白質(zhì)合成方面發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程稱為細胞分化。3奢侈基因(luxury gene)-是與各種分化細胞的特殊性狀有直接關(guān)系的基因,喪失這種基因?qū)毎纳娌o直接影響,只在特定的分化細胞中表達,常受時間和空間的限制。4持家基因(house-keeping gene)-也叫管家基因,是維持細胞基本生存所不可缺少的基因,但是對細胞分化一般只起協(xié)助作用。5干細胞(stem cell,SC)-成體的許多組織中都保留一些未分化的細胞,當機體需要時這些細胞便可按發(fā)育的途徑分裂分化產(chǎn)生特定的細胞。機體組織中這種未分化細胞稱為干細胞。6轉(zhuǎn)決定(transdetermination)-一般胚胎細胞一旦決定,那么沿著特定類型進行分化的方向是穩(wěn)定的;但在果蠅中發(fā)現(xiàn)了某

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