植物組織培養(yǎng)復習資料付答案僅供參考

1、植物組織培養(yǎng)復習材料一、名詞解釋。1植物組織培養(yǎng)（plant tissue culture）:植物的離體器官、組織或細胞在人工制備的培養(yǎng)基上進行無菌培養(yǎng)，并在人工控制的環(huán)境條件下，使其發(fā)育成完整植株的科學技術2、 脫分化（dedifferentiation）:指失去分裂能力的細胞回復到分生性狀態(tài)并進行分裂， 形成無分化的細胞即愈傷組織的現(xiàn)象。3、再分化（redifferentiation）:愈傷組織形成不定芽或不定根或胚狀體。4、 外植體（explant）:植物組織培養(yǎng)過程中從活體植株上切去下來的用于離體培養(yǎng)的一切材 料。（如器官、組織、細胞、原生質體、種子等）5、愈傷組 織（callus）:

2、原本指植物在受傷后于其傷口表面形成的一團薄壁細胞。在組培中， 則指人工培養(yǎng)基上由外植體形成的一團無序生長的薄壁細胞。6、器官發(fā)生：胚胎時期由胚層器官原基發(fā)育成器官的過程。包括細胞分化和器官形成。7、胚狀體發(fā)生：在植物細胞、組織或器官體外培養(yǎng)過程中，由一個或一些體細胞經(jīng)過胚胎發(fā) 生和發(fā)育過程，形成的與合子胚相類似的結構。可進一步發(fā)育成植株。&細胞全能性 （cell totipotency）:指植物的每一個細胞都攜帶有一完整的基因組，并具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。9、細胞分化:一個尚未特化的細胞發(fā)育出特征性結構和功能的過程。10、極性：細胞（也可指器官或植株）內的一端與另一端在形態(tài)結構和生理生化

3、上的差異。11、試管苗：通過組織培養(yǎng)產(chǎn)生的植株。12、看護培養(yǎng)：是指用一塊活躍生長的愈傷組織來看護單個細胞，使其持續(xù)分裂和增殖的一種 培養(yǎng)方法。這塊愈傷組織被稱為看護組織。13、固相化培養(yǎng):將細胞或原生質體固著在瓊脂糖、藻（月元）酸鹽或多聚賴氨酸中，然后將 他們放入液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)。這種培養(yǎng)方法既利用了振蕩培養(yǎng)室營養(yǎng)物質和氣體易于交換 的優(yōu)點，有利用了固相化使細胞免受振蕩時剪切力的作用。14、懸浮細胞培養(yǎng)：將單個游離細胞或小細胞團在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)增值的技術。適用于 大規(guī)模的培養(yǎng)，使細胞工程的基本平臺。15、 植板效率=（每個平板中新形成的細胞團數(shù)/每個平板中接種的細胞數(shù)） *1001

4、6、 實驗室的組成及功能：1.基本實驗室（1）準備室（2）接種室 （3）培養(yǎng)室2. 輔助實驗室 （1）細胞學實驗室（2）攝影室及暗室（3）生化分析室（無菌操作室、化學實驗室、培養(yǎng)室、細胞學觀察室、暗室）。17、植物種質：物親代通過生殖細胞或體細胞傳遞給后代的遺傳物質，植物種質資源即為攜帶 各種不同遺傳物質的植物總稱。18、玻璃化現(xiàn)象：指試管苗的一種生長失調癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的 嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。19、 基本培養(yǎng)基：包括大量元素和微量元素（無機鹽類）、維生素和氨基酸，還有糖和水等。20、完全培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基基礎

5、上，根據(jù)各種不同試驗要求，添加各種植物生長調節(jié)物質 以及其他復雜有機附加物，包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。21、 外植體褐變：在組織培養(yǎng)過程中，外植體向培養(yǎng)基中釋放褐色的物質（醌類）致使培養(yǎng) 基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也隨之變成褐色而逐漸死亡的現(xiàn)象。22、微體快繁：利用植物組織培養(yǎng)技術進行的一種營養(yǎng)繁殖方法。23、 微體嫁接：把極小（小于0.2mm）的莖尖作為接穗嫁接到實生木上，然后將嫁接后的砧木 接種到新培養(yǎng)基上培養(yǎng)。24、敏感植物：有些植物對病毒極為敏感，一旦感染病毒就會在其葉片乃至全株上表現(xiàn)特殊的 病斑，如馬鈴薯病毒一千日紅、黃煙花、心煙葉、毛葉蔓陀羅。菊花病毒一矮牽牛。25、固相

6、化的方法：凝膠包埋、表面吸附、網(wǎng)格及泡沫固定、膜固定。26、懸浮細胞培養(yǎng)：將單個游離細胞或小細胞團在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)增殖的技術。27、 固相化細胞培養(yǎng)：把細胞固定在一種惰性基質，如瓊脂、藻鹽酸、聚丙烯酰胺、纖維或膜 上面或里面，細胞不能運動，而營養(yǎng)液可以在細胞間流動，供應其營養(yǎng)。28、 條件培養(yǎng):在選用的培養(yǎng)基中，加入一定量以生長過組織或細胞的培養(yǎng)液（離心去除組織 或細胞）稱條件培養(yǎng)液。用條件培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞，即使接種的細胞密度低于最低有效密度，這 些細胞也能生長和分裂。30、再分化培養(yǎng)：31、液體培養(yǎng):指在進行培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中不加瓊脂等凝固劑，一般需要通過振蕩等方法解決 培養(yǎng)基的通氣情況。

