膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)-1ppt課件

1、張三李四020-62-7891230757-299-85246南方醫(yī)科大學(xué)公衛(wèi)學(xué)院微生物學(xué)系醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn) Medical Microbiology Practicum微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)那么微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)那么Lab Safety Regulation v進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必需穿白大衣，戴帽子。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必需穿白大衣，戴帽子。v書本、文具放在抽屜里。書本、文具放在抽屜里。v實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不準(zhǔn)吃東西、喝飲料，不準(zhǔn)把任何東西放入嘴中，也不實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不準(zhǔn)吃東西、喝飲料，不準(zhǔn)把任何東西放入嘴中，也不要用手撫摸頭臉等部位。要用手撫摸頭臉等部位。v凡是廢棄的細(xì)菌培育物、帶菌資料，應(yīng)放在指定地點(diǎn)等待滅菌處凡

2、是廢棄的細(xì)菌培育物、帶菌資料，應(yīng)放在指定地點(diǎn)等待滅菌處置，不得隨意亂放或用水沖洗。置，不得隨意亂放或用水沖洗。v一旦發(fā)生不測(cè)，呵斥污染，應(yīng)立刻報(bào)告教師進(jìn)展處置。一旦發(fā)生不測(cè)，呵斥污染，應(yīng)立刻報(bào)告教師進(jìn)展處置。v分開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前分開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前, ,必需洗手。疑心污染應(yīng)及時(shí)用必需洗手。疑心污染應(yīng)及時(shí)用11新潔而滅泡手。新潔而滅泡手。v每次實(shí)驗(yàn)后，實(shí)驗(yàn)臺(tái)用消毒液擦拭，地板先用濕的拖布拖地以后每次實(shí)驗(yàn)后，實(shí)驗(yàn)臺(tái)用消毒液擦拭，地板先用濕的拖布拖地以后再掃地，實(shí)驗(yàn)室用紫外線燈照射再掃地，實(shí)驗(yàn)室用紫外線燈照射1 1小時(shí)。小時(shí)。實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分組45人人v倆倆相對(duì)4人為一個(gè)小組,組號(hào)編在電源插座上。v每組按從前到后,

3、從左到右的順序，分別編號(hào)為甲乙丙丁。 甲 乙 4丙 丁甲 乙 3丙 丁甲 乙 2丙 丁甲 乙 1丙 丁甲 乙 5丙 丁甲 乙 8丙 丁甲 乙 7丙 丁甲 乙 6丙 丁甲 乙 10丙 丁甲 乙 9丙 丁 講 臺(tái)左右11 甲 乙 丙 丁 戊實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分組40人人v倆倆相對(duì)4人為一個(gè)小組,組號(hào)編在電源插座上。v每組按從前到后,從左到右的順序，分別編號(hào)為甲、乙、丙、丁。 甲 乙 4丙 丁甲 乙 3丙 丁甲 乙 2丙 丁甲 乙 1丙 丁甲 乙 5丙 丁甲 乙 8丙 丁甲 乙 7丙 丁甲 乙 6丙 丁甲 乙 10丙 丁甲 乙 9丙 丁 講 臺(tái)左右實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分組36人人v倆倆相對(duì)4人為一個(gè)小組,組號(hào)編在

4、電源插座上。v每組按從前到后,從左到右的順序，分別編號(hào)為甲、乙、丙、丁。 甲 乙 4丙 丁甲 乙 3丙 丁甲 乙 2丙 丁甲 乙 1丙 丁 5 甲 乙 8丙 丁甲 乙 7丙 丁甲 乙 6丙 丁甲 乙 10丙 丁甲 乙 9丙 丁 講 臺(tái)左右實(shí)驗(yàn)室器材引見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室器材引見(jiàn)常用器材擺放順序：電源插座常用器材擺放順序：電源插座試管架試管架酒精燈酒精燈污物盤。污物盤。試管架上器材：接近插座一側(cè)第試管架上器材：接近插座一側(cè)第1列放置接種針列放置接種針,第第2列放置列放置接種環(huán)，另一側(cè)中間兩行放置油性筆和打火機(jī)。接種環(huán)，另一側(cè)中間兩行放置油性筆和打火機(jī)。器材運(yùn)用后，必需放回原處，依次擺整齊。器材運(yùn)用后，必需放

