微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則

1、微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則（NY 1109-2006）1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了微生物肥料使用菌種安全性分級(jí)目錄、不同菌種及產(chǎn)品選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則、程序、試驗(yàn)方法和結(jié)果評(píng)價(jià)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華人民共和國(guó)境內(nèi)生產(chǎn)、銷(xiāo)售的微生物肥料。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 15193.3-2003 急性毒性試驗(yàn)GB/T 4789.28-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染

2、色法、培養(yǎng)基和試劑3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1半數(shù)致死量 median lethal dose,LD50是經(jīng)口給予受試物后，預(yù)期能夠引起動(dòng)物死亡率為50%的單一受試物劑量，該劑量為經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)得出的估計(jì)值。其單位是每千克體重所攝入受試物質(zhì)的毫克數(shù)、克數(shù)或毫升數(shù)，即mg/kg體重、g/kg體重或mL/kg體重。4選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則4.1生產(chǎn)用菌種微生物肥料生產(chǎn)用菌種分為四級(jí)管理，其安全分級(jí)目錄見(jiàn)附錄A。未列入附錄A中的菌種，除根瘤菌和乳桿菌(Lactobacillus）外，其余均需做毒理學(xué)試驗(yàn)。4.1.1第一級(jí)（A.1）為免作毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種。4.1.2第二級(jí)（A.2）為需做急性

3、毒性試驗(yàn)的菌種。4.1.3第三級(jí)（A.3）為需做致病性試驗(yàn)的菌種。4.1.4 第四級(jí)（A.4）為禁用菌種。4.2產(chǎn)品4.2.1 除有機(jī)物料腐熟劑以外的固體微生物接種劑類(lèi)產(chǎn)品均免做毒理學(xué)試驗(yàn)。4.2.2復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥和液體劑型微生物接種劑等需做急性毒性試驗(yàn)。5毒理學(xué)試驗(yàn)程序5.1 菌種毒理學(xué)試驗(yàn)程序5.1.1應(yīng)提供微生物肥料生產(chǎn)用菌種的鑒定資料，包括屬及種的拉丁文學(xué)名和中文譯名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)、功能評(píng)價(jià)等資料。5.1.2根據(jù)產(chǎn)品所含菌種的鑒定資料，依據(jù)附錄A之規(guī)定，確定菌種安全級(jí)別、是否做毒理學(xué)試驗(yàn)及毒理學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目。5.1.3對(duì)于需要做毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種，生產(chǎn)者需提供試驗(yàn)

4、用純菌種斜面，經(jīng)復(fù)核確認(rèn)與該菌種鑒定資料相符且無(wú)雜菌污染后，進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)。5.2產(chǎn)品毒理學(xué)程序需對(duì)送檢產(chǎn)品進(jìn)行菌種和載體物料的真實(shí)性確認(rèn)后，進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)。6試驗(yàn)方法6.1受試物的準(zhǔn)備6.1.1菌種受試物將試驗(yàn)菌種接種于適宜的培養(yǎng)基中，在適宜的條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，用生理鹽水調(diào)整菌液濃度至2.01082.0109cfu/mL，該溶液為菌種受試物。6.1.2產(chǎn)品受試物固體產(chǎn)品根據(jù)試驗(yàn)要求，配制所需濃度，溶劑首選去離子水，也可選用羧甲基纖維素、明膠、淀粉等。液體產(chǎn)品不可稀釋?zhuān)苯邮褂谩?.2急性毒性試驗(yàn)按GB 15193.3-2003執(zhí)行。6.3致病性試驗(yàn)致病性試驗(yàn)包括以下項(xiàng)目。6.3.1急性毒性