7、32、細胞培養(yǎng):指從植物體中分離了單細胞，無人工條件下進行培養(yǎng)，使其生長增殖，甚至發(fā) 育成完整植株的技術。33、無病毒苗：指不含該種植物主要危害病毒的苗木。34、原生質體融合：指使分離下來的不同親本的原生質體，在人工控制的條件下，像性細胞受 精作用那樣互相融合成一體，又稱體細胞雜交。35、胚狀體：體細胞在一定條件下所誘導形成的胚稱為體細胞胚，即胚狀體36、 原生質體：指去掉細胞壁的由質膜包裹有生命活力的裸細胞。37、單倍體植株：只含有配子體染色體組數(shù)的植株。38人工種子：指通過組織培養(yǎng)技術，將植物的體細胞誘導在形態(tài)上和生理上均與合子胚 相似的體細胞胚，然后將它包埋于有一定營養(yǎng)成分和保護功能的介

8、質中，組成便于播種 的類似種子的單位。39、 離體授粉：將未授粉的胚珠或子房從母體上分離下來，進行無菌培養(yǎng),并以一定的方式授以無菌花粉，使之在試管內實現(xiàn)受精的技術 ，又稱為離體受精或試管受精40、植物生長調節(jié)劑：植物中調節(jié)生長及其他功能的激素類物質。主要分為三類：植物生長素 類、細胞分裂素類和赤霉素類。41、器官培養(yǎng):指植物的根、莖、葉、花器和幼小果實的無菌培養(yǎng)。42、植物胚胎培養(yǎng)：指對植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培養(yǎng)。二、不定項選擇（每題2分，共10分）1、下列不屬于生長素類的植物激素是_ _AD。A Kt; B IAA ; C NAA ; D ZT2、影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_ _ABCD

9、。A瓊脂的質量好壞； B高壓滅菌的時間；C高壓滅菌的溫度；D培養(yǎng)基的PH3、第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是：BA Morel ; B Haberland ; C Schleiden ; D White4、下列不屬于大量元素的鹽是 C。A NH4 NO 3 ; B KNO 3 ； C Zn SO 4 .7HO 2； D MgSO 4 .7HO 25、下列實驗中可能獲得單倍體植株的是BC 。A小麥的莖尖培養(yǎng)；B番茄花藥培養(yǎng)；C玉米胚乳培養(yǎng)；D玉米花粉培養(yǎng)6、 活性炭在組織培養(yǎng)中的作用有ABC。A吸附有毒物質；B減少褐變，防止玻璃化；C創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長

10、；D增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分7、 下列具有細胞全能性的細胞是：_ ABCD 。A成熟的老細胞；B幼嫩的組織細胞；C愈傷組織細胞D番茄的受精合子8、 下列培養(yǎng)基中 C _無機鹽的濃度最低。A MS培養(yǎng)基；B B 培養(yǎng)基； C White 培養(yǎng)基；D N6 培養(yǎng)基9、 從單個細胞或一塊外植體形成典型的愈傷組織，大致經(jīng)歷 ACD_三個時期。A誘導期；B潛伏期；C分化期；D分裂期10、植物組織培養(yǎng)的特點是 _ ABCD_:A培養(yǎng)條件可人為控制；B生長周期短，繁殖率高；C管理方便；D取材少11、 高溫易被破壞分解的植物激素是ABD_。A IAA ； B GA ； C NAA ； D Zt12、 同一植株下列B

11、_部位病毒的含量最低。A葉片細胞；B莖尖生長點細胞；C莖節(jié)細胞；D根尖生長點細胞13、 在原生質體的培養(yǎng)中，滲透穩(wěn)定劑的作用是-&-:A穩(wěn)定原生質體的形態(tài)而不使其被破壞B支持作用C提供營養(yǎng)D調節(jié)PH值14、 下列實驗中不可能獲得單倍體植株的是AC。A水稻莖尖培養(yǎng)；B草莓花藥培養(yǎng)；C玉米葉片培養(yǎng)；D棉花胚乳培養(yǎng)15、 適合花粉培養(yǎng)的最適時期是-B-:A單核早期B單核靠邊期 C二核期D三核期16、 IAA需要用_ C法滅菌。A灼燒滅菌；B干熱滅菌；C過濾滅菌 D高壓濕熱滅菌17、 能打破種子休眠，促進種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)的激素是-AB-:A GA ； B IAA ； C NAA ； D ZT