5、回原處，依次擺整齊。普通冰箱普通冰箱(3(3顆星顆星* * * *) )冷藏室冷藏室( (上柜：上柜：溫度溫度4 488，保管細(xì)菌培育物，保管細(xì)菌培育物，培育基，常用菌種和抗菌素紙片培育基，常用菌種和抗菌素紙片等。等。冷凍室下柜：冷凍室下柜：溫度溫度1818，保管診斷血清、血，保管診斷血清、血漿，長(zhǎng)期保藏的抗菌素紙片。漿，長(zhǎng)期保藏的抗菌素紙片。 衛(wèi)生工具：衛(wèi)生工具：掃帚掃帚,拖布拖布,撮箕撮箕,渣滓筐渣滓筐,放在冰箱放在冰箱和水池之間。和水池之間。隔水式電熱恒溫培育箱：隔水式電熱恒溫培育箱：35353737，普通細(xì)菌培育時(shí)間為普通細(xì)菌培育時(shí)間為18182424小時(shí)。小時(shí)。 奧林巴斯奧林巴斯 C

6、X21CX21型型 生物顯微鏡生物顯微鏡實(shí)驗(yàn)柜內(nèi)，每人一臺(tái)實(shí)驗(yàn)柜內(nèi)，每人一臺(tái)留意：只能橫放，不得豎放。留意：只能橫放，不得豎放。革蘭染色瓶革蘭染色瓶染色架染色架石蠟油石蠟油拭鏡紙拭鏡紙吸水紙吸水紙乙醇乙醚乙醇乙醚微生物學(xué)器材柜微生物學(xué)器材柜-1-1西側(cè)邊臺(tái)中段西側(cè)邊臺(tái)中段電爐電爐右側(cè)柜內(nèi)右側(cè)柜內(nèi)微生物學(xué)器材柜微生物學(xué)器材柜-2-2東側(cè)邊臺(tái)中段東側(cè)邊臺(tái)中段酒精棉球酒精棉球碘酒棉球碘酒棉球鑷子鑷子電爐、石棉網(wǎng)電爐、石棉網(wǎng)手套手套 1500W 1500W電爐電爐平安警告平安警告1.1.電源插塞與電爐插孔接觸良好電源插塞與電爐插孔接觸良好插頭插入插座。插頭插入插座。2.2.假設(shè)培育基暴沸溢出，流入電爐

7、；必需立刻切斷假設(shè)培育基暴沸溢出，流入電爐；必需立刻切斷電源、拔除插頭；以免觸電，危及生命！電源、拔除插頭；以免觸電，危及生命！東西兩側(cè)邊臺(tái)各一個(gè)電爐，每個(gè)電爐東西兩側(cè)邊臺(tái)各一個(gè)電爐，每個(gè)電爐可同時(shí)放置可同時(shí)放置4 4個(gè)個(gè)300ml300ml錐形瓶進(jìn)展加熱。錐形瓶進(jìn)展加熱。蒸餾水：配制培育基。蒸餾水：配制培育基。11新潔而滅：疑心病原菌污染，泡手新潔而滅：疑心病原菌污染，泡手3 35 5分鐘。分鐘。消毒液：擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)臺(tái)面。消毒液：擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)臺(tái)面。玻片缸：浸泡用過(guò)的載玻片。玻片缸：浸泡用過(guò)的載玻片。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)綜合性實(shí)驗(yàn)一Comprehensive Experiment 1 v膿汁和糞便標(biāo)本