5、試驗(yàn)方法同5.2。6.3.2 一次破損皮膚刺激試驗(yàn)6.3.2.1目的檢測(cè)受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚的刺激/腐蝕作用和強(qiáng)度。6.3.2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每次實(shí)驗(yàn)至少需要3只皮膚完好的白色健康家兔或豚鼠。6.3.2.3操作程序a)涂受試物前，將家兔或豚鼠背部脊柱兩側(cè)的毛去掉，去毛范圍約2.5cm2.5cm，用75%酒精清潔、消毒暴露皮膚，待酒精揮發(fā)后，用滅菌刀片或注射針頭分別在兩塊皮區(qū)內(nèi)劃一個(gè)“”形的破損傷口。注意皮膚破損僅達(dá)表皮，不要傷及真皮。b)將受試物0.5mL直接滴于破損皮膚上，或滴于同樣大小的2層4層紗布上并敷貼于破損皮膚表面，然后用一層無(wú)刺激塑料膜或油紙覆蓋，再用無(wú)刺激膠布固定。另一側(cè)去毛破損皮膚

6、作為空白對(duì)照（或溶劑對(duì)照），敷貼時(shí)間為4h。試驗(yàn)結(jié)束后，用溫水或無(wú)刺激性溶劑除去殘留受試物。c)分別于去除受試物后1h、24h和48h觀察皮膚局部反應(yīng)，并按表1進(jìn)行刺激反應(yīng)評(píng)分。注意鑒別感染和原發(fā)性刺激反應(yīng)的區(qū)別，若有感染可疑，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)測(cè)試。6.3.2.4評(píng)價(jià)規(guī)定在各個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)，按照表1對(duì)動(dòng)物的皮膚紅斑與水腫形成情況進(jìn)行評(píng)分，并按時(shí)間點(diǎn)將3只動(dòng)物的評(píng)分相加，除以動(dòng)物數(shù)，獲得不同時(shí)間點(diǎn)的皮膚刺激反應(yīng)積分均值（刺激指數(shù)）。取其中最高皮膚刺激指數(shù)，按表2評(píng)定該受試物對(duì)動(dòng)物皮膚刺激強(qiáng)度的級(jí)別。表1皮膚刺激反應(yīng)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)皮膚刺激反應(yīng)皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分紅斑形成：無(wú)0勉強(qiáng)可見(jiàn)1明顯紅斑2中等嚴(yán)重紅斑3紫紅

7、色紅斑并有焦痂形成4水腫形成：無(wú)0勉強(qiáng)可見(jiàn)1皮膚隆起，輪廓清楚2水腫隆起約1mm3水腫隆起超過(guò)1mm4表2皮膚刺激強(qiáng)度分級(jí)皮膚刺激指數(shù)刺激強(qiáng)度級(jí)別00.5無(wú)刺激性0.52.0輕刺激性2.06.0中等刺激性6.08.0強(qiáng)刺激性6.3.3溶血試驗(yàn)6.3.3.1目的檢測(cè)受試物是否具有溶血特性。6.3.3.2操作程序用無(wú)菌棉拭子蘸取菌種受試物,以蛇形線接種于血瓊脂平板(按GB/T4789.28-2003中4.6規(guī)定),置361培養(yǎng)箱中培養(yǎng), 24h后觀察有無(wú)溶血環(huán)產(chǎn)生。同時(shí)用已知陽(yáng)性菌株金黃色葡萄球菌等作為對(duì)照。6.3.3.3試驗(yàn)結(jié)果菌落周?chē)腥苎h(huán)的，則溶血試驗(yàn)陽(yáng)性；否則為陰性。6.3.4抗菌藥物敏

8、感試驗(yàn)質(zhì)控菌株可選用大腸桿菌ATCC25922等標(biāo)準(zhǔn)菌株。6.3.4.1目的檢測(cè)受試物對(duì)抗生素的敏感性強(qiáng)度。6.3.4.2試驗(yàn)用抗生素可選用頭孢哌酮（CFP）、四環(huán)素（TE）、頭孢唑啉（CZ）、鏈霉素（S）、俐特靈（FR）、環(huán)丙沙星（CIP）、復(fù)方新諾明（SXT）、氯霉素（C）、氨芐青霉素（AM）、慶大霉素（GM）、強(qiáng)力霉素（DO）、丁胺卡那霉素（AN）、甲氟哌酸（PEF）、氟啶酸（ENO）、多西環(huán)素(DO)、依諾沙星(ENO)、阿米卡星(AN)等中的幾種。6.3.4.3操作程序a)用無(wú)菌棉拭子將受試物均勻涂抹于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板表面，共涂抹3次。每涂抹1次，平板應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)60，最后將棉拭子繞平板邊緣涂