12、18、 下列實驗中可能獲得單倍體植株的是_ BCD 。A小麥的莖尖培養(yǎng)；B番茄花藥培養(yǎng)；C玉米胚乳培養(yǎng)；D玉米花粉培養(yǎng)19、 下面屬于處于愈傷組織分裂期的特征是_ ABC _。A細胞分裂加快B正在分裂的細胞體積小，內無液泡C細胞的核和核仁增至最大D細胞中的RNA含量減少，而 DNA含量保持不變20、 赤霉素（GA ）需要用C法滅菌。A灼燒滅菌；B干熱滅菌；C過濾滅菌 D高壓濕熱滅菌21、 第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是_B :A Morel ； B Haberland ； C Schleiden ； D White22下列那種方法不能脫除感染植株體內的病毒AC 莖段培養(yǎng)； 微

13、莖尖培養(yǎng)； 愈傷組織的繼代培養(yǎng)； 珠心胚培養(yǎng)23 .適合外植體材料表面消毒的方法是B 高壓蒸汽； 適宜濃度的消毒劑浸泡；紫外線消毒；熏蒸消毒24、 經(jīng)高溫滅菌后。培養(yǎng)基的pH會 AA降低 B 升高 C 不變 D不能確定25、 在植物組織培養(yǎng)中，培 養(yǎng)基 的PH值一般為 BA 低于 5.0 B 5.5 5.8 C 6.0 7.0 D 高于 7.026、 下列有關細胞全能性的含義，正確的是CA每個生物體內的所有細胞都具有相同的功能B生物體內的任何一個細胞可以完成該個體的全部功能C生物體的每一個活細胞都具有發(fā)育成完整個體的潛能D生物體的每個細胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程27、

14、下列那種方法不能脫除感染植株體內的病毒（AC ）A莖段培養(yǎng)；B微莖尖培養(yǎng)。C愈傷組織的繼代培養(yǎng)；D珠心胚培養(yǎng)。28、下列不屬于生長素類的植物激素是AA6-BA ; B IAA ;C NAA;D IBA三、填空題（每空1分，共20分）1、 去除植物病毒的主要方法是 _組培法和_理化法兩種方法，當把二者結合起來脫 毒效果最好。2、 原生質體的融合可實現(xiàn) 體細胞的雜交，其融合的方式分為_自然融合 和一人工 誘導融合_兩類。3、 在組織培養(yǎng)中，非洲菊是靠_叢生芽 _ 的方式進行繁殖的，而蝴蝶蘭是以 原球莖 增殖_的方式進行快繁的。4、 單細胞培養(yǎng)的方法主要有-看護培養(yǎng)-、-微室培養(yǎng)-及-平板培養(yǎng)-。5

15、、在通過微莖尖培養(yǎng)脫毒時，外植體的大小應以成苗率和脫毒率綜合確定，一般以0.3 0.5mm、帶1 2個葉原基為好。6、 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過程中是否需要光，可分為 光培養(yǎng)和暗_培養(yǎng)。7、 細胞的再分化有 -器官發(fā)生-和-體胚發(fā)生-兩種形式。8、 連續(xù)培養(yǎng)有-濁度恒定法-和-化學恒定法-兩種方法。9、 通過莖尖培養(yǎng)脫毒苗的過程中，切取莖尖的大小與其成活率成正比_，而與脫毒效 果成反比 。10、 一個已停止分裂的成熟細胞轉變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)，并形成 未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為”脫分化。11、 植物的胚胎培養(yǎng)，包括 胚_培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)以及離體授粉的。12、 在組織培養(yǎng)中，IAA、ZT

16、和GA必須用 過濾滅菌法滅菌，而接種室空間采用紫外線照射_或甲醛熏蒸_法滅菌。13、 幼胚培養(yǎng)時，其發(fā)育過程有早熟萌發(fā)_、_ _呸性發(fā)育 、形成愈傷 三種方式。14、 原生質體的分離有機械法_和_酶降解法 兩種方法。15、 莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為_普通莖尖培養(yǎng)培養(yǎng)和_莖尖分生組織_ 培養(yǎng)兩種類型。16、 花藥培養(yǎng)是器官培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬于_細胞培養(yǎng)，但二者的培養(yǎng)目的一樣，都是要誘導花粉細胞發(fā)育成單倍體細胞，最后發(fā)育成單倍體植株_。17、不同的滅菌劑其滅菌的機理一般不一樣，次氯酸鈣和次氯酸鈉都是利用分解產(chǎn)生CIO- 來殺菌的；升汞是靠 _重金屬 來達到滅菌目的。18、 一個已停止分裂

17、的成熟細胞轉變?yōu)開分生狀態(tài)，并形成_未分化的愈傷組織 的 現(xiàn)象稱為脫分化”。19、 White 培 養(yǎng)基_ _ _無機鹽濃度低，適合生根培養(yǎng)。20、 在無毒苗的組織培養(yǎng)中，外植體的大小與其成活率成正比，而與脫毒效果成反比。21、 由胚乳培養(yǎng)可以獲得_單_倍體植株，經(jīng)秋水仙素處理可以獲得 二_倍體植株。22、 使單倍體植株染色體加倍的途徑主要有-自然加倍-、-人工加倍-和-通過愈 傷組織再生加倍。23、 細胞懸浮培養(yǎng)有一成批培養(yǎng)-和-連續(xù)培養(yǎng)-兩種類型。24、 通過植物組織培養(yǎng)獲得無病毒苗的方法主要有-莖尖分生組織培養(yǎng)-、-愈傷組 織培養(yǎng)-、-珠心胚培養(yǎng)-及-花藥培養(yǎng)-。25、 植物組織培養(yǎng)按培

