通用檢測方法和指導原則蘇州藥檢所培訓

1、中國藥典中國藥典2010年版附錄年版附錄通用檢測方法和指導原則通用檢測方法和指導原則主要增修訂內容主要增修訂內容一、主要報告內容一、主要報告內容v1、附錄增修訂原則、附錄增修訂原則v2、擬增修訂項目、擬增修訂項目v3、主要增訂項目內容、主要增訂項目內容v4、主要修訂項目內容、主要修訂項目內容v5、評價與展望、評價與展望二、附錄增修訂原則二、附錄增修訂原則v1、新增通用檢測方法應是目前藥品檢驗檢測急需、新增通用檢測方法應是目前藥品檢驗檢測急需 的、能解決目前存在突出問題的，并能引導藥的、能解決目前存在突出問題的，并能引導藥 品檢驗檢測水平不斷增高，能充分反映現(xiàn)階段品檢驗檢測水平不斷增高，能充分反

2、映現(xiàn)階段 國內和國際藥品質量控制先進技術的成熟可靠國內和國際藥品質量控制先進技術的成熟可靠 的方法。的方法。急需、前瞻、先進、成熟急需、前瞻、先進、成熟v2、指導原則的增訂，理由和意義要充分，應對藥、指導原則的增訂，理由和意義要充分，應對藥 品質量標準和質量控制有實際指導意義。品質量標準和質量控制有實際指導意義。v3、修訂內容應緊密圍繞藥品標準以及藥品監(jiān)督管、修訂內容應緊密圍繞藥品標準以及藥品監(jiān)督管 理工作，修訂必須有充分的理由和科學依據(jù)，理工作，修訂必須有充分的理由和科學依據(jù)， 不輕易修改。不輕易修改。三、擬增修訂項目三、擬增修訂項目v1、一部共一部共16項，其中新增項，其中新增6項：項：v

3、電泳測定法電泳測定法v滲透壓摩爾濃度測定法滲透壓摩爾濃度測定法 v等離子體發(fā)射光譜法等離子體發(fā)射光譜法v大孔樹脂有機殘留物測定法大孔樹脂有機殘留物測定法v聚合酶鏈式反應法聚合酶鏈式反應法v中藥特征圖譜指導原則中藥特征圖譜指導原則三、擬增修訂項目三、擬增修訂項目v2、二部共、二部共45項，新增項，新增12項：項：v核磁共振波譜法核磁共振波譜法v離子色譜法離子色譜法v電導率測定法電導率測定法v錐入度檢查法錐入度檢查法v2-乙基己酸測定法乙基己酸測定法 v光學顯微鏡法光學顯微鏡法 v拉曼光譜法指導原則拉曼光譜法指導原則v溶出度測定指導原則溶出度測定指導原則 v藥物多晶型研究指導原則藥物多晶型研究指導

4、原則v蛋白質含量測定法蛋白質含量測定法v合成多肽中醋酸測定法合成多肽中醋酸測定法v氨基酸測定指導原則氨基酸測定指導原則四、主要增訂項目內容四、主要增訂項目內容v核磁共振波譜法核磁共振波譜法 1、未知物的結構測定、未知物的結構測定 2、已知物的結構確證、已知物的結構確證 功能團分析功能團分析 異構體分析異構體分析 打假工作（肝素鈉中的摻偽物在打假工作（肝素鈉中的摻偽物在2.16ppm 有特征信號）有特征信號） 3、含量分析（多組份抗生素、含量分析（多組份抗生素,對映異構體分析）對映異構體分析）四、主要增訂項目內容四、主要增訂項目內容v離子色譜法離子色譜法 1、有機、無機陰陽離子和低分子量親水性、

5、有機、無機陰陽離子和低分子量親水性 有機分子的分離測定（電導檢測器）有機分子的分離測定（電導檢測器） 2、氨基酸不經(jīng)衍生化直接測定、氨基酸不經(jīng)衍生化直接測定 （脈沖積分（脈沖積分安培檢測器）安培檢測器） 3、某些抗生素的有關物質檢查（脈沖積分、某些抗生素的有關物質檢查（脈沖積分安培檢測器）安培檢測器） 4、金屬的形態(tài)與價態(tài)分析、金屬的形態(tài)與價態(tài)分析四、主要增訂項目內容四、主要增訂項目內容v拉曼光譜法指導原則拉曼光譜法指導原則 1、與紅外光譜一樣，同為分子的振動光譜、與紅外光譜一樣，同為分子的振動光譜 ir 與偶極矩變化相關與偶極矩變化相關mnm= raman 與極化率變化相關與極化率變化相關(