9、抹一周。蓋好平皿,置室溫干燥5min。b）用無(wú)菌棉拭子蘸取濃度為2.01082.0109cfu/mL質(zhì)控菌株菌懸液，均勻涂抹于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板表面，具體方法同上，作為對(duì)照試驗(yàn)。c)以無(wú)菌操作取出抗生素紙片分別貼在涂有受試物和質(zhì)控菌株菌懸液的平板培養(yǎng)基表面，每個(gè)平板放4個(gè)紙片。然后將平板置于361恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18h后觀察抗生素紙片周?chē)袩o(wú)抑菌環(huán)，量取并記錄其直徑（包括紙片直徑）大小，單位mm。試驗(yàn)應(yīng)做3個(gè)平行，取其均值。d)質(zhì)控菌抑菌環(huán)應(yīng)均在質(zhì)控范圍內(nèi)，說(shuō)明試驗(yàn)方法準(zhǔn)確可靠，否則試驗(yàn)無(wú)效。6.3.5急性腹腔注射致病性試驗(yàn)6.3.5.1目的檢測(cè)受試物的急性致病性。6.3.5.2試驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)健康成

10、年小鼠，體重1820g。6.3.5.3操作程序a）選健康成年小鼠40只,體重1820g，雌、雄各半，劑量為500mg/kgBW，按0.1mL/10gBW經(jīng)腹腔注射受試物。b）于腹腔注射后第3d、7d分別取存活的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雌、雄各5只解剖，并做大體病理學(xué)觀察。c)腹腔注射后第14d將剩余實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死、解剖并做大體病理學(xué)觀察。6.3.5.4結(jié)果觀察、評(píng)價(jià)根據(jù)試驗(yàn)周期內(nèi)動(dòng)物有無(wú)死亡及出現(xiàn)的中毒體癥、大體病理學(xué)觀察及病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)病變的程度進(jìn)行分級(jí)判定（見(jiàn)表3）。表3急性致病性判定標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別判定依據(jù)強(qiáng)致病性動(dòng)物出現(xiàn)死亡，死亡動(dòng)物及24h以上存活動(dòng)物在第3d、7d經(jīng)解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查即可發(fā)現(xiàn)臟

11、器的明顯病變。弱致病性動(dòng)物有中毒體癥無(wú)死亡，動(dòng)物第14d經(jīng)解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查可發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變。無(wú)致病性動(dòng)物無(wú)中毒體癥無(wú)死亡，動(dòng)物第14d解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查均未發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變。6.3.6 急性眼刺激試驗(yàn)6.3.6.1目的檢測(cè)受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物眼睛的急性刺激和腐蝕作用。6.3.6.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3只家兔，試驗(yàn)前檢查家兔雙眼，有異常者不能用于試驗(yàn)。6.3.6.3操作程序a）吸取受試物0.1mL,滴入家兔一側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi)，另一側(cè)眼以生理鹽水作為正常對(duì)照。b）滴受試物后，將眼被動(dòng)閉合4s,30s后用生理鹽水沖洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d，肉眼觀察家兔