18、養(yǎng)對象分為-器官培養(yǎng)-、-組織或愈傷組織培養(yǎng)-、-細胞 培養(yǎng)-、-植株培養(yǎng)-_等幾種類型。26 1902年德國植物生理學家 Haberlandt第一次提出植物細胞全能性 的理論概念；1943年White提出植物細胞“_全能性”學說，并出版了植物組織培養(yǎng)手冊，從而使植 物組織培養(yǎng)成為一門新興的學科。27、 細胞全能性是指植物的每個細胞都具有該植物的-全部遺傳信息-_和-發(fā)育成完整 植株-的潛在的能力。28、 6-BA / NAA 的高低決定了外植體的發(fā)育方向，比值低時促進根的生長，這時_脫分化_占主導地位；比值高促進芽_的生長，這時 再分化占主導地位。29、 在組織培養(yǎng)中，不耐熱的物質用過濾滅菌

19、法滅菌，而培養(yǎng)基常用 _濕熱滅菌_法滅菌。30、 組織培養(yǎng)中有三大不易解決的問題，它們分別是_污染、褐變、_玻璃化。31、 愈傷組織的形態(tài)發(fā)生有 _器官形態(tài)建成 _和_胚形態(tài)建成兩種情況。33、在組織培養(yǎng)中，IAA和GA必須用過濾_法滅菌，而接種室空間采用_ 70%的酒精 或 2%新潔爾滅噴霧或甲醛熏蒸法滅菌。36、根據(jù)培養(yǎng)的材料，植物組織培養(yǎng)分： _愈傷組織培養(yǎng) _、器官培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質培養(yǎng)等類型。37、 組織培養(yǎng)植株再生的途徑：直接產(chǎn)生不定芽 _和_通過愈傷組織形成不定芽38、植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個階段：_萌芽階段 _、奠基階段_ _和快速發(fā)展和應用階段階段。40、外植體污染原因

20、從病源分面主要有真 和細菌兩大類41、 糖在植物組織培養(yǎng)中是不可缺少的，它不但作為離體組織賴以生長的碳源，而且還能維持 培養(yǎng)基滲透壓42、 外植體滅菌一般先用 酒精 ，再用 升汞浸泡43由愈傷組織后成大致經(jīng)歷 誘導期、分裂期、分化期、三個時期。由愈傷組織再生植株有兩條途徑禾口45、常用的生長素有 IAA、 2, 4-D 、IBA NAA 等，常用的細胞分裂素KT 、ZT 、6-BA46、 防褐變的措施： 選取適宜的外植體和培養(yǎng)條件 、剪切時盡量減少傷口面積、剪切口盡量平整、連續(xù)轉移（繼代培養(yǎng)） 、加入抗氧化劑47、 植物常用脫毒方法：熱處理脫毒原理、莖尖培養(yǎng)脫毒原理、化學藥劑處理冷處理原理、原

21、生質體，愈傷組織培養(yǎng)法、花藥培養(yǎng)、株心胚培養(yǎng)脫48、實驗室必須滿足三個基本的需要：_ 試驗準備 _、_ 無菌操作 、_控制培養(yǎng) _。49植物組織培養(yǎng)的難題是褐變 、 玻璃化 和 污染及變異現(xiàn)象50植物組培獲得單倍體植株的方法是進行,而獲得三倍體的方法是進行 52、 生長素與細胞分裂素比值高有利根生長，比值低有利芽 生長，比例合適誘導愈傷組織53、 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)半固四、判斷題（對的畫 “v；錯題畫“X?！泵款}1分，共5分）1、2 , 4 D可用0. 1mol / L的HCI助溶，再加蒸餾水定容。（x ）2、幼年細胞和組織比成年細胞和組織誘導愈傷組織容易。（

22、 V ）3、在MS的培養(yǎng)基成分中，MgSO4 7HO屬于微量元素。（ x ）4、 一般來說，光照強度較強，幼苗容易徒長，光照強度較弱幼苗生長粗壯。（x ）5、由性細胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚。（x ）6、 一個已分化的細胞若要表現(xiàn)其全能性，首先要經(jīng)歷脫分化過。（ V ）7、 由性細胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚。（x ）8、 用于外植體、手、超凈臺等的表面消毒酒精濃度越大，消毒效果越好越好。（x ）9、 經(jīng)過花藥培養(yǎng)所獲得的植株都是單倍體。（x ）10、 幼嫩的組織比成熟的老組織脫分化難。（x ）11、 通過子房的培養(yǎng)，即可能等到單倍