6、aij)nm= 2、兩者選一、兩者選一 互為補充互為補充 3、拉曼光譜測定快速、準確，樣品制備簡單甚至無需制備、拉曼光譜測定快速、準確，樣品制備簡單甚至無需制備 4、拉曼光譜通常處于可見與近紅外區(qū)、拉曼光譜通常處于可見與近紅外區(qū) 可以有效地用光導纖維將各光學元件聯(lián)結可以有效地用光導纖維將各光學元件聯(lián)結 樣品可以包封在對激光光源透明的玻璃、塑料中或將樣樣品可以包封在對激光光源透明的玻璃、塑料中或將樣 品溶于水中品溶于水中 5、一些特殊的拉曼技術，如共振拉曼和表面增強拉曼光譜、一些特殊的拉曼技術，如共振拉曼和表面增強拉曼光譜 可以使譜帶強度增加可以使譜帶強度增加103106倍，使痕量物質的結構研倍

7、，使痕量物質的結構研 究成為可能。究成為可能。dmn-damijn-四、主要增訂項目內容四、主要增訂項目內容v重金屬檢查與測定法重金屬檢查與測定法 1、重金屬檢查法（化學法）、重金屬檢查法（化學法） 一法一法 硫代乙酰胺比色法硫代乙酰胺比色法 適用于溶于水、稀酸或乙醇等適用于溶于水、稀酸或乙醇等 的藥物的藥物 甲（甲（pb標準管）標準管） 乙（樣品）乙（樣品） 加設監(jiān)控管丙（加設監(jiān)控管丙（pb+樣品）樣品） 要求丙甲乙要求丙甲乙 合格合格 如丙甲如丙甲 采第二法采第二法 二法二法 熾灼后的硫代乙酰胺比色法熾灼后的硫代乙酰胺比色法 適用于含芳環(huán)、芳雜適用于含芳環(huán)、芳雜 環(huán)以及難溶于水、稀酸或有機

8、溶劑的藥物。配成溶環(huán)以及難溶于水、稀酸或有機溶劑的藥物。配成溶 液后同一法操作。液后同一法操作。 三法三法 硫化鈉比色法硫化鈉比色法 適用于堿溶性藥物，同原附錄未加適用于堿溶性藥物，同原附錄未加 監(jiān)控管。監(jiān)控管。 四、主要增訂項目內容四、主要增訂項目內容2、原子吸收與光焰光度法、原子吸收與光焰光度法 無實質修改無實質修改3、等離子體質譜、等離子體質譜 修訂附錄修訂附錄 完善了原附錄完善了原附錄 增加了干擾與校正，樣品溶液的制備以及增加了干擾與校正，樣品溶液的制備以及 測定方法中增加了標準加入法等段落。測定方法中增加了標準加入法等段落。 本法是重金屬測定中最靈敏的一個方法（本法是重金屬測定中最靈

9、敏的一個方法（10-1210-15）4、等離子體發(fā)射光譜、等離子體發(fā)射光譜 新增附錄新增附錄 本法靈敏（本法靈敏（10-910-12）、準確、線性范圍寬、元素覆蓋）、準確、線性范圍寬、元素覆蓋 范圍寬、可實現(xiàn)多種元素同時測定。范圍寬、可實現(xiàn)多種元素同時測定。5、離子色譜、離子色譜 新增附錄新增附錄 可實施金屬的形態(tài)與價態(tài)分析可實施金屬的形態(tài)與價態(tài)分析6、原子熒光、原子熒光 未收載未收載 與與icp-ms和和icp-aes比比 差差 與與aa比相仿比相仿四、主要增訂項目內容四、主要增訂項目內容v制藥用水制藥用水 1、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)工藝 純化水純化水 飲用水經(jīng)蒸餾、離子交換、反滲透等方法飲用水經(jīng)蒸