8、中病原菌的檢測(cè)P2v Isolation and detection of pathogenic bacteria in pus and stool specimens v培育基的制備P2v消毒與滅菌P5v細(xì)菌的人工培育v無(wú)菌技術(shù)錄像v擺斜面，傾注平板。膿汁、痰、咽部分泌物察看菌落特征、溶血性、色素肉湯增菌培育挑取可疑菌落涂片染色鏡檢血平板培育直接涂片、革蘭染色、鏡檢血液、穿刺液純培育培育液涂片染色境檢染色鏡檢生化反響血清學(xué)鑒定雙糖鐵培育基增菌培育血、骨髓挑取可疑菌落SS瓊脂、伊紅美藍(lán)平板分別培育糞便常見(jiàn)腸道致病菌的檢查程序常見(jiàn)腸道致病菌的檢查程序P48P48：常見(jiàn)病原性球菌的檢查程序常見(jiàn)病原

9、性球菌的檢查程序P47P47：生化反響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)藥敏實(shí)驗(yàn)?zāi)撝图S便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程(6次課次課12學(xué)時(shí)學(xué)時(shí)培育基的制備細(xì)菌的分別培育細(xì)菌的純培育細(xì)菌的形狀學(xué)檢查細(xì)菌的生化實(shí)驗(yàn)等細(xì)菌的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)、結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)論文撰寫培育基的制備 Preparation of Culture Media組號(hào)組號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)基稱量稱量水量水量煮沸煮沸分裝分裝備注（備注（4545人份）人份）1 1，1111營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂11.4g11.4g300ml300ml- - -4 4瓶，瓶，500ml500ml瓶，平板瓶，平板2 24 4營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂3.0g3.0g80ml80

10、ml3 3次次5ml5ml1616支支3 3，中試管，斜面，中試管，斜面5 57 7營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)肉湯1.1g1.1g50ml50ml1 1次次3ml3ml1616支支3 3，小試管，肉湯，小試管，肉湯8 81010半固體瓊脂半固體瓊脂1.9g1.9g65ml65ml3 3次次4ml4ml1616支支3 3，小試管，高層，小試管，高層公共培基，勿作標(biāo)志！公共培基，勿作標(biāo)志！培育基的制備 Preparation of Culture Media組號(hào)組號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)基稱量稱量水量水量煮沸煮沸分裝分裝備注（備注（4040人份）人份）1 1營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂11.4g11.4g300ml300ml- - -

11、4 4瓶，瓶，500ml500ml瓶，平板瓶，平板2 24 4營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂2.9g2.9g75ml75ml3 3次次5ml5ml1515支支3 3，中試管，斜面，中試管，斜面5 57 7營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)肉湯1.1g1.1g50ml50ml1 1次次3ml3ml1515支支3 3，小試管，肉湯，小試管，肉湯8 81010半固體瓊脂半固體瓊脂1.7g1.7g60ml60ml3 3次次4ml4ml1515支支3 3，小試管，高層，小試管，高層公共培基，勿作標(biāo)志！公共培基，勿作標(biāo)志！培育基的制備 Preparation of Culture Media組號(hào)組號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)基稱量稱量水量水量煮沸煮沸分裝分

12、裝備注（備注（3636人份）人份）1 1營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂11.4g11.4g300ml300ml- - -3 3瓶，瓶，500ml500ml瓶，平板瓶，平板2 24 4營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂2.7g2.7g70ml70ml3 3次次5ml5ml1414支支3 3，中試管，斜面，中試管，斜面6 67 7營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)肉湯1.3g1.3g60ml60ml1 1次次3ml3ml2020支支2 2，小試管，肉湯，小試管，肉湯8 81010半固體瓊脂半固體瓊脂1.7g1.7g60ml60ml3 3次次4ml4ml1414支支3 3，小試管，高層，小試管，高層公共培基，勿作標(biāo)志！公共培基，勿作標(biāo)志！培育基的制備

13、Preparation of Culture Media組號(hào)組號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)基稱量稱量水量水量煮沸煮沸分裝分裝備注（備注（3232人份）人份）1 1營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂11.4g11.4g300ml300ml- - -3 3瓶，瓶，500ml500ml瓶，平板瓶，平板2 24 4營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂2.3g2.3g60ml60ml3 35ml5ml1212支支3 3，中試管，斜面，中試管，斜面6 6、7 7營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)肉湯1.2g1.2g55ml55ml1 13ml3ml1818支支2 2，小試管，肉湯，小試管，肉湯8 8、9 9半固體瓊脂半固體瓊脂2.2g2.2g75ml75ml3 34ml4ml18