23、體植株，也有可能得到二倍體植株。（V ）12、 蘭花可以通過芽叢分離的組培途徑快繁，非洲菊通過原球莖增殖的途徑快繁。（x ）13、 單細胞培養(yǎng)可以采用發(fā)酵罐進行培養(yǎng)。（x ）1 4、6-BA可用0.1mol /L的HCI助溶，再加蒸餾水定容。（ V ）15、環(huán)境的相對濕度過低易使培養(yǎng)基喪失大量水分，濕度過高時，則易造成污染。（V ）16、 一個已分化的細胞若要表現(xiàn)其全能性，首先要經(jīng)歷脫分化過程。（V ）17、 環(huán)境的相對濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，一般要求80 % -90 %的相對濕度。（V ）18、通過花藥培養(yǎng)，即可能等到單倍體植株，也有可能得到二倍體、三倍體甚至更多倍體 植株。（V ）1

24、9、 單體細胞比二倍倍體細胞容易誘導愈傷組織。（x ）20、 固體培養(yǎng)基可加進活性炭來增加通氣度，以利于發(fā)根。（x ）21、2 , 4-D可用0 . 1mol / L的NaOH 或KOH助溶，而后加無菌水定容。 （ V ）22、 某些植物通過愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無病毒苗（V ）23、 細胞分裂素/生長素的比值較高時，禾U于愈傷組織和芽的誘導X24、 細胞的全能性，可以通過成熟細胞的脫分化和再分化過程體現(xiàn)V25、 鐵鹽，常用乙二胺四乙酸鐵螯合物，以防被氧化為不溶的氫氧化鐵.V26. 用莖尖分生組織脫毒培養(yǎng)時，莖尖外植體大小與脫毒效果成反比。X30對于含有瓊脂糖的培養(yǎng)基而言，在pH值高于6.5時，

25、培養(yǎng)基不能很好地凝固；低于5.0時，培養(yǎng)基會變硬.X31由性細胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚X五、簡答題（每題5分，共15分）1、培養(yǎng)基-些基本成分 ？答：培養(yǎng)基的成份有：（1）無機營養(yǎng)：包括：氧（0）、碳（C）、氫（H）、氮（N）、鉀（K）、磷 （P）、鎂（Mg）、硫（S）和鈣（Ca）等大量元素；鐵（Fe ）、銅（Cu）、鋅（Zn ）、錳（Mn ）、鉬（Mo ）、硼（B ）、碘（I ）、鈷（。0）、氯（CI）、鈉（Na ）等微量元素（2）有機營養(yǎng)： 氨基酸、天然提取物、維生素、糖類（3）植物生長調節(jié)物質：主要包括生長素類和細胞分裂素類。（4）其他：包括水、活性炭、

26、瓊脂等。2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎樣滅菌？答：培養(yǎng)基一般采用濕熱滅菌，如果培養(yǎng)基中的有些成分高溫易分解，則可采用過濾滅菌.培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌或干熱滅菌。植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌，具體操作如下:（1）外植體的預處理，對植物組織進行修整，去掉不需要的部分，并將外植體用流水沖洗 干凈。（2）用70%勺酒精浸潤材料30s左右。（3）用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時不時攪動，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過程中加入數(shù)滴吐溫，則滅菌效果更好。（4）植物材料用無菌水沖洗 3-5次，以除去滅菌劑。3、提咼商品化生產(chǎn)效率：1. 節(jié)約能源2.減少勞務開支3.擴大生產(chǎn)規(guī)模4.節(jié)約生產(chǎn)材料補：降低商

27、業(yè)化生產(chǎn)成本提高經(jīng)濟效益：4、針對試管苗生產(chǎn)所需的費用，應采取相應措施降低生產(chǎn)成本，增強產(chǎn)品競爭力，提高 試管苗經(jīng)濟效益。5、誘導體胚的條件：1.外植體：產(chǎn)生部位：尤其胚、下胚軸、幼根、花序軸組織、未 成熟的子房等；生理狀態(tài)：采用外植體增殖能力較強時候的狀態(tài)；基因型。2. 培養(yǎng)基：特別重要的是培養(yǎng)基中的生長素和N源。N源：還原態(tài)氮/硝態(tài)氮適宜比值。3. 生長調節(jié)劑：生長素：所有生長素中，2,4-D被證明是極有效的。體胚發(fā)生2個階段：胚的分化，胚性細胞的形成（需2,4-D ）;胚狀體的發(fā)育（低或去除2,4-D ）。2,4-D會誘導乙烯的產(chǎn)生，導致纖維素酶等活性升高，引起胚性細胞團的破壞。 細胞分

28、裂素：細胞分裂素與生長素配合促進誘導體胚形成。 赤霉素和脫落酸：GA ABA抑制體胚形成，但 ABA可促進胚狀體的正常發(fā)育，防止畸形胚的產(chǎn) 生，尤其是對體胚成熟特別重要。細胞再分化：是指脫分化的分生細胞重新恢復分省能力，沿著正常的發(fā)育途徑形成具有特定結構和功能的細胞。6、組培實驗室的組成，基本設備和功能答：組織培養(yǎng)實驗室基本組成：（1）無菌操作室 （2）化學實驗室（3）培養(yǎng)室 （4）細 胞學觀察室 （5）暗室 （6）馴化移栽室； 無菌操作室基本設備有超凈工作臺、紫外燈、小擱 架。無菌操作用的器具，主要進行無菌操作；化學實驗室基本設備有干燥箱、電子天平、量筒、 吸管、燒杯、高壓滅菌裝置等，主要用