10、餾、離子交換、反滲透等方法 注射用水注射用水 純化水經(jīng)蒸餾純化水經(jīng)蒸餾 滅菌注射用水滅菌注射用水 注射用水按注射劑生產(chǎn)工藝制備注射用水按注射劑生產(chǎn)工藝制備 2、修訂后質量標準增二項檢查、修訂后質量標準增二項檢查 a、電導率檢查、電導率檢查 新增附錄用于檢查各種陰陽離子的污染新增附錄用于檢查各種陰陽離子的污染程度程度 b、總有機碳檢查、總有機碳檢查 控制有機污染（有機小分子、微生物）控制有機污染（有機小分子、微生物） c、上述兩項檢查的在線檢測可對制水系統(tǒng)進行實時流程、上述兩項檢查的在線檢測可對制水系統(tǒng)進行實時流程監(jiān)控監(jiān)控總有機碳檢查總有機碳檢查 通過測定水中的二氧化碳，間接測量水被有機物污染的

11、程度通過測定水中的二氧化碳，間接測量水被有機物污染的程度（1）方法與原理）方法與原理 a.氧化氧化:燃燒、氧化劑、光照燃燒、氧化劑、光照 b.檢測：直接電導、薄膜電導、非色散紅外檢測：直接電導、薄膜電導、非色散紅外（2）對）對toc測量的各種原理和方法不作任何褒貶，只強調技術測量的各種原理和方法不作任何褒貶，只強調技術 要求要求 a、能區(qū)分水中的有機碳與無機碳，并能排除無機碳的、能區(qū)分水中的有機碳與無機碳，并能排除無機碳的 干擾干擾 b、應滿足系統(tǒng)適用性試驗要求、應滿足系統(tǒng)適用性試驗要求 85% （rss-rw）/（rs-rw）100115% c、具有足夠的靈敏度（、具有足夠的靈敏度（0.05

12、mg/l）（3）toc測量的意義測量的意義 控制化學污染與微生物污染控制化學污染與微生物污染 a toc measurement is not a replacement test for endotoxin or microbiological control.while there can be a qualitative relationship between a food souce (toc) and microbiological activity.there is no direct numerical correlation.電導率檢查1、對電導率儀的一般要求 a、儀器的最小

13、分辨率和讀數(shù)精度 0.1s/cm b、電導率儀須定期校正 （a）采用電導標準溶液校正電導池常數(shù)，實測電導池常數(shù)應在規(guī)定值的2% （b）與校正過的儀器進行間接比對2、影響制藥用水電導率測定的因素 主要有溫度、大氣中二氧化碳的溶入、水的ph值等電導率檢查3、判定標準（1）純化水表1 溫度與電導率限度（純化水）（略）采用內插法計算（2）注射用水表2 溫度與電導率限度（注射用水）（略）電導率檢查a、以小于測定溫度的最接近溫度所對應的電導率值即為限度值b、調水樣（不少于100ml）溫度至25，劇烈攪拌，每5分鐘測一次，當變化0.1s/cm時記錄讀數(shù)，讀數(shù)應不大于2.1s/cm（合格）c、如b步讀數(shù)2.1

14、s/cm，則依法測定水的ph值，由表3查得對應的電導率限度，并與b步實測值比較，如b讀數(shù)不大于對應的限度值，則為合格，如b讀數(shù)大于限度值或ph值超出5.0-7.0，則不合格表3 ph值和電導率的限度（略）電導率檢查（3）滅菌注射用水a(chǎn)、溫度25b、裝量10ml，限度為25s/cmc、裝量10ml，限度為5s/cm電導率檢查4、toc和電導率檢查用水（1）toc檢查toc0.1ppm電導率1.0s/cm（2）電導率檢查電導率0.1s/cm（3）可采用經(jīng)超純水裝置制備并經(jīng)檢驗合格的水，如仍不理想，建議再經(jīng)全玻璃重蒸五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法 1

15、、波長校正、波長校正 增加了高氯酸鈥溶液的校正（以增加了高氯酸鈥溶液的校正（以10% 高氯酸為溶劑，配制含高氯酸為溶劑，配制含4%氧化鈥的溶液）氧化鈥的溶液） max nm：241.13，278.10，287.18，333.44， 345.47，361.31，416.28，451.30， 485.29，536.64，640.52nm。 2、波長允差、波長允差 紫外區(qū)紫外區(qū) 1nm 500nm 2nm 700nm 4.8nm五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v紅外光譜紅外光譜 1、原料藥鑒別、原料藥鑒別 遇多晶干擾遇多晶干擾 （1）按規(guī)定對樣品進行預處理（重結晶與干燥）按規(guī)定對樣品進行預處

