三碘甲腺援氨酸T3作業(yè)指導(dǎo)書

1、文件編號(hào)：LAB OP- MY020第1頁，共4頁版本：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX 醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室分析項(xiàng)目作業(yè)指導(dǎo)書Elecsys E 170/E 411三碘甲腺援氨酸（T3）1. 分析原理采用競爭法原理，整個(gè)過程18分鐘完成。第1步：30 gl標(biāo)本、釘標(biāo)記的抗T3抗體和ANS后者釋放結(jié)合的T3o第2步：加入鏈霉親和素包被的微粒和生物素化的T3,后者占據(jù)標(biāo)記抗體上仍然游離的結(jié)合位點(diǎn)，形成抗體-半抗原復(fù)合物形成的免疫復(fù)合物通過生物素、鏈酶親和素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。第3步：反應(yīng)混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)

2、光， 通過光電倍增管進(jìn)行測定。檢測結(jié)果由儀器自動(dòng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處。此曲線由儀器通過兩點(diǎn)定標(biāo)校準(zhǔn)，由試劑條碼掃描入儀 器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得。2. 標(biāo)本要求血清：按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)方法采集。血漿：肝素鈉、鋰、銨；EDTA-K3檸檬酸鹽；氟化鈉/草酸鉀抗凝均可。標(biāo)本在2 8度可穩(wěn)定7天, -20 C可穩(wěn)定1個(gè)月。標(biāo) 本只能凍融1次。有沉淀的標(biāo)本使用前需離心。不要使用加熱滅活的標(biāo)本。標(biāo)本和質(zhì)控品禁用疊氮鈉防腐。標(biāo)本、定標(biāo)液和質(zhì)控品在測定前應(yīng)預(yù)溫到室溫。3. 試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和其他所需材料采用羅氏原裝配套試劑。試劑：M 鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，12ml。粒子濃度0.72mg/ml，生物素結(jié)合

3、能力：470ng生物素/mg粒子。含 防腐劑。2+R1:釘（Ru（bpy） 3 ）標(biāo)記的羊抗T3多克隆抗體（灰蓋），1瓶，16ml，濃度75ng/ml，ANS 0.08mg/ml，磷酸緩沖液0.1mol/l ， pH7.4。含防腐劑。R2：生物素化的T3 （黑蓋），1瓶，16ml。濃度3ng/ml，ANS 0.08mg/ml，磷酸緩沖液0.1mol/l ，pH 7.4。含防腐劑。校準(zhǔn)品：Cal 1定標(biāo)液（白蓋），2瓶, 1ml/瓶，T3的濃度約為1.25nmol/l ，人血清,含防腐劑Cal 2定標(biāo)液（黑蓋），2瓶, 1ml/瓶，T3的濃度約為8.5nmol/l,人血清，含防腐劑貨號(hào) 1173

4、1548 122質(zhì)控品：Elecsys通用質(zhì)控品（PreciControl ） 1和2貨號(hào)11731416122或其它合適的質(zhì)控品其他所需材料：Elecsys 多項(xiàng)測試稀釋液（Diluent MultiAssay ） 貨號(hào) 03609987Elecsys1010 或2010，MODULAR E170 , Cobas e601 分析儀Elecsys1010或2010、e411分析儀所需耗品：Elecsys 系統(tǒng)緩沖液（ProCell ）貨號(hào) 11662988Elecsys 測量池清洗液（CleanCell ）貨號(hào) 11662970Elecsys 添加劑液（SysWash 貨號(hào) 11930346E

5、lecsys 系統(tǒng)清洗液（SysClean）貨號(hào) 11298500Elecsys 反應(yīng)杯 貨號(hào)11706802Elecsys 吸頭 貨號(hào) 11706799MODULAR E170，Cobas e601 所需耗品：Elecsys 系統(tǒng)緩沖液（ProCell ）貨號(hào) 12135019Elecsys E 170/E 411三碘甲腺援氨酸（T3）Elecsys 測量池清洗液（CleanCell ）貨號(hào) 12135027Elecsys系統(tǒng)緩沖液/測量池清洗液預(yù)熱杯（PC/CCCup）貨號(hào)03023141Elecsys 廢物盒（Waste bags ）貨號(hào) 03023150Elecsys 系統(tǒng)清洗液（Sy

6、sClean）貨號(hào) 11298500Elecsys 反應(yīng)杯/吸頭盒 貨號(hào)12102137Elecsys 試劑針洗液（ProbeWash）貨號(hào) 030057124. 儀器和校準(zhǔn)使用儀器：瑞士羅氏診斷公司生產(chǎn) Elecsys 2010/E 170/e601/E 411全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀儀器校準(zhǔn)：每批T3試劑盒必須用新鮮試劑和TSH Cal 1,Cal 2定標(biāo)一次。另外，以下情況需要再次定標(biāo)：Elecsys2010 或 E170、e601： 一個(gè)月（同一批號(hào)試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒）各種分析儀均適用的情況：根據(jù)要求進(jìn)行標(biāo)定，如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)。5. 操作步驟（以E 170為例）

