試析新會陳皮橙皮苷的量測定工藝

1、試析新會陳皮橙皮苷的量測定工藝 【摘要】目的比較不同年份新會陳皮總黃酮和橙皮苷含量的變化規(guī)律。方法采用紫外分光光度法測定陳皮總黃酮的含量；用高效液相色譜法（HPLC）測定陳皮中橙皮苷的含量。結(jié)果不同年份新會陳皮貯存期越長，總黃酮含量和橙皮苷含量越高。結(jié)論總黃酮是陳皮有效成分之一，橙皮苷則是陳皮總黃酮的主要成分，實驗結(jié)果驗證古人所述陳皮“陳久者良”有一定的道理。 【關(guān)鍵詞】新會陳皮不同年份總黃酮橙皮苷 陳皮是蕓香科植物橘CitrireticulataBlanco及其栽培變種的干燥成熟果皮，藥材分為“陳皮”和“廣陳皮”。“廣陳皮”為茶枝柑CitrireticulataChachi的干燥成熟果皮，主

2、產(chǎn)于廣東新會，是廣東十大道地藥材之一，具有理氣健脾、燥濕化痰的功效。陳皮的主要有效成分為黃酮類化合物和揮發(fā)油，其中橙皮苷是陳皮黃酮類化合物的主要成分。中醫(yī)藥傳統(tǒng)上認為陳皮“陳久者良”，南宋醫(yī)學(xué)家陶弘景曰“橘皮療氣大勝，須陳久者良”。本文對不同年份新會陳皮的總黃酮和橙皮苷含量進行系統(tǒng)分析比較，驗證陳皮“陳久者良”的物質(zhì)基礎(chǔ)，為陳皮的有效開發(fā)利用提供依據(jù)。 一、儀器與試藥 1.1儀器 SPD-10AVP高效液相色譜儀（日本島津公司）；TU1810紫外分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)等。 1.2材料與試劑 橙皮苷(中國藥品生物制品檢定所，批號110712-200512)；甲醇為色譜純，其他

3、試劑為分析純。陳皮樣品由新會陳皮協(xié)會提供，并由廣東藥學(xué)院藥用植物與中藥鑒定學(xué)教研室李書淵教授鑒定為茶枝柑CitriReticulataChachi的干燥成熟果皮。樣品粉碎成粗粉，置干燥箱于60烘干12h以上。于避光、陰涼處存放。 二、方法與結(jié)果 2.1不同年份新會陳皮總黃酮含量測定 2.1.1對照品溶液的制備 精密稱取橙皮苷對照品11.37mg，用甲醇溶解并定容至50ml，制成0.2274mg/ml的橙皮苷對照品貯備液。 2.1.2供試品貯備液的制備 取樣品粉末約1.0g，精密稱定，置索氏提取器中，加80ml石油醚（3060）60提取至無色，放冷，揮去石油醚，再加80ml60%乙醇，索氏提取至

4、無色，將提取液轉(zhuǎn)移置100ml量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，混勻，即得。 2.1.3測定波長的選擇 分別精密量取1.5ml對照品貯備液、0.5ml供試品貯備液至25ml量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，混勻。以60%乙醇溶液為空白，在200400nm之間進行掃描。由圖1可見對照品溶液在285nm處有吸收峰，圖2可見供試品溶液在275nm處和331nm處有吸收峰。故選擇285nm為測定波長。 2.1.4標(biāo)準曲線的繪制 取0.2274mg/ml的橙皮苷對照品貯備液，精密吸取0.5，1，1.5，2.0，2.5ml置于25ml量瓶中，用60%乙醇定容。在285nm處測定吸光度，并繪制校準曲線。結(jié)果表明

5、：在4.54822.74g/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系?；貧w方程為：A=0.033C+0.013，相關(guān)系數(shù)r=0.9993。 2.1.5穩(wěn)定性實驗 精密量取供試品貯備液0.5置于25ml量瓶中，用60%乙醇定容，在285nm處進行測定，結(jié)果:0h的A值為0.573，1h為0.571，2h為0.568，4h為0.565，6h為0.564，24h為0.546，RSD為1.7%。結(jié)果表明，樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。 2.1.6重現(xiàn)性實驗 取同一樣品6份，按“2.1.2”項制備成供試品貯備液并稀釋50倍，在285nm處連續(xù)測定6次A值，RSD為1.7%，說明本實驗的重現(xiàn)性良好。 2.1.7回收

6、率實驗 精密吸取對照品貯備液2.5ml稀釋到25ml的量瓶中，得到22.74g/ml的對照品溶液。精密吸取供試品貯備液3ml稀釋定容到100ml，再分別精密吸取該溶液1ml置9個10ml量瓶，分別加入對照品溶液0.5，1，1.5ml各3份，稀釋定容，在285nm處測定其吸光度，并計算回收率。 2.1.8總黃酮測定 取適量不同年份新會陳皮按“2.1.2”項制備成供試品貯備液并稀釋50倍，在285nm處分別測定A值，計算出供試品中總黃酮的含量。 2.2橙皮苷含量測定 按照中國藥典2005版部陳皮項下含量測定方法，用外標(biāo)兩點法對不同年份新會陳皮的橙皮苷進行測定。 三、分析與結(jié)論 用橙皮苷作對照品，用

7、紫外分光光度法測定陳皮總黃酮的含量，通過方法學(xué)考察，該法操作較簡便，準確，重現(xiàn)性較好。 文獻研究表明，陳皮提取物具有抗氧化，有效清除自由基的作用；陳皮中黃酮類成分除了具有抗氧化作用還有抗衰老作用，能有效延長果蠅的壽命；橙皮苷能有效軟化心血管，增加心血管通透性，并能減輕家兔實驗性動脈粥樣硬化病變，證明陳皮中黃酮類成分和橙皮苷都是具有藥理作用的活性化學(xué)物質(zhì)。本實驗結(jié)果證實：新會陳皮的貯存年份越長，總黃酮和橙皮苷的含量越高，說明古人所述陳皮“陳久者良”有一定的道理。 本實驗用不同乙醇濃度進行陳皮總黃酮的提取，結(jié)果顯示60%乙醇提取的效果最好。 通過水分測定，含量測定結(jié)果折合成干燥品的含量。 【參考文獻】 1李小風(fēng)，張立堅，程荷風(fēng)，等.中藥佛手中總黃酮含量的紫外分析J.時珍國醫(yī)國藥，2004，15(10):551. 2國家藥典委員會.中國藥典，部S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：132. 3王姝梅，何春蘭.陳皮提取物清除氧自由基和抗脂質(zhì)過氧化作用J.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1998，29(6):462. 4蘇丹，秦德安.陳皮提取液抗氧化及延緩衰老作用研究J.華東師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，1999，1:100. 5李琴山，婁桂予，錢民章，