29、于配置好培養(yǎng)基；培養(yǎng)室設備有固定式培養(yǎng)架、旋轉式 培養(yǎng)架、轉床、搖床、控溫、控光設備，是將接種到試管等的培養(yǎng)材料進行培養(yǎng)生長的場所。 細胞學觀察室有顯微鏡、解剖鏡、及照相設備，用于觀察，記錄培養(yǎng)材料的生長情況及結果； 暗室用于實驗室材料的攝影記錄，有放大機、暗箱、上光機等設備；馴化移栽室用于試管苗移 栽，有彌霧裝置、遮陰網(wǎng)、移植床等。7、培養(yǎng)基的配制答：配制培養(yǎng)基時應做好下列準備工作：（1）實驗用具的準備 （2）試劑、藥品的準備 （3）根據(jù)培養(yǎng)基的配方、母液擴大倍數(shù)及需要配制的培養(yǎng)基體積計算所需的各種母液及其他附加物 的量。具體操作如下：1,取規(guī)定數(shù)量糖原和凝固劑，加熱使之溶解2，根據(jù)計算所需

30、量依次加入大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物、生長調節(jié)物質母液及其他特殊附加物，攪拌均勻3，加水定容至規(guī)定體積8、無菌操作技術答：無菌操作技術分為物理滅菌一干熱、濕熱、射線處理，物理除菌一過濾，化學方法一消毒劑、抗菌素滅菌。注意事項：（1）瓶口要清洗干凈（2 ）培養(yǎng)瓶上的標記要擦凈（3）冬季用熱水溶解洗衣粉后再洗（4）洗過玻璃器皿要瀝干或烘干（5）移液管之類的量具和計量儀器不直接烘烤。實驗室一般使用高壓滅菌鍋，是在0.105mpa壓力下，鍋內溫度達到 121C,在此水蒸氣溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。9、熱處理脫毒法答：原理：（1）高于正常溫度的環(huán)境 （35C 40C）時，組織

31、內部的病毒部分或全部鈍化（2）熱處理使病毒失去傳染力。方法：1，適用于離體材料和休眠器官的處理。在50C左右溫水浸漬10min至數(shù)小時2，熱空氣法：盆栽植物移入溫熱療室，3540C，適合莖尖，處理時間短則幾十分鐘，長可達數(shù)月。局限性：1并非所有的病毒都對熱處理敏感2延長熱處理時間，也可能會鈍化，植物組織中的抗性因子3處理后只有一小部分植株能存活。10、快繁中幾大難題及解決方法答：影響快繁的方法有內因有外因。因主要是外植體的選取，應該在春夏、早秋時根據(jù)外植體 基因型和生理、發(fā)育等方面選取0.51cm的。外因，首先是污染，防止污染應從以下幾方面考慮：（1）選擇植物材料（2）嚴格消毒滅菌（3）合理安

32、排繁殖程序（4）規(guī)范操作2，褐變問 題，克服外植體產(chǎn)生褐變的措施有（1）選擇適合的外植體和培養(yǎng)條件（2）連續(xù)轉移（繼代培養(yǎng)）（3）加入抗氧化劑；3，玻璃化，控制和克服玻璃化的措施有（1）使用透氣好的封口材料（2）光照 （3）溫度 （4）提高瓊脂的量（5）硝態(tài)和氨態(tài)的比例提高（6）繼代培養(yǎng)時，降低ck/IAA，增加乙烯醇等（7）抗逆性的鍛煉。原球莖：縮短的呈珠粒狀的，由胚性細胞組成的，類似嫩莖的器官11、植物組織培養(yǎng)的應用及意義：理論研究（在遺傳、生理、生化、病理等研究上的應用）；快繁；脫毒；遺傳育種（單倍體育種、突變育種、抗性選育、體細胞雜交）；次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)（主要用于藥物、食品、調料、 香

33、精、顏料等領域）；種質資源保存和交換；人工制種。13、植物遺傳轉化的方法：1. 通過載體系統(tǒng)：病毒、細菌質粒2.非載體介導：種質系統(tǒng)（自身生殖系統(tǒng)細胞，如花粉）、 直接轉化系統(tǒng)（基因槍、超聲波）。14、原生質體融合的原理和方法答：植物原生質體最大特性是去掉細胞壁的裸細胞無論來源如何都具有彼此融合的能力1.自發(fā)融合2.誘發(fā)融合：a，NaNO處理b，高PH值一高濃度鈣離子處理 c ,聚乙二醇（PEG處理d， 電融合3.化學融合15、外植體消毒應注意的問題：1. 要考慮藥劑對各類菌類的殺滅效果，從中選出最有效的殺菌劑；2.考慮植物材料對殺菌劑的忍耐力。17、快繁的基本程序：1. 穩(wěn)定無菌培養(yǎng)體系的建