14、18支支2 2，小試管，高層，小試管，高層公共培基，勿作標(biāo)志！公共培基，勿作標(biāo)志！ 培育基隔石棉網(wǎng)煮沸，使完全溶解。營(yíng)養(yǎng)肉湯煮沸培育基隔石棉網(wǎng)煮沸，使完全溶解。營(yíng)養(yǎng)肉湯煮沸1 1次，含瓊脂的次，含瓊脂的培育基煮沸培育基煮沸3 3次次( (煮至剛剛冒泡煮至剛剛冒泡, ,立刻放置臺(tái)面，半分鐘后再煮立刻放置臺(tái)面，半分鐘后再煮) )。加熱時(shí)加熱時(shí),常搖動(dòng)。常搖動(dòng)。沸騰時(shí)，不能搖動(dòng)！沸騰時(shí)，不能搖動(dòng)！用洗耳球和刻度吸管分裝培育基。用洗耳球和刻度吸管分裝培育基。棉塞棉塞1/21/2塞入試管口內(nèi)，松緊適宜。塞入試管口內(nèi)，松緊適宜。培育基趁熱分裝培育基趁熱分裝培育基裝筐待滅菌培育基裝筐待滅菌放置試管筐內(nèi)，罩上

15、硫酸放置試管筐內(nèi)，罩上硫酸紙牛皮紙，用橡皮筋扎好。紙牛皮紙，用橡皮筋扎好。各組邊臺(tái)柜子內(nèi)器材各組邊臺(tái)柜子內(nèi)器材量筒量筒錐形瓶錐形瓶砝碼砝碼干粉培育基干粉培育基試管筐試管筐天平天平各組邊臺(tái)抽屜內(nèi)器材各組邊臺(tái)抽屜內(nèi)器材試管試管刻度吸管刻度吸管洗耳球洗耳球稱量皿稱量皿2個(gè)個(gè)藥勺藥勺厘米尺厘米尺硫酸紙、牛皮紙、橡皮筋硫酸紙、牛皮紙、橡皮筋 稱量皿置于左、右盤，游碼移至標(biāo)尺左端“0點(diǎn)位置上，指針應(yīng)對(duì)準(zhǔn)中線，獲得平衡。否那么將杠桿兩端的調(diào)整螺母旋動(dòng)調(diào)理平衡。 秤物時(shí)“左物右碼，砝碼置右盤，物品置左盤，盡能夠放在秤盤中心。天平堅(jiān)持枯燥、清潔。用過(guò)的藥勺、稱量皿清洗干凈。 稱量皿置于左盤，游碼移至標(biāo)尺左端“0

16、點(diǎn)位置上，指針應(yīng)對(duì)準(zhǔn)中線，獲得平衡。否那么將杠桿兩端的調(diào)整螺母旋動(dòng)調(diào)理平衡。 秤物時(shí)“左物右碼，砝碼置右盤，物品置左盤，盡能夠放在秤盤中心。天平堅(jiān)持枯燥、清潔。用過(guò)的藥勺、稱量皿清洗干凈。培育基配制器材內(nèi)蓋蓋好內(nèi)蓋蓋好外蓋扭緊外蓋扭緊培育基制備程序 干粉培育基蒸餾水加熱溶化分裝集中放在試管筐里 罩上硫酸紙、牛皮紙 用橡皮筋扎好 放入講臺(tái)邊的滅菌桶或滅菌筐內(nèi)送到高壓蒸汽滅菌室洗刷室滅菌。 請(qǐng)?jiān)?30分鐘內(nèi)完成。培育基的制備 Preparation of Culture Media組號(hào)組號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)基稱量稱量水量水量煮沸煮沸分裝分裝備注（備注（4040人份）人份）1 1營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂11.4g1