12、眼結(jié)膜、虹膜和角膜的損傷與恢復(fù)情況。如果72h內(nèi)未出現(xiàn)刺激反應(yīng)，或第7d或第14d，眼睛刺激反應(yīng)完全恢復(fù)，即可提前終止試驗(yàn)。必要時(shí)，用2%熒光素鈉溶液或裂隙燈、放大鏡檢查角膜及虹膜變化。6.3.6.4評(píng)價(jià)規(guī)定按表4對(duì)家兔眼角膜、虹膜和結(jié)膜的急性刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分，并分別計(jì)算每只動(dòng)物在三個(gè)不同觀察時(shí)間（24h、48h和72h）角膜損害、虹膜損害、結(jié)膜充血和結(jié)膜水腫四方面的“平均評(píng)分”（即每只動(dòng)物的24h、48h和72h評(píng)分之和除以觀察數(shù)3）。分別以動(dòng)物眼角膜、虹膜和結(jié)膜充血、水腫的平均評(píng)分和恢復(fù)時(shí)間進(jìn)行評(píng)分，按表5或表6眼刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判定受試物對(duì)眼睛的刺激強(qiáng)度。表4急性眼刺激反應(yīng)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)眼損

13、害表現(xiàn)評(píng)分角膜損害：無(wú)潰瘍形成或混濁散在或彌漫性混濁，虹膜清晰可見(jiàn)半透明區(qū)易分辨，虹膜模糊不清出現(xiàn)灰白色半透明區(qū)，虹膜細(xì)節(jié)不清，瞳孔大小勉強(qiáng)可見(jiàn)角膜不透明，混濁，虹膜無(wú)法辨認(rèn)01234虹膜損害：正常皺褶明顯加深，充血，腫脹，角膜周?chē)兄卸瘸溲?，瞳孔?duì)光仍有反應(yīng)出血、肉眼可見(jiàn)破壞，或瞳孔對(duì)光無(wú)反應(yīng)012結(jié)膜（瞼結(jié)膜、球結(jié)膜）充血：血管正常血管充血呈鮮紅色血管充血呈深紅色，血管不易分辨彌漫性充血呈紫紅色0123結(jié)膜（瞼結(jié)膜、球結(jié)膜）水腫：無(wú)水腫輕微水腫（包括瞬膜）明顯水腫，伴有部分眼瞼外翻水腫至眼瞼近半閉合水腫至眼瞼大半閉合01234表5眼刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別判定依據(jù)可逆性損傷無(wú)刺激性3只動(dòng)物的平

14、均評(píng)分：角膜損害1、虹膜損害1、結(jié)膜充血2和結(jié)膜水腫2；或3只動(dòng)物中至少有2只動(dòng)物的平均評(píng)分符合上述標(biāo)準(zhǔn)，另外1只動(dòng)物的刺激反應(yīng)在21d內(nèi)完全恢復(fù)。輕刺激性3只動(dòng)物中有2只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害1；虹膜損害1；結(jié)膜充血2；結(jié)膜水腫2，且7d內(nèi)全部動(dòng)物的刺激反應(yīng)完全恢復(fù)。刺激性a3只動(dòng)物中有2只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害1；虹膜損害1；結(jié)膜充血2；結(jié)膜水腫2，且21d內(nèi)全部動(dòng)物的刺激反應(yīng)完全恢復(fù)。不可逆性損傷腐蝕性b至少有1只動(dòng)物的角膜、虹膜或結(jié)膜的刺激反應(yīng)在21d的觀察期內(nèi)未完全恢復(fù)或/和在3只動(dòng)物中有2只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害3；虹膜損害1.5。注：完全恢復(fù)是指動(dòng)物的眼刺激反應(yīng)評(píng)分：角膜損

