玉丹榮心顆粒對小鼠免疫功能的影響

1、DOC格式論文，方便您的復制修改刪減玉丹榮心顆粒對小鼠免疫功能的影響（作者：單位：郵編：）【摘要】：目的探討玉丹榮心顆粒對小鼠非特異性免疫和 特異性免疫功能的調節(jié)作用。方法 將小鼠隨機分為正常組、Cy（環(huán)磷 酰胺）模型組、玉丹榮心丸組、玉丹榮心顆粒組，分別觀察玉丹榮心顆 粒對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能、2,4-二硝基氯苯（DNCB所致遲發(fā)性 超敏反應、雞紅細胞（CRBC致敏小鼠溶血素抗體生成的影響。結果 玉 丹榮心顆粒與 Cy模型組相比，巨噬細胞吞噬能力提高（P0.01）,DNCB 所致遲發(fā)性超敏反應增強（P0.01）,血清溶血素抗體水平增加 （P0.01）。結論玉丹榮心顆?？稍谝欢ǔ潭壬显鰪?

2、Cy所致免疫功能 低下小鼠非特異性免疫和特異性免疫功能?！娟P鍵詞】玉丹榮心顆粒免疫功能小鼠Abstract : Objective To inv estigatethe in flue nee of Yuda nRongxin Keli on immunoregulation in mice. Methods The mice were randomly divided into the normal group, cyclophosphamide （Cy） model group, Yuda n Rongxin Pill group and Yuda n Rongxin Keli group

3、. The effects of Yuda n Rongxin Keli on the phagocytosis of macrophage in mouseabdomen, delayed-type hypersensitivity (DTH) in duced by din itrochlorobe nzene (NDCB), and gen erati onof hemolysin antibody induced by chicken red blood cell (CRBC) were observed respectively. Result Compare with the Cy

4、 model group, the phagocytosis of macrophage in Yuda n Rongxin Keli group was promoted (P0.01), DTH in duced by DNCB was enhan ced (P0.01) and the level of hemolys in an tibody was in creased (P0.01). Conclusion Yudan Rongxn Keli has the promotive effect on non specific and specificimmun ity in mice

5、 with hypoimmu nityin duced by Cy.Key words : Yudan Rongxin Keli ; immune function ; mice玉丹榮心顆粒是上海玉丹藥業(yè)有限公司生產的中藥制劑，是玉丹榮心丸的改良劑型。為了探討玉丹榮心顆粒對免疫功能低下小鼠免疫 功能的影響，筆者于2006年5-8月進行了此實驗研究，現(xiàn)報道如下。1實驗材料1.1動物120只8周齡Balb/c健康雄性小鼠，體重1822 g,中國醫(yī)學科學 院實驗動物中心提供，合格證號：SCXK-2005-0013,層流架內飼養(yǎng)。1.2藥物玉丹榮心顆粒，上海玉丹藥業(yè)有限公司生產，批號20060303玉

6、丹 榮心丸,上海玉丹藥業(yè)有限公司生產，批號20060303。1.3試劑環(huán)磷酰胺（Cy）,規(guī)格200 mg/支,山西普德藥業(yè)有限公司生產 批號2006.1.2 ;肝素鈉1 250萬U/支,天津生物化學制藥廠生產，批 號20060309;甲醇，分析純，北京化工廠生產，批號2002.12 ;丙酮， 分析純,北京化工廠生產；生理鹽水,北京雙鶴藥業(yè)有限公司生產；姬 姆薩染液，粉針，美國Sigma公司生產，自己配制；雞紅細胞（CRBC懸 液,雞血取自北京華都肉雞場，按文獻1方法配制；補體（豚鼠血清） 凍干,0.3 g/支，購于北京藥品生物制品檢定所，批號20060408; 2,4- 二硝基氯苯（DNCB）

7、, Aldrich Chemical Co. Ltd。1.4儀器Olympus顯微鏡；離心機；Tcl-16 g臺式高速離心機；分光光度 計LG721,山東高密電子儀器廠；離心機IEC Centra CL2; 37 C恒溫 箱 NAPCO 5410 天平（1/10 萬）Sartorius ;打孔器，KW-trio 97AO。2方法與結果2.1分組與給藥實驗設正常組、Cy模型組、玉丹榮心丸組、玉丹榮心顆粒組，按 小鼠體重隨機分組，每組10只。正常組和Cy模型組每日經口灌胃蒸 餾水0.5 mL/次,玉丹榮心丸組和玉丹榮心顆粒組經口灌胃玉丹榮心 顆粒20 mg/（g d）,相當于臨床用量20倍。各組每

8、日給藥2次，連續(xù) 14 d,10 d起除正常組外，其它各組均皮下注射 Cy 40 mg/（kg d）1, 每日1次,共3d。2.2統(tǒng)計學方法米用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包。計量資料以一x士 s表示,組間比較米 用方差分析，以P0.05為有顯著性差異。2.3對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響各組經口灌胃給藥后第14無腹腔注射5%CRB懸液0.4 mL/ 只。8 h后將小鼠頸椎脫臼處死，仰位固定于鼠板上，腹部消毒，剪開 皮膚,0.9%氯化鈉溶液2.5 mL反復沖洗腹腔。然后將腹腔內液體全部 吸出，放入離心管中,1 000 r/min離心5 min。離心后留少許細胞懸液混勻,滴到載玻片上,3 min后