17、1.4g300ml300ml- - -4 4瓶，瓶，500ml500ml瓶，平板瓶，平板2 24 4營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂2.9g2.9g75ml75ml3 3次次5ml5ml1515支支3 3，中試管，斜面，中試管，斜面5 57 7營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)肉湯1.1g1.1g50ml50ml1 1次次3ml3ml1515支支3 3，小試管，肉湯，小試管，肉湯8 81010半固體瓊脂半固體瓊脂1.7g1.7g60ml60ml3 3次次4ml4ml1515支支3 3，小試管，高層，小試管，高層公共培基，勿作標(biāo)志！公共培基，勿作標(biāo)志！Preparation of Culture media vGroup forma

18、tion:v Four students each form one groupv Total of 10 groups (10 4= 40)v Each group will prepare the media according to the instruction given in next slide.Preparation of Culture MediaGroupnumberName of Medium to prepareQuantity weightingDistilled waterBoilDispensing quantity in containerContainer t

19、o dispense1Nutrient agar11.4g300ml4 bottles ，Petri dishes24Nutrient agar2.9g75ml35ml153 tubes ，agar slants57Nutrient broth1.1g50ml13ml153 tubes ，broth tubes810Semi-solid agar1.7g60ml34ml153 tubes ，agar deepsMelt agar into solution in the microwave or electric stove 玻璃器材的洗刷玻璃器材的洗刷v無(wú)污染器皿:洗滌劑洗刷流水沖洗10次晾

20、干。v病原菌污染的器材高壓蒸汽滅菌趁熱倒出污物洗滌劑浸泡瓶子、試管、吸管用毛刷，平皿用紗布，洗刷干凈流水沖洗10次晾干。瓶刷瓶刷試管刷試管刷吸管刷吸管刷去污粉去污粉紗布紗布拾掇器材，放回邊臺(tái)柜內(nèi)，依次擺整齊拾掇器材，放回邊臺(tái)柜內(nèi)，依次擺整齊! !量筒量筒錐形瓶錐形瓶砝碼砝碼干粉培育基干粉培育基試管筐試管筐天平天平量筒量筒罩紙?zhí)?，扎皮筋罩紙?zhí)祝そ?。錐形瓶錐形瓶洗干凈，塞棉塞，罩紙?zhí)祝そ钕锤蓛?，塞棉塞，罩紙?zhí)?，扎皮?。干粉培育基干粉培育基內(nèi)外蓋子，必需蓋好扭緊！內(nèi)外蓋子，必需蓋好扭緊！拾掇器材，放回抽屜內(nèi)，依次擺整齊拾掇器材，放回抽屜內(nèi)，依次擺整齊! !試管試管刻度吸管刻度吸管洗耳球洗

21、耳球稱量皿稱量皿藥勺藥勺厘米尺厘米尺硫酸紙、牛皮紙、橡皮筋硫酸紙、牛皮紙、橡皮筋藥勺、稱量皿、刻度吸管洗刷干凈，藥勺、稱量皿、刻度吸管洗刷干凈，甩去水滴，放回邊臺(tái)抽屜內(nèi)。甩去水滴，放回邊臺(tái)抽屜內(nèi)。細(xì)菌培育基細(xì)菌培育基 Culture MediaCulture Media 用人工的方法，將多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，根據(jù)各種微生物生長(zhǎng)繁衍的需求而合成的一種營(yíng)養(yǎng)制品。它的主要成分是蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉和水，pH7.47.6。培育基制備的普通程序： 調(diào)配溶化 矯正pH 分裝滅菌檢定保管。 干粉培育基蒸餾水加熱溶化分裝滅菌檢定 保管。培育基的制備原那么： (1)適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)成分,(2)適宜的酸堿度,(3)配制后必需

22、滅菌。v培育基的種類按物理性狀分類培育基的種類按物理性狀分類v液體培育基液體培育基: :不含凝固劑不含凝固劑( (瓊脂瓊脂),),用于增菌，純培育用于增菌，純培育, ,保保種。種。v固體培育基固體培育基: :含含1 12 2瓊脂，用于分別培育瓊脂，用于分別培育, ,純培育純培育, ,保種。保種。v半固體培基瓊脂高層半固體培基瓊脂高層: :含含0.30.30.50.5瓊脂，用于瓊脂，用于動(dòng)力檢測(cè)動(dòng)力檢測(cè), ,保種。保種。營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)肉湯 broth tube broth tube 瓊脂斜面瓊脂斜面 agar slant agar slant 瓊脂高層瓊脂高層 agar agar deepdeep