16、理（重結晶與干燥） （2）采用對照品平行操作）采用對照品平行操作 （3）采用溶液法）采用溶液法 2、制劑鑒別、制劑鑒別 （1）提?。ㄈ軇┑倪x擇）提取（溶劑的選擇） 輔料無干擾，晶型不變輔料無干擾，晶型不變 直接與標準光譜比對直接與標準光譜比對 輔料無干擾，晶型有變輔料無干擾，晶型有變 與對照品同法處理后比對與對照品同法處理后比對 輔料有干擾，晶型不變輔料有干擾，晶型不變 在指紋區(qū)選擇在指紋區(qū)選擇35個特征譜帶個特征譜帶 波數(shù)允差為波數(shù)允差為0.5% 輔料有干擾，晶型有變輔料有干擾，晶型有變 不宜采用紅外鑒別不宜采用紅外鑒別五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容3、多組份原料藥的鑒別、多組份原

17、料藥的鑒別 可借鑒制劑鑒別的可借鑒制劑鑒別的 方法方法4、混晶中無效或低效晶型的限度控制、混晶中無效或低效晶型的限度控制 采用基線密度法計算指定譜帶的吸光度后采用基線密度法計算指定譜帶的吸光度后 再計算各晶型的相對含量（甲苯咪唑和棕再計算各晶型的相對含量（甲苯咪唑和棕 櫚氯霉素）櫚氯霉素）五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v高效液相色譜法高效液相色譜法 1、色譜柱、色譜柱 （1）常用色譜柱填料粒徑）常用色譜柱填料粒徑310m （2）微徑柱填料粒徑）微徑柱填料粒徑 約約2m（uplc或或uflc） 硬件須匹配硬件須匹配 色譜條件可適當調整色譜條件可適當調整 以品種正文規(guī)定條件的測定結果為準

18、以品種正文規(guī)定條件的測定結果為準 2、柱溫、柱溫 （1）通常為室溫）通常為室溫 （2）以硅膠為載體的普通色譜柱，最高使用溫度不得超過）以硅膠為載體的普通色譜柱，最高使用溫度不得超過 60，（，（htlc） （a）提高靈敏度）提高靈敏度 峰高的對數(shù)與柱溫呈線性關系峰高的對數(shù)與柱溫呈線性關系 （b）改善選擇性）改善選擇性五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容 3、有些色譜條件可適當調整，但流動相比例的調整有明確規(guī)、有些色譜條件可適當調整，但流動相比例的調整有明確規(guī) 定。組分比例較低者（定。組分比例較低者（50%）相對于自身的改變量不）相對于自身的改變量不 超過超過30%，相當于總量的改變量不超過

19、，相當于總量的改變量不超過10%。如。如 30%的相對改變量超過總量的的相對改變量超過總量的10%時，則以后者為準。時，則以后者為準。 4、系統(tǒng)適用性試驗、系統(tǒng)適用性試驗 （1）理論板數(shù)）理論板數(shù)n n=16（ ）2或或n=5.54（ ）2 （2）分離度）分離度r（關鍵指標）（關鍵指標） r=2 或或r= 5、拖尾因子、拖尾因子 必要時，應規(guī)定拖尾因子必要時，應規(guī)定拖尾因子n/2rwtwtr21rrw+wt-t12()()2n 2,2n 1,rrw+ w 1.70t-t 212五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容vph值測定法值測定法 1、ph的含義的含義 ph=-log ah+ 2、ph

20、值的測定值的測定 ph=phs+（e-es）/r r=0.05916+0.000198（t-25） 影響影響ph值測定的因素值測定的因素 表觀表觀ph值值 3、弱緩沖液的、弱緩沖液的ph測定測定 除另有規(guī)定外，按下法測定除另有規(guī)定外，按下法測定 先用苯二甲酸鹽緩沖液（先用苯二甲酸鹽緩沖液（ph4.01）校正儀器，）校正儀器，1min內內 ph改變改變0.05時讀數(shù)，再用硼砂緩沖液（時讀數(shù)，再用硼砂緩沖液（ph9.18）校）校 正儀器，正儀器，1min內內ph改變改變0.05時讀數(shù)，取二次讀數(shù)的時讀數(shù)，取二次讀數(shù)的 平均值。平均值。 4、水的、水的ph值測定值測定 加加kcl適量（由制藥用水正文