34、立時期；2.穩(wěn)定培養(yǎng)系的增殖、生長和健壯時期；3.誘導莖芽生根形成小苗時期；4.生根小苗移栽和馴化時期；5.商品苗培育時期。18、植物離體快繁中常見的問題：污染、遺傳穩(wěn)定性、玻璃化、褐化、黃化等19、克服外植體褐變：選取適宜的外植體和培養(yǎng)條件；剪切時盡量減少傷口面積，剪切口盡量平整；連續(xù)轉移（繼代培養(yǎng)）；加入抗氧化劑。20、玻璃化苗產(chǎn)生原因：乙烯過飽和，引起解氨酶活性降低，阻礙木質化進程；細胞激動素或銨離子的過剩也是一 種原因；植物的磷酸戊糖代謝途徑與玻璃苗產(chǎn)生也有關。22、控制玻璃化苗的措施：1. 使用透氣性好的封口材料，盡可能降低培養(yǎng)容器中空氣的濕度，改善氧氣的供應情況。2.選擇合適的激素

35、種類和濃度，注意生長素和分裂素的配合，盡量兼顧繁殖系數(shù)。3.采用固體培養(yǎng)基，適當增加瓊脂含量，降低培養(yǎng)基中的水勢。4.高溫季節(jié)培養(yǎng)室要有降溫措施，避免培養(yǎng)基溫度的突然升高。5.改變供氮形態(tài)。6.在培養(yǎng)基中適量地添加間苯三酚或根皮苷、青霉素G鉀、活性炭、聚乙烯醇均可以有效的抑制玻璃苗的產(chǎn)生。7.適當?shù)匮娱L光照培養(yǎng)皿的時間或增加自然光照，提高光照的強度，有利于克服玻璃化。8.適當提高培養(yǎng)基中無機鹽的含量。1123、不定芽與體胚芽比較：1）體細胞胚最根本的特征是具有兩極性（2）體胚的維管組織與外植體的該組織無解剖結構上的聯(lián)系，而不定芽或不定根往往總與愈傷組織的維管組織聯(lián)系（3）體細胞胚維管組織的分布

36、是獨立的“ Y”字形，而不定芽的維管組織無此現(xiàn)象。24、莖尖培養(yǎng)脫毒的原理：1. 病毒在植物體內分布不均勻，越接近頂端分生組織，病毒濃度越?。?.病毒DNA分子與細胞分裝蛋白質合成競爭，在迅速合成的植物細胞中正常合成的蛋白質占優(yōu)勢；3.病毒的復制趕不上細胞分裂的速度。關鍵：通常莖尖培養(yǎng)脫毒的效果與莖尖的大小呈負相關，與成活率呈正相關。操作程序：外植體表面滅菌，在解剖鏡下，經(jīng)無菌操作切取小莖尖，接種到備用培養(yǎng)基 土培養(yǎng)，并及時觀察記錄培養(yǎng)結果25、在植物組織培養(yǎng)中細胞分裂素和生長素各有什么作用？答：生長素能促進細胞的縱向伸長，它的作用具有兩重性：既促進生長，又能抑制生長、甚至殺死植物；既促進發(fā)芽

37、，又會抑制發(fā)芽；既能防止落花落果，又可疏花疏果。這取決于濃度、細胞的年齡和器官的種類。一般低濃度促進生長，中濃度抑制生長，高濃度則殺死植物。細胞分裂素能促進細胞分裂和擴大、延遲衰老和保鮮、誘導芽的分化、促進側芽發(fā)育，防止果樹生理落果、打破種子的休眠，促使其發(fā)芽等作用。26、什么是看護培養(yǎng)？其具體的方法是什么？答：看護培養(yǎng)指用一塊生長活躍的愈傷組織來看護單個細胞或其他培養(yǎng)物，使其生長和增 殖的方法。具體方法：1、將生長活躍的愈傷組織放入滅過菌的固體培養(yǎng)基上，并在愈傷組織上放一片 無菌濾紙片。2、將該愈傷培養(yǎng)過夜。3、將單細胞或其他培養(yǎng)物放于濾紙片上面，移入培養(yǎng)室培養(yǎng)。27、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物

38、材料通常怎樣滅菌 答：植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌，具體操作如下:1、外植體的預處理，對植物組織進行修整，去掉不需要的部分，并將外植體用流水沖洗干凈。2、用70%勺酒精浸潤材料30s左右。3、用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時不時攪動，使植物材 料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過程中加入數(shù)滴吐溫，則滅菌效果更好。4、植物材料用無菌水沖洗3-5次，以除去滅菌劑。培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌，培養(yǎng)器皿也可采用干熱 滅菌，有些培養(yǎng)器械也可采用灑精燈火焰灼燒。29、NAA的中文名稱是什么？有何作用和特點？答：NAA的中文名稱是荼乙酸，是植物生長素的一種。作用和特點為：促進植物細胞縱向伸長，促進植物細胞脫分化，促