23、Different forms of culture media.v培育基的種類按用途分類培育基的種類按用途分類P3v根底培育基根底培育基:含普通細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍所需的根本營(yíng)養(yǎng)成含普通細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍所需的根本營(yíng)養(yǎng)成分，可作為一些特殊培育基的根底成分，如普通平分，可作為一些特殊培育基的根底成分，如普通平板。板。v營(yíng)養(yǎng)培育基：在根底培育基中參與血液、生長(zhǎng)因子營(yíng)養(yǎng)培育基：在根底培育基中參與血液、生長(zhǎng)因子等特殊成分，供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需求特殊生等特殊成分，供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需求特殊生長(zhǎng)因子的細(xì)菌生長(zhǎng)，如血平板。長(zhǎng)因子的細(xì)菌生長(zhǎng)，如血平板。v增菌培育基：促進(jìn)目的菌的生長(zhǎng)，適用于含菌量較增菌培育基：促進(jìn)

24、目的菌的生長(zhǎng)，適用于含菌量較少的標(biāo)本，如葡萄糖肉湯。少的標(biāo)本，如葡萄糖肉湯。v選擇培育基：在培育基中參與抑制劑抑制雜菌生長(zhǎng)，選擇培育基：在培育基中參與抑制劑抑制雜菌生長(zhǎng)，有助于目的菌的生長(zhǎng)，如有助于目的菌的生長(zhǎng)，如EMB、SS平板。平板。v鑒別培育基：利用細(xì)菌分解才干及代謝產(chǎn)物的不同，鑒別培育基：利用細(xì)菌分解才干及代謝產(chǎn)物的不同，在培育基中參與特定的作用底物和指示劑，用來(lái)實(shí)在培育基中參與特定的作用底物和指示劑，用來(lái)實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的生化反響、代謝產(chǎn)物，如糖發(fā)酵管。驗(yàn)細(xì)菌的生化反響、代謝產(chǎn)物，如糖發(fā)酵管。v厭氧培育基：氧化復(fù)原電勢(shì)低，外表用凡士林和石厭氧培育基：氧化復(fù)原電勢(shì)低，外表用凡士林和石蠟封住，與

25、空氣隔絕，成為無(wú)氧環(huán)境，如庖肉培育蠟封住，與空氣隔絕，成為無(wú)氧環(huán)境，如庖肉培育基?；?。培育基的滅菌培育基的滅菌 在冷空氣完全排盡的情況下，蒸汽壓103.43 kPa ,溫度可到達(dá)121.3 ,維持1530分鐘，可以殺滅包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的一切微生物。根底培育基：121高壓蒸汽滅菌1530分鐘。含糖培育基：115滅菌15分鐘。雞蛋、牛奶培育基:7510030分鐘，3次(1天1次)。不耐高溫的液體成分：濾菌器濾過(guò)除菌EK型蔡氏濾器、 G5或G6玻璃濾器、0.45um或0.22um微孔濾膜。瓊脂平板瓊脂平板 agar plateagar plate 含瓊脂的培育基滅菌以后，冷卻5060溫度越高，冷凝水

26、越多，越易污染 ，以無(wú)菌操作，傾注平皿10ml直徑7厘米平皿，瓊脂凝固后構(gòu)成瓊脂平板。 平板主要用于細(xì)菌的分別培育和藥敏實(shí)驗(yàn)。平板儲(chǔ)存待用或做細(xì)菌培育時(shí)，為什么要倒置？平板儲(chǔ)存待用或做細(xì)菌培育時(shí)，為什么要倒置？防止平板水分蒸發(fā)喪失。防止平板水分蒸發(fā)喪失。防止冷凝水滴于平板外表，影響單菌落構(gòu)成。防止冷凝水滴于平板外表，影響單菌落構(gòu)成。瓊脂斜面瓊脂斜面 agar slantagar slant 含瓊脂的培育基滅菌以后，趁熱斜放，培基不超越試含瓊脂的培育基滅菌以后，趁熱斜放，培基不超越試管長(zhǎng)度的管長(zhǎng)度的2/32/3，瓊脂凝固以后構(gòu)成一個(gè)傾斜的外表。，瓊脂凝固以后構(gòu)成一個(gè)傾斜的外表。 斜面主要用于純菌