21、自行規(guī)定）適量（由制藥用水正文自行規(guī)定）五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v電位滴定電位滴定 1、作圖法、作圖法 零階零階 ev曲線突躍部的中點或拐點所曲線突躍部的中點或拐點所 對應的滴定液體積對應的滴定液體積 一階導數(shù)一階導數(shù) 一級微商（一級微商（e/v）的極值）的極值 所對應的滴定液體積所對應的滴定液體積 二階導數(shù)二階導數(shù) 二級微商（二級微商（2e/v2）等于）等于 零時所對應的滴定液體積零時所對應的滴定液體積五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v2、計算法、計算法 二階導數(shù)法較一階導數(shù)法更準確，故最常用二階導數(shù)法較一階導數(shù)法更準確，故最常用 采用線性內插法采用線性內插法 v0=

22、v+ v 式中式中 v0：終點時的滴定液體積：終點時的滴定液體積 a：二級微商為零前的二級微商值：二級微商為零前的二級微商值 b：二級微商為零后的二級微商值：二級微商為零后的二級微商值 v：二級微商為：二級微商為a時的滴定液體積時的滴定液體積b+aav0=v+(a/a + b )v=34.30+1100/(1100+3600) 0.10=34.32mlv（ml）e(mv)eve/v2e/v233.00405100.402533.404153370.203533.604225090.204533.8043175120.206034.00443400120.1012034.10455300150.

23、1015034.204702900440.1044034.305141100550.1055034.40569-3600190.1019034.50588-800110.1011034.60599-40070.107034.70606五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v不溶性微粒檢查法不溶性微粒檢查法 1、應用對象、應用對象 由溶液型靜脈注射液擴大至溶液型靜脈注射由溶液型靜脈注射液擴大至溶液型靜脈注射 液，注射用無菌粉末、注射用濃溶液及注射用無菌原料液，注射用無菌粉末、注射用濃溶液及注射用無菌原料 藥藥 2、統(tǒng)一了操作方法、統(tǒng)一了操作方法 （1）取樣體積）取樣體積 大于大于5ml取取5m

24、l 小于小于5ml根據(jù)實際裝量取或合并成不少于根據(jù)實際裝量取或合并成不少于25ml，每，每 次取次取5ml （2）有效讀數(shù)不少于）有效讀數(shù)不少于3個，取平均值計算個，取平均值計算 3、儀器校正、儀器校正 （1）標準粒子）標準粒子 10m 相對標準偏差不大于相對標準偏差不大于5% （2）8m與與10 m或或10 m與與12 m兩個通道的差值計數(shù)兩個通道的差值計數(shù) 68% 10 m通道的累計計數(shù)通道的累計計數(shù)五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v可見異物檢查法可見異物檢查法 1、合并原附錄、合并原附錄h及及可見異物檢查法補充可見異物檢查法補充 規(guī)定規(guī)定 2、10ml及以下規(guī)格，每次手持不超過及

25、以下規(guī)格，每次手持不超過2支支 3、目視檢測時間不超過、目視檢測時間不超過20秒秒 4、所檢樣品必須系隨機抽取、所檢樣品必須系隨機抽取五、主要修訂項目內容五、主要修訂項目內容v滲透壓摩爾濃度測定法滲透壓摩爾濃度測定法 1、供試溶液的濃度、供試溶液的濃度 （1）由儀器可測定范圍改為不大于）由儀器可測定范圍改為不大于700mos mol/ （2）經(jīng)稀釋的供試液，其滲透壓摩爾濃度不能）經(jīng)稀釋的供試液，其滲透壓摩爾濃度不能 簡單地用實測值乘以稀釋倍數(shù)表示，而應簡單地用實測值乘以稀釋倍數(shù)表示，而應 將實測值和稀釋倍數(shù)完整表述將實測值和稀釋倍數(shù)完整表述 2、擴大了應用范圍，在制劑通則的注射劑和眼用、擴大了應用范圍，在制劑通則的注射劑和眼用 制劑項下有明確規(guī)定。制劑項下有明確規(guī)定。 3、各類制劑的滲透壓摩爾濃度范圍暫不作統(tǒng)一規(guī)、各類制劑的滲透壓摩爾濃度范圍暫不作統(tǒng)一規(guī) 定，原則要求與血液等滲或接近等滲（定，原則要求與血液等滲或接近等滲（285 310mos mol/