7、5.1校準(zhǔn)操作步驟：在編緝各項(xiàng)目的參數(shù)時(shí)，已經(jīng)在Application Calib菜單中定義好了定標(biāo)類型和幾點(diǎn)定標(biāo)。因此在對各項(xiàng)目進(jìn)行定標(biāo)時(shí)，只需在定標(biāo)菜單 Calibration中進(jìn)行即可。進(jìn)入 Calibration Status菜單，用鼠標(biāo)選擇需定標(biāo)的項(xiàng)目，再根據(jù)需要點(diǎn)單點(diǎn)定標(biāo)（BLANK建）或兩點(diǎn)定標(biāo)（TWOPOINT鍵）、跨距定標(biāo)（SPAN!）、多點(diǎn)定標(biāo)（FULL鍵），再選擇其它項(xiàng)目進(jìn)行相應(yīng)選擇，最后 點(diǎn)SAVE將定標(biāo)物放入在 Calibration Calibrator中定義好的位置，點(diǎn) Start，再點(diǎn)Start，儀器開始定標(biāo)。在Calibration Status菜單中看定標(biāo)結(jié)

8、果，點(diǎn) Calibration Result鍵看定標(biāo)結(jié)果，點(diǎn) Reaction Monitor鍵看每個(gè)定標(biāo)物的反應(yīng)曲線。5.2樣本檢測程序：單個(gè)樣本輸入，在主菜單下選擇Workplace- Testslection，在Sequenee No欄輸入標(biāo)本號(hào)，然后選擇該標(biāo)本所需做的單個(gè)項(xiàng)目或組合項(xiàng)目點(diǎn) SAVE建，樣本號(hào)自動(dòng)累加。批量常規(guī)標(biāo)本的輸入，在主菜單下選擇Workplace- Testslection ，在Sequenee No欄輸入起始標(biāo)本號(hào)，然后選擇該標(biāo)本所需做的單個(gè)項(xiàng)目或組合項(xiàng)目點(diǎn)REPEAT輸入該批標(biāo)本的最后一個(gè)標(biāo)本號(hào)，點(diǎn)0K即可。進(jìn)樣分析，將標(biāo)本按在 Workplace菜單中輸入的

9、標(biāo)本號(hào)順序在樣本架上排好，放入進(jìn)樣盤內(nèi)，按START鍵，輸入該批上機(jī)標(biāo)本的起始標(biāo)本號(hào)，再點(diǎn) START鍵，儀器自動(dòng)開始推架檢測標(biāo)本。6. 質(zhì)量控制Elecsys通用質(zhì)控品（PreciControl ） 1和2。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時(shí)或每一次定標(biāo)后測定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適 用于各實(shí)驗(yàn)室的具體要求。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取校正措施。7. 計(jì)算方法對每一個(gè)標(biāo)本，儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算 TS啲含量，單位是nmol/l、ng/ml或ng/dl。換算方法是：nmol/l x 0.65仁ng/ml（ x 65.09998=ng/dl） ； ng/ml x 1.536= n

10、mol/l8. 參考范圍1.3-3.1 nmol/l或0.8-2.0 ng/ml（范圍：第 2.5百分位一第 97.5百分位，n=514）。如有必要各個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)自己測定一個(gè)參考范圍。Elecsys E 170/E 411三碘甲腺援氨酸（T3）9.稀釋由于檢測范圍足夠?qū)?，?biāo)本不需稀釋。10. 分析性能11. 干擾因素該方法不受黃疸（膽紅素35mg/dl ）、溶血（血紅蛋白2.0g/dl ）、脂血（脂質(zhì)1800mg/dl ）和生物素20ng/ml等干擾。接受高劑量生物素（5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時(shí)后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（2000U/ml）。來之透析病人的標(biāo)本也

11、無干擾。26種常用藥物經(jīng)試驗(yàn)對本測定無干擾。Amiodarone治療可降低T3的含量。苯妥英、保泰松和水楊酸鹽可使T3從結(jié)合蛋白中釋放出來，從而導(dǎo)致總 T3水平下降而游離T3水平正常。本試驗(yàn)受甲狀腺激素自身抗體的干擾。結(jié)合蛋白質(zhì)（TG,白蛋白）濃度異常（如NTI病人、懷孕、口服避孕藥等）可使總T3的水平不正常，盡管甲狀腺功能 正常。在患病非常嚴(yán)重的一般病人中，偶爾會(huì)出現(xiàn)與酶免方法不同的檢測結(jié)果。對這樣的病例，建議做游離T3或游離T4的檢測。偶爾會(huì)遇到抗鏈酶親和素抗體和抗釘抗體的干擾。Elecsys T3測定結(jié)果應(yīng)結(jié)合病人病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合起來進(jìn)行診斷12. 臨床意義T3是甲狀腺激素對各種靶器官作用的主要激素。T3主要在甲狀腺以外，尤其是在肝臟由 T4經(jīng)酶解脫去5位碘生成。因此，血清T3濃度反應(yīng)出甲狀腺對周邊組織的功能甚于反應(yīng)甲狀腺分泌狀態(tài)。T4轉(zhuǎn)變成T3的減少會(huì)導(dǎo)致T3濃度的下降。由于藥物的影響，如丙醇、糖皮質(zhì)內(nèi)固醇、胺碘酮以及嚴(yán)重的非甲狀腺疾?。∟TI）,稱為“ T3低下綜合征。與T4一樣，99%以上的T3與運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)結(jié)合，但T3的親和力要低10倍左右。T3的檢測可用于T3甲亢的診斷，早期甲亢的查明和假性甲狀腺毒癥的診斷