27、移種和菌種保管。斜面主要用于純菌移種和菌種保管。 斜面底部的冷凝水有利于純菌移種、菌苔構(gòu)成斜面底部的冷凝水有利于純菌移種、菌苔構(gòu)成和菌種保藏。和菌種保藏。怎樣檢查培育基能否合格?v無(wú)菌實(shí)驗(yàn)：將待檢培育基置于3537培育箱培育24小時(shí)，無(wú)任何細(xì)菌生長(zhǎng)為合格。v效果實(shí)驗(yàn)：將知的規(guī)范參考菌株，接種于待檢培育基中，檢查細(xì)菌的生長(zhǎng)繁衍情況和生化反響能否與預(yù)期的結(jié)果相符合。細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍的方式和速度細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍的方式和速度v細(xì)菌繁衍方式：以二分裂方式進(jìn)展無(wú)性繁衍。v繁衍速度：多數(shù)2030分鐘繁衍1代，結(jié)核桿菌1820小時(shí)繁衍一代。v細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍曲線細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線細(xì)菌數(shù)量的對(duì)數(shù)細(xì)菌數(shù)量的對(duì)數(shù)培育

28、時(shí)間培育時(shí)間小時(shí)小時(shí)5 10 15 20 25 30 6.06.57.07.58.08.59.0活菌數(shù)活菌數(shù)總菌數(shù)總菌數(shù)緩慢期緩慢期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰退期衰退期細(xì)菌生長(zhǎng)曲線意義細(xì)菌生長(zhǎng)曲線意義v緩慢期：普通14h，細(xì)菌代謝活潑，但不繁衍。v對(duì)數(shù)期：維持48h，細(xì)菌快速繁衍，數(shù)目呈幾何級(jí)數(shù)添加，細(xì)菌形狀、染色性、生理活性最典型、對(duì)抗菌素最敏感。細(xì)菌鑒定選用此期為佳。v穩(wěn)定期： 通常維持10h，活菌數(shù)和死菌數(shù)幾乎相等，代謝產(chǎn)物構(gòu)成較多。v衰亡期：培育18 24 h以后，代謝逐漸停滯,死菌數(shù)超越活菌數(shù)。玻璃器材的洗刷玻璃器材的洗刷v無(wú)污染器皿:洗滌劑洗刷流水沖洗10次晾干。v病原菌污染的器材高壓蒸汽滅菌趁熱倒出污物洗滌劑浸泡瓶子、試管、吸管用毛刷，平皿用紗布，洗刷干凈流水沖洗10次晾干。瓶刷瓶刷試管刷試管刷吸管刷吸管刷去污粉去污粉紗布紗布試管用毛刷，試管用毛刷，上下、旋轉(zhuǎn)刷洗上下、旋轉(zhuǎn)刷洗內(nèi)壁和管底。內(nèi)壁和管底。字跡用濕紗布，字跡用濕紗布，粘去污粉擦拭。粘去污粉擦拭。管口朝向一樣，管口朝向一樣，流水沖洗流水沖洗1010次。次。洗干凈的試管，洗干凈的試管，倒扣在筐內(nèi)，晾干。倒扣在筐內(nèi)，晾干。平皿用紗布，旋轉(zhuǎn)擦平皿用紗布，旋轉(zhuǎn)擦拭內(nèi)外側(cè)，字跡用紗拭內(nèi)外側(cè)，字跡用紗布粘去污粉擦拭。布粘去污粉擦拭。流水沖洗流水沖洗1010次。逐個(gè)