15、害=0，虹膜損害=0，結(jié)膜充血=0或1，結(jié)膜水腫=0或1。a接觸受試物后所產(chǎn)生的可逆性炎性反應(yīng)。b接觸受試物后所產(chǎn)生的不可逆性組織損傷。表6眼刺激性反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)平均評(píng)分動(dòng)物數(shù)（只）恢復(fù)時(shí)間（d）a損傷類(lèi)型角膜損害1和虹膜損害1和結(jié)膜充血2和結(jié)膜水腫21a為動(dòng)物刺激反應(yīng)評(píng)分恢復(fù)至角膜損害=0，虹膜損害=0，結(jié)膜充血=0或1，結(jié)膜水腫=0或1的時(shí)間。b至少有1只動(dòng)物于21d尚存在角膜粘連或血管翳，也可判為腐蝕性。7結(jié)果評(píng)價(jià)凡毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)為有毒的產(chǎn)品，不得生產(chǎn)和銷(xiāo)售；有毒或致病性試驗(yàn)結(jié)果不符合的菌種,均不得作為微生物肥料生產(chǎn)用菌種。7.1急性毒性試驗(yàn)根據(jù)半數(shù)致死量（LD50）數(shù)值,判定受試物的

16、毒性分級(jí),半數(shù)致死量(LD50)劑量分級(jí)按GB 15193.3-2003附錄D執(zhí)行，凡LD505000mg/kgBW的，可通過(guò)，即該菌種可作為生產(chǎn)用菌種或該產(chǎn)品可進(jìn)行生產(chǎn)、銷(xiāo)售。7.2致病性試驗(yàn)7.2.1急性毒性試驗(yàn)結(jié)果判定同6.1。7.2.2一次破損皮膚刺激試驗(yàn)如結(jié)果為無(wú)刺激或僅具輕度刺激作用，可通過(guò)；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.3溶血試驗(yàn)溶血試驗(yàn)結(jié)果為陰性的，可通過(guò)；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.4抗菌藥物敏感試驗(yàn)受試菌株必須對(duì)兩種以上的抗生素敏感；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.5急性腹腔注射致病性試驗(yàn)結(jié)果為無(wú)急性致病性可通過(guò)；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.6急性眼刺激試驗(yàn)結(jié)果對(duì)眼無(wú)刺激性或具有輕刺激性

17、的，可通過(guò)；否則，應(yīng)放棄使用。附錄A（規(guī)范性附錄）菌種安全分級(jí)目錄A.1 第一級(jí)：免作毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種A.1.1根瘤菌類(lèi)Azorhizobiumcaulinodans莖瘤固氮根瘤菌（田菁（莖瘤）根瘤菌）Bradyrhizobiumelkanii埃氏慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobiumjaponicum日本慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobiumliaoningense遼寧慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Mesorhizobium huakuii華癸中生根瘤菌（紫云英）Mesorhizobium loti百脈根中生根瘤菌Rhizobium etli埃特里根瘤菌（菜

18、豆）Rhizobium leguminosarumbiovarphaseoli豌豆根瘤菌（菜豆生物型）Rhizobium leguminosarumbiovartrifolii豌豆根瘤菌（三葉草生物型）Rhizobium leguminosarumbiovarviceae豌豆根瘤菌（蠶豆生物型）Sinorhizobiumfredii費(fèi)氏中華根瘤菌（快生大豆根瘤菌）Sinorhizobiummeliloti苜蓿中華根瘤菌還包括尚未確定種名的，從一些豆科植物根瘤內(nèi)分離、純化、鑒定、回接、篩選后在原宿主植物結(jié)瘤、固氮良好的根瘤菌，如花生、綠豆、沙打旺根瘤菌等。A.1.2自生及聯(lián)合固氮微生物類(lèi)Azos

19、pirillum lipoferum生脂固氮螺菌Azospirillum brasilense巴西固氮螺菌Azotobacter beijgerinckii拜氏固氮菌Azotobacter chroococcum褐球（圓褐）固氮菌Azotobacter vinelandii棕色固氮菌Azotobacter paspali雀稗固氮菌Beijerinckia indica印度貝氏固氮菌A.1.3光合細(xì)菌類(lèi)Rhodobacter capsulatus莢膜紅細(xì)菌Rhodobacter sphaeroides類(lèi)球紅細(xì)菌(球形紅桿菌)Rhodopseudomonas acidophila嗜酸紅假單胞菌Rh