39、進根的生長。除此以外還具有植物生長素類有一般性質：它的作用具有兩重性：既促進生長，又能抑制生長、甚至殺死植物；既促進發(fā)芽，又會抑制發(fā)芽；既能防止落花落果，又可疏花疏果。這取決于濃度、細胞的年齡和器官的種類。一般低濃度促進生長，中濃度抑制生長，高濃度則殺死植物30、實驗室設備：1.恒溫箱、生化培養(yǎng)箱、光照培養(yǎng)箱、人工氣候箱和植物生長箱2. 烘箱3.空調、加熱器 4.滅菌設備5.冰箱和冰柜6.振蕩和旋轉培養(yǎng)機7.天平8.酸度計9.顯微鏡10水浴鍋11.蒸餾水制造裝置12.超凈工作臺31、無菌操作技術：1.常用滅菌方法及其使用范圍（濕熱滅菌、干熱滅菌、過濾滅菌、射線滅菌、藥劑滅菌）2. 培養(yǎng)基滅菌3

40、.植物材料的滅菌4.接種15、培養(yǎng)基的制備：1.母液的配制與保存 2.培養(yǎng)基的配制3.培養(yǎng)基的滅菌 4.培養(yǎng)基的保存32、培養(yǎng)基的制備：1.母液的配制與保存 2.培養(yǎng)基的配制3.培養(yǎng)基的滅菌 4.培養(yǎng)基的保存33、高壓蒸汽滅菌鍋操作程序：將分裝好的培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋的消毒桶內，滅菌鍋內添加適量的水，蓋好滅菌鍋 蓋，對角擰緊螺絲；檢查一下放氣閥有無故障，然后關閉放氣閥，打開電源加熱，當壓力表指 針達0.05mpa時，打開氣閥，排出鍋內空氣，再關閉氣閥，此時鍋內取而代之的是水蒸氣，當 高壓鍋內溫度達121C，壓力為0.105mpa時保持此壓力滅菌約 1520min，然后切斷電源，緩緩 打開放

41、氣閥放氣，待高壓鍋壓力表指針恢復到零后，開啟壓力鍋并取出培養(yǎng)基，室溫下冷卻。34、為什么要有一定的細胞起始濃度？答：細胞能夠合成某些對進行分裂所必須的化合物，只有當這些化合物的內生濃度達到一 個臨界點以后，細胞才能進行分裂，當細胞密度處于臨界點密度以下是永遠達不到這種平 衡狀態(tài)，因此細胞也就不能分裂。22、體細胞雜交按所用親本原生質體的性質可分為3類：體細胞雜交（用雙親體細胞原生質體或其衍生系統(tǒng)進行誘導融合 ）；配子間細胞雜交（用雙親的性細胞原生質體作為融合親本進行融合、培育、篩選、鑒定等過程）；配子和體細胞雜交（一個融合親本為性細胞原生 質體，另一個為體細胞原生質體間的雜交過程）。35、 體

42、細胞雜交按所用親本原生質體的性質可分為3類：體細胞雜交（用雙親體細胞原生質體或其衍生系統(tǒng)進行誘導融合）；配子間細胞雜交（用雙親的性細胞原生質體作為融合親本進行融合、培育、篩選、鑒定等過程）；配子和體細胞 雜交（一個融合親本為性細胞原生質體，另一個為體細胞原生質體間的雜交過程）。36、固相化細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：1.有利于次級代謝產(chǎn)物的積累；2.細胞經(jīng)包埋后，可以減小剪切力的損傷，有利于產(chǎn)物合成和分泌；3.有利于進行連續(xù)培養(yǎng)和生物輕化等。37、簡述植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)？植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是細胞全能性學說，即植物體的每一個細胞都攜帶有一套完整的 基因組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。38、植物

43、組織培養(yǎng)有哪些特點？1 ）培養(yǎng)條件可以人為控制（2）生長周期短，繁殖率高：（3）管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制：39、 培養(yǎng)基的種類？太多了自己去書上找40、植物組織培養(yǎng)主要應用于哪些方面？1）快速繁殖 運用組織培養(yǎng)的途徑，一個單株一年可以繁殖幾萬到幾百萬個植株；（2 ）種苗脫毒 針對病毒對農(nóng)作物造成的嚴重危害，通過組織培養(yǎng)可以有效地培育出大量的無 病毒種苗；（3）培育和創(chuàng)制新品種利用組織培養(yǎng)可以使難度很大的遠緣雜交取得成功，從而育成一些罕見的新物種；（4 ）大量生產(chǎn)次生代謝物質 通過植物細胞培養(yǎng)獲得的生物堿、維生素、色素、抗生素以及抗 腫瘤藥物不下 50多個大類，其中已有 30多種次生物質的含量在人工培養(yǎng)時已達到或超過親本 植物的水平。植物細胞次生物質的研制與生產(chǎn)碩果累累，后來居上。（5） 植物種質資源的離體保存植物組織培養(yǎng)結合超低溫保存技術，可以給植物種質保存帶來 一次大的飛躍。因為保存一個細胞就相當于保存一粒種子，但所占的空間僅為原來的幾萬分之一，而且在-193度的液氮中可以長時間保存，不像種子那樣需要年年更新或經(jīng)常更新。（6） 人工種子人工種子便于貯藏和運輸，適合機械化播種；繁殖速度快，不受季節(jié)和環(huán)境限制，利于工廠化生產(chǎn)；體細胞胚由無性繁殖體系產(chǎn)生，可以固定雜種優(yōu)勢。