9、將多余液體沖掉，以丙酮-甲醇液（1 : 1）固定5 min,用姬姆薩染液染色3 min,晾干后油鏡觀察。每片計數(shù) 200個巨噬細胞，按下式計算巨噬細胞吞噬率與吞噬指數(shù)2。結果見 表1。表1玉丹榮心顆粒對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響（略）注：與Cy組比較,*P0.01（下同）吞噬率（）=吞噬CRBC的巨噬細胞數(shù)/200個巨噬細胞X100%吞噬指數(shù)=被吞噬的CRBC、數(shù)/200個巨噬細胞2.4對2,4-二硝基氯苯所致小鼠遲發(fā)性超敏反應的影響各組小鼠首次給藥后第 4天,用大寶化妝品有限公司生產的腋毛脫毛劑在小鼠頸部皮膚上涂抹,5.0% DNCB丙酮溶液20卩L/只致敏。給藥第10天起除正常組外，其

10、它各組均皮下注射Cy 40 mg/（kg d）,共3次。各組灌胃給藥后第14天,在小鼠右耳兩側均勻涂抹2.5% DNCB 丙酮溶液20卩L/只進行攻擊。24 h后，頸部脫位處死各組小鼠，用打 孔器（直徑7 mm在左右相同部位打下耳片,1/10萬天平稱重，以左右 耳片重量差（腫脹度）表示遲發(fā)型過敏反應的強度2。結果見表2。 表2玉丹榮心顆粒對DNCB所致小鼠遲發(fā)性超敏反應的影響（略）2.5對雞紅細胞致敏小鼠溶血素抗體生成的影響首次灌胃第4無各組小鼠腹腔注射5% CRB（懸液0.4 mL/ 只進行免疫。各組灌胃給藥后第14 d,摘眼球取血于離心管中，室溫下放置 1 h 后,2 000 r/min

11、離心（離心機 IEC Centra CL2）,10 min 后取血清。用生理鹽水稀釋100倍,取小鼠血清20卩L加生理鹽水1 980卩L配成2 mL,取稀釋血清1 mL,與5% CRBC懸液0.5 mL、10% 補體（豚鼠血清）0.5 mL混合，在37 C恒溫箱中保溫30 min后,0 C 冰箱30 min中止反應。離心，取上清液于分光光度計540 nm處比色， 另用生理鹽水代替血清做空白對照，取其上清液作為比色時調零的基 準。以光密度值作為血清溶血素的指標2。結果見表3。表3玉丹 榮心顆粒對CRB（致敏小鼠血清溶血素抗體生成的影響（略）3討論機體的免疫由特異性免疫和非特異性免疫所組成。 非特

12、異性免疫是特異性免疫的基礎，特異性免疫所產生的免疫物質又能增強非 特異性免疫的作用，因此,增強機體的非特異性免疫對提高機體的整個免疫功能意義重大。巨噬細胞是一類重要的免疫調節(jié)細胞，不僅能吞噬病原和異物，參與非特異性免疫反應，而且能分泌補體、酶和干擾 素等近百種生物活性物質，對NK細胞、B細胞進行雙向調節(jié)，激發(fā)T、 B淋巴細胞產生免疫應答，參與特異性免疫反應。雞紅細胞對鼠類是 一種較強的抗原性異物，當其被注入小鼠腹腔后，可引起腹腔巨噬細 胞聚集并吞噬，這是一項機體非特異性免疫功能的主要指標，因此可 用以檢測藥物對機體防御能力的影響。 血清溶血素測定是了解受試藥 物對動物特異性免疫功能影響的實驗，

13、溶血素水平反映了體液免疫能 力，溶血素的含量與機體體液免疫能力呈正相關。DNCB誘導的小鼠遲發(fā)型超敏反應是由特異性致敏效應 T細胞介導的細胞免疫反應，其中 的T細胞在排斥移植物抗宿主病、自身免疫和腫瘤免疫等方面起著關 鍵作用,是檢測細胞免疫功能的常用方法之一 2。本實驗結果表明,Cy組小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬率及吞噬指數(shù)、 遲發(fā)性超敏反應強度、血清溶血素水平均低于正常對照組，說明免疫 抑制模型小鼠造模成功。玉丹榮心顆粒組和榮心丸組，腹腔巨噬細胞的吞噬率及吞噬指數(shù)均高于 Cy模型組小鼠（P0.01）,血清溶血素也較 Cy模型組小鼠增加（P0.01）,說明玉丹榮心顆粒和玉丹榮心丸能明顯 提高Cy所致免疫功能低下模型小鼠的非特異性免疫功能，還可促進 小鼠特異性體液免疫。Cy模型組小鼠遲發(fā)型超敏反應明顯減弱，而玉 丹榮心顆粒和榮心丸組的耳腫脹程度超過正常水平（P0.01）,提示玉丹榮心顆粒能拮抗Cy降低的DTH顯著恢復免疫功能低下小鼠的遲發(fā) 型超敏反應。因此認為,玉丹榮心顆?？稍谝欢ǔ潭壬显鰪?Cy所致免 疫功