20、odopseudomonas gelatinosa膠質(zhì)紅假單胞菌Rhodopseudomonas globiformis球形紅假單胞菌Rhodopseudomonas palustris沼澤紅假單胞菌Rhodopseudomonas rutila血色紅假單胞菌Rhodopseudomonas sulfidophila嗜硫紅假單胞菌Rhodopseudomonas viridis綠色紅假單胞菌Rhodospirillum fulvum黃褐紅螺菌Rhodospirillum rubrum深紅紅螺菌Rhodospirillum salinarium鹽場(chǎng)紅螺菌Rubrivivax gelatinosu

21、s膠狀紅環(huán)菌（膠狀紅長(zhǎng)命菌）A.1.4分解磷鉀化合物細(xì)菌類(lèi)Bacillus amyloliquefaciens液化淀粉芽孢桿菌Bacillus laterosporus側(cè)孢芽孢桿菌Bacillus licheniformis地衣芽孢桿菌Bacillus megaterium巨大芽孢桿菌Bacillus mucilaginosus膠胨樣芽孢桿菌Bacillus subtilis枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis蘇云金芽孢桿菌Thiobacillus thiooxidans氧化硫硫桿菌A.1.5促生細(xì)菌類(lèi)Paenibacillus azotofixans固氮類(lèi)芽孢桿菌Paen

22、ibacillus polymyxa多粘類(lèi)芽孢桿菌A.1.6酵母菌類(lèi)Candida guillermondii季也蒙假絲酵母Candida membranaefaciens膜醭假絲酵母Candida tropicalis熱帶假絲酵母Candida utilis產(chǎn)朊假絲酵母Endomycopsis fibuliger扣囊擬內(nèi)孢霉Pichia farinosa 粉狀畢赤酵母Pichia membranaefaciens膜醭畢赤酵母Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母Rhodotorula rubra深紅酵母A.1.7放線菌類(lèi)Frankiasp.弗蘭氏克菌（固氮放線菌）Strep

23、tomyces chingyangensis涇陽(yáng)鏈霉菌Streptomyces microflavus細(xì)黃鏈霉菌A.1.8 AM真菌類(lèi)Glomus mosseae摩西球囊霉A.1.9其它Lactobacillusparabuchner類(lèi)布氏乳桿菌Lactobacillus acidophilus嗜酸乳桿菌Lactobacillus bulgaricus保加利亞乳桿菌Lactobacillus casei干酪乳桿菌Lactobacillus delbruecki德氏乳桿菌Lactobacillus lactis乳酸乳桿菌Lactobacillus plantarum植物乳桿菌Pediococcu

24、s pentosaceus戊糖片球菌Streptococcus lactis乳酸鏈球菌Streptococcus thermophilus嗜熱鏈球菌A.2 第二級(jí)：需做急性毒性（LD50）試驗(yàn)的菌種Arthrobacter aurescens金黃節(jié)桿菌Aspergillus candidusLink亮白曲霉Aspergillus niger黑曲霉Aspergillus oryzae米曲霉Aspergillus penicillioidesSpeg帚狀曲霉Aspergillus wentiiWehmer溫特曲霉Eurotium chevalieriMangin謝瓦散囊菌Bacillus brev

25、is(Brevibacillus brevis)短芽孢桿菌Bacillus circulans環(huán)狀芽孢桿菌Bacillus coagulans凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus pumilu短小芽孢桿菌Bacillus sphaericus球形芽孢桿菌Brevibacteriumsp.短桿菌Burkholderia fungorum真菌伯克霍爾德氏菌Chaetomium cochliodes 螺卷毛殼Chaetomium trilaterale 三側(cè)毛殼Clostridium pasteurianum巴斯德梭菌Geobacillusstearothermophilus嗜熱脂肪地芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)Geotrichum candidum白地霉Nocardiasp.諾卡氏菌Nocardiopsissp.擬諾卡氏菌Paenibacillus macerans浸麻類(lèi)芽孢桿菌Penicillium citreonigrum黃暗青霉Penicillium citrinum桔青霉Penicillium frenguentans